Protocolo

Hemostasia
Interpretación
INR sobre el rango terapéutico → Riesgo de hemorragia
INR bajo el rango terapéutico → Riesgo de eventos trombóticos

Referencia
- Hasta 38 seg (Ácido Elágico)
- Hasta 40 seg (Partículas sílicas)

(Neph) 1. Temperar las cubetas y reactivos

en el equipo. Seguimiento de paciente
2. Añadir 50 uL de plasma en con heparina.
INR: TP paciente ISI
estudio.
TP normal 3. Agregar 50 uL de fosfolípidos más
activadores.
4. Dejar incubar 3 minutos.
5. Añadir 50 uL de cloruro de calcio.

Determinación de fibrinógeno
1. Diluir plasma 1:10 en buffer
estrecomendado.
2. Colocar en una cubeta 100 uL plasma paciente
diluido.
3. Incubar por 2 min.
4. Agregar 50 uL de trombina
Referencia
5. Registrar resultados. 200-400 mg/dL
6. Extrapolar seg en la curva para obtener
[fibrinógeno]
7. Multiplicar el valor obtenido por el factor de
dilución
 Flujograma de interpretación

Prueba de mezcla
Fundamento
- TTPA o TP prolongados.
- Sospecha de inhibidor o deficiencia de factores.
- Corrección de TP o TTPA con un plasma normal → en caso
de deficiencia, el plasma normal es capaz de corregir y
producir valores normales.
Interpretación
Prueba de mezcla 1+1:
- Se mantiene prolongado el tiempo: Sospecha de inhibidor
- Se corrige: Sospecha de deficiencia de factor.

Prueba de mezcla 1+4:

- Se mantiene prolongado el tiempo: Sospecha de inhibidor de bajo titulo
- Se corrige: descarta presencia de inhibidor.
 Interpretación
Índice de rosner (IR) Valor índice de Rosner Interpretación
Menor a 10 % Presencia de deficiencia de factor
IR: TTPA plasma PM – TTPA plasma control X 100 Entre 10 y 15 % Indeterminado
TTPA plasma paciente Mayor a 15 % Presencia de inhibidor de factores.

Porcentaje de corrección (PC)

PC: Tiempo plasma paciente – Tiempo plasma PM X 100
Tiempo plasma paciente – Tiempo plasma control
Interpretación
Valor índice de Rosner Porcentaje de corrección Interpretación
Mayor a 15% Menor a 50% Presencia de inhibidor.
Menos a 10% Mayor a 50 % Deficiencia de factor

Prueba de mezcla a 37°

Principio
Pacientes con un Plasma pobre en plaquetas → inhibidores dependientes
del tiempo y la temperatura → Inhibidores de acción lenta.

Estos inhibidores son cuantificados con el ensayo de cuantificación de

inhibidores del VIII → Test de Bethesda.

Interpretación
Condición PM inmediata PM después de 2 horas a 37°
Deficiencia de factor Corrige Corrige
Posible anticoagulante lúpico No corrige No corrige
Inhibidor de factor VIII Corrige No corrige

Dímero-d

Procedimiento
1. 50uL a c/ cubeta
2. 80 uL de buffer
3. Incubar 2 min ½
4. 40 uL de reactivo de latex dinero D
 Cuantificación de factor VIII
Fundamento
El porcentaje de factor VII puede ser determinado por el grado de corrección obtenido cuando el plasma en estudio se
agrega a un plasma deficiente en factor VII comercial (menos 1 % de factor VII). El grado de corrección es determinado
por un TTPA. El plasma deficiente en factor VIII entrega de la coagulación en caso de que en paralelo existiera la
deficiencia de otro factor.

6. De la Activad interpolada se calcula la

actividad real → Multiplicar por el factor de
2. Realizar 3 diluciones → 1:10, 1:20, 1:40. Buffer + Plasma dilución.
del placiente.
3. Realizar TTPA:
- 50 uL de plasma diluido. 7. Calcular promedio de la actividad real
- 50 uL de plasma deficiente en factor VIII. de cada dilución.
- 50 uL de reactivo de fosfolípido más activadores
- Incubar por 3 minutos.
- Agregar 50 uL de reactivo de cloruro de calcio
Informar: Actividad de factor VIII
4. Registrar resultados junto a la curva de calibración normal
5. Verificar que exista PARARELISMO entre las curvas.

Interpretación
La actividad de factor VIII se puede ver disminuida por:
- Hemofilia A.
- Portadoras de hemofilia (heterocigoto).
- Todos los tipos de enfermedad Von Willebrand.
- CID
- Deficiencia combinada de factor VIII y V congénita

Interpretación
Actividad de FVIII (%) Clasificación Tendencia al sangrado Incidencia relativa
Menor a 1 Severa Frecuente y espontaneo. 50%
Entre 2 y 5 Moderada Algunos espontáneos. 30%
Mayor a 5 y menor a 45 Leve Considerable después de 20%
un trauma significativo.
 Determinación de anticoagulante lúpico
Definición
Autoanticuerpo adquirido que se encuentra en
personas con desordenes autoinmunes u en
algunos individuos sanos.

Fundamento
Los AL son anticuerpos que se unen a proteínas de unión a fosfolípidos. Estos Ac
secuestran los fosfolípidos lo que provoca que se prologuen los tiempos de
coagulación de las pruebas dependientes de fosfolípidos como el TP y TTPA.

Prueba de la vívora de Russel diluido

Principio
El veneno tiene la capacidad de activar directamente al factor X, lo que provoca la
formación de la malla de fibrina en presencia de factor V, protrombina, fosfolípidos
y calcio.

Prueba de Screening de AL
1. Agregar 100 uL de plasma de paciente.
2. Incubar por 4 min a 37 min.
3. Agregar 100 uL reactivo dRVV Screen.
4. Registrar tiempo de coagulación

Interpretación
Radio screening AL: Tiempo de coagulación del plasma del paciente - Radio Screening menor 1,2: Descarta la presencia de AL
Tiempo de coagulación del plasma normal - Radio Screening mayor a 1,2: Sospecha de Al

Prueba de confirmatoria de AL
1. Agregar 100 uL de plasma de paciente.
2. Incubar por 4 min a 37 min.
3. Agregar 100 uL reactivo dRVV Screen.
4. Registrar tiempo de coagulación

Interpretación
- Radio Screening menor 1,2: Sospecha casi confirmatoria
Radio confir AL: Tiempo de coagulación del plasma del paciente
de AL
Tiempo de coagulación del plasma normal
- Radio Screening mayor a 1,2: Otro inhibidor no
dependiente de fosfolípidos.
Confirmación de AL
Radio normalizado: Radio de screening AL
Radio confirmación AL Interpretación
- Radio NORM menor 1,2: Otro inhibidor no dependiente de
fosfolípidos.
- Radio Screening mayor a 1,2: Confirma presencia de AL.