UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR

FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS

CARRERA DE CIENCIAS BIOLÓGICAS Y AMBIENTALES

GUÍA DE PRÁCTICAS DE LABORATORIO

ABRIL 2020-AGOSTO 2020

Asignatura: BIORREMEDIACION AMBIENTAL

Docente: Fidel Ernesto Rodríguez Galarza y Estefania Ortega Tinajero
Semestre: OCTAVO Fecha de elaboración : 1-11-2022

Fecha de la práctica: 11-08-2022 Número de práctica 02

Tema Bioensayo de toxicidad con semillas de rábanos
La toxicidad de los compuestos es determinante para el diseño de un proceso de
tratamiento, es necesario conocer la concentración que se considera tóxica de cada
contaminante puesto que de esta manera podemos evaluar efectos en la biota como
son: inmovilidad, mortalidad, inhibición del crecimiento, alteración del
comportamiento, entre otros (Cando, 2011). El bioensayo de toxicidad son semillas de
lechuga es un ensayo estático de toxicidad del agua (120 h) en el que se puede evaluar
los efectos fitotóxicos de compuestos puros o de mezclas complejas en el proceso de
germinación de las semillas y en el desarrollo de las plántulas durante los primeros días
de crecimiento. Se determina la inhibición de la germinación y la inhibición de la
INTRODUCCIÓN
radícula y el hipocotilo. Una sustancia tóxica altera el desarrollo y la supervivencia
normal de la planta. Las reacciones y procesos involucrados son generales a una gran
parte de las semillas por lo que los efectos en esta especie son representativos en los
efectos de plántulas y semillas en general. La evaluación del desarrollo de la radícula y
del hipocotilo constituyen indicadores representativos para determinar la capacidad de
establecimiento y desarrollo de la planta. La evaluación del efecto en estos procesos
permite determinar el efecto de compuestos en bajas concentraciones que no llegan a
inhibir la germinación, siendo indicadores sensibles de compuestos sub-letales.
(Gónzalez et al., 2011).
General: Determinar la toxicidad de un contaminante sobre los procesos de
germinación de semillas de rábano.
Específicos:
Objetivos
Determinar la IC50.
Determinar el % de inhibición de germinación.
Determinar el % de inhibición de crecimiento de hipocotilo y radícula.
Comprender y analizar la importancia de un ensayo de toxicidad.
Resultados de Establecer los posibles efectos adversos del contaminante en la biota.
aprendizaje Analizar la importancia de la determinación del IC50 en el diseño experimental de un
tratamiento.
Materiales proveídos por el laboratorio:
Matraces aforados de 100 mL
Pipetas volumétricas (1, 2, 5, 10 mL)
Agua destilada
Balanza analítica
Potenciómetro
Materiales proveídos por el estudiante:
Mandil, guantes, mascarilla y cofia
Material o recursos
Cajas Petri pequeñas plásticas (6 cajas)
Ácido láctico de vegetal (fermentación de col) y animal (suero de queso)
Semillas de rábano
Regla
Hoja milimétrica
Toallas de papel
bolsas plásticas
Marcador permanente

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1. Instrucciones - Procedimiento – Actividades

I. Realizar 5 diluciones (2, 10, 20%) para calcular IC50.

II. Colocar en cada caja Petri un disco de papel filtro.
III. Marcar correctamente cada caja con la dilución, fecha y hora de inicio del bioensayo.
IV. Saturar el papel toalla con 4 o 5 mL de la dilución evitando la formación de bolsas de aire.
V. Con la ayuda de una pinza colocar 10 semillas, dejando espacio entre ellas para permitir la generación de la
radícula.
VI. Tapar las cajas y colocarlas en bolsas plásticas para evitar la pérdida de humedad.
VII. Cubrir las cajas de la luz y mantenerlas a una temperatura de 22°C ± 2, por 120 h (5 días).
VIII. Realizar repeticiones para cada dilución.
IX. Establecer un control negativo y control positivo.
X. Después de los 5 días registrar el número de semillas que germinaron normalmente.
XI. Utilizando una regla o papel milimétrico medir la longitud de la radícula y del hipocótilo de cada una de las
plántulas.

2. Resultados esperados - obtenidos

Promedio y desviación estándar de la longitud de la radícula e hipocotilo.

Porcentaje de inhibición del crecimiento de la radícula e hipocotilo, respecto al promedio en el control
negativo.
Porcentaje de inhibición de la germinación.
Causas de no germinación o no crecimiento
Gráfico dosis vs. Respuesta, evaluando el porcentaje de inhibición (uno para inhibición de la germinación y
otro para inhibición del crecimiento) vs. La concentración (dilución), calcular IC50.

3. Discusiones y Conclusiones

¿Qué otras pruebas de toxicidad existen? Ventajas y desventajas del ensayo. ¿De qué sirve la información
obtenida? ¿Para qué tipo de contaminantes está indicado este ensayo?

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4. Recomendaciones

(De ser necesario se completa en el informe del estudiante)

5. Referencias

Cando, M. 2011. Determinación y análisis de un proceso de biorremediación de suelos contaminados por

hidrocarburos. Tesis. Universidad Politécnica Salesiana – Cuenca.
González et al. 2011. Prácticas de laboratorio de remediación de suelos y acuíferos. Unidad profesional
interdisciplinaria de biotecnología.

6. Evaluación

El informe de la práctica se evaluará en función de la rúbrica.

REVISADO POR:
APROBADO:
ELABORADO POR DOCENTE COORDINACIÓN DE LA UNIDAD
DIRECCIÓN DE CARRERA
CURRICULAR

FECHA: 2-11-2022 FECHA: 2-11-2022 FECHA: 2-11-2022

Docente: Fidel Rodríguez FIRMA: JAVIER TORRES FIRMA: CONSEJO DE CARRERA

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