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MARCO TEÓRICO
Los organismos vivos para el mantenimiento del equilibrio de las concentraciones y el buen
funcionamiento del organismo, recurren al transporte de moléculas entre los compartimentos
u organelos intracelulares y extracelulares. Esto es de gran importancia ya que, funciones
como el metabolismo y la termorregulación dependen de estas acciones(1). Cuando se habla
de transportes a través de membrana, hay que hacer mención al transporte activo que consiste
en atravesar la membrana en contra del gradiente, es decir, de una menor concentración a
mayor concentración, generando un gasto energético, que se consigue a través de la hidrólisis
del ATP. Un ejemplo de transporte activo es la bomba de sodio/potasio(13).
De igual forma, existe el transporte pasivo, definido cómo el movimiento del soluto de
manera energéticamente favorable, es decir, es un movimiento a favor del gradiente que no
requiere energía para su realización, donde se encuentran procesos como la difusión y la
ósmosis.
La ósmosis es un mecanismo de movimiento por parte del solvente que se da a través de una
membrana de carácter semipermeable, siendo permeable al solvente y no permitiendo el paso
de los solutos a través de sí. El solvente se moverá hacia el lugar donde hay una mayor
concentración de soluto esto a fin de restablecer un equilibrio en cuestión de minutos(2). La
osmolaridad es fundamental para la función correcta de las células, incluidas las células
vegetales. Las células deben mantener un equilibrio osmótico suficiente para funcionar
normalmente, con el fin de ajustar la entrada y la salida del agua a través de su solubilidad en
la membrana plasmática. Especialmente, las células vegetales tienen paredes celulares
rígidas, lo que puede afectar su comportamiento osmótico, ya que pueden ejercer presión
sobre la célula en función de la concentración de soluto en su interior.
OBSERVACIONES
Protocolo #1
En el laboratorio se encontraba un montaje en el que se presentaba una bolsa de diálisis con
4 mL de una solución de sacarosa sobresaturada con rojo congo (RCS), la cual, estaba sujeta
a una pipeta con cinta y sumergida en un beaker con agua. Se observó el montaje por 60
minutos en intervalos de 15 minutos, tiempo en el que se tomaron las medidas de altura que
alcanzó la solución en la pipeta.
15 0,5 cm En este momento el cambio fue mínimo. Tanto así que no se notó
la diferencia.
30 2,6 cm Fue en este momento que se pudo observar un mayor cambio con
respecto a los anteriores. En la bolsa de diálisis se observó un
crecimiento, probablemente debido al volumen.
Protocolo #2
Recién sumergidas las tres bolsas de diálisis en el agua destilada se pudieron notar cambios
inmediatos: La bolsa con SCAM (azul de metileno) rápidamente empezó a expulsar en
grandes cantidades su contenido, al igual que la bolsa con SZR Y SCRV (zumo de remolacha
y el colorante para ropa), a diferencia que esta última lo hizo en cantidades más pequeñas. La
bolsa con RCS (rojo congo saturado) no expulsó su contenido y no presentó cambios
notables.
Tabla 3. Bolsas con SCAM, SZR Y SCRV, RCS al inicio del proceso.
A los 15 minutos del proceso, se logró presenciar cambios importantes en las tres bolsas: La
bolsa con SCAM perdió volumen y el agua destilada se tiñó de un color azúl claro, la bolsa
con SZR y SCRV de igual forma perdió volumen, pero no tanto como la anterior pues esta no
dejaba escapar las mismas cantidades. El agua de la bolsa con SZR y SCRV se empezó a
teñir de rosa desde el fondo del beaker. La bolsa con RCS siguió sin dejar escapar su
contenido, sin embargo, se notó que la bolsa estaba aumentando su volumen.
Tabla 4. Bolsas con SCAM, SZR Y SCRV, RCS a mitad del proceso.
Al finalizar el proceso, se presentaron cambios similares a los anteriores, las bolsas SCAM y
SZR y SCRV perdieron aún más su volumen y el agua destilada estuvo aún más teñida en
comparación a sus colores respectivos. La bolsa con RCS no expulsó su contenido, pero, se
hinchó aún más.
Tabla 5. Bolsas con SCAM, SZR Y SCRV, RCS al final del proceso.
Protocolo #3
En este protocolo se utilizó un soluto polar como lo es el Rojo Congo y un solvente polar
como lo es el agua destilada y el etanol. Se adicionó una gota de Rojo Congo a 4 vasos de
precipitado, de los cuales 2 tenían agua destilada, uno a temperatura alta y otro a temperatura
fría. Para los otros 2 se usó Etanol, uno a temperatura ambiente y otro a temperatura fría.
Al momento de adicionar el Rojo Congo al agua destilada caliente, esta comenzó a esparcirse
con una velocidad normal, aunque más rápido que el agua destilada fría. El etanol tanto frío
como a temperatura ambiente se concentró rápidamente en la parte inferior del Beaker. Al
pasar los primeros 4 minutos el Rojo Congo en agua destilada caliente se esparció por el
Beaker, aunque se encontraba concentrado en la mitad de este, al contrario del agua destilada
fría, el Rojo Congo también se ha esparció por el Beaker, pero se ha concentró en las paredes
del vaso precipitado. El etanol frío y caliente continuaron concentrados. Al pasar 2 minutos
El Rojo Congo en el agua destilada caliente ocupó un mayor espacio sin dejar de estar
concentrado en el centro del Beaker, caso contrario del Rojo Congo en agua Destilada fría, el
cual solo pasó a un mayor volumen. En el caso del Etanol a temperatura ambiente y el Etanol
frío no se presentó ningún cambio, continuaron concentrados en la parte inferior del Beaker.
Al pasar otros 2 minutos, el Rojo Congo en el agua destilada a temperatura ambiente
solamente tiñó más el agua, caso contrario del agua destilada a temperatura fría, ya que ésta
no presentó cambios significativos. Al pasar los últimos 2 minutos el Rojo Congo en el agua
destilada a temperatura caliente, dejó de presentar cambios y se concentró una parte de Rojo
Congo en el centro de Beaker. En contraste el Rojo Congo en el agua destilada a temperatura
fría solamente se concentró un poco cerca a los bordes del Beaker. El etanol no obtuvo
ningún cambio en los minutos registrados en el experimento.
Protocolo #4
Este protocolo tuvo cómo objetivo presenciar el fenómeno de difusión de un soluto a través
de una membrana semipermeable. Siendo el Almidón al 2% el soluto presente en una bolsa
de diálisis y puesto en reacción con 3 mL de Lugol. Lo anterior, con el fin de evidenciar la
influencia de la disolución de Yodo (Lugol) sobre el Polisacarido (Almidón) al pasar el
tiempo.
Inicialmente, la bolsa de diálisis que contenía el Almidón se encontraba incolora y se
mantuvo igual al introducirse en agua destilada. No fue hasta ponerse en contacto con el
Lugol, que el Polisacárido empezó a producir tinciones de color azul-violeta. Las cuales, al
transcurrir el tiempo dentro del lapso de 20 minutos tiñeron y recubrieron por completo la
bolsa, arrojando así, un Almidón con una pigmentación bastante cercana al negro.
Tabla 6. Coloración del Almidón presente en la bolsa de diálisis antes, durante y después del
contacto con el Lugol.
Protocolo #5
RESULTADOS Y DISCUSIÓN
La homeostasis tiene como objetivo mantener el equilibrio interno sobre ciertos factores del
cuerpo humano como la temperatura o la concentración de iones, una vez el interior o
exterior celular se ven alterados, se genera un estímulo que será captado por unos receptores,
generando que el sistema ajuste ciertos procesos de tal manera en que se vuelva al punto de
equilibrio, uno de los mecanismo de acción utilizados es la ósmosis. Como ejemplo se
presenta la osmorregulación que se encarga de controlar la concentración de solutos, donde
hay una mayor cantidad de partículas disueltas habrá una mayor osmolaridad, por lo que el
agua se moverá de una región con menor concentración a una de mayor concentración,
evitando estados diluidos o muy concentrados y de esa manera alcanzar el equilibrio (14).
Por su parte, el RCS (Rojo Congo Saturado) es una molécula polar y ácida que se une a las
proteínas y a las fibrillas amiloides en el cuerpo humano. Esta propiedad de unión a las
proteínas puede afectar su capacidad para pasar a través de la membrana del túnel de diálisis.
Si el RCS se une fuertemente a las proteínas en el dializado, es posible que no pueda pasar a
través de la membrana del túnel de diálisis y, por lo tanto, no se elimine del sistema. En este
caso, el RCS presenta un tamaño de 2,1 nm (11), es decir menor al del poro de la bolsa, lo
que significa que por sí solo puede atravesar la membrana, sin embargo, para este
procedimiento el RCS estaba saturado con sacarosa y esta última sí es una molécula de
tamaño mayor a 5 nm, lo que impide el paso a través de la membrana y permite el ingreso del
agua para su unión mediante la ósmosis.
Figura 3. RCS intacto y la bolsa de diálisis hinchándose.
En el caso del SZR y SCVR (Zumo de remolacha y colorante verde para ropa) el proceso de
diálisis fue exitoso ya que este proceso es un método de separación que consta en la
separación de dos solutos (3), en este caso el SZR y SCVR. Es importante reconocer que la
sustancia morada que pasó a través de la membrana es llamada betaína cuya medida es menor
que el del poro de la membrana semipermeable, sin embargo no se puede saber su medida en
nm , ya que no es una partícula física como un átomo o una molécula, sin embargo su medida
en Å es de aproximadamente de 4,8, por lo tanto puede atravesar la membrana
semipermeable con un poco de dificultad, eso explica porqué el SCAM teñía más rápido el
agua que el SZR. Por otro lado, el SCVR quedó atrapado en la bolsa de diálisis por lo que se
infiere que su tamaño es mayor que el del poro.
La diálisis es un procedimiento terapéutico por medio del cual se eliminan sustancias tóxicas
presentes en la sangre en pacientes con enfermedad renal crónica (ERC) que presentan un
deterioro importante de entre el 5-15% de su capacidad renal. La diálisis se realiza a través de
dos tipos de procedimientos: la hemodiálisis y la diálisis peritoneal. La hemodiálisis consiste
en dializar la sangre a través de una máquina que hace circular la sangre desde una arteria del
paciente hacia el filtro de diálisis o dializador en el que las sustancias tóxicas de la sangre se
difunden en el líquido de diálisis; la sangre libre de toxinas vuelve luego al organismo a
través de una vena canulada. La diálisis peritoneal, por otro lado, es una técnica que usa el
recubrimiento del abdomen (llamado peritoneo) y una solución conocida como dializado. El
dializado absorbe los desechos y líquidos de la sangre, usando el peritoneo como un filtro
(12).
Figura 5. Comparación de las soluciones con Rojo Congo pasados 10 minutos. A) Agua
destilada caliente, B)Agua destilada fría, C) Etanol ambiente, D) Etanol Frío.
Figura 6. Comparación de las soluciones con Rojo Congo pasados 10 minutos. A) Agua
destilada caliente con Rojo Congo, B)Agua destilada fría, C) Etanol ambiente, D) Etanol
Frío.
El primer factor sometido a discusión fue el cambio de la coloración positiva del almidón
(Figura 7) presente en la bolsa de diálisis al ponerse en contacto con el Lugol, debido a que el
Yodo (Figura 9) presente en el Lugol se introduce entre las espiras o espacios vacíos de la
molécula del Almidón, formando así, un compuesto de inclusión que modificó las
propiedades físicas de la molécula. Posteriormente, se analizó el hecho de la salida o entrada
del Almidón de la bolsa de diálisis, sustentando que en este proceso de difusión no se
presentó una salida del Almidón, por el contrario, se generó la entrada del Yodo presente en
el lugol, evidenciando así un movimiento de solutos de una menor a una mayor
concentración.
Ahora bien, el tamaño de los poros presentes en la bolsa de diálisis de celofán que oscila
entre un diámetro de 50 Å, fue determinante para el movimiento de las moléculas de ambos
solutos (Almidon y Lugol) , ya que, esta membrana sintética permitió la difusión de las
moléculas pequeñas del Lugol al presentar un menor tamaño comparado con los poros de la
bolsa de diálisis, con lo cual se cumple la función de semipermeabilidad, y por el contrario
las moléculas del Almidón, que es una molécula muy grande, no atravesaron la membrana
debido a su gran concentración de moléculas de Glucosa (Figura 8) que le dan al polisacárido
un mayor tamaño comparado con los poros de la membrana.
Uno de los procesos más relevantes en los que el gradiente de concentración del NaCl juega
un papel importante en la elodea es la osmosis. La elodea es una planta de agua dulce, lo que
significa que su entorno natural tiene una concentración de solutos (incluyendo Na + y Cl-)
más baja que el citoplasma de sus células. Como resultado, el gradiente de concentración del
NaCl tiende a hacer que el agua entre en las células de la elodea por ósmosis (16), es decir, el
agua fluya desde una región de menor concentración de solutos (el medio externo) hacia una
región de mayor concentración de solutos (el citoplasma de las células). Esto causa que las
células de la Elodea se hinchen y se vuelvan turgentes, lo que es esencial para el
mantenimiento de la estructura y función celular, así como para el soporte mecánico de la
planta.
Por otro lado, si la concentración de NaCl en el medio externo de la Elodea es alta, creando
un gradiente de concentración inverso, el agua tiende a salir de las células por ósmosis. Esto
puede provocar que las células de la Elodea se deshidraten, pierdan su turgencia y se
marchiten, lo que puede afectar negativamente la estructura y función celular, así como el
bienestar de la planta en general. Para una mejor comprensión de lo expuesto anteriormente,
se mostrará la forma de manera turgente, flácida y plasmolizada en la célula vegetal a
continuación:
Figura 11. Efecto de la célula vegetal con cada tipo de solución.
Por otro lado, se plantea que si en lugar de NaCl se utilizara una solución de glucosa
sobresaturada en uno de los experimentos, los resultados podrían ser distintos. A diferencia
del NaCl, la glucosa es una molécula grande que no se disocia en iones de solución, por lo
que no afecta directamente el gradiente de concentración de iones en la célula. La glucosa
sobresaturada podría tener un efecto diferente en la ósmosis y la turgencia celular en
comparación con el NaCl (18).
CONCLUSIONES
BIBLIOGRAFÍA
6.Windholz, Martha (1976). The Merck index: an encyclopedia of chemicals and drugs (9a
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11. Prieto García JO, Quero Jimenez PC, Enríquez García M, Ribalta Quesada JA. SciELO
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12. Rodríguez Pereira J, Morales Boada L, Flores Peñaranda GD, Navarro Torrado Y. SAN |
Revista Nefrología Argentina. Rehabilitar Cúcuta IPS, Grupo De Investigación
RehabilitarCI; 2017
18. Osmotic adjustment and ion balance in the leaves of the submerged freshwater
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19. "Osmoregulation in the Leaf Cells of Elodea densa Planchon. II. Dynamics of Osmotic
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