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Campus IV
LABORATORIO DE BIOQUÍMICA
PRACTICA NO. 4
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ÍNDICE
INTRODUCCIÓN---------------------------------------------------------------3
OBJETIVO----------------------------------------------------------------------4
MATERIAL Y REACTIVOS-----------------------------------------------------5
CONSIDERACIONES TEÓRICAS---------------------------------------------6
PROCEDIMIENTO-------------------------------------------------------------16
OBSERVACIONES-------------------------------------------------------------18
DISCUSIONES----------------------------------------------------------------21
CONCLUSIONES--------------------------------------------------------------22
BIBLIOGRAFÍA---------------------------------------------------------------23
CUESTIONARIO--------------------------------------------------------------24
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INTRODUCCIÓN
El glucógeno es el principal polisacárido de reserva de las células animales al igual que
la amilipectina es un polisacárido ramificado de la D-glucosa con enlaces alfa-1,4 y
alfa-1,6.
El glucógeno es abundante en el hígado, puede alcanzar hasta el 7% del peso húmedo,
se le haya en musculo esquelético; en las células hepáticas el glucógeno se encuentra
almacenado en granulos grandes contiene enzimas responsables de su síntesis y
degradación.
Puede hidrolizarse por la acción de alfa-amilasa se encuentra en la saliva y jugo
pancrático, rompen los enlaces alfa-1,4 en las ramas exteriores del glucógeno para dar
glucosa, maltosa y un núcleo resistente llamado dextrina limite.
GLUCOGENESIS
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OBJETIVO
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MATERIALES
• Balanza granataria
• Tubos de centrifuga
• Centrifuga
REACTIVOS (FRIOS)
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• Cloruro de sodio al 5% y solido
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CONSIDERACIONES TEÓRICAS
Hígado
El hígado es un órgano o víscera del cuerpo humano y, a la vez, la glándula más
voluminosa de la anatomía y una de las más importantes en cuanto a la actividad
metabólica del organismo. Desempeña funciones únicas y vitales como la síntesis de
proteínas plasmáticas, función desintoxicarte, almacén de vitaminas, glucógeno, etc.
Además, es el responsable de eliminar de la sangre las sustancias que pueden resultar
nocivas para el organismo, transformándolas en otras innocuas.
Glucógeno muscular
El glucógeno muscular es la energía que usamos en la mayoría de los entrenamientos o
ejercicios físicos. Es el que aporta energía en ejercicios de media y alta intensidad. En
los ejercicios de máxima intensidad de menos de quince segundos de duración la
energía proviene directamente del ATP.
Un deportista entrenado puede tener suficiente glucógeno en los músculos para entrenar
entre el 80/110% de su máximo consumo de oxigeno durante casi dos horas, incluso
más. Si el entrenamiento continua por encima de las dos horas y no hay ingesta de
glucosa y/o hidratos de carbono, el organismo empezara a utilizar las grasas
acumuladas, lo que reducida el nivel de ejercicio hasta alrededor del 50% del máximo
consumo de oxigeno del deportista.
Glucógeno
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El glucógeno es un polisacárido de reserva energética de los animales, formado por
cadenas ramificadas de glucosa; es soluble en agua, en la que forma dispersiones
coloidales. Abunda en el hígado y en el músculo.
Su estructura puede parecerse a la de amilo pectina del almidón, aunque mucho más
ramificada que ésta. Está formada por varias cadenas que contienen de 12 a 18 unidades
de α-glucosas formadas por enlaces glucosídicos 1,4; uno de los extremos de esta
cadena se une a la siguiente cadena mediante un enlace α-1,6-glucosídico, tal y como
sucede en la amilopectina.
Una sola molécula de glucógeno puede contener más de 120.000 moléculas de glucosa.
La importancia de que el glucógeno sea una molécula tan ramificada es debido a que:
• La ramificación aumenta su solubilidad.
• La ramificación permite la abundancia de residuos de glucosa no reductores que
van a ser los lugares de unión de las enzimas glucógeno fosforilasa y glucógeno
sintetasa, es decir, las ramificaciones facilitan tanto la velocidad de síntesis
como la de degradación del glucógeno.
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En el hígado la conversión de glucosa almacenada en forma de glucógeno a glucosa
libre en sangre, está regulada por la hormona glucagón y adrenalina. El glucógeno
hepático es la principal fuente de glucosa sanguínea, sobre todo entre comidas. El
glucógeno contenido en los músculos es para abastecer de energía el proceso de
contracción muscular.
Molécula de glucosa
Los carbohidratos son moléculas esenciales para la vida debido a que estos son las
principales moléculas para el aporte de energía, esto gracias a su fácil metabolismo.
Glicólisis
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En este proceso vemos como en un primer paso la glucosa se quina (se le agrega un
enlace éster fosfato) en el carbono 6, mediante este proceso se logra la activación de la
glucosa, debido a que la glucosa en una molécula muy apreciada para el organismo, este
no puede darse el lujo de perderla tan fácilmente ya que la glucosa es muy soluble y en
un medio muy acuoso como el podría perderse, además la glucosa es una molécula
muy estable y llevando a cabo este proceso se logra desequilibrar la molécula para
posteriores transformaciones, este proceso se logra gracias a la enzima hexoquinasa,
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debido a que esta enzima quina todas las hexosas y en este caso en especial la glucosa,
la llamaremos glucoquinasa, entonces pues la glucoquinasa es una enzima reguladora es
decir acepta como único sustrato a la glucosa y no a la glucosa 6 fosfato, esto produce
que esta enzima se ha considerado como la "llave" de entrada de glucosa a este proceso.
La fosfo glicerato quinasa cataliza la transferencia del grupo fosforilo del 1,3 bisfosfo
glicerato al ADP a partir del acil fosfato, los productos son ATP y 3-fosfoglicerato. El
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siguiente paso es catalizado por la fosfoglicerato mutasa, una mutasa es aquella enzima
que realiza un cambio intramolecular de un grupo químico en este caso un fosforilo.
En la siguiente reacción se forma un enol (grupo OH junto a un carbono sp2, con doble
enlace,-C=C-OH) por la deshidratación del 2-fosfoglicerato. La enolasas cataliza la
formación del fosfoenol piruvato, el grupo que se forma (enolfosfato), tiene un alto
potencial energético
Glucogénesis
La glucogénesis, o también conocida por glucogenogenesis es la ruta anabólica por la
que tiene lugar la síntesis de glucógeno (también llamado glicógeno) a partir de un
precursor más simple, la glucosa-6-fosfato. Se lleva a cabo principalmente en el hígado,
y en menor medida en el músculo.
Síntesis
En primer lugar, la glucosa es transformada en glucosa-6-fosfato, gastando una
molécula de ATP.
Glucosa + ATP → glucosa-6-P + ADP
A continuación se transforma la glucosa-6-fosfato en glucosa-1-fosfato con gasto de un
ATP.
Glucosa-6-P ←→ glucosa-1-P
Se transforma la glucosa-1-fosfato en UDP-glucosa, con el gasto de un UTP.
Glucosa-1-P + UTP → UDP-glucosa + PPi
La glucógeno sintetasa va uniendo UDP-glucosa para formar el glucógeno.
(glucosa)n + UDP-glucosa → (glucosa)n+1 + UDP
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Regulación
Enzimas de la glucogenolisis
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En la glucogenolisis participan dos enzimas:
Esta reacción es muy ventajosa para la célula, en comparación con una de hidrólisis.
Regulación de la glucogénesis y la
glucogenolisis
La regulación del metabolismo del glucógeno se ejecuta a través de las dos enzimas; la
glucógeno sintetasa que participa en su síntesis, y la glucógeno fosforilasa en la
degradación.
La glucógeno sintetasa tiene dos formas: glucógeno sintetasa I (independiente de la
presencia de glucosa 6 fosfatos para su acción), que no está fosforilada y es activa, y la
glucógeno sintetasa D (dependiente de la presencia de glucosa 6 fosfatos para su
acción), que está fosforilada y es menos activa.
La otra enzima, la glucógeno fosforilasa, también tiene dos formas: glucógeno
fosforilasa b, menos activa, que no está fosforilada y la glucógeno fosforilasa a, activa,
que está fosforilada.
Las hormonas adrenalina y glucagón activan las proteínas quinasas que fosforilan
ambas enzimas, provocando activación de la glucógeno fosforilasa, estimulando la
degradación del glucógeno; mientras que la glucógeno sintetasa disminuye su actividad,
lo que inhibe la síntesis de glucógeno.
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Gluconeogénesis
En realidad este proceso se hace de muchas formas posibles, aquí trataremos algunas de
ellas:
Desde Glicerol:
el proceso empieza cuando el glicerol (que viene desde el proceso de lipidolisis) se
fosforila para obtener así el glicerol 3 fosfato ,este proceso es catalizado por la enzima
Glicerol Quinasa, el glicerol 3 fosfato se convierte en dihidroxi acetona fosfato
(producto que también participa en la ruta anterior), este proceso es catalizado por la
glicerol 3 fosfato óxido-reductasa, la dihidroxi acetona fosfato se convierte en fructosa
1,6 bisfofato, esta pasa a glucosa 6 fosfato por otra enzima (recordemos que este
proceso es regulado por lo tanto tendría que regresar por una enzima más especifica
para este sustrato),la glucosa 6 fosfato se convierte en Glucosa por medio de la Glucosa
6 Fosfatasa.
Desde Láctico:
El desplazamiento de las moléculas de lactato y piruvato (en condiciones de
requerimiento de energía) esta hacia piruvato esto es realizado por la enzima lactato
dehidrogenasa, desde pirúvico es casi imposible detener el proceso y este se carboxila
(mediante la piruvato carboxilasa) para poder entrar a la mitocondria como oxal acetato.
El oxal acetato pasa a Malato mediante la malato deshidrogenasa de tipo A,
descargando su protones sobre el NAD+, el malato vuelve a Oxal acetato pero Fuera de
La mitocondria (debido a lo explicado anteriormente, de que el malato no es permeable
en mitocondria), mediante la malato deshidrogenasa tipo b, este pasa a Fosfo enol
piruvato mediante la Fosfo enol Piruvato carboxi quinasa, para empezar nuevamente el
proceso de Gluconeogenesis.
Estas tres formas de producción de nueva Glucosa son las formas más básicas e
importantes, en la producción de Glucosa no existe ningún paso que la célula no
controle, esto debido a que la glucosa es una molécula muy preciada es por eso que si
esta molécula no es necesitada inmediatamente se almacena bajo la forma de
Glucógeno. El glucógeno como vemos en gráfico número 3, es altamente metabolizado.
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PROCEDIMIENTO
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OBSERVACIONES
• Se lavo el hígado de pollo al igual que el de res, se peso y se corto en
pedazos pequeños para poder triturarlo.
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• para después lo pusimos en agua fría
RESULTADOS
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• Los dos volúmenes de etanol al 95% que pusimos fue de 60 ml ya que
tuvimos 30 ml de sobrenadante. Vaso de precipitado con sobrenadante y
60 ml de etanol al 95%
DISCUSIONES
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Los resultados arrojaron que para trabajar con el hígado de res este
debe ser fresco, ya que con el que trabajamos en la práctica era de un
día antes; por tal motivo la prueba que se realizo con el lugol dio
negativa.
Esto lo relacionamos con el hígado de pollo por que este si dio positiva
ya que fue fresco.
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CONCLUSIONES
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BIBLIOGRAFÍA
• http://es.wikipedia.org/wiki/Metabolismo_de_carbohidratos
• http://es.wikipedia.org/wiki/Glucógeno
• http://www.todonatacion.com/ciencias-del-deporte/glucogeno.php
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CUESTIONARIO
1.- ¿Cuáles son los órganos encargados de conservar las concentraciones
constantes de glucosa y glucógeno?
4.- ¿Por qué es importante que el animal al que se le va a extraer el hígado en ese
momento este vivo?
5.- ¿en qué ocasiones las concentraciones de glucógeno hepático son elevadas sin que
haya daño hepático?
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7.- ¿Cuál es la fuente más importante de glucosa endógena?
8.- ¿en cuales tejidos se realiza la vía de la pentosa fosfato y para que se
utiliza esta vía?
La vía completa ocurre solo en los tejidos con necesidad del NADPH destinado
a la síntesis reductiva
Ejemplo: lipogenesis ---- tejido adiposo
Hígado---6%
Musculo—1%
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