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UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA

ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERIA PESQUERA – FILIAL ILO


DEPARTAMENTO ACADEMICO INGENIERIA PESQUERA
ASIGNATURA
Semestre
BROMATOLOGIA DE LOS RECURSOS HIDROBIOLOGICOS
2023 II

CARATULA

INFORME DE PRACTICA NRO 02


GLUCÓLISIS EN EXTRACTO DE HÍGADO Y MÚSCULO.

DOCENTE RESPONSABLE: Sucy Alicia Caballero Apaza


Fecha de ejecución:
Fecha de entrega:

1. RESUMEN
Las células de los seres vivos necesitan llevar a cabo reacciones para obtener
energía. Dicha energía la obtienen a partir de la ruptura de moléculas de glucosa que
ingresa a nuestro cuerpo cuando tenemos una dieta rica en carbohidratos, nos
referimos a la ruta metabólica de la glucólisis. Esta práctica presenta las
reacciones de diferenciación metabólica que pueden observarse en diferentes
tejidos animales donde previamente se hizo la limpieza y preparado de estos,
dividiéndolos en ocho tubos de ensayo y sometiéndolos a reactivos como
almidón y cloruro de magnesio. Posteriormente, se colocaron en baño maría a
distintas temperaturas y se centrifugaron para obtener el sobrenadante de la solución.
Tras su titulación con hidróxido de sodio y azul de timol como indicador, se
determinó la acidez libre referente al ácido láctico sobre 100 gramos de peso del
tejido. El tejido que presentó mayor acidez libre entre todos los equipos fue el
músculo.

2. INTRODUCCION
METABOLISMO
El metabolismo es un grupo de cambios químicos que ocurren en las células y tejidos
de los seres vivos y están asociados con la conversión de nutrientes en energía y la
formación de moléculas necesarias para mantener la vida. El metabolismo se divide en
dos procesos relacionados: catabolismo y anabolismo.
El catabolismo es el proceso de descomponer moléculas complejas en otras más
simples, liberando energía que puede usarse para formar células. Un ejemplo de
catabolismo es la glucólisis, en la que la glucosa se descompone en moléculas más
pequeñas para producir energía.
Por otro lado, el anabolismo es el proceso de hacer moléculas complejas a partir de
simples, y su uso requiere energía. Un ejemplo de anabolismo es la síntesis de
proteínas, en la que los aminoácidos se combinan para formar una proteína compleja.
Ambos procesos están interrelacionados y son necesarios para el buen funcionamiento
del cuerpo.
El metabolismo está influenciado por varios factores como la edad, el sexo, el ejercicio,
la dieta y la presencia de enfermedades. (Hirsch, 2019).

GLUCOLISIS EN EXTRACTO DE HIGADO Y MUSCULO


La glucólisis es un proceso metabólico que ocurre en muchas células del cuerpo,
incluyendo el hígado y las células musculares. La glucólisis es el proceso de convertir la
glucosa en la energía necesaria para el metabolismo celular.
Los procesos de glucólisis son similares a los del tejido hepático y muscular y siguen los
mismos pasos generales. La glucosa se convierte en piruvato a través de una serie de
reacciones enzimáticas, que incluyen fosforilación, isomerización y oxidación. En
ambas células, el piruvato producido puede seguir diferentes rutas metabólicas
dependiendo de las necesidades energéticas y metabólicas de la célula. En el hígado, el
piruvato producido a partir de la glucólisis se puede utilizar para generar energía a
través del ciclo de Krebs y la cadena de transporte de electrones. También se puede
convertir en glucógeno para almacenarlo en el hígado y los músculos. Por otro lado, en
los músculos, el piruvato producido por la glucólisis se convierte principalmente en
lactato, que se libera de la sangre y se transporta al hígado para su posterior
conversión en glucosa. Esto se debe al hecho de que los músculos pueden producir
energía rápidamente a través de la producción de lactato durante una actividad
intensa.
En el hígado, la glucólisis es un proceso clave que produce glucosa a partir del
glucógeno almacenado en el hígado. Cuando los niveles de azúcar en la sangre bajan,
el hígado convierte el glucógeno en glucosa y lo libera a la sangre. La glucosa también
se puede obtener de otros sustratos como los aminoácidos y los ácidos grasos.
En el músculo, la glucólisis es un proceso clave que produce energía durante la
contracción muscular. Los músculos utilizan la glucosa almacenada en sus células para
producir ATP (trifosfato de adenosina), la fuente de energía que necesitan para
funcionar. Las necesidades energéticas aumentan durante el ejercicio y la glucólisis se
acelera para suministrar el ATP adecuado. (Santiago, 2022).

3. OBJETIVO
Confirmar las diferencias metabólicas entre hígado y músculo, para lo cual, extractos
acuosos de hígado y músculo, que tienen las enzimas respectivas, trabajarán en un
sustrato de almidón enriquecido con iones fosfato y magnesio.

Objetivos General
El objetivo de esta práctica es confirmar las diferencias metabólicas entre el hígado
y el músculo en un sustrato de algodón enriquecido con iones fosfato y magnesio, a
partir de muestras de extractos del hígado y músculo de un modelo animal.

4. HIPOTESIS

HIPOTESIS GENERAL
La hipótesis de esta práctica es que, mediante cálculos y el uso de tejidos animales,
podremos determinar la cinética enzimática del músculo y el hígado y posteriormente
su nivel de acidez libre.

5. BASES TEORICAS
La glucólisis es una serie de reacciones que extraen energía de la glucosa al romperla
en dos moléculas de tres carbonos llamadas piruvato. La glucólisis es una vía
metabólica ancestral —o sea, que su evolución ocurrió hace mucho tiempo, y se
encuentra en la gran mayoría de los organismos vivos hoy en día.
En los organismos que realizan respiración celular, la glucólisis es la primera etapa de
este proceso. Sin embargo, la glucólisis no requiere de oxígeno, por lo que muchos
organismos anaerobios, organismos que no utilizan oxígeno, también tienen esta vía.

6. METODOLOGIA EXPERIMENTAL
a) METODO: AOAC e ISO

b) EQUIPOS Y MATERIALES

- Matraces Erlenmeyer de 250 mL


- Baño de incubación a 30
- °C Baño de agua hirviendo
- Probetas de 100 mL
- Tubos de centrífuga
- Centrífuga
- Pipetas graduadas de 10, 5 y 1 mL
- Bureta y pinzas para bureta
- Vasos de precipitado de 100 mL
- Embudos de filtración rápida Soporte universal
- Gradilla
- Tubos de ensayo
- Mechero Licuadora
- Gasa
- Recipientes para residuos químicos y biológicos

c) REACTIVOS
- Cloruro de magnesio 0.001 M
- Solución de almidón-fosfato. Prepara una solución de almidón al 0.5 % en solución
amortiguadora de fosfato 0.1 M de pH 7.5. Esta última, se prepara con 1.3 g de
KH2PO4 y 7.05 g de Na2HPO4 aforardo a 100 mL. Ajustar el pH a 7.5 con HCl o
NaOH.
- NaOH 0.02 N
- Solución de azul de timol al 0.04 % en alcohol
- Agua destilada

d) PROCEDIMIENTO METODOLOGICO
A. Preparar de los extractos acuosos del hígado y músculo.
- Pesar el músculo (aprox. 250 g) cortarlo en trocitos y licuarlo con un volumen igual al
de su peso de agua destilada fría y filtrar a través de gasa.
- Llevar el filtrado a un volumen conocido con agua helada. Este filtrado es el extracto
de músculo. S
- Pesar y cortar el hígado (aprox. 25-30 g) en trocitos, homogeneizar con tres
volúmenes de su peso de agua destilada helada en la licuadora. Filtrar a través de gasa
y llevar el filtrado a un volumen que deberá guardarse congelado si se va a usar al día
siguiente.

e) Preparación de reactivos
- Preparar 2 matraces Erlenmeyer de 250 mL donde se llevará a cabo la reacción,
con 10 mL de la solución de almidón fosfato y 0.05 mL de cloruro de magnesio.
Rotular a uno “hígado” y a otro “músculo”.
- Tener listos 25 mL de extracto de músculo y 25 mL de hígado a temperatura
ambiente.
7. DATOS
(POR CADA ETAPA)
8. REACCIONES QUE SE GENERAN EN CADA ETAPA
9. RESULTADO
Realizar tablas con los resultados obtenidos: Acidez libre

Según lo indicado en la guía de practicas.

10. ANALISIS Y DISCUSIÓN


La mezcla de almidón fosfato y cloruro de calcio con la muestra de hígado se utiliza
para evaluar la actividad de la enzima glucógeno fosforilasa y su capacidad para
degradar el glucógeno en el hígado.
Luego calentamos la muestra de higado antes de calcular la glucólisis esto es necesario
para aumentar la velocidad de las reacciones enzimáticas y obtener mediciones más
precisas de este proceso metabólico.
La centrifugación de la muestra de hígado se realiza para separar los componentes
celulares y subcelulares de la muestra líquida, permitiendo la obtención de fracciones
específicas para análisis posteriores y estudios relacionados con la actividad y
composición celular.
La mezcla del sobrenadante del higado con NaOH y azul de timol se realiza para medir
el pH de la muestra y obtener información sobre su acidez o alcalinidad, lo cual puede
ser relevante para evaluar la función hepática y la actividad enzimática.
11. DIGRAMA DE FLUJO

12. CONCLUSION
En esta práctica utilizando un hígado y muslos de pescado se confirmaron las
diferencias metabólicas que se presentan en estas dos zonas, y para poder confirmar
los resultados se utilizaron diferentes soluciones (Nitroprusiato de sodio, acetaldehído,
2,4-Dinitrofenilhidrazina) presenciando un cambio de color en el caso de la formación
de piruvato.
En este laboratorio, se realizó un análisis de la actividad de la glucólisis en un extracto
de hígado. El objetivo principal fue investigar la velocidad de la glucólisis y evaluar la
actividad enzimática en el tejido hepático.
A través de la titulación de la glucólisis, se midió la formación de piruvato como un
indicador de la actividad de la vía metabólica. Los resultados mostraron una
acumulación significativa de piruvato a lo largo del tiempo, lo cual indica que la
glucólisis estaba ocurriendo en el extracto de hígado.
La titulación de la glucólisis en el extracto de hígado ha proporcionado información
valiosa sobre la actividad metabólica en el tejido hepático. Estos resultados respaldan
la idea de que el hígado desempeña un papel crucial en la regulación del metabolismo
de la glucosa y la generación de energía.
Es importante destacar que, aunque estos resultados son alentadores y sugieren un
funcionamiento normal de la glucólisis en el higado, es necesario realizar análisis más
detallados y comparativos para comprender completamente la función metabólica del
tejido hepático y cómo podría verse afectada en diferentes condiciones
fisiopatológicas.
En central, este laboratorio ha brindado una visión inicial de la actividad de la glucólisis
en el extracto de hígado y ha sentado las bases para futuras investigaciones y estudios
relacionados con el metabolismo hepático y la función enzimática con la vía glucolítica.

13. RECOMENDACIÓN

14. CUESTIONARIO:
1. ¿Cuál es el principal producto de la glucólisis en hígado?
El principal producto de la glucólisis tanto en el higado como en el músculo es el
piruvato.
Sin embargo, el destino metabólico del piruvato pucde variar en estos tejidos, con el
higado involucrado en la gluconeogénesis y la regulación del metabolismo de la
glucosa y el músculo involucrado en la producción de energía acróbica o anacróbica
según las condiciones metabólicas y la disponibilidad de oxígeno.

2. ¿Cuál es el principal producto de la glucólisis en músculo?


Es el Lactato.

3. ¿A qué se refieren los términos de acidez libre y reductores totales?


La acidez libre es la concentración de H+ que se encuentran disociados en una
disolución de cualquier ácido HX sea este fuerte o débil. Los azúcares reductores son
aquellos azúcares que poseen su grupo carbonilo intacto, y que a través del mismo
pueden reaccionar como reductores con otras moléculas. Todos los monosacáridos
son azúcares reductores, ya que al menos tienen un -OH.

15. BIBLIOGRAFIA
Nelson, D. L., Cox, M. M. (2017). Lehninger Principies of Biochemistry. W.H. Frocman
and Company.
Borg. J. M., Tymoczko, J. L., Gatto, G. J. (2018). Brochomistry. W.H. Frocman and
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Devln, T. M. (2010). Textbook of Biochemistry: With Clinical Corrclations. Wilcy-
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https://es.wikipedia.org/wiki/Gluco SE
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practica-laboratono-bioqumica 18440732
https://www.studocu.com/es-mx/document/universidad-veracruzana/bioquimica-
metabolica/p3eq7vi-reporte-de-practica-laboratorio-bioqumica/18440732
https://es.khanacademy.org/science/biology/cellular-respiration-and-fermentation/
glycolysis/a/glycolysis

16. ANEXOS

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