Biología Celular y Molecular: UNIDAD VIII- RE Y GOLGI.

PARTE 1: RETÍCULO ENDOPLASMÁTICO (RE)

Es una red de túbulos y sacos (cisternas) rodeados de membrana. Se extiende desde la
MP hasta una buena parte del citoplasma. Son orgánulos grandes, sus membranas
representan la mitad de las membranas celulares. Existen 2 tipos: el RER, asociado a
ribosomas, que se relaciona con la síntesis proteica, y el REL, que se encarga de la
síntesis de lípidos.
1.a) RETÍCULO ENDOPLASMÁTICO RUGOSO Los experimentos con células
pancreáticas permitieron saber la vía secretora de proteínas en el RER: RER-Golgi-
vesículas de secreción-exterior celular.
- Existen 2 tipos de ribosomas: los asociados a las membranas del RER, y los libres
(citosólicos). SON FUNCIONALMENTE INDISTINGUIBLES. Esto quiere decir que las
proteínas son las que realmente tienen algo diferente: la propia secuencia de
aminoácidos, que regula su actividad
biológica, es la que indica al ribosoma si se asociará o no al RER. La presencia de
"secuencias señal" hacen esta labor.
Las proteínas sintetizadas en ribosomas asociados al RER van al Golgi, y del Golgi van
hasta la membrana plasmática o la membrana de las mitocondrias, peroxisomas o
nuclear. También van al exterior celular, a los lisosomas o endosomas. Obs.: si van a la
membrana peroxisomal o a la nuclear, las proteínas no pasarán por el aparato de
Golgi.
Las proteínas sintetizadas en ribosomas libres van al núcleo, mitocondrias, peroxisomas
y cloroplastos.
TODA SÍNTESIS PROTEICA INICIA EN RIBOSOMAS LIBRES. Estos se translocarán al
RER de forma cotraduccional o postraduccional. La secuencia señal tiene de 15 a 40
aminoácidos en su mayoría hidrófobos.
- Vía cotraduccional: la secuencia señal hace que los ribosomas se dirijan al RER, en el
camino se encuentran con una Partícula Reconocedora de la Señal, PRS, que se unirá
tanto a los ribosomas como a la proteína con su secuencia señal, y las llevará al RER, en
donde se unirá con un receptor de la PRS, y dejará libre al ribosoma con su proteína. El
ribosoma entonces se unirá al Translocón, un complejo formado principalmente por Sec
61, la secuencia señal de la proteína se introducirá por un canal y activará a Sec 61, esto
permitirá que la proteína pueda entrar. La secuencia señal será escindida por una
peptidasa señal cuando esta se haya introducido totalmente al RER. La traducción
entonces se reanudará, y será la propia traducción la que introducirá a la proteína dentro
del lumen del RER.
- Vía postraduccional: Se utiliza una secuencia señal, pero no se utiliza una PRS. En
cambio, se utilizan proteínas del complejo sec 62/63 para reconocer la secuencia señal.
También es necesaria la presencia de
chaperonas como Hsp70, pues al estar completamente terminada la traducción, hay que
evitar que la proteína se pliegue para que pase por el Translocón. Chaperonas BiP del
lumen del RER también participan en el pasaje de la proteína al interior del organelo,
evitan también el plegamiento antes de tiempo. La translocación postraduccional requiere
de ATP.
- Transporte proteico en el RER: Las proteínas son transportadas como componentes
de la membrana del RER, deben unirse a esta. Luego serán transportados al Golgi y al
resto de sus vías en forma de vesículas. Algunas proteínas tienen extremos C-citosólicos
(tipo 1: receptor de LDL, receptor de Insulina, receptor de influenza receptor de hormona
de crecimiento), otros tienen extremos N-citosólicos (Galactosiltransferasa y
Sialililtransferasa de Golgi), otros tienen su extremo C-citosólico y una porción N-
Luminal muy corta (citocromo p450), y otros tienen varios dominios y un extremo C
citosólico (Receptores asociados a proteínas G, GLUT y otros transportadores, CFTR, la
propia Sec61).

Algunas proteínas pueden presentar secuencias señales internas que no se escinden

con señal peptidasa, e incluso cuentan con señales externas e internas. Las secuencias
señal internas estimulan el anclaje a la membrana, a mayor cantidad de
señales internas, mayor cantidad de inserciones tendrá la proteína. Algunas proteínas no
son reconocidas por la PRS debido a que la secuencia señal es interna, por lo que
utilizan factores de redireccionamiento. Las proteínas que irán a la membrana nuclear
desde el RE tienen la posibilidad de difundir lateralmente por continuidad de membranas.
La emerina y el receptor de laminina B tienen secuencias transmembrana específicas
que indican su transporte a la membrana nuclear, en donde pueden interaccionar con
cromatina o láminas nucleares para ser retenidas.
- Formación de puentes disulfuro: enzima disulfuro isomerasa
- N-glucosidación: En residuos de asparagina, por medio de N-acetilgucosamina. Se
añaden oligosacáridos a residuos de asparagina. Los oligosacáridos son sintetizados en
Dolicol, un transportador lipídico de la membrana del RER. La enzima
del proceso es la oligosacaril transferasa. La glucosidación evita que las proteínas se
agreguen a la membrana del RER, promueven el plegamiento y la correcta distribución.
- Anclajes a la MP: por medio de GPI (glucosilfosfatidilinositol). Se unen al extremo
carboxilo terminal y lo reemplazan (la secuencia C terminal se escinde). Se componen de
2 cadenas de ácidos grasos, inositol y otros azúcares y etanolamina.
- Control de calidad: es lento e ineficiente. La degradación asociada al RER (ERAD), se
encarga de encontrar y sacar proteínas mal plegadas al citosol, en donde serán
marcadas por ubiquitina y degradadas por un proteasoma. La calnexina y calreticulina
(una se ubica en el lumen, y la otra en la membrana del RER, en ese orden), trabajan en
compañía de una disulfuro isomerasa y una peptidil-prolil-isomerasa para facilitar el
plegado de las glucoproteínas. 2 residuos de glucosa se pierden en la translocación, y
uno más en la interacción calnexina-glucoproteína. Un sensor de plegamiento vigilará
luego que no haya partes hidrófobas expuestas. Si no las hay, la proteína está bien
plegada, y puede seguir con su vía. Si hay algunas, se le vuelve a adicionar glucosa por
la actividad glucosiltransferasa, y si hay demasiadas EDEM1 le quita todas las manosas
al oligosacárido, y luego la proteína es enviada al citosol para ser marcada por ubiquitina
y degradada por un proteasoma. Si hay demasiadas proteínas mal plegadas, se activa
UPR (Respuesta a proteínas no plegadas), esto hace que el tamaño del RER crezca y se
generen más chaperonas. Si esto no es suficiente, ocurrirá la apoptosis vía lisosomas.
1.b) RETÍCULO ENDOPLASMÁTICO LISO
Los lípidos se sintetizan en el REL en su mayoría debido al carácter hidrófobo de estos.
Provienen de precursores
hidrosolubles citosólicos. Los ácidos grasos se transfieren al glicerol por medio de
transportadores Coenzima A para formar Ácido Fosfatídico, que se une a la membrana.
De allí, más enzimas citosólicas convertirán al Ácido Fosfatídico en Diacilglicerol, y le
añadirán grupos polares para formar fosfatidilcolina, fosfatidilserina, fosfatidiletanolamina,
fosfatidilinositol, y otros más. Las flipasas son enzimas que permiten que tanto la
monocapa citosólica como la monocapa luminal crezcan al mismo tiempo, debido a que
los fosfolípidos se sintetizan solo en la cara citosólica. También se sintetizan colesterol y
ceramida. Hay 2 lípidos que se sintetizan en el Golgi: esfingomielina y glucolípidos.
Ambos provienen de la ceramida. El REL es responsable de todos los precursores o
productos finales de los lípidos principales en los eucariotas. Abunda en células que se
involucran en el metabolismo lipídico, como
en las gónadas y células hepáticas (enzimas que metabolizan compuestos liposolubles y
los vuelven hidrosolubles para eliminarlos en la orina. Son desintoxicantes, pues vuelven
hidrosolubles a drogas nocivas como el fenobarbital. No siempre son buenas las
enzimas. Ej.: citocromo p450, oxida todo lo que está a su paso, si llega a oxigena
Benzoαpireno puede provocar cáncer). Otras funciones del REL: almacenamiento de
Calcio en receptores de rianodina (células musculares, retículo sarcoplásmico).
- Exportación de proteínas y lípidos del RER:
Se utilizan vesículas de transporte originadas por gemación de membrana de un
orgánulo y posterior fusión con la membrana de otro orgánulo. La región especializada
del RE se llama sitio de salida del RE (SSRE). También existe un compartimiento
intermedio RE-Golgi (CIREG), en el que las vesículas se reorganizan. Proteínas
marcadas con KDEL o KKXX en su extremo carboxilo hacen que las proteínas retornen
al RE (son reconocidas por un receptor de reciclaje en el CIREG o en el Golgi. Las
proteínas mantendrán una posición similar a la adoptada en la membrana del RER.
PARTE 2: APARATO DE GOLGI.
Reprocesa y distribuye las proteínas que recibe del RER a sus destinos finales. Se
compone de cisternas. Es polar en función y estructura (tiene una cara cis convexa y una
cara trans cóncava). Las proteínas que vienen del RE entrarán por la cara cis y saldrán
por la trans para su transporte a lisosomas, endosomas, MP, o exterior celular. Se divide
en 4 compartimientos: Red cis golgi (primeras modificaciones a proteínas, lípidos y
polisacáridos), red medial y trans (nuevas modificaciones) y red trans golgi (distribución
final). El tráfico molecular puede seguir el modelo de cisternas estables (cisternas
inmóviles, se mueven vesículas) o el modelo de maduración de las cisternas
(las cisternas tienen compartimientos que realizan el transporte, pero también usan
vesículas para determinados casos).
- Glucosidación: Se modifican porciones de carbohidratos de las glucoproteínas. En la
N-glucosidación, el oligosacárido quedó con 11 carbonos (-3 glucosa). Sufre de nuevas
modificaciones en el Golgi.
a) Red Cis: eliminación de 4 residuos de manosa, agregación de 1 N-acetilglucosamina,
eliminación de 2 manosas más.
b) Red medial: se suma una fucosa, se añaden también 2 de N-acetilglucosamina.
c) Trans y red Trans-Golgi: agregado de 3 residuos de ácido siálico y 3 residuos de
galactosa.
Esto puede variar dependiendo del sitio al que irá la proteína. Si la proteína irá a los
lisosomas, en la Red cis se le adicionará N-acetilglucosamina fosfato a residuos de
manosa. Luego se eliminará el N-
acetilglucosamina, lo que dejará a la proteína con una Manosa 6-Fosfato. Esta es
reconocida en la Red trans-Golgi, y de ahí es enviada al lisosoma. La conformación
tridimensional de la proteína es lo que hace que se le agreguen las manosas 6-fosfato
(regiones señal).
- O glucosidación: Se le añaden a residuos de serina y treonina N-acetilgalactosamina.
Ej.: proteoglicanos. Ocurre mediante la GLUCOSACARILTRANSFERASA.
- Metabolismo de lípidos y polisacáridos. Esfingomielina y glucolípidos.
- Esfingomielina: se sintetiza en la superficie luminal del Golgi. Fosforilcolina+ceramida.
No pueden translocarse. Solo en la mitad luminal.
- glucolípidos: en la cara citosólica se le añade azúcar a la ceramida, pero solo están en
la mitad luminal.
- Distribución y exportación de proteínas desde el aparato de Golgi.
Las proteínas, lípidos y polisacáridos siguen su trayecto, salen por gemación de la Red-
Trans-Golgi y llevan su contenido a sus destinos. Hay 3 vías de transporte a la superficie
celular: vía endosomas de reciclaje, vía gránulos secretores o transmisión directa Golgi-
MP.
OJO: van en vesículas recubiertas de clatrina SIEMPRE: neurotransmisores,
hormonas endócrinas (peptídicas), y enzimas digestivas producidas por células
acinares pancreáticas.
- Mecanismo de transporte en neuronas: cuando ocurre la sinapsis, la información se
transmite mediante neurotransmisores, los cuales se almacenan en vesículas sinápticas
(recubiertas con clatrina). La señalización mediante estímulos provoca la fusión de las v.
Sinápticas con la MP de otras células.
- Proteínas de la cubierta. Tipos.
Las vesículas recubiertas son aquellas que se revisten con proteínas citosólicas de
cubierta. Estas cubiertas son eliminadas en
la membrana blanco, y permiten así la fusión de la vesícula con su membrana diana.
Hay 3 familias importantes:
- CLATRINA: realizan transporte bidireccional entre la Red Trans-Golgi, endosomas,
lisosomas. No van al RE. Sus subunidades son los trisqueliones. OJO: vesículas de
secreción regulada=gránulos secretores. TODAS LAS PROTEÍNAS CON RECEPTORES
ESPECÍFICOS TENDRÁN CUBIERTA DE CLATRINA. Ej. Insulina. Proteínas asociadas:
AP1, GGA, AP2 Y AP3. GTPasa: Arf. Arf-GTP recluta a proteínas que nuclean el
ensamblaje de la cubierta y la selección de la mercancía.
- COP II: realiza el siguiente trayecto: RE-CIREG-Red cis Golgi-Red Trans (Golgi). Son
vesículas secretoras, NO GRÁNULOS SECRETORES. Subunidades: Sec 23/24, Sec
13/31. GTPasa: Sar1.
- COP I: es una vía de retorno desde la Red Trans Golgi hasta el RE. Sirve para que
puedan volver las proteínas que residen en el RE o en el Golgi. GTPasa: Arf.
- Fusión vesicular: interacción inicial entre Rab y factores de anclaje de membrana. Se
forman complejos entre SNARE en la vesícula y las membranas diana, lo que provoca la
fusión. Síndrome de Griscelli: provoca albinismo e inmunodeficiencia por mutaciones en
el Gen que codifica la Rab 27a, que es responsable del transporte vesicular de
pigmentos y linfocitos T.
PARTE 3: LISOSOMAS Y ENDOSOMAS.
Los lisosomas o lisosomas secundarios son orgánulos membranosos que tienen por
función degradar cualquier polímero biológico (proteínas, lípidos, carbohidratos, ácidos
nucleicos). Se forman mediante la unión de un lisosoma primario con un endosoma
tardío. Los lisosomas primarios cuentan con las enzimas hidrolasas inactivas, pues aún
no se han unido con el endosoma tardío. Las hidrolasas son enzimas que solo
funcionan en ambientes muy ácidos, para evitar que la célula se destruya en caso de
romperse la membrana de un lisosoma. Los endosomas son vesículas que absorben
material extracelular (como receptores de membrana) con el fin de reutilizarlos. Tienen
cubierta de clatrina. No cuentan con hidrolasas. El endosoma temprano madura a
endosoma tardío al perder sus receptores de membrana. La unión del endosoma tardío
con el lisosoma primario provoca la disociación del receptor de manosa 6-fosfato de las
hidrolasas, lo cual finalmente activa a estas enzimas: el lisosoma se transforma en un
lisosoma secundario funcional. La fagocitosis es un proceso a nivel celular (ocurre, por
ejemplo, en macrófagos). Las vesículas que encierran a las partículas a ser digeridas,
como bacterias u otras células, se llaman fagosomas. A estos se les une un lisosoma
secundario, y se forma así un fagolisosoma, una organela muy grande. La autofagia
ocurre cuando la energía celular es baja, y se reciclan estructuras como macromoléculas
u organelas como las mitocondrias. Esta vez, la vesícula que encierra al material se
llama autofagosoma, y la unión con el lisosoma resulta en un fagolisosoma que degrada
el material en su interior.
PATOLOGÍAS LISOSOMALES:
- De tipo I: Defecto en el receptor de manosa 6-fosfato.
- enfermedad de Hunter: mucopolisacaridosis por falta de la enzima iduronato sulfatasa.
- enfermedad de Huler: mucopolisacaridosis por falta de la enzima α-L-iduronasa.
- Niemann-Pick: acumulación de esfingomielina por falta de la enzima esfingomilinidasa
- Tay Sach: acumulación de gangliósidos en neuronas por falta de la enzima
hexosaminidasa.
- Gaucher: acumulación de glucocerebrósidos. Falta la enzima glucocerebrosidasa.