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PRIMER INFORME CONSOLIDADO

TALLER DE MICROBIOLOGIA

Evelyn Valentina Garcia Bonilla, Juan Esteban Rueda Montañez


Taller de microbiología, Departamento de química, Facultad de Ciencias, Universidad Nacional de
Colombia, sede Bogotá, Colombia.
5 de octubre de 2022.

ABSTRACT. RESUMEN.

In order to have a first approach to the laboratory Para tener un primer acercamiento a las prácticas de
practices in microbiology, practices were carried laboratorio en microbiología, se realizaron
out as an aseptic technique in a TBS liquid as a test prácticas como técnica aséptica en un líquido TBS
for the sowing with a loop, the sowing techniques como prueba para la siembra con asa, las técnicas
with a loop, through a sample obtained from a cell de siembra con asa, mediante una muestra obtenida
phone and skin in three media different: TSA, MC de un celular y piel en tres medios diferentes: TSA,
and MT, which resulted in no case of growth of MC Y MT, lo que resulto que en ningún caso se
microorganisms; Additionally, the action of observó crecimiento de microorganismo;
antimicrobial agents on the growth of adicionalmente se analizó la acción de los agente
microorganisms was analyzed with the following antimicrobianos en el crecimiento de los
agents; water, sodium hypochlorite, hydrogen microorganismos, con los siguiente agentes; aguas,
peroxide and amoxicillin for E. Coli and Bacillus hipoclorito de sodio, agua oxigenada y amoxicilina
Thuringiensis, which resulted in a great inhibition para a E. Coli y Bacillus Thuringiensis lo que
response, allowing the comparison of their radii. resulto una gran respuesta de inhibición,
After this, an identification is made by means of a permitiendo comparar los radios de estos. Luego de
wet sample and a fixed one by Gram stain. esto, se realiza una identificación por medio de una
muestra húmeda y una fija por tinción de Gram.

INTRODUCCIÓN

En el estudio de los microorganismos se tiene como objetivo caracterizar, entender e identificar que tipo de
especie es, por lo que debemos tener organismos en forma de cultivo puro, es decir, tener una única especie.
Un cultivo puro es aquel que solo tiene un tipo de microorganismo a crecer en él, por lo que esto requiere de
un medio estéril que contenga los nutrientes necesarios para su crecimiento. Un medio de cultivo esta diseñado
para un rápido crecimiento microbiano y normalmente se producirá poca o ninguna acumulación de producto,
y sus requerimientos nutricionales dependen del tipo de microorganismo que se utilice en este proceso de
fermentación [1], aunque si se pueden consideras requerimientos nutricionales elementales, donde su
composición química son macroelementos de carbono, oxigeno, hidrogeno, nitrógeno, azufre, fosforo, potasio,
sodio, calcio, magnesio y hierro ( C, O, H, N, S, P, K, Na, Ca, Mg, Fe) y microelementos u oligoelementos:
manganeso, molibdeno, zinc, cobre, níquel, vanadio, boro, c1oro, selenio, silicio, wolframio entre otros, que
no los necesitan todos los organismos. Los metales pesados son principalmente componentes de los enzimas
que transforman elementos a compuestos inorgánicos, estos elementos son obtenidos mediante sales y
disoluciones de oligoelementos [2]. Además, necesitan fuentes de energía, de carbono, nitrógeno, vitaminas y
agua. En esta practica de laboratorio para el crecimiento microbiano se emplearon tres medios de cultivo, el
Agar Triptona-Soja (TSA), es un medio que aporta nutrientes ricos en péptidos, aminoácidos libres, bases
púricas y pirimídicas, minerales, y vitaminas, además su fuente de carbono lo obtiene a partir de hidratos de
carbono. Puede ser empleado para bacteria aeróbicas y anaeróbicas, el medio de cultivo [3] (MC) Agar
MacConkey es un medio de cultivo, que al tener presencia de peptonas aporta nutrientes necesarios para el
desarrollo bacteriano. La lactosa es el hidrato de carbono que se fermenta, disminuyendo el pH alrededor de la
colonia. Además de tener una mezcla de sales biliares y el cristal violeta, los cueles inhiben el desarrollo de la
flora Gram positiva, pues este medio es empleado para el aislamiento de bacilos Gram negativos, aerobios y
anaerobios [4] y por ultimo. El agar Monitol salado (MT) el cual es un medito selectivo y diferencial, el cual
aísla estafilicocos, por medio de diversas muestras. Este medio tiene el extracto de carne, la peptona de carne
y la tripteína, que constituyen la fuente de carbono, nitrógeno, vitaminas y minerales que promueven el
desarrollo microbiano. El cloruro de sodio es el agente encargado de inhibir el desarrollo de la flora de las
Gram-negativas por lo que es usado para el crecimiento de bacterias Gram-positivas, es importante recalcar
que el agar es el agente encargado de solidificar.

En el medio de cultivo por un método cualitativo que se denomina siembra por estría, donde se aísla el
microorganismo por agotamiento en la placa a apartir de una muestra. Este método consiste en esparcir
mediante un asa de siembra, un numero pequeño de individuos con una determinada organización,
favoreciendo así la formación de colonias.

Para lograr la pureza de cultivo, también se debe recurrir a técnica de laboratorio, que tienen como fin disminuir
la contaminación microbiana, estas técnicas son denominadas técnicas asépticas, la cual consiste en esterilizar
y mantener la inocuidad de un objeto y ambiente [5] En el laboratorio se trabajó con un mechero Bunsen, el
cual crea un flujo de aire ascendente a través de la convección, lo que reduce la probabilidad de contaminación
de polvo u otros agentes que estén en equipos, instrumentos o superficie. Otro aspecto a tener en cuenta es que
los tubos de ensayo u otros recipientes que contengan muestras biológicas deben flamearse alrededor de la tapa
y cuello a medida que se abre el recipiente, evitando que ingresen contaminantes a la muestra. Los alambres
también se deben esterilizar por medio del mechero, para garantizar su descontaminación, se debe lograr un
color rojo intenso durante su exposición al calor. Una ventaja de trabajar con el mechero Bunsen, es que permite
crear una zona inocua, por lo que es aprovechada para ubicar empaques de pipetas, evitando que no se
contaminen, ya que este instrumento es utilizado con frecuencia en la trasferencia de líquidos. Importante que
su punta no esté en contacto con ninguna superficie, y luego de haberse utilizado debe depositarse en frascos
desinfectantes.

Los microrganismos estudiados en esta práctica de laboratorio fueron Bacillus thuringiensis, el cual es un
bacilo gram positivo, de flagelación perítrica, que mide de 3 a 5 µm de largo por 1 a 1,2 µm de ancho. Es un
microorganismo anaerobio facultativo, quimioorganótrofo y con actividad de catalasa. Los distintos
aislamientos de B. thuringiensis presentan en general características bioquímicas comunes. Tiene la capacidad
de fermentar glucosa, fructosa, trealosa, maltosa y ribosa, y de hidrolizar gelatina, almidón, glucógeno, esculina
y N-acetil-glucosamina [7]. Y, la Escherichia coli es un bacilo gram negativo, anaerobio facultativo de la
familia Enterobacteriaceae, tribu Escherichia [8] esta se encuentra normalmente en el intestino del ser humano
y en la sangre caliente de los animales, al ser productora de toxina Shiga esta puede causar graves enfermedades
a través de los alimentos, en especialmente de alimentos procedentes de animales [9].

El estudio de estos microrganismos consistió en observar su respuesta de crecimiento frente agentes


antimicrobianos como; antisépticos, antibióticos, desinfectante. Cada uno de estos tiene un determinado
objetivo; Los antisépticos son sustancias que inhiben el crecimiento bacteriano pero que normalmente no son
dañinas para los tejidos humanos. Los desinfectantes son sustancias que inhiben el crecimiento de bacterias,
se usa para objetos, superficies y ambientes, como el hipoclorito de sodio (clorox) el cual tiene un espectro
amplio de actividad y no deja residuos tóxicos, además que tiene un bajo costo en el mercado. Los antibióticos
están hechos de microorganismos, un ejemplo es la amoxicilina que es un antibiótico semisintético derivado
de la penicilina, es un grupo amino penicilina, el cual tiene un amplio rango de espectro. Razón por la cual se
emplea como fármaco en diversas infecciones. Su mecanismo de acción busca impedir la correcta formación
de la pared celular, ocurriendo la lisis de la bacteria y su muerte [10]

Para la identificar el tipo de bacteria, se recurre a un método de tinción diferencial, se define así debido a que
se emplean dos tipos de colorante, ese método de gran utilidad se nombre Tinción de Gram [11]. Sus principios
están basados por la característica de la pared celular de las bacterias, la cual determina propiedades
importantes en los microrganismos, pues su principal diferencia es que las bacterias Gram-negativas poseen
una capa gruesa de petdoglicano con ácido teicoico, que permite que en la tinción se mantenga el color morada
a diferencia de la Gran-positivas que contienen una pared celular delgada sin acido teicoico lo cual le permite
teñir su pared de rosado. Después de su tinción se observa mediante un microscopio. [12]

3. METODOLOGIA

3. 1 TECNICAS ASEPTICAS Y METODOS BASICOS PARA CULTIVOS DE


MICROORGANISMOS.

Para emplear la técnica aséptica se hizo uso de dos tubos de ensayo que contenían caldo de soya tríptico. El
procedimiento consistió; con ayuda un asa (herramienta utilizada para cultivar microorganismos) se transfiere
de un tubo a otro el líquido interno, teniendo en cuenta cada parte del proceso de la técnica aséptica, con el
objetivo que ninguna de las muestras se haya contaminado (figura No.1).

La segunda parte de esta practica consistio en realizar una siembra por estrias de una bacteria en especifico
(E.coli) en un medio de cultivo TSA, esto se realizo haciendo uso de un asa para poder suministrar la bacteria
al cultivo. Uno de estos cultivos se realiza apartir de una muestra solida y ¿de una liquida. (figura No.2).

La tercera parte de la practica consistio en agregar agua potable en una placa de TSA con la tecnica de siembra
por extension. Se adiciono una cantida de 0,1 ml de agua y esparcio en el recipiente con una varilla previamente
esterilizada hasta que se observara homogeneidad (figura No.3).

Por ultimo, la cuarta parte de practica consistio en la siembra por estria de una muestra aleatoria haciendo uso
de un hisopo esterilizado, esta muestra se cultivo en tres diferentes medios: agar de soya triptico (TSA), placa
de agar MacConkey (Mc) y placa de sal de manitol (MT), esparciendo la muestra de forma continua y sin
dejar espacios entre cada estria (figura No.4).

3.2 ACCION DE AGENTES ANTIMICROBIANOS EN EL CRECIMIENTO DE LOS


MICROORGANISMOS.

En esta práctica de laboratorio se hizo uso de las técnicas asépticas y de siembra por extensión realizadas
previamente, con el fin de poder ejecutar las pruebas con los agentes antimicrobianos. En esta práctica se
empleó 3 tipos de agentes antimicrobianos: un antiséptico (agua oxigenada) ubicado en la sección 1, un
desinfectante (clorox) ubicado en la sección 2 y un antibiótico (amoxicilina) ubicado en la sección 3 con el fin
de observar el comportamiento de dos especies (Escherichia Coli, Bacillus Thuringiensis) ante la presencia de
estos agentes. Estos agentes se añadieron con círculos de papel de filtro. (figura No.5).
3.3 MICROSCOPIA Y TECNICAS DE TINCION GRAM

Esta practica de laboratorio su objetivo era entender el funcionamiento de un microscopio óptico, por lo que
se observó una preparación húmeda y fija empleando la técnica de tinción de Gram. Las muestras estudiadas
son Gram de E. Coli y Bacillus Thuringiensis.

Para la preparación húmeda, se agrega una gota de agua destilada en el portaobjeto, se coloca homogéneamente
una pequeña cantidad de colonia de un cultivo de medio sólido, usando un asa. Se ubica un cubreobjetos y se
observa al microscopio.
+
En la preparación fijada para tinción de Gram, en un portaobjeto se agrega una gota agua, y por medio de un
asa se esparce homogéneamente una pequeña cantidad de colonia. Luego pase rápida y repetitivamente el
portaobjetos con la ayuda de unas pinzas por la llama del mechero, de tal manera que se fije la extensión por
el calor y así se pueda llevar la tinción.
3
Tinción de Gram, se añade cristal violeta, se espera 3 min, se lava con abundante agua, se añade Lugol, esperar
2 min, lavar con abundante agua, decolorar con etanol, dejar reposar 30 seg, lavar con abundante agua, añadir
Safraina, esperar 2 min. Lavar y secar. Para así observar en el microscopio.

4. DISCUSIÓN DE RESULTADOS.

4.1 TECNICAS ASEPTICAS Y METODOS BASICOS PARA CULTIVOS DE


MICROORGANISMOS.

Figura 1. Prueba de tecnica aseptica en caldo de soya triptico (TSB), (a) tubos de ensayo del estudiante
1, (b) tubos de ensayo de estudiante 2.

Con respecto a los resultados obtenidos y observados en figura No. 1, que corresponde a la implantación de las
técnicas asépticas, se puede observar que estas fueron implementadas debidamente por ambos estudiantes ya
que no se observa ningún tipo de suspensión o turbidez en el TSB mostrando una tonalidad amarilla traslucida.
Dicho de otra forma, esto demuestra que ningún tipo de microorganismo presente en el ambiente de trabajo,
tubo la posibilidad de realizar algún tipo de crecimiento tanto como en el tubo 1 como en el tubo 2 al momento
de realizar las transferencias.

(a) (b)
Figura 2. Siembra por estrias de E. coli en medio de cultivo TSA, (a) placa de TSA con muestra solida
de estudiante 1, (b) placa de TSA con muestra liquida de estudiante 2

Respecto a los resultados del cultivo por estrías de la bacteria E. coli, se puede detallar que en ambos casos
tanto en sepa liquida como en solida se generó el respectivo crecimiento de esta, representada por colonias
fácilmente observables (figura No. 2). Esto se debe ya que la bacteria E. coli no tiene una característica
nutricional exigente y es anaerobia facultativa permitiendo que crezca con facilidad en un medio de cultivo
TSA el cual tiene un nivel nutritivo básico. Otro factor importante para el crecimiento de esta bacteria es la
temperatura optima de crecimiento de 37 °C la cual se garantiza al momento de incubar las muestras. Al
observar la figura No. 2 no se pueden distinguir o diferenciar una colonia de las otras, esto ocurre ya que al
momento de realizar la siembra con el asa no se realizó de la forma adecuada ya que se hizo de una forma
rápida y sin el debido cuidado provocando que la bacteria se reprodujera unas sobre otras.

(a) (b)
Figura 3. Siembra por extension de agua potable en medio de cultivo TSA, (a) placa de TSA con agua
potable de estudiante 1, (b) placa de TSA con agua potable de estudiante 2.
Por otra parte, los resultados obtenidos de la siembra por extensión que consistía en aprender esta técnica por
medio del uso de agua destilada (figura No.3) se mostraron satisfactorios, puesto que no se observa ningún tipo
de microorganismo creciendo en el medio de cultivo dejando a simple vista que las técnicas asépticas fueron
empleadas debidamente por ambos estudiantes.

(a) (e) (f)

(b) (c) (d)


Figura 4. Siembra por estrias de una muestra aleatoria en diferentes medios de cultivo, (a) cultivo de muestra de
grasa de la cara del estudiante 2 en placa TSA, (b) cultivo de muestra de la pantalla de celular del estudiante 1
en placa TSA, (c) cultivo de la muestra de la pantalla de celular del estudiante 1 en placa Mc, (d) cultivo de
muestra de grasa de la cara del estudiante 2 en placa Mc, (e) cultivo de muestra de la pantalla de celular del
estudiante 1 en placa MT, (f) cultivo de muestra de grasa de la cara de estudiante 2 en placa MT.

Finalmente, al observar los resultados obtenidos en la última parte de esta práctica podemos decir que
independientemente de las muestras que se hayan utilizado se generó un crecimiento bacteriano en ambos casos
(figura No. 4 a, b), esto se puede explicar ya que existen bacterias que pueden proliferar con facilidad en estas
superficies. Las bacterias que comúnmente se encuentran presentes tanto en la pantalla de un celular como en
la piel humana son estreptococo, estafilococos, difteroides, E. coli, micrococos, corinebacterias y acinetobacter
las cuales mayormente son infecciosas, al implantarlas en el medio de cultivo TSA incitamos el crecimiento y
reproducción de estas. Debido a la presencia de todos estos microorganismos en el medio de cultivo no es
posible diferenciar de una de otra, por esta razón se realizaron siembras en otros dos medios que son específicos
a ciertas bacterias. En la (figura No. 4 c, d) se trabajó con un medio de cultivo de sal de manitol el cual es
selectivo y diferencial de microorganismos estafilococos, este se compone principalmente por extracto de
carne, peptona, tripteina, manitol que es el compuesto fermentable, cloruro de sodio que actúa como inhibidor
de crecimiento y rojo de fenol como indicador. Al ver la figura se observa que no se produjo ningún tipo de
crecimiento de microorganismos, esto puede deberse a que el medio de trabajo es selectivo a un microrganismo
especifico que posiblemente no estaba presente en las muestras o no se tenía la suficiente cantidad de este al
momento de realizar el muestreo o de cultivarlo. Por otro lado, ocurrió lo mismo con el medio de cultivo de
McConkey (figura No. 4 e,f) ya que no se presenta ningún crecimiento en la placa, esto se debe a que también
es un medio selectivo pero en este caso de bacterias gram negativas específicas que pueden o no estar presentes
en las muestras que se tomaron en la práctica; también otro factor importante es que al momento de realizar la
siembra en los medios de cultivo esta se hizo con un solo hisopo esto puede ser un inconveniente ya que la
cantidad que se esparcía en cada medio era mínima y al parecer no fue suficiente para generar algún crecimiento
notable en los medios de cultivo selectivos.

4.2 ACCION DE AGENTES ANTIMICROBIANOS EN EL CRECIMIENTO DE LOS


MICROORGANISMOS.

(a) (b)

Figura 5. Siembra por extencion en TSA de dos especies en presencia de angentes antimicrobianos, (a)
cultivo de Escherichia Coli, (b) cultivo de Bacillus Thuringiensis.

Al observar los resultados obtenidos en esta práctica de laboratorio, se podría decir que independientemente
de la naturaleza del microorganismo que se sembró en el medio TSA los agentes antimicrobianos tuvieron un
efecto notable sobre estos; debido a la presencia de los radios de inhibición en cada uno de los sectores
señalados (figura No. 5 a, b). Sin embargo, analizando la siembra de ambas bacterias siendo una de ellas la
Escherichia Coli la cual es un microorganismo gram negativo que se constituye principalmente por un
peptidoglicano muy delgado recubierto de una membrana externa de lipopolisarida, y la otra Bacillus
Thuringiensis siendo esta un microorganismo gram positivo que a diferencia de la otra bacteria esta posee un
peptidoglicano con un grosor consideramente más grande con ausencia de una membrana externa que conforma
su pared celular. Podemos decir, que en el sector No. 1 (figura No. 5 a,b) donde había presencia de agua
oxigena, el radio de acción en ambos casos es notorio aunque donde está la bacteria E.coli presenta un radio
relativamente más grande que el del B. thuringiensis, si bien como se observar en la figura No. 5 (a) se puede
ver una cantidad mínima de crecimiento dentro del radio de inhibición, esto se debe a que las bacterias gram
negativas por lo general son más resistentes a los antisépticos que las gram positivas debido a la complejidad
de la pared celular. Por lo tanto, el agente antiséptico utilizado en esta práctica (peróxido de hidrogeno) ingresa
con mayor facilidad en las gram positivas formando radicales libres OH-, que oxida a los grupos tioles de
enzimas y proteínas; este agente también afecta considerablemente la estructura del ADN de la bacteria ya que
inhibe la síntesis de este y a su vez la rompe. Esto también ocurre con la presencia del agente desinfectante
clorox (figura No. 5 a, b sector 2) puesto que el halógeno presente oxida los grupos tioles de la célula a
disulfitos, sulfoxidos y disulfoxidos, también cuando las enzimas entran en contacto con el cloro, uno o más
de los átomos de hidrógeno es substituido por el cloro. Esto provoca que la molécula se transforme o se rompa.
Provocando que la enzima no funcione correctamente hasta llegar a la muerte de la bacteria.
Por otro lado, al analizar el efecto que tiene el antibiótico sobre estas bacterias (figura No.5 a, b sector 3), se
observa que en el cultivo que pertenece a la B. Thuringiensis el efecto de la amoxicilina es menor inhibidor
debido a que el radio de acción es considerablemente más pequeño a diferencia del radio de inhibición del
cultivo que contiene E. coli, esto puedo ocurrir ya que la amoxicilina tiene un espectro útil similar al de la
ampicilina, que incluyen bacterias gram positivos tales como Enterococcus, Staphylococcus, Streptococcus,
incluido S. pneumoniae, y algunos bacterias gram negativas Neisseria, E. coli, H. influenzae, H. pylori,
Proteus, demostrando asi que su efecto frente a la bacteria B. Thuringiensis es casi imperceptible ya que no se
incluye en el espectro de acción de este antibiótico. Aunque, si es posible que una cantidad mínima de bacterias
lleguen a sufrir este efecto (figura No. 5 b) ya que igualmente afecta de una forma u otra el proceso de
formación de enlace peptídicos de la bacteria. Sin embargo, en la bacteria E. coli el efecto de antimicrobiano
es considerablemente alto, esto ocurre que ya el antibiótico inhibe la acción de peptidadas y carboxipeptidasas,
las cuales son enzimas vitales para la ruta biosintetica de peptidoglicano bacteriano que forma parte integral
de un compuesto de la pared celular bacteriana. Esta inhibición da pie a una debilitación de la pared celular
que es normalmente seguida por lisis celular y la respectiva muerte como se observa en los resultados obtenidos
(figura No. 5 a), demostrando que la amoxicilina tiene un rango de inhibición amplio frente a esta bacteria.

4.3 MICROSCOPIA Y TECNICAS DE TINCION GRAM.

(a) (b)
Figura 6. Preparación húmeda de Bacillus (a) y E. Coli (b) observada en el microscopio

(b) (b)
Figura 7. Preparación fija por tinción de Gram para Bacillus (a) y E. Coli (b) observada en el
microscopio 40x.

La preparación húmeda permite una visualización tenue y poco definida debido al contraste de estas bacterias
con el campo claro del microscopio empleado. Este contraste se genera por la dispersión de la luz de cada
célula de las bacterias observadas (figura 6). El uso de colorantes, por medio del desarrollo de tinciones, facilita
la observación directa de aquellos organismos que poseen un índice de refracción similar al del medio
proporcionado por el microscopio, ver figura 7. En la figura 7 se pueden observar los resultados de la tinción
de Gram para Escherichia coli. Y para Bacillus. encontrando una diferencia de tinción, así identificando como
Gram-negativa y Gram-positiva respectivamente. Esta técnica es posible gracias a la diferencia que existe en
la pared celular de estos dos tipos de bacterias, pues en las bacterias Gram-positivas poseen una gruesa pared
de capa de peptidoglicano, y dos ácidos teicoicos, anclado en la cara interna de la pared celular y unido a la
membrana plasmática. Estos dos tipos de ácidos son el lipoteicoico y el teicoico (mureína) mientras que las
Gram-negativas poseen una pared delgada y se encuentra unida a una segunda membrana plasmática exterior
de diferente composición, mediante lipoproteínas. La composición de la membrana exterior es de proteína,
fosfolípido y lipopolisacárido. Por lo tanto, ambos tipos de bacterias se tiñen diferencialmente debido a estas
diferencias constitutivas de su pared, Otro factor a tener en cuenta es la resistencia de decoloración, y todo
sigue siendo factor de la membrana. Pues las Gram-negativas al tener una capa externa soluble en agentes
orgánicos, va a ocurrir con el alcohol que el complejo sea disuelto, sumando que al tener una capa de
peptidoglucano delga, no va a tener la suficiente capacidad para retener el complejo de augol cristal violeta/
yodo. Mientras que la respuesta de las Gram.positivas al tener una concentración mayor de peptidoglucano, el
agente afecta a la bacteria deshidratándola, lo que su respuesta es cerrar sus poros y contener el
complejo.[14][15]

5. CONCLUSIONES.

Las técnicas asépticas y los métodos de siembra de un microrganismo en específico se emplearon


adecuadamente, También se demostró que la técnica es eficiente para la eliminación de microrganismo
externos y así evitar posibles contaminaciones como se mostró en los resultados obteniendo medios de cultivo
axenicos y sin ningún tipo de suspensión o contaminante notorio.

Como factor importe a la hora de realizar una siembra de algún tipo de muestra, es importante tener en cuenta
la cantidad que se tome de esta ya que debido a esto el resultado de crecimiento del microorganismo se verá
afectado según los resultados obtenidos llegamos a esta conclusión.

Los agentes antimicrobianos tienen un efecto notorio respecto a la naturaleza de las bacterias puesto que unas
(gram positivas) son más susceptibles a ser inhibidas o eliminadas por los agentes que las otras (gram
negativas). También cabe resaltar, que a pesar de la naturaleza y la composición de cada bacteria en todos los
resultados se mostraron valores positivos de inhibición demostrando así que los agentes antimicrobianos son
ideales para combatir a cierto grupo de bacterias que son consideradas patógenos o un riesgo para la salud.

Al momento de escoger algún antibiótico como agente antimicrobiana, toca tener en cuenta el mecanismo de
acción o la utilidad que tiene este a cierto tipo de bacterias ya que cada antibiótico semisintetico se especializa
en la eliminación de un microrganismo en específico. Aunque, en la actualidad existen varios antibióticos de
alto espectro que atacan de forma general a los microorganismos presentes en el ambiente.
La tinción de Gram es un método diferencial efectivo, es un método completamente cualitativo, pues identifica
teóricamente a las bacterias Gram positivas de color azul/violeta y las Gram negativas de color rosa, esta
comparación se obtuvo en el laboratorio, por lo que se puede evidenciar la efectividad de esta técnica de
diferenciación.

BIBLIOGRAFIA.

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