1.

Resume cómo se llevaría a cabo la obtención de una muestra de sangre periférica, preparación
de la muestra para su análisis y el análisis por citometría de flujo.

R: La obtención de una muestra de sangre periférica implica la punción venosa en un

sitio desinfectado, extrayendo la sangre en tubos con anticoagulantes. Después, se prepara la
muestra, homogeneizándola y tratándola adecuadamente. En el análisis por citometría de flujo,
las células se etiquetan con anticuerpos fluorescentes, se lavan y se introducen en un citómetro.
Este dispositivo analiza las células mientras fluyen, detectando las señales fluorescentes emitidas
por los anticuerpos. La información recopilada se procesa con software especializado para
evaluar características celulares y subpoblaciones, permitiendo un análisis detallado del sistema
inmunológico u otros propósitos diagnósticos o de investigación.

2. ¿Por qué es necesario llevar un control sobre el funcionamiento del citómetro?

R: Es crucial llevar un control sobre el funcionamiento del citómetro de flujo para

garantizar mediciones precisas y consistentes a lo largo del tiempo. Este monitoreo regular
permite la calibración y estabilidad del instrumento, verifica la calidad de los reactivos, previene
y detecta posibles contaminaciones, optimiza la sensibilidad del citómetro y ayuda a prevenir
errores técnicos. Además, en entornos regulados, contribuye al cumplimiento de normativas y
estándares de calidad, asegurando la validez y la integridad de los datos generados en análisis
celulares y experimentos.

3. ¿Qué tipos de gráficos arroja el citómetro de flujo? ¿Qué información puede obtenerse

de cada uno de ellos?

R:

• Histogramas de intensidad de fluorescencia: El eje de abscisas (eje X) recoge la

intensidad de la fluorescencia y el de ordenadas (eje Y) la densidad de células.
• Dot-plot: en una gráfica de este tipo para muestras de sangre periférica, los linfocitos
son células sin granularidad y de pequeño tamaño, los monocitos son de un tamaño
mayor y los granulocitos (la mayoría, neutrófilos) son de gran tamaño y de complejidad

4. Nombra cada una de las poblaciones señaladas:

Granulocitos

Monocitos

Linfocitos

5. ¿Cuáles son los inmunofenotipos de las siguientes enfermedades hematológicas?

a) Leucemia linfocitaria crónica B. R= CD5+, CD22+, CD23+.
b) Leucemia prolinfocitaria T. R= CD2+, CD3+, CD4+, CD5+, CD7+, CD8+.
c) Leucemia linfoide crónica T. R= CD2+, CD3+, CD4-, CD8+.
d) Linfoma de células peludas. R= CD11+.
e) Linfoma esplénico. R= CD19/20+, CD10+.
f) Leucemia de células T del adulto. R= CD2+, CD3+, CD4+, CD5+, CD7+.
g) Síndrome de Sézarv. R= CD2+, CD3+, CD4+, CD5+, CD7+, CD26+, TCR alfa-beta.
2. Elabora un protocolo de preparación de muestras para aplicar una técnica de
separación celular inmunomagnética.
R: Para realizar la técnica de separación magnética que debe llevar a cabo los
siguientes pasos:

1. Recolectar la muestra de células de interés.

2. Centrifugar la muestra para obtener un pellet celular.
3. Resuspender las células en un tampón de lavado.
4. Incubar las células con anticuerpos magnéticos específicos para los
marcadores de interés.
5. Lavar las células para eliminar el exceso de anticuerpos.
6. Pasar la muestra a través de un separador magnético para aislar las células
marcadas.
7. Recolectar las células positivas y descartar las negativas.

3. Indica si los siguientes enunciados son verdaderos o falsos.

a) La citometría de flujo (CF) es una técnica basada en el reconocimiento de las
diferentes poblaciones celulares en función de marcadores de superficie o de
citoplasma, incluso marcadores nucleares, que expresan de manera característica.
VERDADERO.
b) El citómetro de flujo emite un análisis de las poblaciones estudiadas, sin necesidad
de que el analista intervenga. FALSO
c) El sistema óptico del citómetro está formado por los elementos de iluminación de la
muestra únicamente. FALSO, también se encuentran los de detección de señal.
d) El sistema electrónico es el responsable de traducir la señal lumínica detectada en
el sistema óptico en una señal electrónica proporcional a la primera. VERDADERO.
e) El mantenimiento del citómetro no incluye ningún procedimiento que haya de
realizarse de manera diaria. FALSO
f) Los neutrófilos se identifican por su gran tamaño y granulosidad. VERDADERO
g) Por citometría de flujo, no puede distinguirse entre linfocitos T citotóxicos y
colaboradores o helper. FALSO
h) En citometría de flujo, se aplica el criterio de utilizar fluorocromos más intensos para
el marcado de las moléculas de mayor expresión. VERDADERO
i) Para el marcaje de marcadores citoplasmáticos, es preciso permeabilizar la célula
previamente. VERDADERO
j) La separación celular inmunomagnética solo permite una selección positiva de las
células por separar. FALSO