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RESUMEN
ACCIÓN DE LA ENZIMA CATALASA, ACCION DE LA ENZIMA AMILASA SALIVAL Y
SACARASA
1.- Hidrólisis enzimática del almidón por la saliva: Acción digestiva de la amilasa salivar.
Primero se hace un tubo patrón con 2 ml. de una disolución de almidón al 2 % y unas gotas de
disolución de yodo (lugol). Observar el resultado. Después se calienta suavemente el tubo hasta que
la mezcla pierda el color. Dejar enfriar el tubo bajo el agua del grifo y esperar unos minutos. Anotar
lo sucedido.Colocar en un segundo tubo 2 ml. de la disolución de almidón y una cierta cantidad de
saliva, mezclar bien la saliva con la disolución y calentar muy suavemente durante unos segundos.
Añadir unas gotas de lugol. Anotar los resultados y dar una explicación a lo ocurrido.
2.- Reconocimiento de la enzima catalasa
La catalasa se encuentra tanto en tejidos vegetales (patata, zanahoria, lechuga, etc.) como en tejidos
animales (carne, pescado, etc.) produciendo la siguiente reacción química:
H2O2 (agua oxigenada) ==== H2O + ½ O2 (gaseoso)
va anotando las variaciones de temperatura que se producen en el interior del calorímetro cada
treinta segundos durante un período de cinco minutos. Hacer la gráfica de la reacción y explicar los
resultados.
RESULTADOS DEL APRENDIZAJE
Como resultado obtuvimos reacciones con azúcar, saliva y otros ingredientes que nos permitieron
realizar este proceso de forma expontanea para nuestro desempeño en conocer las diferentes partes
de reacciones químicas ya que fue muy importante identificar este tipo de reacciones.
Intensidad
Carne color Rojo 9 ml
Pimiento color verde 5 ml
Zanahoria color celeste 7 ml
Tiempo
Carne color rojo 6 min
Pimiento color verde 3 min
Zanahoria color celeste 3 min
INTRODUCCIÓN
En el organismo existe un sistema de protección antioxidante formado por enzimas y compuestos de
bajo peso molecular. Una de las enzimas que intervienen en la protección y, en el mantenimiento del
balance oxidante/antioxidante es la catalasa (CAT). La catalasa se encuentra en las células de tejidos
animales y vegetales. La función en los tejidos es necesaria porque durante el metabolismo celular,
se forma una molécula tóxica que es el
PER-OXIDO DE HIDROGENO, H2O2 (agua oxigenada), la catalasa, lo descompone en agua y en
oxígeno. La reacción de la catalasa sobre el H2O2, es la siguiente.
páncreas. Tiene actividad enzimática a un pH de 7. Cuando una de estas glándulas se inflama, como
en la pancreatitis, aumenta la producción de amilasa y aparece elevado su nivel en sangre
(amilasemia). El pH óptimo de la amilasa salival es de 6.9. Prácticamente todos los seres vivos
disponen de amilasas.
La sacarasa es una enzima específica de la sacarosa. La sacarasa, conocida también como invertasa,
es una enzima que convierte la sacarosa (azúcar común) en glucosa y fructosa. Está presente en el
intestino delgado, en el borde del cepillo de las vellosidades intestinales.
MARCO TEÓRICO
Enzimas:
- ¿Qué son?
Las enzimas son proteínas “especialistas” y controlan TODAS las reacciones químicas de nuestro
cuerpo. Hay enzimas en todo lo que está vivo. Se dice que son catalizadores, porque cada reacción
química necesita una enzima para que se realice, es decir, todo lo que se transforma lo hace gracias
a una enzima. Cada enzima actúa sobre una sustancia concreta, como una llave y una cerradura.
- ¿Cómo actúan?
Actúan como catalizadores en el metabolismo de los seres vivos. Con su acción, regulan la
velocidad de muchas reacciones químicas implicadas en este proceso.
- ¿Qué factores afectan a su actividad?
• Efecto del pH
• Temperatura
• Concentración de sustrato
-¿Qué es apoenzima?
Es la parte proteica de una holoenzíma, es decir, una enzima que no puede llevar a cabo su acción
catalítica desprovista de los cofactores necesarios, ya sean iones metálicos (Fe, Cu, Mg, etc.) u
orgánicos, que a su vez puede ser una coenzima o un grupo prostético, dependiendo de la fuerza de
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sus enlaces con la apoenzima. La apoenzima, es por tanto, catalíticamente inactiva, hasta que se le
une el cofactor adecuado.
-¿Que es holoenzíma?
Es una enzima que está formada por una apoenzima y un cofactor, que puede ser un ion o una
molécula orgánica compleja unida (grupo prostético) o no (una coenzima). En resumidas cuentas, es
una enzima completa y activada catalíticamente.
- ¿Qué es zimógeno?
Es un precursor enzimático inactivo, es decir, no cataliza ninguna reacción como hacen las enzimas.
Para activarse, necesita de un cambio bioquímico en su estructura que le lleve a conformar un centro
activo donde pueda realizar la catálisis. En ese momento, el zimógeno pasa a ser una enzima activa.
Enzima catalasa:
- ¿Qué reacción cataliza?
- ¿Dónde se encuentra?
Se encuentra en casi todos los organismos vivos en el planeta que están expuestos al oxígeno.
Amilasa salival.
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Cataliza la reacción de hidrólisis de los enlaces 1-4 entre las unidades de glucosa al digerir el
glucógeno y el almidón para formar fragmentos de glucosa (dextrinas, maltosa) y glucosa libre.
- ¿Dónde se encuentra?
Agua: representa más del 99 %.56 Permite que los alimentos se disuelvan y se pueda percibir su
sabor a través del sentido del gusto. Anulándose este si el alimento no se disuelve correctamente.
Iones cloruro: activan la amilasa salival o ptialina.
Bicarbonato: neutralizan el pH de los alimentos ácidos y de la corrosión bacteriana.
Moco: El contenido de mucina, glicoproteína fundamental de la saliva, produce la viscosidad
necesaria para funciones lubricantes y de formación del bolo alimenticio que facilita la deglución a
lo largo del tubo digestivo, sin dañarlo.7
Lisozima: es una sustancia antimicrobiana que destruye las bacterias contenidas en los alimentos,
protegiendo en parte los dientes de la caries y de las infecciones.
Enzimas: como la ptialina, que es una amilasa que hidroliza el almidón parcialmente en la boca,
comenzando la digestión de los hidratos de carbono. La lipasa lingual inicia también la digestión de
grasas.7
Estaterina: con un extremo amino terminal muy ácido, que inhibe la precipitación de fosfato cálcico
al unirse a los cristales de hidroxiapatita. Además, también tiene función antibacteriana y
antifúngica.
Otras sustancias: la saliva contiene también inmunoglobulinas específicas, transferrina y
lactoferrina. En 2006 investigadores franceses del Instituto Pasteur identificaron una sustancia en la
saliva humana que llamaron Opiorfina, similar a la encontrada en ratas y vacas, que es hasta seis
veces más potente que la morfina para calmar el dolor.89
Calcio: la saliva está saturada de Ca2+, con lo que se evita que los dientes lo pierdan y ayuda a
digerir el alimento.
Tiocianato: protege los dientes de las bacterias.
¿Qué es la sacarasa?
La sacarasa, conocida también como invertasa, es una enzima que convierte la sacarosa (azúcar
común) en glucosa y fructosa. Está presente en el intestino delgado, en el borde del cepillo de las
vellosidades intestinales.
¿Dónde se encuentra?
Está presente en el intestino delgado, en el borde del cepillo de las vellosidades intestinales.
¿Cómo actúa?
Entre los sustratos sobre los que actúa, el más significativo es la sacarosa, de ahí que la enzima se
conozca también, como ya se ha señalado, con el nombre de sacarasa.
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NO INHALAR
CUIDADO AL MANIPULAR
SE PUEDE QUEBRAR
termina el burbujeo, y la intensidad de burbujeo en cada muestra (hasta dónde se sube el nivel de
burbujas).
7. Elaborar esquemas de relación intensidad y tiempo
Influencia del pH en la acción de la catalasa de la papa
8. Macerar un trozo de papa en 15 ml de agua destilada y recoger el extracto
9. En el Tubo 1:
5 ml de extracto de papa + 2ml de ácido clorhídrico al 0.1N + 3ml de peróxido de hidrógeno al 3%
En el Tubo 2:
5 ml de extracto de papa + 2ml de solución de hidróxido de sodio + 3 ml de peróxido de hidrógeno
al 3%
En el Tubo 3:
5 ml de Extracto de papa + 3 ml de Peróxido dehidrógeno al 3%
Realizar las anotaciones respectivas a la toma de pH con papel indicador y analizar los resultados
Influencia de la superficie de la muestra en su acción enzimática
10. Extraer una porción de hígado y macerar +3 ml de peróxido de hidrógeno.
11. Dividir en trozos un pedazo de hígado + 3 ml de peróxido de hidrógeno.
12. Comparar las reacciones de los dos montajes.
PROCESO DE LA SACARASA
1. Poner en una gradilla cuatro tubos de ensayo, numerados del 1 al 4.
2. Añadir una pisca de azucar en la tara y pesar en la balanza 2gr .
3. A los tubos 3 y 4 añadir una pequeña cantidad de solución de amilasa salival.
Para la solución salival: Se miden 20 ml de agua destilada se embucha por 5 minutos y colectar en
erlen meyer de 50 ml. Para ayudar y formar más saliva pensar en un limón o en algo que apetezca
mucho comer. Es preferible que el donante, esté en ayunas... Así se favorece que forme más saliva.
4. Antes de la acción de la amilasa salival se harán las siguientes determinaciones:
- En el tubo 1, se realiza la Reacción de Fehling. Para comprobar la presencia de azúcares
libres (reductores).
- En el tubo 2, se realiza la Reacción de Lugol. Para comprobar la presencia de almidón.
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- Los tubos 3 y 4 que contienen el almidón, al que le hemos echado la saliva, ponerlos en un
vaso de precipitados al baño María, controlando la temperatura del agua para que no hierva, ya que
lo que intentamos, es que la enzima de la saliva trabaje a unos 37° C. Dejarlo unos 15 minutos.
5. A continuación realizar las siguientes reacciones:
En el tubo número 3, realizar la Reacción de Fehling.
En el tubo número 4, realizar la Prueba del Lugol.
Sobre la sacarasa
Preparamos una solución de levadura (Shaccharomyces cereviceae) con 20ml de agua + 2.5g de
levadura + 0,1g de sulfato de amonio (se puede prescindir).
Dejar reposar por 15 minutos
Filtra el contenido (extracto de levadura)
Prepara los siguientes tubos:
Tubo 1
Preparar 1 cucharadita de sacarosa en 2 ml de agua destilada
Agitar
Tubo 2
Preparar 1 cucharadita de sacarosa en 2 ml de agua destilada + 2ml de extracto de levadura
Agitar
RESULTADOS Y OBSERVACIONES
Observación de la reacciones de la
sacarasa, levadura y uva.
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catalizadores, es decir, sustancias que, sin consumirse en una reacción, aumentan notablemente su
velocidad. ... La sustancia sobre la que actúa la enzima se llama sustrato.
¿Pueden las enzimas actuar en diferentes tipos de sustratos?- ¿Por qué?
Si porque Cada enzima está hecha para una función específica. Las moléculas por sobre las cuales
trabaja una enzima se denominan sustratos y cada uno está ligado a una región del enzima, llamado
sitio activo. Existen dos formas o modelos en que puede actuar una enzima y la velocidad de la
reacción depende de ello. Si la zona activa de la enzima tiene la forma exacta para unirse a cierto
sustrato, la reacción es veloz.
Qué significa alta especificidad o especificidad absoluta y especificidad de grupo?
Cuando la enzima solo puede actuar sobre un tipo de substrato, se dice que la enzima muestra
especificidad absoluta para el substrato. Ese es el caso de la deshidrogenasa succinica, que es
específica para el succinato, o la L-glutamico deshidrogenasa, específica para el glutamato.
Si la enzima puede actuar sobre substratos con estructuras muy similares, se dice que la enzima
muestra especificidad relativa para el substrato. La L-aminoacido oxidasa, por ejemplo, puede
catalizar la oxidacion de diferentes aminoacidos de la serie L.
CONCLUSIONES
ENZIMA CATALASA
• La actividad de la catalasa puede medirse por diversos procedimientos, sin embargo hay que
procurar operar con la menor concentración posible de sustrato, agua oxigenada, para evitar la
inactivación de la enzima por el sustrato.
• La catalasa se encuentra en todas las células que tienen metabolismo aerobio
• La determinación de la magnitud de la actividad catalítica presentes en las diferentes
fracciones proteicas obtenidas de la célula o tejidos: permite purificar las enzimas y obtenerlos al
final en forma homogénea.
• Entre los vegetales estudiados, la papa es la que contiene mayor cantidad de catalasa.
• La enzima es un producto delicado, por lo tanto la agitación excesiva desnaturaliza la
enzima.
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