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PRÁCTICA DE LABORATORIO
CURSO: Bioquímica
PRÁCTICA N°: 9
TÍTULO: DIGESTIÓN ENZIMÁTICA DEL ALMIDÓN
FECHA DE REALIZACIÓN: 16 / 10 / 23
FECHA DE ENTREGA: 24 / 10 / 23
LIMA – PERÚ
INTRODUCCIÓN Y OBJETIVO (S)
INTRODUCCIÓN:
OBJETIVOS:
● Describir la digestión enzimática del almidón mediante la hidrólisis por efecto de la
amilasa salival.
MATERIALES Y MÉTODOS
MATERIALES:
● 01 gradilla
● 12 tubos de ensayo 13x100 mm
● 01 piseta con agua destilada
● 04 pipetas graduadas 5 mL
● 01 pipetas graduadas de 1 mL
● 01 propipeta
● Tampón fosfato 0.1M pH 6.5, 5 mL
● Solución de almidón 1%, 10 mL
● Solución de cloruro de sodio 0.5N gotero 25mL
● 01 gotero con solución de Lugol
● 01 baño maría 37°C
PROCEDIMIENTO:
Luego colocaremos los tubos de ensayo en baño maria a 37° C durante 2 minutos
Luego pediremos a alguien la muestra de su saliva para poder hacer que reaccione
con los tubos de ensayo
Colocar nuevamente los tubos en baño maría y sacar alícuotas de 0.5mL de cada
uno de los tubos a los 3, 6, 9 minutos, y adicionarlos a los tubos previamente
preparados que contienen 1.0mL de cloruro de sodio 0.5N, de acuerdo al siguiente
esquema:
Tuvimos que dividir en grupos cada fila de tubos : 0.1, 0.2 y 0.3- 3.1, 3.2 y 3.3-
6.1,6.2 y 6.3- 9.1,9.2 y 9.3.
En la primera fila de 1 todos deben salir azules, en la segunda fila saldrán amarillos
debido a la hidrolisis debido a su activador
RESULTADOS
DISCUSIÓN
Las enzimas se encuentran en diferentes órganos de nuestro cuerpo y sus valores son
útiles para hacer diagnósticos médicos. Las amilasas son las responsables de degradar el
almidón en nuestro organismo; además, tienen un uso farmacológico.
El Lugol es una sustancia que nos sirve para determinar la presencia de almidón en
nuestra práctica tornando la muestra de color azul oscuro y el cloruro de sodio 0.5N actúa
como cofactor enzimático de la α amilasa salival.
RECOMENDACIONES
● Brindar atención al último tiempo reacción en cada uno de los tubos de ensayos;
ya que dependerá de la cantidad del NaCl 0.5N (ml) y su grado de disociación
dependiente de T° y la cantidad de agua destilada para poder reaccionar en el centro
activo de la alfa salival y con ello llevar a cabo su acción sobre las cadenas de almidón
(alfa 1,4 glucosídico).
● Asimismo, se obtendrá el grado de eficiencia de la alfa salival sobre el
almidón cuando adicionaremos el Lugol; que en observancia podremos
diferenciar el cambio de color y su intensidad.
● Para presentar una buena acción de la alfa amilasa se recomienda
proporcionar un medio estable; es decir, el estado PH (6.7-7.2) que se lleva a cabo por
el tampón fosfato, además tamponado al almidón, que en incubación con NaCl se
podrá realizar la hidrólisis enzimática.
● Para detener la hidrólisis se utiliza el reactivo de yodo.
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
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