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ING. BIOQUIMICA
SEXTO SEMESTRE
MICROBIOLOGIA
EQUIPO 5
Carnero Lerma Tania Ernestina
Carvajal Portillo Jocelyn Pamela
Figueroa Daz Carmen Liliana
Franco Torres Amayrani
Lizarraga Duarte Izamary
Zepeda Mediana Ana Karen
CONTENIDO
INTRODUCCION .................................................................................................... 2
CULTIVO DE MICROORGANISMOS .................................................................. 2
MEDIOS DE CULTIVO ........................................................................................ 2
CULTIVO DE MICROORGANISMOS. ................................................................. 2
DESARROLLO ........................................................................................................ 4
AGAR DE BILIS Y ROJO VIOLETA. ............................................................. 4
AGAR DE BILIS VERDE BRILLANTE ........................................................... 6
AGAR DESOXICOLATO ............................................................................... 7
AGAR DEXTROSA........................................................................................ 9
AGAR DE PAPA Y DEXTROSA (PDA) ....................................................... 11
AGAR ENDO ............................................................................................... 12
AGAR EOSINA AZUL DE METILENO ........................................................ 14
AGAR PARA ESTAFILOCOCOS (NO 110 S-110) ...................................... 16
AGAR PARA INFUSIN DE CEREBRO Y CORAZN (BHI) ..................... 17
AGAR LACTOSA......................................................................................... 19
AGAR Mc CONKEY .................................................................................... 21
AGAR PARA MTODOS ESTNDAR ........................................................ 22
AGAR NUTRITIVO ...................................................................................... 24
AGAR SALMONELLA SHIGELLA (SS) ....................................................... 26
AGAR BISMUTO SULFITO ......................................................................... 28
AGAR TCBS (TIOSULFATO CITRATO SALES BILIARES SACAROSA) . 30
AGAR XILOSA LISINA DESOXICOLATO (XLD)......................................... 32
AGAR BAIRD-PARKER .............................................................................. 34
CALDO TETRATIONATO ........................................................................... 36
CALDO ESCHERICHIA COLI ..................................................................... 38
BIBLIOGRAFAS ................................................................................................... 39
INTRODUCCION
CULTIVO DE MICROORGANISMOS
El cultivo de microorganismos consiste en proporcionarles las condiciones fsicas,
qumicas y nutritivas adecuadas para que puedan multiplicarse de forma
controlada. En general, podemos distinguir cultivos lquidos y slidos en funcin de
las caractersticas del medio y cultivos discontinuos y continuos en funcin de la
disponibilidad de nutrientes en el medio.
MEDIOS DE CULTIVO
Un microorganismo necesita para crecer nutrientes que le aporten energa y
elementos qumicos para la sntesis de sus constituyentes celulares. Dependiendo
de la fuente de carbono que utilizan, los microorganismos se pueden clasificar en
autotrofos si es el CO2 atmosfrico (microorganismos que fotosintetizan) y
heterotrofos si utilizan carbono orgnico.
Lo que supone que los componentes de las clulas son: carbono que representa
alrededor del 50% del peso seco, oxgeno (32%), nitrgeno (14%), fsforo (3%),
azufre (en torno al 1%) y otros elementos traza entre los que se encuentran Fe, K,
Mg, Mn, Co, Mb, Cu y Zn.
de
microorganismos
hemolticos),
selectivo-diferenciales
cuando
DESARROLLO
AGAR DE BILIS Y ROJO VIOLETA.
Fundamento
En el medio de cultivo, la peptona y el extracto de levadura aporta los nutrientes
necesarios para el crecimiento bacteriano, las sales biliares y el cristal violeta
inhiben el desarrollo de la flora Gram positiva, la lactosa es el hidrato de carbono
fermentable, y el rojo neutro es el indicador de pH. El agar es el agente
solidificante. Los coliformes son bacterias que fermentan la lactosa, acidifican el
medio y producen un viraje del indicador de pH al color rojo intenso. Debido a
esto, se observan como colonias de color rojo prpura, de 1 a 2 mm de dimetro,
rodeadas, generalmente, de una zona rojiza de bilis precipitada.
Ingredientes
(gr/L)
Extracto de levadura
3.0 gr
Peptona
7.0 gr
Sales biliares
1.5 gr
Lactosa
10.0 gr
Cloruro de sodio
5.0 gr
Rojo neutro
0.03 gr
Cristal violeta
0.002 gr
Preparacin
Suspender 41,5 g en 1 l de agua destilada; calentar y agitar hasta ebullicin y
hervir durante 1 minuto. Dejar enfriar a 45C y emplear de inmediato.
Se puede esterilizar a 118C durante 15 minutos. No sobrecalentar ni refundir el
medio.
Crecimiento
Satisfactorio
8739
Escherichia coli ATCC
satisfactorio
25922
Klebsiella pneumonias
Satisfactorio
ATCC 700603
Salmonella typhimurium
satisfactorio
ATCC 14028
Proteus mirabilis ATCC
satisfactorio
43071
Pseudomonas
satisfactorio
Escaso
ATCC 29212
Staphylococcus aureus
Inhibido
ATCC 6538
(gr/L)
Bilis de buey
0.00295 gr
Erioglucina
0.0649 gr
0.0295 gr
Peptona de gelatina
8.25 gr
Sodio sulfito
0.205 gr
Verde brillante
0.0000295 gr
Fuscina bsica
0.0776 gr
Lactosa
1.8 gr
0.0153 gr
Preparacin
Suspender 20,6 g en 1 l de agua destilada; calentar y agitar hasta ebullicin y
hervir durante 1 minuto. Distribuir y esterilizar a 121C durante 15 minutos.
El medio preparado es fotosensible por lo que se recomienda almacenarlo al
abrigo de la luz, y prepararlo poco antes de su utilizacin. Incubar a 37C de 18 a
24 horas.
AGAR DESOXICOLATO
Fundamento
Es un medio altamente selectivo para el aislamiento de patgenos entricos,
particularmente de los gneros Salmonella y Shigella. Como la cantidad de este
carbohidrato es limitada, una vez que estos microorganismos lo consumen,
comienzan a utilizar la lisina lo cual produce la alcalinizacin del medio; este
hecho se evidencia porque el rojo fenol nuevamente vira a un color rojo. En el
caso de los coliformes lisina positiva, para prevenir la alcalizacin del medio por la
utilizacin de la lisina, se incorpora en el medio un exceso de lactosa y sacarosa.
El medio tambin tiene la capacidad de detectar la produccin de H2S, a travs
del sistema indicador tiosufalto de sodio y citrato frrico amonio. Cuando el
microorganismo produce H2S se observan colonias con el centro negro. Los
microorganismos no patgenos productores de H2S no descarboxilan la lisina;
7
(gr/L)
330,0
Proteosa peptona
10,0
Lactosa
10,0
Citrato de sodio
20,0
2,0
Desoxicolato de sodio
5,0
Agar
13,5
Rojo neutro
20,0 mg
Agua destilada
1.000 mL
Preparacin
Suspender los ingredientes en el agua destilada. Calentar hasta ebullicin con
agitacin suave y frecuente hasta disolver completamente los ingredientes. Enfriar
entre 45C y 50C, colocar 20 mL de medio por cada placa y dejar solidificar. El
medio en las placas debe utilizarse el mismo da de su preparacin.
E. coli
Enterobacter/Klebsiella
Proteus
especie.
Salmonella/Shigella
Pseudomonas
Vibrio cholerae
Bacterias gram-positivas
AGAR DEXTROSA
Fundamento
Este medio de cultivo es utilizado para cultivo de mohos y levaduras patgenas y
no patgenas. El bajo pH del medio resulta favorable para el crecimiento de los
hongos y ligeramente inhibitorio para las bacterias. En caso de requerirse un
incremento en la inhibicin del crecimiento de bacterias, se recomienda aadir
agentes antimicrobianos como la gentamicina que inhibe el crecimiento de los
microorganismos gram negativos o el cloramfenicol que tiene un amplio espectro
de accin.
Ingredientes
(gr/L)
Dextrosa
40 g
Peptona de Casena
5g
5g
Animal
Agar Bacteriolgico
15 g
PH 5.6
0.2
Preparacin
Suspender 65 g del medio en un litro de agua purificada. Calentar con agitacin
suave hasta su completa disolucin y hervir durante un minuto. Evitar el
sobrecalentamiento. Esterilizar en autoclave a 121C (15 libras de presin)
durante 15 minutos. Dejar enfriar a una temperatura entre 45-50C y vaciar en
placas de Petri estriles.
Color
Blanco a blanco grisceo/marrn claro.
Marrn a negro.
Blanco a blanco grisceo.
10
(gr/L)
1 L.
20 g.
Agar en Polvo
20 g.
Preparacin
La infusin de patata se puede preparar hirviendo 200 g de patatas cortadas en
rodajas sin pelar en ~ 1 litro de agua destilada durante 30 minutos y luego
decantar o filtrar el caldo a travs de una gasa. Se aade agua destilada de
manera que el volumen total de la suspensin es 1 litro. Se aaden 20 g de
dextrosa y agar en polvo (20 g), el medio se esteriliza en una autoclave a 15 psi
(121C) durante 15 minutos.
11
Color
Saccharomyces cervisiae
Crema, lisas.
Candida albicans
Crema, lisas.
AGAR ENDO
Fundamento
La selectividad del agar Endo se debe a la combinacin de sulfito de sodio y
fucsina bsica que inhibe ligeramente el crecimiento de los microorganismos gram
positivos. Es un medio de cultivo microbiolgico de color rosa plido. Fue
originalmente desarrollado para el aislamiento de Salmonella typhi, pero ahora es
usado mayormente como un medio para coliformes. La mayora de los organismos
gram negativos crecen bien en este medio, mientras que otros organismos gram
positivos son inhibidos.
Ingredientes.
(gr/L)
Agar
15.0 gr
Fucsina bsica.
0.5 gr
Fosfato dopotsico.
3.5 gr
12
Lactosa
10.0 gr
Peptona de carne
10.0 gr
Sulfito de sodio
2.5 gr
PH 7.4 0.2
Preparacin
Rehidratar 41.5 g del medio en un litro de agua destilada. Reposar 10 a 15
minutos. Calentar agitando frecuentemente hasta el punto de ebullicin durante 1
minuto para disolverlo por completo. Esterilizar a 121C (15 lbs de presin)
durante 15 minutos. Enfriar aproximadamente a 45C. Vaciar en cajas de Petri
estriles. Conservar en refrigeracin de 2 a 8C.
NOTA: Para una mejor solubilidad de la Fucsina bsica agregar 40 ml de etanol
absoluto por litro de medio y dejarlo reposar 15 durante minutos.
Resultado
Escherichia coli
Enterobacter cloacae
Salmonella typhi
Shigella flexneri
Enterococcus faecalis
13
(gr/L)
Peptona especial.
10 gr
Lactosa
5 gr
Sacarosa
5 gr
Fosfato dipotsico
2 gr
Agar
13.5 gr
Eosina
0.4 gr
Azul de metileno
0.085 gr
pH = 7.2 0.2
Preparacin
Rehidratar 36 g del medio en un litro de agua destilada. Reposar 10 a 15 minutos.
Calentar agitando frecuentemente hasta el punto de ebullicin durante 1 minuto
para disolverlo por completo. Esterilizar a 121C (15 lbs de presin) durante 15
14
Resultado
Escherichia coli
Enterococcus faecalis
Inhibicin parcial
Salmonella typfhimurium
Shigella flexneri
Staphylococcus aureus
Candida albicans
Enterobacter/ Kiebsiella
Proteus
Colonias incoloras.
Pseudomonas
Bacterias gram-positivo
15
(gr/L)
Extracto de levadura
2.5
Triptena
10.0
Gelatina
30.0
Lactosa
2.0
D-Manitol
10.0
Cloruro de sodio
75.0
Fosfato dipotsico
5.0
Agar Bactereologico
15.0
PH final: 7.0
0.2
Preparacin
Suspender 149 g del medio en un litro de agua destilada. Reposar 5 minutos y
mezclar calentando a ebullicin durante 1 o 2 minutos. Esterilizar en autoclave
durante 15 minutos a 121C. Verter en placas y mezclar para dispersar el
precipitado.
Pigmento Fermentacin
de manitol
Hidrlisis
Prueba de la
de la
coagulasa
gelatina
S. aureus ATCC
25923
S. aureus ATCC
6538
S. epidermidis ATCC
14990
(gr/L)
200.0
250.0
10.0
5.0
2.0
2.5
15.0
Preparacin
Disolver 52 g de polvo en un litro de agua destilada. Calentar a ebullicin hasta su
disolucin total. Esterilizar en autoclave durante 15 minutos a 121C.
Extender la muestra tan pronto como sea posible despus de recibirla en el
laboratorio, mediante un asa de inoculacin estril para obtener colonias aisladas.
Para el aislamiento de hongos de muestras potencialmente contaminadas, se
debe inocular un medio selectivo junto con uno no selectivo. Incubar las placas a
25 30 C en posicin invertida con humedad aumentada.
Incubar las placas durante 24 48 para bacterias y Candida, y hasta un mximo
de 5 das para Trichophyton. Las bacterias y Candida deben incubarse a una
temperatura de 35 a 37 C, y Trichophyton, a 25 30 C.
Crecimiento
Aspergillus niger
Bueno
Neisseria meningitidis
Bueno
Streptococcus pyogenes
Bueno
Streptococcus pneumoniae
Bueno
AGAR LACTOSA
Fundamento
Es un medio rico en nutrientes y no contiene inhibidores del crecimiento
bacteriano. Permite recuperar clulas injuriadas, diluye sustancias txicas o
inhibitorias y favorece el desarrollo de Salmonella con respecto a otras bacterias.
El extracto de carne y la peptona son la fuente de carbono y nitrgeno mientras
que la lactosa es el hidrato de carbono fermentable. Por la fermentacin de la
lactosa se produce cido y gas (el cual se evidencia al utilizar las campanas
Durham).
En
19
Ingredientes
(gr/L)
Peptona
15
Extracto de carne
3
Extracto de levadura
3
Desoxicolato de sodio
1
Tiosulfato sdico
1
Lactosa
15
Cristal violeta
0.005
Azul de bromotimol
0.08
Agar
11
pH final: 7.4 0.2
Preparacin
Suspender 50 g del polvo en 1 litro de agua purificada. Reposar 5 minutos.
Calentar con agitacin frecuente y llevar a ebullicin 1 a 2 minutos hasta disolver
completamente. Distribuir en recipientes apropiados y esterilizar en autoclave a
121C durante 15 minutos.
Resultado
Inhibido
20
AGAR Mc CONKEY
Fundamento
En el medio de cultivo, las peptonas, aportan los nutrientes necesarios para el
desarrollo bacteriano, la lactosa es el hidrato de carbono fermentable, y la mezcla
de sales biliares y el cristal violeta son los agentes selectivos que inhiben el
desarrollo de gran parte de la flora Gram positiva. El agar es el agente
solidificante.
Por fermentacin de la lactosa, disminuye el pH alrededor de la colonia. Esto
produce un viraje del color del indicador de pH (rojo neutro), la absorcin en las
colonias, y la precipitacin de las sales biliares. Los microorganismos no
fermentadores de lactosa producen colonias incoloras.
Ingredientes
(gr/L)
1.5 g
17 g
Triptena 1.5
1.5 g
Lactosa 10.0
10 g
1.5
5g
0.03 g
0.001 g
Agar 13.5
13.5 g
Preparacin
Suspender 50 g del polvo en 1 litro de agua purificada. Reposar 5 minutos.
Calentar con agitacin frecuente y llevar a ebullicin 1 a 2 minutos hasta disolver
completamente. Distribuir en recipientes apropiados y esterilizar en autoclave a
121C durante 15 minutos. En superficie: inocular directamente la muestra por
estria. En profundidad: inocular una alcuota de la muestra directa o de su
21
Crecimiento y color
Escherichia coli
Proteus mirabilis
Salmonella Typhimurium
Salmonella Abony
Shigella flexneri
Colonias incoloras.
Enterococcus faecalis
Staphylococcus aureus
Sin inocular
Ingredientes
(gr/L)
Peptona de Casena
5 gr
Extracto de levadura
2.5 gr
Dextrosa
Agar bacteriolgico
15
7.0 0.2
Preparacin
Rehidratar 23.5 g del medio en un litro de agua destilada. Reposar 10 a 15
minutos. Calentar agitando frecuentemente hasta el punto de ebullicin durante 1
minuto para disolverlo por completo. Esterilizar en autoclave a 121C (15 lbs de
presin) durante 15 minutos. Enfriar aproximadamente a 45C antes de usarlo.
Crecimiento
Escherichia coli
Staphylococcus aureus
Enterococcus faecalis
Lactobacillis casei
Salmonella typhimurium
23
AGAR NUTRITIVO
Fundamento
Medio de cultivo nutritivo no selectivo, en el cual la pluripeptona y el extracto de
carne constituyen la fuente de carbono, nitrgeno y aportan nutrientes para el
desarrollo bacteriano. El agregado de cloruro de sodio mantiene el balance
osmtico y el agar es el agente solidificante. Puede ser suplementado con sangre
ovina desfibrinada estril para favorecer el crecimiento de microorganismos
exigentes en sus requerimientos nutricionales y permite una clara visualizacin de
las reacciones de hemlisis.
Ingredientes
(gr/l)
Extracto de carne.
3 gr
Peptona de geletina.
5 gr
Agar.
15 gr
Desarrollo
bueno
bueno
bueno
bueno
bueno
6301
Hemlisis alfa: lisis parcial de los glbulos rojos. Se observa un halo de color
verdoso alrededor de la colonia en estudio. Es debido a la oxidacin de la
hemoglobina a metahemoglobina (compuesto de color verdoso) por el perxido de
hidrgeno generado por los microorganismos.
Hemlisis beta: lisis total de los glbulos rojos. Se observa un halo claro, brillante
alrededor de la colonia en estudio.
Hemlisis gamma: ausencia de lisis de los glbulos rojos. El medio de cultivo no
presenta modificaciones de color y aspecto alrededor de la colonia en estudio.
25
(gr/L)
Pluripeptona
5g
Extracto de carne
5g
Lactosa
10 g
8.5 g
Citrato de sodio
8.5 g
Tiosulfato de sodio
8.5 g
Citrato frrico
1g
Verde brillante
0.00033 g
Rojo neutro
0.025 g
Agar
13.5 g
Preparacin
Suspender 60 g del polvo en un litro de agua purificada. Reposar 5 minutos y
mezclar hasta homogeneizar. Calentar con agitacin frecuente y llevar a ebullicin
durante un minuto para disolucin total. NO esterilizar en autoclave.
Enfriar y distribuir en placas de Petri estriles.
26
Microorganismos
Produccin de
Crecimiento
Color de la colonia
Satisfactorio
Incolora
Satisfactorio
Incolora
Satisfactorio
Incolora
Satisfactorio
Incolora
Satisfactorio
Incolora
Rojo-rosada
Incolora
Salmonella enteritidis
Salmonella
typhimurium
Shigella flexneri
Shigella sonnei
Proteus mirabilis
Escherichia coli
Enterococcus faecalis
Inhibicin parcial
o total
Inhibicin parcial
o total
27
(gr/L)
Agar
20 gr
Dextrosa
5 gr
Extracto de carne
5gr
Fosfato disdico
4 gr
8 gr
Peptona de carne
5 gr
Peptona de casena
5 gr
Sulfato ferroso
03 gr
Verde brillante
0.025 gr
7.6 0.2 25
Preparacin
Rehidratar 52 g del medio en un litro de agua destilada. Reposar 10 a 15 minutos.
Calentar agitando frecuentemente hasta el punto de ebullicin durante 1 minuto
28
Crecimiento y color
Salmonella typhi
Salmonella typhimurium
Escherichia coli
Proteus mirabilis
Staphylococcus aureus
Crecimiento inhibido.
Salmonella enteriditis
Shigella flexneri
Enterococcus faecalis
Crecimiento nulo
29
(gr/L)
Agar
14
Cloruro de sodio
10
Azul de bromotimol
Colato de sodio
Azul de timol
0.04
3
0.04
Extracto de levadura
Bilis de buey
Polipeptona
10
30
Citrato de hierro
Sacarosa
20
Citrato de sodio
10
Tiosulfato de sodio
10
pH 8.6 0.2
Preparacin
Rehidratar 88 g del medio en un litro de agua destilada. Reposar 10 a 15
minutos. Calentar agitando frecuentemente hasta el punto de ebullicin durante
1 minuto para disolverlo por completo. NO ESTERILIZAR EN AUTOCLAVE.
Enfriar aproximadamente a 45C. Vaciar en cajas de Petri estriles. Conservar
en refrigeracin de 2 a 8C.
Crecimiento y color
Vibrio parahaemolitycus
Vibrio cholerae
Escherichia coli
Proteus mirabilis
31
Ingredientes
(gr/L)
Extracto de levadura
3gr
L-lisina
5gr
Lactosa
7.5 gr
Sacarosa
7.5 gr
Xilosa
3.5 gr
Desoxicolato sdico
2.5 gr
Cloruro sdico
5 gr
Tiosulfato sdico
6.8 gr
0.8 gr
Rojo fenol
0.08 gr
Agar
13.5 gr
7.4 0.2
Preparacin
Homogenice el polvo contenido en el frasco.
Aada 55 gramos de medio deshidratado a un litro de agua destilada estril.
Caliente suavemente, agitando con frecuencia hasta que hierva. Evitar el
32
MICROORGANISMOS
Escherichia coli
Enterobacter
azcares y LDC(-)
Klebsiella
Citrobacter
Proteus
Serratia
Shigella
Providencia
Salmonella H2S(-)
Salmonella
Produccin de H2S
Edwardsiella
33
AGAR BAIRD-PARKER
Fundamento
Es un medio selectivo utilizado para el aislamiento de Staphylococcus Aureus
coagulasa positivo.
piruvato estimulan el
Ingredientes
(gr/L)
Peptona de casena
10 g
Extracto de carne
5g
Extracto de levadura
1g
Cloruro de litio
5g
Glicina
12 g
Piruvato de sodio
10 g
Agar 17 g
17 g
Preparacin
Suspender 60 g del polvo en 940 ml de agua purificada. Dejar en reposo 5 a 10
minutos. Calentar agitando frecuentemente y hervir durante 1 minuto, hasta
disolucin total. Distribuir en recipientes apropiados y esterilizar en autoclave a
121C durante 15 minutos. Enfriar a 45-50C y agregar 50 ml de emulsin de
yema de huevo y 10 ml de la solucin de telurito (Emulsin Yema de Huevo
con Telurito). Homogeneizar y distribuir en placas de Petri estriles.
Crecimient
Actividad
Reducci
Caracterstica
Lecitinsic
n de
s de las
34
Telurito
Colonias
de Potasio
Colonias
negras con
borde incoloro,
Staphylococcus
aureus
convexas,
Satisfactorio
Positiva
Positiva
rodeadas de
una zona
opaca, con una
zona clara
externa.
Colonias
negras con
borde incoloro,
Staphylococcus
aureus
convexas,
Satisfactorio
Positiva
Positiva
rodeadas de
una zona
opaca, con una
zona clara
externa.
Colonias
negras, de
tamao
Staphylococcus
Regular-
epidermidis
Satisfactorio
irregular. Zona
Negativa
Positiva
opaca
alrededor
de la colonia
(no hay zona
clara).
Total o
Escherichia coli
parcialmente
Negativa
Negativa
----
Negativa
Positiva
Colonias
inhibido
Proteus mirabilis
Total o
35
parcialmente
marrones sin
inhibido
zona clara u
opaca
alrededor.
CALDO TETRATIONATO
Fundamento
El medio de cultivo contiene peptona que provee los nutrientes necesarios para
el desarrollo bacteriano, y carbonato de calcio que neutraliza y adsorbe
metabolitos txicos. La selectividad est dada por la presencia de sales biliares
y tetrationato (compuesto generado en el medio de cultivo al reaccionar el
tiosulfato de sodio con la solucin iodo-iodurada) que inhiben el desarrollo de
microorganismos Gram positivos y algunas enterobacterias. Salmonella spp.
contiene la enzima tetrationato reductasa y puede crecer satisfactoriamente en
el medio de cultivo debido a que no la afecta la toxicidad del tetrationato.
Para evitar la proliferacin de especies de Proteus spp., se recomienda agregar
40 mg/l de Novobiocina previo al agregado de la solucin iodo iodurada.
Ingredientes
Peptona
Sales biliares
Carbonato de calcio
(gr/L)
5.0
1.0
10.0
36
Tiosulfato de sodio
30.0
pH final: 8.4 0.2
Solucin iodo iodurada
Iodo
6.0
Ioduro de potasio
5.0
Agua
20.0
Preparacin
Suspender 46 g en 1 l de agua destilada; calentar y agitar hasta ebullicin. NO
ESTERILIZAR EN AUTOCLAVE. Si se va a utilizar el mismo da, aadir
aspticamente 20 ml de solucin yodo-yodurada por litro de medio, o
proporcionalmente a la cantidad usada. Eventualmente puede aadirse 10 ml/l
de una solucin al 0,1% de Verde Brillante, as como Novobiocina a razn de
0,04 g/l, ambos esterilizados por filtracin. Al distribuir el Caldo repartir
homogneamente el precipitado existente. No recalentar el medio.
Sembrar el medio con el inculo e incubar entre 352C de 18 a 24 horas.
Pasado este tiempo sembrar en medios selectivos.
Microorganismo
Crecimiento y color
Salmonella typhimurium
Satisfactorio, incoloras.
Salmonella enteritidis
Satisfactorio, incoloras.
Salmonella typhi
Satisfactorio, incoloras
Escherichia coli
37
Ingredientes
(gr/L)
Triptena
20.0
Lactosa
5.0
Sales biliares N 3
1.9
Fosfato dipotsico
4.0
Fosfato monopotsico
1.5
Cloruro de sodio
5.0
pH final: 6.9 0.2
Preparacin
Suspender 37,4 g del medio en un litro de agua destilada. Calentar hasta su
total disolucin. Distribuir en tubos de ensayo que contengan campanitas de
Durham. Esterilizar en autoclave durante 15 minutos a 121C.
Crecimiento
Bueno a
excelente
Bueno a
excelente
Bueno a
excelente
Inhibido
Produccin de gas
+
+
Inhibido
38
de
cultivo
deshidratado:
color
beige
claro,
homogneo,
libre
deslizamiento.
Medio de cultivo preparado: color mbar claro.
BIBLIOGRAFAS
http://britanialab.com.ar/esp/productos/b02/cerebcorinfusagar.htm
http://britanialab.com.ar/esp/productos/b02/estafilococomedio110.htm
http://ssfe.itorizaba.edu.mx/ntec13/webext/secure/hoja/GUSTAVO%20A%20C
OMPLETO/MSDS%20AGAR%20ESTANDAR%20GA.pdf
http://www.bd.com/resource.aspx?IDX=22894
http://www.bd.com/resource.aspx?IDX=8755
http://www.bd.com/resource.aspx?IDX=8771
http://www.britanialab.com/productos/234_inserto_es.pdf
http://www.britanialab.com/productos/288_hoja_tecnica_es.pdf
http://www.britanialab.com/productos/302_hoja_tecnica_es.pdf
http://www.britanialab.com/productos/337_hoja_tecnica_es.pdf
http://www.britanialab.com/productos/343_hoja_tecnica_es.pdf
http://www.britanialab.com/productos/346_hoja_tecnica_es.pdf
http://www.britanialab.com/productos/351_hoja_tecnica_es.pdf
http://www.britanialab.com/productos/367_hoja_tecnica_es.pdf
http://www.britanialab.com/productos/379_hoja_tecnica_es.pdf
http://www.condalab.com/uploads/media/1011__AGAR_BISMUTO_SULFITO_
REv_0_Abril_2010_01.pdf
http://www.electronicsystems.com.mx/pdf/AGAR%20DEXTROSA%20Y%20PAPA.pdf
39
http://www.lablinsan.cl/imagenes_ficha_3/fichasWeb3_6.pdf
http://www.probiotek.com/producto/agar-de-dextrosa-y-papa/
http://www.probiotek.com/wp-content/uploads/2014/01/1059-E_AGARDEXTROSA-Y-PAPA.pdf
http://www.ucv.ve/fileadmin/user_upload/facultad_farmacia/catedraMicro/desoxi
colatocitrato.pdf
http://www.ucv.ve/fileadmin/user_upload/facultad_farmacia/catedraMicro/10_Ag
ar_XLD.pdf
http://www.ucv.ve/fileadmin/user_upload/facultad_farmacia/catedraMicro/10_Ag
arSabouraudDextrosa.pdf
http://www.ucv.ve/fileadmin/user_upload/facultad_farmacia/catedraMicro/10_Ag
arEndo.pdf
http://www.ucv.ve/fileadmin/user_upload/facultad_farmacia/catedraMicro/10_Ag
ar_XLD.pdf
Microbiologa General, Tema 2.- Cultivo de microorganismos.
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