I Funciones Celulares 2

Transporte Vesicular y Citoesqueleto

Dra. Sonia Mujaes

 Transporte Vesicular
 Retículo Endoplásmico: sist. de memb. que rodea el espacio cis-
ternal. Consta de RER (proteínas) RE transicional y REL (lípidos)
• Ribosomas libres: sintetizan p. citosólicas y p. destinadas a núcleo,
mitocondrias y peroxisomas.
• Ribosomas unidos a RER: profuso en páncreas e ID; sintetizan prot.
de membrana, de RE y Golgi, p. secretoras y p. endocíticas tienen sec.
específicas para reconocimiento: cada prot. se une a un receptor en RE,
llega a la luz y es plegada por chaperonas, glicosilada, etc; las p.
dañadas regresan de ap. Golgi y van a citosol o a proteasoma.

2. REL: fosfolípidos: fosfatidilcolina, serina, etanolamina o inositol. REL

es profuso en gónadas y suprarrenales por sínt. colesterol (h. sexua-
les y corticoides) y en túbulos renales e hígado, ligado a detoxificación
(enz. inactivan barbitúricos, alcohol y otras drogas, solubilizándolos y
excetándolos); en m. esquelético (se-cuestra Ca+2 en RS, que es libe-
rado a citosol durante la contracción)
 Ap. Golgi: pila de cisternas y túbulos membranosos: “cara cis” (elige p.
que regresan a RE o siguen), “medial” (modificaciones) y “red trans Golgi
RTG”  guía vesíc. a: endosoma, lisosoma, m. celular o exterior). Golgi
participa en sínt de oligo y polisacáridos y en metabolismo de lípidos; y
crea cubierta de vesícula: curvatura a membrana y selección de carga.
Vía Secretora
Vía Endocítica
• I. Vía Secretora: lípidos y proteínas son secretados en RE y guiados
por vesículas a m. celular, lisosomas, otros organelos, o al exterior.
• Constitutiva: prot. de m. celular y MEC se liberan continuamente; tam-
bién se recuperan p. de membrana de Golgi. Fibroblasto libera colágeno.
• Regulada: vesículas se almacenan bajo membrana celular y sólo se libe-
ran en respuesta a una señal: conc. Ca++, h. peptídicas, neu-
rotransmisores, enz. digestivas pancreáticas.
- T. anterógrado (RE a Golgi): p. de RE van a Golgi por vesíc. que se
fusionan entre sí y muestran progresión cisternal: de cis Golgi a me-
dial y a trans Golgi; cinesina media transporte por microtúbulos.
- T. retrógrado (Golgi a RE): p. recuperadas regresan de cis Golgi a RE por
otras vesículas sin sufrir gemación ni fusión; dineína media transporte.
- Red trans-Golgi (TGN): p. no destinadas a RE o Golgi, van a red trans y
brotan a través de vesículas transportadoras ó secretoras.
 Formación de Vesículas
• La membrana se invagina y forma una fosa con una 1ª cubierta y gracias
a la dinamina (GTPasa) se crea un anillo alrededor del cuello, que estran-
gula a la vesícula. Una 2ª cubierta c/prot. adaptadoras se fija a clatrina y
selecciona la carga (AP1 + clatrina de Golgi a endosoma; AP2 + clatrina de m.
celular a endosoma y AP3+ clatrina de Golgi a lisososma). El mov. ocurre por
p. motoras a lo largo de microtúbulos y también microfilamentos.
• La vesícula, que sale de Golgi al exterior o de la m. celular al interior,
posee 1 cubierta que favorece unión c/m. diana, y se libera por fusión.
• Cada vesíc. posee p. reconocedora Rab y una v-SNARE, de manera que
es direccionada hacia la membrana diana y unida a la t-SNARE para su
fusión (además de entregar la carga, la m. vesicular se suma a la m.
diana).
• Las vesíc. brotan del organelo donador y su cubierta puede ser:
* V. COP II: t. anterógrado de RE a Golgi
* V. COP I: t. retrógrado de cis Golgi a RE rugoso
* V. Clatrina: ambos sentidos; RTG, endosomas, lisosomas y m. celular
• El ensamble de la cubierta requiere GTPasa (Sar1/GTPactiva en COP II
(al liberarse vesíc., Sar/GDP induce desensamble; ARF/GTPactiva en COP I y
en Clatrina) y ARF/GDP induce desensamble).
• La función de cubierta incluye: destino de vesíc., reconocimiento y
fusión con m. diana y paso por microtúbulos y escisión.
• Cubierta COP II: Sar1/GTP crea cubierta y traslada prot. por vía secre-
tora, de RE a compartimento intermedio RE/Golgi, ó a Golgi-;
• Cubierta COP I: ARF/GTP crea cubierta y vesic. regresa por t. retrógrado
• Cubierta de Clatrina: ARF/GTP endocita mol. externas y traslada vesíc.
de Red Trans Golgi a endosomas, lisosomas y m.celular.
Vesículas COP I, COP II y CLATRINA
Direccionamiento y Fusión de Vesícula con M. Diana

Las proteínas Rab (superficie de vesícula) permiten que la

vesícula reconozca el destino donde vaciar su contenido.

Las memb. diana poseen proteínas de reconocimiento

que interaccionan con Rab para la fusión .

Las v-SNARE y t-SNARE ayudan al

enlace de la vesícula con la m. diana
* Proteína Rab: GTPasa (como Ras en prolif. cel.
direcciona y coloca a vesicula sobre m. diana
* V-SNARE (p. receptor en vesíc.) y T-SNARE
(p. receptor en m. diana)
* P. accesorias: GEF conversión GDP en GTP;
y GAP, conversión GTP en GDP.

Formación de
complejo SNARE

Desensamble de
complejo SNARE
• II. Vía Endocítica: sust. del entorno son incorporadas a la célula
para ser digeridas por lisosomas (vierten sus enzimas al fusio-
narse con endosomas tardíos). Hay 3 tipos de endocitosis: fago-
citosis, pinocitosis y endocitosis mediada por receptor.
 LDL: Endocitosis mediada por Receptor

Complejo LDL transporta colesterol por sangre y al unirse a su receptor, forma

vesícula endocítica Clatrina/AP2. La cubierta se desintegra, deja la vesícula sola
como endosoma temprano, que se convierte en endosoma tardío. El pH interno
favorece un cambio en la conf. del receptor, liberando a LDL, que va a lisosomas
para ser degradado y reutilizado. El receptor regresa a la membrana y es reciclado.
• Endosomas: las vesículas formadas en m. celular se fusionan con
endosomas, que trasladan las vesículas hacia los lisosomas. Los
endosomas se clasifican en tempranos (recién creaos por ves. endo-
cíticas); intermedios (pueden ser reciclados a m. celular ó ir a endo-
soma tardío) y tardíos (pH ác. favorece la separación de ligando a re-
ceptor; los tardío se fusionan con los lisosomas para ser digeridos)
 Arrestinas y Vía Endocítica

* Las GPK son cinasas que fosforilan, activan y desensibilizan a los Rec. acoplados
a Prot. G, mientras que las Arrestinas β pueden bloquear el acoplamiento por 2
vías: uniéndose al receptor (bloquean su unión a prot. G y la transducción de señal);
o internalizándolo (en vesíc. de clatrina/AP2) para degradarlo o redirigirlo a la memb.
para ser reciclado. Las caveolas (formadas por prot. colesterol y esfingolípidos) son
vesículas endocíticas, que se cree que facilitan la entrada de virus a la célula).
 Citoesqueleto
 Funciones: da estructura y sostén a la célula y a los organelo,
participa en la contracción muscular, contractilidad, migración
celular y citocinesis (microfilamentos); huso acromático (mi-
crotúbulos) t. vesicular (microfilamentos y microtúbulos), sostén
y t. axónico (microtúbulos y f.intermedios); estabilidad, fuerza y
resistencia (f. intermedios

a) Microfilamentos: sólidos y delgados, formados por actina.

b) Microtúbulos: tubos largos y huecos, formados por tubulina.
c) Filam. Intermedios: cordones resistentes, c/diversas proteínas.

 Movimiento por 2 mecanismos: Ensamble y desensamble de rie-

les (microfilamentos y microtúbulos) y prot. motoras (ATP  mov
(actina/miosina; GTP  tubulina / cinesina ó dineína).
Citoesqueleto
 Microfilamentos de Actina

 Actina: p. más abundante, da forma y sostén a célula. Forma ha-

ces (paralelos) y retículos (por p. enlaces cruzados  espectrina en
eritrocitos, distrofina en músculo). Actina G (monómeros globulares)
se ensamblan en Actina F (filamentos polimerizados), predomina ac-
tina G/ATP y F/ADP. Polaridad (crec. polimerización rápida en extre-
mo +; se altera por p. fijadoras de actina (timosina-inhibe, profilina-
induce); unión de citoesqueleto a p. integrales de m. celular y a MEC
(por p. fijadoras).
Miosina: p. motora, impulsa contrac. muscular, citocinesis y t.
vesicular; c/acción ATPasa (ATP  cambio conf. cabeza  despla-
zam. por rieles de actina; el Ca++ y otras vías indep. de Ca influyen
en miosina y contracción.
Crean uniones celulares (c/p. integrales de m. celular y con MEC por p.
fijadoras (espectrina, anquirina, distrofina). Participan en migración, mov.
celular, y citocinesis; cél. de cresta neural en edo. embrionario migran a e-
pidermis, cartílago, etc; leucocitos migran p/ defensa); proyección y adhe-
sión focal en terminación axónica (guían al axón); junto con microtúbulos,
realizan t. vesicular y son responsables de contrac. muscular.

Nucleación F: Elongación F. Estacionaria

4-5 Actina G Actina F equilibrio

Polimerización requiere ATP

- Además del Ca+2, el complejo troponina (TN) (I, C, T)/ tropomiosina (TM)
puede estimular o inhibir la contracción. En ausencia de Ca+2 (edo.
apagado), la miosina se fija al filamento de actina, pero el Complejo TN-
TM impide que se deslice. El aumento de Ca+2, su unión a calmodulina y
fijación a troponina C del complejo TN/TM, dispara el deslizamiento de
los filamentos y la contracción muscular.
 Contracción Muscular
- Sarcómera: unidad contráctil de fibra
muscular, cuyas bandas surgen por super I A A I
posición de fibras de actina y miosina).
La sarcómera se ubica entre dos líneas Z Z
y hay varias bandas: 1 par de bandas I en H
los bordes externos (bandas + claras; solo
f. actina) una banda A (+oscura; actina y mio
sina), en cuyo centro hay zona H (un poco I A A I
+ clara; solo hay f. miosina). En el centro de
la H hay una línea M oscura (unión de una Z Z
M
miosina a otra adyacente)

Durante la contracción muscular, las sarcómeras se acortan, acercando las lí-

neas Z; las bandas A mantienen su longitud, y el deslizamiento/acortamiento de
los f. de actina sobre los f. gruesos de miosina hacia las bandas A y línea H cau-
sa la desaparición de H y de las bandas I. Así, el acortamiento de sarcómeras no
se debe al acortamiento de filamentos, sino al deslizamiento de f. actina hacia el
centro  aumento en superposición y la desaparición de I y de H.
 Tipos de Músculo
M. Esquelético posee miofibrillas multinucleadas en haces y tiene mov.
voluntario; da soporte, forma y mov. al cuerpo. Además del Ca+2, la tropo-
miosina (TM) y un complejo de 3 troponinas (TN I, C y T ) pueden estimular o
inhibir la contracción. En ausencia de Ca+2 (edo. apagado), la miosina se fija
al filamento de actina, pero el complejo TN-TM impide que se deslice. El au-
mento de Ca++, syu unión a calmodulina y fijación a troponina C de comple-
jo TN/TM dispara deslizamiento de filamentos y contracción. El ejercicio in-
tenso como 100m planos dispara sist. de fosfágenos, mientras que el mara-
tón, el metab. aeróbico. En la natación, se dispara la glucólisis anaerobia.

M. Cardiaco: miofibrillas uninucleadas con uniones gap, hendidura, para

contrac. armónica; mov. involuntario; contracción depende de Ca++ extracel.

M. Liso: miofibrillas uninucleadas están agrupadas en una sola capa; mov.

involuntario: En útero, oxitocina favorece uniones GAP y liberación de
prostaglandina 2 para contracciones rítmicas).
Contracción Muscular
Miasteina gravis: déficit de receptores para Ach
 Microtúbulos de Tubulina
 Formados por tubulina (dímeros de α tubulina (ext +) y β tubulina (ext. -),
que muestran polaridad y se polimerizan por GTPasas). Funciones: huso,
cilios y flagelos; transporte de organelos y vesicular, incluyendo el
axónico.
 Cinesinas y Dineínas: p. motoras, usan GTP p/mover carga (inclu-
yendo organelos y vesículas en axones). Cinesinas (con sitio p/ GTP);
realizan t. anterógrado de vesíc: RE a Golgi (al extremo positivo de mi-
crotúbulo). Dineínas (2 cadenas pesadas con cabezas que se une a GTP);
realizan t. retrógrado de vesic. (al extremo neg. de microtúbu-lo); MAP: p.
asociadas a microtúbulos (los alínea y crea uniones cruza-das con
memb. (unión celular) y con f. intermedios (axón). MTOC: centro orga-
nizador de microtúbulos  centrosoma  centriolos p/huso;
homólogo a axonema en cilios y flagelos (9+2).
 Estructura de Microtúbulos

Polimerización requiere GTP

Organización de Microtúbulos Formación del Huso en Mitosis
 Movimiento de Vesículas sobre Microtúbulos

Las vesículas exocitadas (neurotransmisores y hormonas, entre otros), así como

las vesículas endocitadas (recaptación para evitar exceso) en el axón, se mueven
por microtúbulos: t. anterógrado (cinesinas) o t. retrógrado (dineínas).
 Filamentos Intermedios
 Resistencia y estabilidad vs. estrés mecánico; ditribuyen tensión
en tejido (son f. estables, ensamblados a partir de diversas prot.
(láminas en núcleo, vimentina en fibroblastos, queratina en c.epiteliales,
desmina en c. musc. y junto con microtúbulos, en neurofilamentos); crean
haces y retículos por prot. PAFI (p. asociadas a fil. Intermedios) que
se unen a filamentos de citoesqueleto, de m. nuclear o a m. celular p,
formando parte de desmosomas y hemidesmosomas.
 Proteínas de Filamentos Intermedios
 Desmina Queratina Espectrina

 Proteína ácida fibrosa de Glial

 Neurofilamentos