PRCTICA N 21

LABILIDAD DE LA AMILASA


OBJETIVOS
Identificar la influencia de los cambio de temperatura del medio exterior sobre la
actividad enzimtica.

INTRODUCIN:

La temperatura del medio influye mucho en la actividad de las enzimas. La
temperatura ptima para la accin de enzimas es Ja temperatura de cuerpo de los
animales que oscila en el intervalo de 36 a 41 C. Con cierto aumento de la
temperatura del medio ocurre aceleracin de la reaccin a consecuencia de la
activacin de las molculas de sustrato. A la vez, incluso un aumento pequeo de
la temperatura conduce al debilitamiento de los enlaces que mantienen la
conformacin de la molcula de enzima, necesaria para la manifestacin de su
actividad cataltica. Empieza, gradualmente, la desnaturalizacin de la enzima que
se acelera bruscamente a la temperatura que sobrepase 50 C. La inactivacin de
la enzima con aumento de la temperatura del medio es irreversible. Al bajar la
temperatura la enzima disminuye su actividad tambin. El mecanismo de este
proceso no est claro. Sin embargo, el enfriamiento no causa desnaturalizacin de
la enzima y por lo tanto su inactivacin puede ser reversible.

MATERIAL:

o 3 Tubos de ensayo
o 1 Vasos de precipitacin 50ml
o 1 Vasos de precipitacin 600ml
o 1 Luna de reloj pequea
o 2 Balones de aforo de 50ml
o 1 Pipeta 5ml

EQUIPOS DE LABORATORIO:

o 1 Mechero
o 2 Gradilla
o 1 Malla
o 1 Bao mara
o 1 Termmetro
o 1 Balanza
o 1 Esptula
SUSTANCIAS:

o Cloruro de sodio al 0,3%
o Solucin de lugol
o Solucin de Almidn al 1% disuelto en una solucin de ClNa
0,3%
o Agua destilada (comprar porque es para realizar un enjuague
bucal)
Amilasa



PROCEDIMIENTO:
1. Enjuagar la boca con aproximadamente 20ml de agua destilada.
2. Colocar 3ml de esta solucin en cada tubo de ensayo, y rotular: 1, 2
y 3.
3. El tubo 1 se debe colocar por 1 minuto a hervir.
4. Luego en los tres tubos aadir 4ml de la solucin de almidn.
5. Los tubos de ensayo 1 y 2 colocarlos en el bao mara por 10
minutos a 37 C. El tubo 3 se lo sumerge en hielo por 10 minutos.
6. Al transcurrir este tiempo, en el tubo de ensayo se aade 1 gota de
reactivo de lugol. Los resultados del experimento se anotan en la
tabla de labilidad trmica de las anzimas y se sacan conclusiones:


# Tubo de
ensayo
Enzima Condiciones
del
experimento
Sustrato Incubacin Coloracin
con Yodo
1
2
3



CUESTIONARIO:
1. Qu es el almidn y la amilasa?
2. Qu tipos de enzimas intervienen en la degradacin de carbohidratos
en la saliva?
3. Qu importancia tienen estas enzimas en el proceso de digestin del
bolo alimenticio?
4. Cules son los factores que afectan para que una enzima no realice la
funcin de catlisis enzimtica?
A qu se debe la presencia de azucares reductores, tras tratar el almidn con la
amilasa salival? y s el Cu
2+
se reduce, qu se oxida y a qu?



BIBLIOGRAFA

BIOQUIMICA. H.R. HORTON et al. DE PRENTICE HALL
HISPANOAMERICANA, S.A. 1993.

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BIOQUIMICA DE HARPER. ROBERT K MURRAY. AD. MANUAL MODERNO,
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