Facultad de Ciencias Naturales, Exactas y de la Educación

Programa Biología
Laboratorio Microbiología
14/11/2023

CARACTERIZACIÓN BIOQUÍMICA DE ENTEROBACTERIAS

Danier Muñoz Buitron

daniermunoz@unicauca.edu.co

Dayana Estefanía Taimal Cuaspud

dtaimal@unicauca.edu.co

Juan Felipe Huila Medina

juanhuila@unicauca.edu.co

Maria Paula Arcos Guerrero

mariaparcos@unicauca.edu.co

RESUMEN: Las Enterobacterias son una familia de bacterias gram negativas reconocidas como un grupo
importante en la industria alimentaria para monitorear la higiene y el saneamiento. Este grupo incluye una
gama completa de microorganismos, incluidas todas las bacterias coliformes. Sus miembros abarcan desde
bacterias como la Salmonella y la E. coli, bien conocidas por causar enfermedades transmitidas por los
alimentos, hasta agentes de deterioro de los alimentos y diversos microorganismos que normalmente se
encuentran en el tracto intestinal humano como parte de la flora intestinal.

Las Enterobacterias se caracterizan por ser anaerobios facultativos, con forma de varilla, negativos a la oxidasa,
que fermentan la glucosa en ácido y / o dióxido de carbono y generalmente móviles; Las Enterobacterias no
patógenas se consideran "organismos indicadores" en la industria alimentaria, ya que su detección y
enumeración puede indicar un procesamiento inadecuado y un saneamiento deficiente en el entorno de
procesamiento.

Se llevaron a cabo diversas pruebas bioquímicas con el fin de identificar la especie de bacteria a partir de
inóculos propuestos de los cuales se desconoce su contenido. La muestra se cultivó en tubos de ensayo y cajas
de petri con diferentes medios de cultivo y se incubó durante un tiempo determinado de 8 días . Después de la
observación de los resultados, se determinó que el cultivo bacteriano N6 corresponde a la bacteria
Enterobacter aerogenes, según las pruebas bioquímicas realizadas, ya que sus especificaciones corresponden
con lo visto. Además se concluye que en su mayoría los medios de cultivo preparados cumplen la función de
crecimiento microbiano de una manera óptima y el desarrollo de las pruebas propuestas.
PALABRAS CLAVES:

1. INTRODUCCIÓN: La caracterización bioquímica de enterobacterias es un proceso

importante en microbiología clínica y ambiental, ya que permite identificar y clasificar diferentes
especies de bacterias del género Enterobacteriaceae.
Las enterobacterias son un grupo de bacterias gramnegativas que incluyen patógenos importantes
como Escherichia coli, Salmonella y Shigella, así como otros géneros no patógenos como Klebsiella,
Enterobacter y Citrobacter
Las pruebas bioquímicas permiten determinar características metabólicas de las bacterias que se
pretende identificar. Consisten en técnicas capaces de demostrar rasgos como la presencia de una
enzima y su función de manera rápida y eficaz. Aunque algunas de estas pruebas requieren lapsos de
tiempo más extensos para el estudio y la determinación, en general resultan pruebas más eficaces y
prácticas para el estudio de bacterias. [1]

2. OBJETIVOS

-Entender el concepto de prueba bioquímica, el fundamento de cada una de las pruebas y su

interpretación.

-Identificar género y/o especie de cepas puras de enterobacterias mediante pruebas bioquímicas.

3. RESULTADOS Y DISCUSIÓN

3.1. Medio de cultivo SIM

Imagen 1: Resultado prueba de cultivo SIM (izquierda: positivo para movilidad y negativo para
producción de indol (bacteria de estudio) , centro: Enegrecimiento por formación de sulfuro de
hidrógeno, derecha: reacción positiva para Indol)

El medio de cultivo SIM, es un medio semisólido usado para verificar la movilidad, producción de
indol y de sulfuro de hidrógeno por los microorganismos. Se usa principalmente para la identificación
de la familia de bacterias Enterobacteriaceae. De forma general, el medio evidencia la capacidad del
microorganismo para hidrolizar y desaminar el triptófano gracias a la presencia de la enzima
triptofanasa, produciendo indol, ácido pirúvico y amonio. El triptófano es un aminoácido constituyente
de muchas peptonas, entre ellas la tripteína, que puede ser metabolizada por algunas bacterias para la
formación de indol. El indol producido se combina con el aldehido del reactivo de Ehrlich o de
Kovac´s, para originar un compuesto de color rojo, dando un resultado positivo para la prueba.
Además a partir del tiosulfato de sodio los microorganismos pueden generar ácido sulfhídrico que
reacciona con el hierro presente formándose un compuesto de color negro. Con respecto a la
demostración de la movilidad, el medio cuenta con agar agar, que es agente solidificante y le otorga al
medio la propiedad de ser semisólido, condición que permite detectar movilidad, evidenciada por el
enturbiamiento del medio o por crecimiento que difunde más allá de la línea de siembra del
microorganismo.[2]

Se realiza esta prueba con el cultivo facilitado por el laboratorio identificado con el número 6,
obteniendo un resultado positivo para la movilidad, evidenciado por un ensanchamiento de la línea de
punción, por lo que se identifica la presencia de flagelos en los individuos de la colonia. Por el
contrario, dado a la ausencia del anillo rojo en el cultivo, se obtiene un resultado negativo para la
producción de indol, por lo que se identifica ausencia de triptofanasa en los individuos.

3.2. Medio de cultivo TSI

Imagen 2:Resultado prueba de cultivo TSI De izquierda a derecha:producción de H2S, producción de

H2S y produce glucosa K/A, K/A, A/A

El cultivo TSI, es usado para la identificación de enterobacterias, en base a su capacidad fermentativa

de los hidratos de carbono glucosa, lactosa y sacarosa y la producción de ácido sulfhídrico.
La lactosa, sacarosa y glucosa son hidratos de carbono fermentables. El tiosulfato de sodio es el
sustrato necesario para la producción de ácido sulfhídrico, el sulfato de hierro y amonio, es la fuente de
iones Fe3+ , los cuales se combinan con el ácido sulfhídrico y producen sulfuro de hierro, de color
negro. El rojo de fenol es el indicador de pH, y el cloruro de sodio mantiene el balance osmótico. Por
fermentación de azúcares, se producen ácidos, que se detectan por medio del indicador rojo de fenol, el
cual vira al color amarillo en medio ácido. El tiosulfato de sodio se reduce a sulfuro de hidrógeno que
reacciona luego con una sal de hierro proporcionando el sulfuro de hierro de color negro. [3]

Se obtiene un resultado homogeneo de color amarillo en la totalidad del cultivo, por lo que se
determina un caracter acido, en base a la capacidad de fermentación de glucosa y lactosa que presenta
la muestra.
3.3. Medio de cultivo citrato de simmons.

Imagen 3: Reacción en medio Citrato de Simmons, reacción negativa

Medio utilizado para la diferenciación de enterobacterias en base a la capacidad de usar citrato como
única fuente de carbono y energía. En el medio de cultivo, el fosfato monoamónico es la única fuente
de nitrógeno y el citrato de sodio es la única fuente de carbono. Ambos componentes son necesarios
para el desarrollo bacteriano. Las sales de fosfato forman un sistema buffer, el magnesio es cofactor
enzimático. El cloruro de sodio mantiene el balance osmótico, el azul de bromotimol es el indicador de
pH, que vira al color azul en medio alcalino y el agar es el agente solidificante. El medio de cultivo es
diferencial en base a que los microorganismos capaces de utilizar citrato como única fuente de carbono
usan sales de amonio como única fuente de nitrógeno, con la consiguiente producción de alcalinidad.
El metabolismo del citrato se realiza, en aquellas bacterias poseedoras de citrato permeasa, a través del
ciclo del ácido tricarboxílico. El desdoblamiento del citrato genera progresivamente, oxalacetato y
piruvato. Este último, en presencia de un medio alcalino, da origen a ácidos orgánicos que al ser
utilizados como fuente de carbono, producen carbonatos y bicarbonatos alcalinos. El medio entonces
vira al azul y esto es indicativo de la producción de citrato permeasa.
Sin embargo se debe tener encuenta que si se usa un inóculo muy denso para sembrar el medio de
cultivo, puede variar el color del pico del verde al amarillo-amarronado. Esto no afecta el color verde
del resto del medio de cultivo, pero puede afectar la visualización azul de un resultado positivo, por lo
cual Inóculos demasiado densos, pueden originar resultados falsos positivos. [4]

En la prueba bioquimica realizada se obtuvieron resultados negativos para el crecimiento del inoculo
bacteriano propuesto en laboratorio, con lo cual se infiere que la bacteria no es capaz de utilizar citrato
como única fuente de carbono e iones de amonio como única fuente de nitrógeno; por lo cual no se
evidiencia crecimiento, y con ello cambio de color en el medio de cultivo, si no que por el contrario,
este queda de color verde como es inicialmente,sin emnbargo no se descartan que haya podido haber
posibles errores en la manipulacion de los cultivos bacterianos y por ello no crecio el inoculo que fue
sembrado.
3.4. Medio de cultivo prueba de urea de Christensen

Imagen 4:Reacción en medio Urea de Christensen: izquierda reacción negativa –Amarillo–, derecha
reacción positiva –Rosado–

Medio utilizado para diferenciar microorganismos en base a la actividad ureásica. Se utiliza para
identificar bacterias que hidrolizan urea, tales como Proteus spp. otras enterobacterias y estafilococos,
En el medio de cultivo, la tripteína y la glucosa, aportan los nutrientes para el desarrollo de
microorganismos. El cloruro de sodio mantiene el balance osmótico, y el rojo de fenol es el indicador
de pH, el agar es el agente solidificante; Las bacterias hidrolizan la urea por medio de la enzima ureasa
liberan amoníaco y dióxido de carbono, estos productos alcalinizan el medio de cultivo haciendo virar
el indicador rojo de fenol del color amarillo al rosa. Es recomendado especialmente para la detección
de la actividad ureásica en bacterias que hidrolizan lentamente la urea ya que la fermentación de la
glucosa presente activa la enzima ureasa microbiana.
En esta prueba bioquímica se debe prestar mucha atención al tiempo de incubación de los inóculos,
pues bacterias que hidrolizan lentamente la urea, como el caso de Klebsiella, Enterobacter y
Citrobacter, viran al color rojo rosado de todo el medio de cultivo luego de 24 horas de incubación, por
lo cual se recomienda incubar el medio por un periodo de tiempo superior a este, para así tener
certeza en cuanto a los resultados obtenidos; Además se debe tener en cuenta de no calentar o
sobrecalentar el medio de cultivo porque la urea se descompone fácilmente. y puede conllevar a error
en la muestra.[5].
El cultivo facilitado por el laboratorio, esta vez genera resultados negativos antes esta prueba
bioquimica, con lo que se infiere que la bacteria no es capaz de producir ureasa, una enzima que
hidroliza la urea, produciendo amoniaco y dióxido de carbono; El amoniaco, una base capaz de elevar
el pH del medio de cultivo, lo que se indica por un cambio de color del indicador rojo de fenol de
amarillo a rosado.
3.5. Prueba lisina descarboxilasa

Imagen 5: Reacción en medio Lisina descarboxilasa:izquierda reacción positiva, centro reacción

positiva, derecha reacción negativa.

La lisina descarboxilasa es un medio de cultivo utilizado para diferenciar microorganismos,

especialmente Salmonella spp., basado en la descarboxilación y desaminación de la lisina y en la
producción de ácido sulfhídrico.
En este medio, la peptona y el extracto de levadura son los elementos que proporcionan nutrientes
para el desarrollo bacteriano. La glucosa es un carbohidrato fermentable y la lisina es el sustrato
utilizado para detectar la presencia de las enzimas descarboxilasa y desaminasa. El citrato de hierro y
amonio y el tiosulfato de sodio son indicadores de la formación de ácido sulfhídrico El púrpura
bromocresol es el indicador de pH (su color es amarillo a pH igual o inferior a 5,2 y morado a pH igual
o superior a 6,8) y el agar es el agente solidificante.
Los microorganismos fermentadores de glucosa acidifican el medio y provocan el viraje del color
púrpura al amarillo. El ambiente ácido favorece la actividad enzimática descarboxilasa y se metaboliza
la lisina a cadaverina elevando el pH del medio de cultivo y retornando al color púrpura o violeta.
Las cepas de los géneros Proteus, Providencia y algunas cepas de Morganella, desaminan la lisina, esto
produce un ácido alfa-ceto-carbónico, el cual, con la sal de hierro y bajo la influencia del oxígeno
forma un color rojizo en la superficie del medio.[6]

Se realiza esta prueba con el cultivo facilitado por el laboratorio identificado con el número 6,
obteniendo un resultado positivo, lo cual quiere decir que la bacteria posee la enzima descarboxilasa,
que por la descarboxilación de la lisina produjo una amina que neutralizó el ácido producido por la
fermentación de la glucosa, retornando el medio a su color original que es el violeta.
3.6. Prueba rojo de metilo

Imagen 6:Reacción en medio rojo de metilo: (de izquierda a drecha): reacción negativa –Amarillo–,
reacción negativa/positiva –Rosado–, reacción positiva –Rosa intenso–

Para esta prueba se usa MR-VP como medio de cultivo. El ensayo de Rojo de Metilo y Voges
Proskauer, es particularmente útil para la clasificación de enterobacterias.
En el medio de cultivo, la pluripeptona proporciona los nutrientes necesarios para el crecimiento
bacteriano y la glucosa es un carbohidrato fermentable.
Los microorganismos pueden metabolizar la glucosa mediante diferentes vías metabólicas.
Dependiendo de la ruta utilizada, se producirá un producto final ácido (ácido láctico, ácido acético,
ácido fórmico) o un producto final neutro (acetil metil carbinol).
Esta diferencia en el metabolismo bacteriano se puede evidenciar agregando indicadores como el rojo
de metilo para detectar la presencia de productos ácidos y la presencia de productos finales neutros se
detectan mediante la adición de alfa naftol e hidróxido de potasio.
Se realiza esta prueba con el cultivo facilitado por el laboratorio identificado con el número 6,
obteniendo un resultado un color rojo, lo que nos indica que el pH descendió a 4,4 aproximadamente,
es decir, se obtuvo un producto final ácido. [7]

3.7. Prueba de Voges Proskauer (Siguiendo el contexto de la prueba anterior)

Voges y Proskauer describieron un color rojizo producido después de la adición de hidróxido de

potasio a los cultivos de ciertos microorganismos en medio con glucosa. Este color está asociado con
La oxidación del acetil metil carbinol a diacetilo, el cual reacciona con las proteínas del medio de
cultivo para formar un color rojo.
Se realiza esta prueba con el cultivo facilitado por el laboratorio identificado con el número 6, el cual,
después de la adición de la solución de sulfato de cobre, no presenta coloración roja (la prueba es
negativa, es decir no hay presencia de diacetilo.
3.8. Prueba OF

Imagen 7: Reacción de OF (Oxidación-Fermentación): positiva para un metabolismo fermentativo en

ausencia de oxígeno (Adición de Glicerina),

Esta prueba se realiza con el fin de identificar el tipo de metabolismo energético: respiratorio (O) o
fermentador (F). Se usa glucosa como sustrato. En esta prueba se detecta la acumulación de ácidos
con un indicador ácido-base llamado azul de bromotimol. En el proceso de siembra, la bacteria se
inocula con el hilo recto (por picadura ) y se incuba en condiciones de aerobiosis (sin parafina) y de
anaerobiosis (con parafina, tubo cerrado), simultáneamente.
Las bacterias que respiran aeróbicamente crecen en la superficie del medio del tubo abierto.
Transformando la glucosa en CO2, la superficie del medio se verá ligeramente amarilla (por la
formación de ácido carbónico originado al reaccionar el CO2 con el agua del medio). En el tubo
cerrado el cultivo se mantiene azul-verdoso. Las bacterias fermentadoras producen ácidos a partir de la
glucosa. Viran el cultivo del tubo cerrado a amarillo; en el tubo abierto se inicia el viraje en el fondo,
pero transcurridas 24 horas los ácidos pueden difundir por todo el medio virándolo a amarillo.[8]

Se realiza esta prueba con el cultivo facilitado por el laboratorio identificado con el número 6, como el
medio de cultivo cambia de verde azulado a amarillo en ambos tubos se obtiene un resultado
fermentativo. (Puede observarse la producción de gas dependiendo de la especie bacteriana en estudio)
3.9. Agar Salmonella Shigella

Imagen 8: Cultivo de enterobacterias en agar Salmonella - Shigella: Colonia incolora

Medio de cultivo selectivo y diferencial utilizado para el aislamiento de Salmonella spp. y de algunas
especies de Shigella spp. a partir de heces, alimentos y otros materiales en los cuales se sospeche su
presencia.
En el medio de cultivo la pluripeptona y el extracto de carne aportan los nutrientes para el desarrollo
microbiano. Las sales biliares y el verde brillante inhiben el desarrollo de una amplia variedad de
bacterias Gram positivas, de la mayoría de los coliformes y el desarrollo invasor del Proteus spp. La
lactosa es el hidrato de carbono fermentable. El tiosulfato de sodio permite la formación de SH2 que se
evidencia por la formación de sulfuro de hierro. El rojo neutro es el indicador de pH y el agar es el
agente solidificante. Los pocos microorganismos fermentadores de lactosa capaces de desarrollar,
acidifican el medio haciendo virar al rojo el indicador de pH, obteniéndose colonias rosadas o rojas
sobre un fondo rojizo. Salmonella, Shigella y otros microorganismos no fermentadores de lactosa,
crecen adecuadamente en el medio de cultivo, y producen colonias transparentes. La producción de
ácido sulfhídrico se evidencia como colonias con centro negro debido a la formación de sulfuro de
hierro. Para aumentar la selectividad, se recomienda incubar previamente la muestra en Selenito
Caldo.[9]

Se realiza esta prueba con el cultivo facilitado por el laboratorio identificado con el número 7 y se
obtiene una colonia color rosado o mejor dicho transparente dándonos un crecimiento satisfactorio al
resultar la prueba positiva lo cual nos conlleva a analizar sus características para identificarla
tratándose de una posible salmonella o posiblemente de una Enterobacter aerogenes.
3.10. Prueba agar EMB

Imagen 9: Prueba de agar EMB: Colonia rosada, Verde brillante

Este medio (también denominado E.A.M.) es utilizado para el aislamiento selectivo de bacilos Gram
negativos de rápido desarrollo y escasas exigencias nutricionales. Permite el desarrollo de todas las
especies de la familia Enterobacteriaceae. El medio de cultivo combina las fórmulas de Holt-Harris y
Teague con la de Levine, para obtener un mejor rendimiento en el aislamiento selectivo de
enterobacterias y otras especies de bacilos Gram negativos. Es nutritivo por la presencia de peptona
que favorece el desarrollo microbiano. La diferenciación entre organismos capaces de utilizar la
lactosa y/o sacarosa, y aquellos que son incapaces de hacerlo, está dada por los indicadores eosina y
azul de metileno; éstos ejercen un efecto inhibitorio sobre una amplia variedad de bacterias Gram
positivas. El agar es el agente solidificante. Muchas cepas de Escherichia coli y Citrobacter spp.
presentan un característico brillo metálico. Las cepas que utilizan la lactosa poseen centro oscuro con
periferia azulada o rosada, mientras que las que no lo hacen son incoloras. También, pueden crecer
especies de Candida y se observan como colonias rosadas y puntiformes; la siembra en profundidad
permite el desarrollo de clamidosporas en C. albicans. Enterococcus spp. crece en este medio como
colonias puntiformes y transparentes, mientras que Acinetobacter spp. y otras bacterias oxidativas se
observan como colonias de color azul lavanda; esto puede ocurrir aunque las cepas no sean capaces de
acidificar a partir de lactosa al 0.5% y ello se debe a la incorporación de azul de metileno a sus
membranas. En este medio se obtiene además, un buen desarrollo de especies de Salmonella y
Shigella.[10]

Se realiza esta prueba con el cultivo facilitado por el laboratorio identificado con el número 8 y se
obtiene una colonia de color rosada, lo cual es de análisis, obteniéndose una prueba con un crecimiento
bacteriano con colonias incoloras o de color claro. Estas colonias indican la presencia de bacterias no
fermentadoras de lactosa
Tabla 1.

Prueba Resultado

Medio de cultivo SIM Positivo para movilidad, negativo para

producción de indol

Medio TSI pH ácido en todo el medio

Lisina Positivo

Citrato de Simmons Negativo

Urea Medio de cultivo Negativo

Rojo de metilo pH ácido a neutro (4.4)

Agar SS Crecimiento colonias rosadas

Agar EMB Crecimiento colonias rosadas, verdes brillantes

OF Metabolismo fermentativo

VP No aplica
Resultados de pruebas bioquímicas realizadas a muestra de estudio.

Imagen 10: Tabla de identificación bioquímica de Enterobacterias, tomado de:

https://es.scribd.com/document/518796689/328449270-Tabla-de-Identificacion-Enterobacterias-1
En base a la información recopilada de los resultados de las pruebas bioquímicas se identifica a la
especie estudiada como: Enterobacter aerogenes.

4. CONCLUSIONES

Las pruebas bioquímicas desempeñan un papel fundamental en la identificación de bacterias al

permitir la evaluación de sus características metabólicas mediante técnicas eficientes y rápidas. Estas
pruebas son capaces de demostrar la presencia de enzimas específicas y su función, proporcionando
una visión detallada de los perfiles bioquímicos de las bacterias evaluadas. Las pruebas se destacan
por su eficacia y practicidad en el análisis bacteriano. La capacidad de obtener información precisa
sobre la presencia de enzimas y otros aspectos metabólicos de manera oportuna hace que las pruebas
bioquímicas sean herramientas valiosas en el estudio y la determinación de la identidad de las
bacterias, facilitando así su caracterización y clasificación.

En base a los resultados obtenidos mediante la aplicación de pruebas bioquímicas que pretenden
estudiar el comportamiento metabólico de las bacterias, se identifica que el cultivo analizado en el
laboratorio corresponde a Enterobacter aerogenes.

Para el desarrollo de pruebas bioquímicas es importante que los cultivos donde se realicen se hayan
preparado de manera correcta, que las condiciones en las que se requiere el crecimiento de la bacteria
estén debidamente aplicadas, que en caso de requerir la adición de reactivos estos se añadan en la
cantidad y manera correcta y que posterior a esto se realice un análisis completo contemplando los
posibles errores que puedan presentarse en la práctica, todo con el fin de poder realizar una buena
aproximación sobre la identificación del microorganismo evaluado.

5. REFERENCIAS November 14, 2023, from

1. Métodos de identificación bacteriana en
el laboratorio de microbiología. (n.d.).
seimc. Retrieved November 14, 2023,
from
https://www.seimc.org/contenidos/docu
mentoscientificos/procedimientosmicro
biologia/seimc-procedimientomicrobiol
ogia37.pdf
https://www.britanialab.com/back/publi
c/upload/productos/upl_6070971eb11bd
.pdf
4. Simmons JS. A culture medium for
differentiating organisms of the
typhoid-colon aerogenes groups and for
isolation of certainfungi. J Infect Dis;
39: 209-214

2. SIM Medio. (n.d.). Britania Lab. 5. MacFaddin . Media for

Retrieved November 14, 2023, from isolation-cultivation-identificationmaint
https://www.britanialab.com/back/publi enance of medical bacteria, volume 1.
c/upload/productos/upl_6070922459b8 Williams & Wilkins, Baltimore, Md
4.pdf
6. AGAR LISINA IRON Medio de cultivo
3. T.S.I. Agar (Triple Sugar Iron Agar). LISINA IRON. (2015, April 6). Lab
(n.d.). Britania Lab. Retrieved Medibac. Retrieved November, 2023,
 from
https://www.labmedibac.com.ec/wp-con
tent/uploads/2015/04/AGAR-LISINA-
MEDIBAC-LAB.pdf

7. MR-VP Medio. (n.d.). Britania Lab.

Retrieved November, 2023, from
https://www.britanialab.com/back/publi
c/upload/productos/upl_607075106482
0.pdf

8. Métodos OF y fermentación de
azúcares. (s. f.).
https://www.ugr.es/~pomif/pom-bac/pb-
v/pb-v-3-of.htm

9. Salmonella Shigella Agar. (n.d.).

Britania Lab. Retrieved November 14,
2023, from
https://www.britanialab.com/back/publi
c/upload/productos/upl_6070900c78db3
.pdf

10. MR-VP Medio. (n.d.). Britania Lab.

Retrieved November , 2023, from
https://www.britanialab.com/back/publi
c/upload/productos/upl_607075106482
0.pdf.

11. Alvarez, A. (n.d.). Tabla de

Identificación Enterobacterias | PDF |
Las bacterias | Microbiología. Scribd.
Retrieved November 14, 2023, from
https://es.scribd.com/document/518796
689/328449270-Tabla-de-Identificacion
-Enterobacterias-1