DIAGNOSTICO DE SIFILIS

LIC.IVONE VIDARTE GARCIA

• El T. pallidum es una espiroqueta helicoidal ,
móvil, sumamente fina, de 6 a 15 μm de
largo y 0,1 a 0,2 μm de ancho. Causante de la
sifilis

• Su composición es 70% proteínas, 20%

lípidos, y 5% carbohidratos.

• La porción lipídica está formada por varios

fosfolípidos, dentro de los que destaca la
cardiolipina

• Pared celular flexible, microfibrillas, La

membrana, contiene la mayoría de las
proteínas integrales y abundantes
lipoproteínas, siendo la más antigénica 47
kilo daltons

• Es preferentemente anaerobio, aunque

puede sobrevivir y desarrollarse en
aerobiosis
 MECANISMO DE TRANSMISIÓN

SEXUAL

TRANSFUCIONAL

VERTICAL
• PUERTA DE ENTRADA:PIEL Y MUCOSA
GENITAL, PUEDE SER EXTRAGENITAL.

El chancro se presenta en el lugar de

Chancro (primera etapa de la
la inoculación, siendo los de mayor
sífilis) desarrollado en el sitio
frecuencia el pene, labios mayores,
de contagio
cérvix, conducto anal, recto, boca.
 DIAGNOSTICO - SIFILIS

Microscopía Directa Ex. Serológicos

(muestra de lesión o tejido) (Suero, plasma y LCR)

Ex. No Treponémicos Ex. Treponémicos

Ex. Treponémicos
VDRL FTA-ABS
RPR TPHA
RST TPI
USR inmunocromatografia
TRUST ELISA
 SÍFILIS PRIMARIA
Hay que tener siempre presente que:

• El Diagnóstico directo es posible del producto de las lesiones

clínicas compatibles con este período.

• Las pruebas serológicas no se hacen positivas hasta pasadas 1-4

semanas de la aparición del chancro.

• La prueba TPHA es menos sensible que FTA-ABS en este período

y probablemente, tanto una como otra, menos sensibles que
las pruebas VDRL o RPR.

• En la etapa primaria repetirse el examen en 1 semana,1 mes y

3 meses
 SIFILIS SECUNDARIA

El Diagnóstico es sencillo puesto que:

• El diagnóstico directo es posible en las

lesiones secundarias.

• Las pruebas reagínicas y treponémicas

son positivas en el 100 % de los casos.
 SIFILIS LATENTE PRECOZ / DE MENOS DE UN AÑO DE EVOLUCIÓN

Como norma encontramos que:

• No es posible el diagnó stico directo.
• Las pruebas reagínicas y treponémicas
positivas.
• Se observa una caída lenta pero progresiva
de los títulos de las pruebas reagínicas que,
con el paso del tiempo, pueden llegar a
negativizarse.
 SIFILIS LATENTE TARDÍA O DE MÁS DE UN AÑO DE
EVOLUCIÓN

• El diagnóstico de certeza es más complicado.

Podemos observar:

• Pruebas treponémicas positivas.

• Pruebas reagínicas positivas o negativas, según el

tiempo de evolución.

• No existen síntomas clínicos (evaluar

serológicamente para neurosífilis)
 SÍFILIS TERCIARIA

• El Diagnóstico serológico es difícil. Es imprescindible

conocer la historia y la terapéutica del paciente.

• Por regla general, los datos clínicos suelen ser confusos.

Pruebas Treponémicas positivas en el 95 % de los casos.

• Pruebas reagínicas negativas, al menos en el 30 % de los

pacientes.

• Investigar la presencia de síntomas clínicos de

terciarismo: gumas, sífilis cardiovascular, neurosífilis, etc.
• Los Anticuerpos Contra la sífilis comienzan a
aparecer en la sangre entre cuatro a seis
semanas después de la infección.

• Las pruebas no Treponemicas (inespecíficas)

determinan la presencia de la reagina, que es
un anticuerpo no Treponemico dirigido contra
los antígenos de la cardiolipina.
NOMBRE DESCRIPCION COMENTARIO
DE LA
PRUEBA

El anticuerpo
FTA-ABS fluorescente DETECTA anticuerpos treponemicos,
Absorción de absorbe los distingue las falsas positivas
anticuerpos anticuerpos biológicas de las positivas
Treponemicos contra los treponemas verdaderas y ayudan al diagnostico
fluorescentes no de la sífilis cuando existen signos
patógenos clínicos definitivos

La reagina reacciona con los

RPR antígenos grasos, se utiliza como
Reagina Aglutinación prueba de detección, muestra la
plasmática rápida presencia de reagina, Los pacientes
con tratamiento contra sífilis deben
someterse a RPR basal
 NOMBRE DESCRIPCION COMENTARIO
DE LA PRUEBA

VDRL Floculación Se utiliza como prueba de

detección, elaborada en los
laboratorios venéreos y de
investigación del servicio de
salud publica de EE.UU,
muestra la presencia de
reagina
NEGATIVO POSITIVO CONTROL
POSITIVO

TPHA Hemaglutinación
Hemaglutinación para Indica la presencia de Ac.
Acs T. pallidum Treponemicos de la sifilis
 TÉCNICAS SEROLÓGICAS

Exámenes Antígeno Anticuerpo

No Treponémicos Cardiolipina Reagina

Treponémicos T. pallidum Específicos

 En Nuestra Red de Salud Túpac Amaru se han
Utilizado diferentes marcas de test- serológicos
para sifilis como :

• RPR-CARBON SPINREACT
• CASIANOS EIRL,
• TECO-DIAGNOSTICS
• RPR-CARBON BIOSYSTEMS
• RPR-CARBON CROMATEST
• RPR-NOSTICON Y
• RPR-CARBON RANDOX.
• RPR-LAB-21
Toda prueba serológica para sífilis debe
poseer dos cualidades, tales son:

• Sensibilidad :
la capacidad de encontrar anticuerpos en el suero de
un sifilítico.

• Especificidad
la cualidad de la prueba serológica de dar resultados
No Reactivos en sueros no sifilíticos.

Pero lo ideal de una reacción serológica con sensibilidad

y especificidad al ciento por ciento, no se ha alcanzado
RPR (REAGINA PLASMÁTICA RÁPIDA)
• Se basa en una reacción de floculación de una suspensión
estabilizada de cristales de colesterol, cardiolipina, lecitina y
partículas de carbón para facilitar la lectura de la reacción. Este
reactivo actúa como antígeno frente anticuerpos reagínicos
presentes en los enfermos con sífilis.

• La reagina es un Ac. contra los lípidos de los tejidos, se supone

que los tejidos del organismo liberan lípidos durante al actividad
normal, estos lípidos inducen a la formación de anticuerpos. Estos
anticuerpos reagínicos, no son exclusivos de la sífilis, también son
producidos en otras enfermedades infecciosas.
• Si la muestra es Reactiva contiene reaginas,
ocurre la floculación con las partículas de
carbón contenidas en la suspensión del
antígeno, Evidenciándose macroscópicamente
la reacción, la cual aparece como un cúmulo
negro.

• Las muestras No Reactivas son homogéneas

con un ligero color gris.
• El resultado se reporta como No Reactivo
o Reactivo

• Todas aquellas muestras Reactivas deben

ser diluidos seriadamente para realizar la
titulación y se reporta la dilución mas
alta que exhibe reacción
 REACTIVOS - ANTÍGENO RPR.
• Suspensión de Antígeno Elaborado por la
Empresa de Productos Biológicos "Carlos J.
Finlay"
– Cardiolipina 0,003%
– Lecitina 0,020- 0,022%
– Colesterol 0,09%
– Cloruro de colina 10%
– EDTA 0,0125 mol/L, micropartículas de
carbón 0,01%, en tampón fosfato.
Contiene 0,1% de mertiolato sódico.
• La suspensión del antígeno Debe homogenizarse
por 5 a 10 segundos antes de abrirse, para
resuspender las particular de carbón, antes de
ser utilizado, pues tiende a sedimentar en
reposo.

• La suspensión del antígeno siempre debe

refrigerarse, es estable sin abrir y almacenado
entre 2-8°C, hasta la fecha de caducidad.

• Cuando no se utilice. Proteger de la luz ¡No

congelar!.
CONTROL POSITIVO RPR.

• Control líquido estabilizado, Suero humano

Reactivo con antígeno RPR y con un :
título de reaginas ≥ ½, ≥ 1/8.
Suero de conejo inmune:
Contiene 0,95 g/L de acida sódica.
CONTROL NEGATIVO RPR .
• Control líquido estabilizado, No
reactivo con antígeno RPR.
• Suero animal. Contiene 0,95 g/L de
acida sódica
• Los controles están listos para su uso y hasta
la fecha de caducidad.

• Lleve a temperatura ambiente la

suspensión del antígeno y los controles
antes de utilizarse.

Precauciones: Únicamente para uso

diagnóstico in-vitro.
 MATERIAL PROPORCIONADO

• Aguja No. 18 sin bisel utilizada para dispensar

aproximadamente 17ul de la suspensión del
antígeno.

• Pipetas/ agitadoras utilizadas para dispensar

aproximadamente 50 ul (0.05 mL) de muestra.
• Tarjetas de Prueba (círculos de
aproximadamente 18 mm). Cartón laminado.
Utilizado como superficie de prueba. Se debe
tener cuidado en la manipulación de las
tarjetas de prueba para evitar introducir
contaminantes al circulo de prueba. Extienda
cada muestra sobre el total del área del círculo
de prueba.
MATERIALES SUMINISTRADOS

PALILLOS
HOMOGENIZADORES

CONTROL CONTROL
ANTIGENO RPR
NEGATIVO POSITIVO

AGUJA N° 18

CARD-TEST
PIPETAS PLASTICAS
 MATERIALES REQUERIDOS PERO NO
PROPORCIONADOS

• Rotador (100 ± 2 rpm)

• Solución salina (0.9%)
• Cronómetro
• Lámpara
• GUANTES
• AGUJAS Y TUBOS VACUTAINER
• LEGIA 5%
MATERIALES NO SUMINISTRADOS
 RECOLECCIÓN Y PREPARACIÓN DE LA MUESTRA

• Las muestras pueden ser sueros activados o

inactivados , plasmas recolectados con EDTA
como anticoagulante.

• Evite la hemólisis, si la muestra esta severamente

lipémica de manera que se obscurece el estado
de las partículas de antígeno podrían dar una
aglutinación no específica, la muestra no debe
ser utilizada.
• Las muestras con restos de fibrina deben ser
centrifugadas nuevamente antes del ensayo.

• Hemoglobina (<10 g/L), bilirrubina (<20 mg/

dL) y lipemia (<10 g/L) no interfieren con el
ensayo. Los factores reumatoideos (>300 UI/
mL) interfieren.
 ESTABILIDAD DE LA MUESTRA

• Las muestras de suero se reportan estables

por 5 - 7 días entre 2-8°C ó 3 meses
conservados a -20°C. Los plasmas
recolectados con EDTA y almacenados entre 2-
8°C se reportan estables hasta 24 hrs.
 PROCEDIMIENTO CUALITATIVO

1. Lleve a temperatura ambiente la suspensión

del antígeno de RPR, los controles y las
muestras.
CODIFICAR MX. Y CONTROLES
CODIFICAR
COLOCAR EL NUMERO DE DILUCIONES POSIBLES
SEGÚN LA REACCION DE LA MUESTRA
DEBE REALIZARSE CON UNA BUENA LUZ NATURAL O
BAJO UNA LÁMPARA DE ALTA INTENSIDAD DE LUZ
INTERPRETACION DE RESULTADOS

• La última dilución que contenga agregados

macroscópicos indica el título de la muestra.
Ejemplo:
CIRCULO No. Dilución del suero Resultado
1 1:2 REACTIVO
2 1:4 REACTIVO
3 1:8 REACTIVO
4 1:16 REACTIVO
5 1:32 REACTIVO
6 1:64 REACTIVO
7 1: 128 NO REACTIVO

El título del suero problema será: 1:64.

 DILUCIONES ALTAS
• Prepare una dilución 1:16 de la muestra Reactiva agregar en un
tubo de ensayo 0.1 ml. del suero reactivo a 1.5 mL de SSF al
0.9% Mezcle firmemente.

• Colocar 50 ul de la dilución 1:16 preparada en el circulo N° 1 y a

partir del circulo N°2 ,3,4,5 o hasta donde considere necesario
colocar 50 ul de SSF 0,9%

• A partir del circulo 2 e iniciar la dilución agregando 50 ul de

dilución 1:16 mezclar con la SSF 0,9% y transferir 50 ul al
siguiente círculo y así hasta el circulo N° 5 eliminando 50 ul al
final y agregar los 17 ul del antígeno RPR mezclar por todo el área
del circulo y colocar en el rotador a 100 rpm x 8 min. e
interpretar.
 LECTURA-RPR
REACTIVO
Cuando hay presencia de grumos NO REACTIVO
Intenso, finos y dificultosos de ver Si no muestra grumos

El resultado será la mas alta dilución que

Muestre reacción

TPHA
PRUEBA CONFIRMATORIA
ENVIO DE
MUESTRA PARA •TIPO DE EXAMEN
•CODIGOS
EXAMEN •ESTABLECIMIENTO
•FECHA DE
CONFIRMATORIO NACIMIENTO

C.S TUPAC AMARU

10-05-84

PCAM
TPHA
VOLUMEN
DE SUERO

1.5 - 2.0 ml.

FALSOS POSITIVOS

• Presencia de fármacodependencia, lupus eritrematoso,

mononucleosis, paludismo, lepra, neumonía viral
vacunación reciente y en raras ocasiones durante el
embarazo.

• Muestras hemolisadas o contaminadas

 FALSOS NEGATIVOS
• Al principio de la enfermedad o durante la fase inactiva
o tardía.

• Fenómeno de Prozona, El suero de los pacientes con

grandes cantidades de Ac. Puede ocurrir este fenómeno
ya que las concentraciones relativas de Ac. y Ag. No
están en equilibrio y la floculación no tiene lugar, que
viene siendo un problema clínico. La existencia de este
fenómeno de prozona a menudo produce un aspecto
rugoso del antígeno no floculado. Cualquier suero que
produzca este aspecto rugoso debe ser diluido y
titulado, si se sospecha de sífilis.
 1) FENOMENO PROZONA
donde existe exceso de Ac.
1) 2) 3) Frente al Ag, donde no se
produce aglutinación ,
originando falsos(-) por altas [ ]
de Ac. Esta dificultad se elimina
con diluciones seriadas estándar
del suero.

2) Equivalencia

3) POSTZONA, se da en la zona
de exceso de Ag, donde tampoco
se da la aglutinación, dando
también falsos (-).
INTERFERENCIAS:
• El exceso de lípidos en la sangre

• El alcohol reduce la intensidad de la reacción en las

pruebas que se detecta la reagina, por lo tanto, el
paciente no debe consumir alcohol por lo menos
durante 24 hrs antes de la prueba.

Después del tratamiento, los pacientes con sífilis

temprana deben someterse a estudios cada tres meses
durante un año hasta que disminuya la reactividad
• Evitar efectuar las pruebas en áreas próximas a
sistemas de calefacción o acondicionadores de aire,
temperaturas elevadas del medio ambiente pueden
provocar la desecación de la mezcla de reacción sobre
el porta, dando lugar a un aspecto de “aglutinación”
que puede confundirse con un falso positivo.

• El mal funcionamiento del rotador mecánico,

volúmenes excesivos de muestra, reactivos fríos
(antígeno, muestra o solución salina)
 EX.NO TREPONEMICOS
• Son utiles para seguir la progresion de la
enfermedad y la respuesta al tratamiento.

• Los resultados Reactivos deben ser titulados

• Si el titulo de Ac. No disminuye en forma

progresiva con el tratamiento, debe
considerarse la posibilidad de un fracaso al tto.
 EX. NO TREPONEMICOS
• De haber una disminucion de por lo menos 4
veces en el titulo de Ac. Después de tres meses
de tto antitreponemico se considera eficaz.

• Los pacientes que son tratados en los estadios

tardíos de la sífilis o que se han reinfectado, los
títulos disminuyen muy lentamente o
permanecen estables. Algunos de estos persisten
crónicos, pueden mantener las pruebas No
Treponemicas Reactivos toda la vida
 EX. NO TREPONEMICOS
• VDRL es la única prueba serológica con
aceptación universal para el diagnostico de
la neurosifilis.

• Las muestras de plasma no deben ser

utilizadas para pruebas semi-cuantitativas.
RESULTADO NO REACTIVO

• Indica que el paciente no tiene sífilis.

• La sífilis se encuentra en fase latente o

inactiva.

• El paciente presenta un estado inmunológico

deficiente.

• Las técnicas del laboratorio tuvieron fallas.

RESULTADO REACTIVO

• No es dato concluyente de sífilis ya que

existen varias situaciones que producen falsos
positivos.

• Las reacciones falsas positivas en realidad no

son falsas, muchas veces indican la presencia
de otra enfermedad peligrosa.
 CAUSAS DE ERROR
•La concentración excesiva de anticoagulantes en
el plasma , origina resultados poco fiables.

• Los círculos de las tarjetas visualizadoras no

deben tocarse con los dedos. Las huellas
digitales impiden un reparto homogéneo entre la
muestra y el antígeno.

•Empleo de antígenos caducados.

 Los estudios serológicos, son procedimientos
no invasivos que proporcionan la información
necesaria para adoptar acciones preventivas o
terapéuticas y que han demostrado su utilidad
e importancia en la población vulnerable y en
la asistencia preconcepcional y prenatal de la
mujer.
GRACIAS