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Universidad Popular Autónoma del Estado de Puebla.

Facultad de Medicina.

Decanato de Ciencias Biológicas.

Laboratorio de Bioquímica y Biología Celular.

Práctica: Determinación de metabolitos.

Grupo 5.

Equipo 1:

Abigail Severo Orozco.


Alejandra Sinai Cruz Leyva.
Dulce Yahaira Mendoza Tehuitzil.
Luis Angel Mejía Torres.
Luis Enrique Temoltzin Acosta.

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Laboratorio de Bioquímica y Biología Celular.

PRÁCTICA 4. DETERMINACIÓN DE GLUCOSA.

INTRODUCCIÓN

La glucosa es importante para el cuerpo, pues resulta ser la principal fuente de energía del
cuerpo para que se lleven a cabo muchas funciones dentro de él. La glucosa es un
carbohidrato, específicamente un monosacárido, que se absorbe en el intestino delgado,
está formado por carbono, hidrógeno y oxígeno.

Las personas obtienen la glucosa de alimentos como el pan, algunas frutas, y vegetales,
algunos otros en productos lácteos. Aunque la glucosa es importante, como muchas otras
cosas, lo más recomendable es consumirla de manera moderada, ya que los niveles de
glucosa que no son saludables o están fuera de control pueden tener efectos permanentes
y graves.

La prueba de glucosa en sangre mide los niveles de este metabolito en la circulación


sanguínea, de manera que los resultados nos dicen si la persona se encuentra en un estado
saludable (glucosa normal) o presenta alguna anomalía.

Un nivel de glucosa en la sangre inferior a 140 mg/dl (7.8 mmol/l) se considera normal. Un
nivel de glucosa en la sangre de entre 140 y 199 mg/dl (7.8 a 11 mmol/l) se considera
prediabetes. Niveles arriba de 200 mg/dl se consideran críticos, pues pueden comprometer
la salud de la persona y llevarla a un estado diabético.

La glucosa es un tipo de azúcar que se puede presentar de manera confusa en el cuerpo,


por lo que existen algunos síntomas que nos indican que los niveles de glucosa en sangre
no son normales, por ejemplo: el aumento de la sed, poliuria, visión borrosa, cansancio y
heridas que se cicatrizan lentamente.

Cuando comemos, la glucosa en la sangre tiende a elevarse, para ello hay una hormona
reguladora que es la insulina, producida por las células beta del páncreas, esta se encarga
de hacer que la glucosa de la sangre entre en los tejidos disminuye. Cuando la glucosa en
sangre está muy baja, en condiciones normales por el ayuno, se secreta otra hormona
llamada glucagón que hace lo contrario y mantiene normales los niveles de glucosa en
sangre.
La importancia de saber la cantidad de glucosa que está en el cuerpo es completamente
favorable ya que así se pueden prevenir ciertas enfermedades o simplemente saber en qué
condiciones está el cuerpo.

PROPÓSITOS DE APRENDIZAJE

Observar y valorar la concentración de glucosa en sangre a través de la prueba en


espectrofotómetro, para conocer la importancia de identificar niveles bajos, normales y altos
de este metabolito mediante la toma de sangre, para así realizar diagnósticos oportunos y
evitar complicaciones metabólicas.

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Laboratorio de Bioquímica y Biología Celular.

MATERIAL BIOLÓGICO

● Suero de los alumnos

MATERIAL

● Kit de determinación de glucosa


● Tubos de ensayo
● Racks con puntas para micropipeta de 100 µl
● Racks con puntas para micropipeta de 1000 µl
● Micropipeta de 100 µl
● Micropipeta de 1000 µl
● Contenedores para desecho

EQUIPO

● Espectrofotómetro
● Centrífuga clínica
● Micropipetas de diferentes volúmenes

DIAGRAMA DE FLUJO

PROCEDIMIENTO

Para realizar esta práctica, primero fue necesario ordenar el área de trabajo, para manejar
fácilmente los materiales a utilizar. De igual manera, las micropipetas se encontraban ya en

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los volúmenes deseados (1000 µl y 10 µl respectivamente). De igual manera, en el sistema


del espectrofotómetro se seleccionó la prueba número 20, correspondiente a glucosa.

1. Primero se tomó la micropipeta de 1000 µl, se le colocó la punta correspondiente y


se procedió a tomar una muestra del reactivo y se colocó con constancia en la pared
del tubo de ensayo. Después se tiró la punta en el bote RPBI.
2. Con la micropipeta del 10 µl fue el mismo procedimiento, se tomó el suero y se
agregó al tubo de ensayo en donde estaba ya el reactivo.
3. Se agitó levemente el tubo muestra para que se incorporaran bien las sustancias.
4. Se dejó incubar por 5 minutos la muestra.
5. Una vez pasado el tiempo, se colocó el tubo en la manguera del espectrofotómetro y
se presionó la placa de arranque para que el equipo succionara la cantidad
específica de muestra para realizar el análisis.
6. Finalmente, el espectrofotómetro arrojó en la pantalla el resultado del análisis.

RESULTADOS Y OBSERVACIONES.

Para esta práctica se analizaron muestras sanguíneas postpandriales para determinar los
valores de glucosa en sangre de la persona al momento de tomar la muestra, en este caso
se necesitó de micropipetas de 10 y 1000 µl para la toma de muestra y reactivo para ser
combinados y obtener el dato específico, que en este caso fue de 56.9 mg/dl lo cual es un
caso muy bajo (valores normales de 100 a 125 mg/dl) lo cual puede indicar una posible falla
al momento de realizar la mezcla de la muestra con el reactivo, posible contaminación que
pudo provocar estos resultados erróneos.

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DISCUSIÓN

Los resultados obtenidos durante esta práctica fueron bajos, pues el espectrofotómetro
arrojó una cantidad de 56.9 mg/dL de glucosa en sangre. Se podría tomar en cuenta el
estado del paciente muestra, que se encontraba en estado de ayuno de 4-5 horas, sin
embargo, el resultado sigue siendo bajo para una persona que se encuentre en ese estado
al momento de la muestra, por lo que los posibles sesgos son los siguientes:

● El periodo de incubación no cumplió el tiempo adecuado, por lo que la reacción


suero-reactivo no ocurrió adecuadamente, arrojando así un resultado bajo.
● Las cantidades de suero o de reactivo no fueron suficientes, esto debido a un mal
manejo de las micropipetas, dejando restos de líquido dentro de las puntas.
● La combinación reactivo-suero no se realizó correctamente (el paso de agitar
levemente el tubo muestra) por lo que no hubo una homogeneización de la muestra.

El análisis de los resultados obtenidos es importante para determinar los posibles errores
realizados durante la práctica, y así, corregir estos mismos para conseguir resultados más
exactos en pruebas futuras.

CONCLUSIÓN

La determinación de los niveles de glucosa en el plasma, sueros sanguíneos o líquidos


corporales conforman la primera línea de exploración de las alteraciones del metabolismo
hidrocarbonado y de este modo lograr identificar las enfermedades más frecuentes en
relación a los niveles de glucosa en el organismo y su alteración en el organismo, la
medición de la glucosa se reporta en métodos de óxido- reducción, condensación y
enzimáticos.

Tener como margen de investigación los niveles séricos o plasmáticos de los metabolitos de
la sangre, nos permitió conocer el pilar de la conducta a cumplir y dar un seguimiento que
nos permita dar un mejor diagnóstico.Es necesario evaluar la exactitud con que
practicamos la determinación de glucosa en comparación con la de otros métodos y
pudimos comprender y comparar la importancia que implica tener una técnica fiable y
avanzada, para reforzar el conocimiento teórico.

Para finalizar se logró demostrar que el método empleado tenía la exactitud necesaria para
determinar valores normales en los laboratorios clínicos y saber la importancia de las
alternativas técnicas, la evaluación del comportamiento de las muestras y la respuesta de
ensayo sobre los reactivos ante el material biológico.

BIBLIOGRAFÍA

● Nemours Teen Health. (2021). Glucosa (para Adolescentes) - Nemours KidsHealth. .


https://kidshealth.org/es/teens/glycogen.html
● McKee, T., McKee, J. R., Araiza Martínez, M. E., & Hurtado Chong, A. (2014).
Bioquímica: Las bases moleculares de la vida. 5a.ed. México D.F.: Mc Graw-Hill.

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● Rodwell, V., Bender, D., Botham, K., Kenelly, P. & Weil, P. (2019). Harper. Bioquímica
ilustrada. LANGE. 31ª Edición. McGraw-Hill

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PRÁCTICA 5. DETERMINACIÓN DE LACTATO DESHIDROGENASA

INTRODUCCIÓN

Esta prueba mide el nivel de la enzima lactato deshidrogenasa (LDH), también conocida
como deshidrogenasa del ácido láctico, en la sangre o en diferentes ocasiones en otros
líquidos del cuerpo.

La LDH mantiene y cumple una función importante en el proceso de la respiración celular


para la producción de energía por el cuerpo. Esta misma se encuentra en casi todos los
tejidos del cuerpo, entre ellos, los de la sangre, el corazón, los riñones, el cerebro y los
pulmones. Cuando se produce daño en estos tejidos, liberan LDH en el torrente sanguíneo
o en otros líquidos corporales. Cuando los niveles de LDH en la sangre o en otros líquidos
del cuerpo están altos, puede indicar que ciertos tejidos del cuerpo han sufrido daño por una
enfermedad o una lesión. Los valores bajos no tienen la más mínima significación.

La iniciativa de la actividad lactato deshidrogenasa (LDH) tiende a tener una gran variedad
de aplicaciones clínicas. Por el hecho de ser una enzima intracelular y así su elevación
puede ser índice de daño tisular con la consecuente liberación de ésta a la circulación. El
daño puede variar desde una simple anoxia con ligero daño celular y pérdida de citoplasma
hasta necrosis celular severa generando diversos grados de elevación de la actividad
enzimática.

El análisis LDH se utiliza, por lo general, para detectar si existen lesiones en el tejido. Estas
lesiones pueden ser graves (como en el caso de una lesión traumática) o crónicas
(causadas por una afección prolongada, como una enfermedad hepática o ciertos tipos de
anemia). También puede utilizarse para controlar las afecciones progresivas, como la
distrofia muscular y el VIH.

PROPÓSITOS DE APRENDIZAJE.

Observar y valorar la concentración sanguínea de la enzima Lactato Deshidrogenasa a


través de la prueba en espectrofotómetro, para determinar la importancia de la función de la
misma, así como las posibles causas y consecuencias en el metabolismo al existir una
deficiencia de la enzima.

MATERIAL BIOLÓGICO

● Suero de los alumnos

MATERIAL

● Kit de determinación de LDH


● Tubos de ensaye
● Racks con puntas para micropipeta de 10 µl
● Racks con puntas para micropipeta de 1000 µl

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● Micropipeta de 10 µl
● Micropipeta de 1000 µl
● Contenedores para desecho

EQUIPO

● Espectrofotómetro
● Centrífuga clínica
● Micropipetas de diferentes volúmenes

DIAGRAMA DE FLUJO.

PROCEDIMIENTO.

Para realizar esta práctica, primero fue necesario ordenar el área de trabajo, para manejar
fácilmente los materiales a utilizar. De igual manera, las micropipetas se encontraban ya en
los volúmenes deseados (1000 µl y 10 µl respectivamente). Se colocó al espectrofotómetro
se seleccionó la prueba de LDH.

1. Primero se tomó la micropipeta de 1000 µl, se le colocó la punta correspondiente y


se procedió a tomar una muestra del reactivo y se colocó con constancia en la pared
del tubo de ensayo. Después se tiró la punta en el bote RPBI.
2. Con la micropipeta del 10 µl fue el mismo procedimiento, se tomó el suero y se
agregó al tubo de ensayo en donde estaba ya el reactivo.

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3. Se agitó levemente el tubo muestra para que se incorporaran bien las sustancias.
4. El tiempo para realizar todo lo anterior fue de 2 minutos, esto con el propósito de
tener resultados certeros.
5. Una vez pasado el tiempo, se colocó el tubo en la manguera del espectrofotómetro y
se presionó la placa de arranque para que el equipo succionara la cantidad
específica de muestra para realizar el análisis.
6. Finalmente, el espectrofotómetro arrojó en la pantalla el resultado del análisis.

RESULTADOS Y OBSERVACIONES.

Para la determinación de LDH en sangre fue necesario una muestra en este caso
postprandial para determinar la cantidad de lactato deshidrogenasa en esta al igual que el
reactivo, usando micropipetas de 1000 µl y 10 µl, teniendo con esto un resultado de 234.2
v/l saliendo un poco elevado posiblemente debido al estado de alimentación de la persona
al momento de realizarse la muestra sanguínea, pudiese ser de igual manera alguna falla al
momento de poner el suero o la muestra.

DISCUSIÓN

El resultado de Lactato Deshidrogenasa del paciente muestra fue de 234 unidades por litro,
que demuestran niveles normales de la enzima en sangre, pues si tomamos en cuenta los

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niveles promedio de un adulto, que son de 140 a 280 unidades por litro, podemos decir que
nuestro paciente tiene una actividad constante y eficaz de la enzima.

Este resultado nos indica que la práctica se realizó correctamente, es decir, se usaron los
volúmenes adecuados de reactivo y suero, y el procedimiento se llevó a cabo dentro del
tiempo establecido.

Es importante mencionar que el tiempo fue vital en esta práctica, pues al tener solo 2
minutos para realizar todo el procedimiento, fue necesario mejorar la técnica del manejo de
las micropipetas, de manera que no quedaran restos en las puntas y se vaciara
completamente el contenido de las mismas, apretando correctamente los botones de la
micropipeta.

De igual manera, un factor importante es la combinación de reactivo-suero, que se realiza


mediante una pequeña agitación del tubo muestra, esto con la intención de tener mejores
resultados, cosa que nos funcionó, pues los análisis arrojaron una cantidad razonable de
LDH.

Sin embargo, si los resultados hubieran sido por arriba de las 280 u/L, esto significaría una
alta concentración de la enzima y por lo tanto una mayor actividad de la misma,
ocasionando así enfermedades como anemia, enfermedad de los riñones, enfermedad del
hígado, lesión muscular, entre otros.

CONCLUSIÓN

La prueba de LDH es importante para medir el nivel de lactato deshidrogenasa, también


llamado ácido láctico, es un estudio que analiza la sangre y otros componentes enzimáticos,
la LDH cumple con la importante función de la producción de energía del cuerpo ya que
se encuentra en todos los tejidos.Cuando los niveles de lactato se elevan puede ser un
marcador de daño en los tejidos por una enfermedad o lesión.

Practicando la prueba pudimos monitorear posibles problemas médicos, en caso de ver una
anomalía,juega un papel importante que nos permite dar un diagnóstico más acertado y ver
el avance del tratamiento.Aunque la prueba indique el daño , no expresa dónde y de este
modo podemos hacer uso de los conocimientos teóricos anatómicos para poder dar un
seguimiento y dar lugar, tipo y gravedad del daño.

Para finalizar fue estimulante a nivel práctico poder percibir de manera presencial la
combinación del reactivo- suero, que nos permitió identificar mejor el análisis de la
cantidad normal del LDH.

BIBLIOGRAFÍA

● SEQC. (2021). Lactato deshidrogenasa.


https://labtestsonline.es/tests/lactato-deshidrogenasa

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● Marco, J. (2016) ¿Qué significan los valores bajos de LDH?.


https://www.elmundo.es/elmundosalud/2008/04/08/dolordudasypreguntas/12076808
40.html
● McKee, T., McKee, J. R., Araiza Martínez, M. E., & Hurtado Chong, A. (2014).
Bioquímica: Las bases moleculares de la vida. 5a.ed. México D.F.: Mc Graw-Hill.
● Rodwell, V., Bender, D., Botham, K., Kenelly, P. & Weil, P. (2019). Harper. Bioquímica
ilustrada. LANGE. 31ª Edición. McGraw-Hill

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PRÁCTICA 6. DETERMINACIÓN DE TRIGLICÉRIDOS

INTRODUCCIÓN

Los triglicéridos tienden a ser ésteres del alcohol glicerol y ácidos grasos, principalmente se
encuentran en el tejido adiposo y son la principal forma de almacenamiento y transporte de
ácidos grasos.

Los triglicéridos tienen varias y diferentes funciones como proveer la energía que requieren
las células, almacenar la energía en depósito debajo de la piel (grasa subcutánea), aislar al
cuerpo para ayudar a mantener la temperatura y protegerlo de traumatismos.

Los triglicéridos generalmente se miden en miligramos (mg) de triglicéridos por decilitro (dl)
de sangre. En los adultos, los resultados generalmente se clasifican de la siguiente manera:

● Rango de triglicéridos normal o deseable: Menos de 150 mg/dl


● Rango de triglicéridos en el límite de la normalidad: De 150 a 199 mg/dl
● Rango de triglicéridos alto: De 200 a 499 mg/dl
● Rango de triglicéridos muy alto: 500 mg/dl o más

Los triglicéridos altos pueden contribuir al endurecimiento de las arterias o al engrosamiento


de las paredes arteriales (arteriosclerosis), lo que aumenta el riesgo de sufrir accidente
cerebrovascular, ataque cardíaco y cardiopatías.

PROPÓSITOS DE APRENDIZAJE

Determinar y analizar la cantidad de triglicéridos en sangre mediante una prueba realizada


en espectrofotómetro, con el fin de determinar posibles causas de los niveles de este
metabolito, así como también las consecuencias para la vida del individuo en cuestión y así
poder realizar diagnósticos y tratamientos oportunos que mejoren la calidad de vida de la
persona.

MATERIAL BIOLÓGICO

● Suero de los alumnos

MATERIAL

● Kit de determinación de triglicéridos


● Tubos de ensaye
● Racks con puntas para micropipeta de 100 µl
● Racks con puntas para micropipeta de 1000 µl
● Micropipeta de 100 µl
● Micropipeta de 1000 µl
● Contenedores para desecho

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EQUIPO

● Espectrofotómetro
● Centrífuga clínica
● Micropipetas de diferentes volúmenes

DIAGRAMA DE FLUJO.

PROCEDIMIENTO.

Para realizar esta práctica, primero fue necesario ordenar el área de trabajo, para manejar
fácilmente los materiales a utilizar. De igual manera, las micropipetas se encontraban ya en
los volúmenes deseados (1000 µl y 10 µl respectivamente). Se colocó al espectrofotómetro
y se seleccionó la prueba de triglicéridos.

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1. Primero se tomó la micropipeta de 1000 µl, se le colocó la punta correspondiente y


se procedió a tomar una muestra del reactivo y se colocó con constancia en la pared
del tubo de ensayo. Después se tiró la punta en el bote RPBI.
2. Con la micropipeta del 10 µl fue el mismo procedimiento, se tomó el suero y se
agregó al tubo de ensayo en donde estaba ya el reactivo.
3. Se agitó levemente el tubo muestra para que se incorporaran bien las sustancias.
4. Se dejó incubar la muestra durante 5 minutos.
5. Una vez pasado el tiempo, se colocó el tubo en la manguera del espectrofotómetro y
se presionó la placa de arranque para que el equipo succionara la cantidad
específica de muestra para realizar el análisis.
6. Finalmente, el espectrofotómetro arrojó en la pantalla el resultado del análisis.

RESULTADOS Y OBSERVACIONES.

Para esta práctica se debía analizar los triglicéridos de la muestra, tomándola con una
micropipeta de 1000 µl y mezclando con el reactivo una cantidad de 10 µl para dejarla
incubar aproximadamente 5 minutos, después de esto la muestra se tornaba un poco de
color rosado, lo cual significaba que había reaccionado de manera correcta con el suero, al
final se obtuvieron datos de 77.4 mg/dl de triglicéridos valores normales en personas sanas,
ya que no se deberían rebasar de 150 mg/dl de triglicéridos.

DISCUSIÓN

Los resultados obtenidos durante la práctica de triglicéridos fueron buenos y aceptables,


pues se tuvo que la cantidad de miligramos por decilitro de triglicéridos en sangre por parte
del paciente fue de 77.4, que si comparamos dentro de los parámetros normales (debajo de
150 mg/dL), podemos decir que el individuo en cuestión se encuentra sano.

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Otra de las conclusiones que nos pueden llevar a este resultado es que el paciente no había
ingerido alimentos al menos 2-4 horas antes de la toma de la muestra, por lo que sus
niveles de triglicéridos en sangre fueron relativamente normales, aunque podrían tomarse
como un poco bajos en comparación al promedio normal. Sin embargo, el resultado sigue
siendo favorable para el individuo.

Un posible sesgo en el procedimiento puede también arrojar ese resultado, pues existe la
posibilidad de que los reactivos y el suero no se hayan agregado correctamente (mal uso de
la micropipeta) o el tiempo de incubación no fue el correcto (menos o más de 5 minutos).

Sin embargo, a pesar de las posibles complicaciones pudieron haber ocurrido, los
resultados arrojados son aceptables y permiten realizar un diagnóstico oportuno del
paciente, por lo que se puede decir que la práctica se realizó correctamente.

CONCLUSIÓN

La prueba de triglicéridos nos permitió medir la cantidad que existe en nuestro torrente
sanguíneo, son un tipo de grasa que en grandes cantidades en nocivo para la salud, es
importante tener una dieta balanceada para prevenir enfermedades desarrolladas gracias al
exceso que se encuentra en el organismo, ya que se almacenan en las células y el cuerpo
puede reaccionar con infartos cerebrales o cardiovasculares en sus casos más críticos.

Es esencial para el análisis del perfil lipídico, y medir los niveles de colesterol, en especial del
LDL, es relevante que la prueba se tome en ayunas para tener una captura de los niveles
acertada, nos apoyat de los conocimientos teóricos respectos los niveles normales del rango de
triglicéridos en adultos menor a 150 mg/dl y el límite de 150 a 199 mg/dl, los niveles altos oscilan
de los 2000 q los 500 mg/dl.

Los niveles anormales aumentan el riesgo de llegar a casos críticos en el organismo, es


recomendable, bajar de peso y mantener un estilo de vida saludable en cuanto a la alimentación
y ejercitación física, en casos extremos se recurrirá a medicamentos reductores de
triglicéridos.Para finalizar los resultados fueron aceptables reflejando, un correcto procedimiento
práctico en el laboratorio por parte de nuestro equipo.

BIBLIOGRAFÍA

● Medline Plus. (2020) Prueba de triglicéridos.


https://medlineplus.gov/spanish/pruebas-de-laboratorio/prueba-de-trigliceridos/#:~:te
xt=La%20prueba%20del%20triglic%C3%A9ridos%
● McKee, T., McKee, J. R., Araiza Martínez, M. E., & Hurtado Chong, A. (2014).
Bioquímica: Las bases moleculares de la vida. 5a.ed. México D.F.: Mc Graw-Hill.
● Rodwell, V., Bender, D., Botham, K., Kenelly, P. & Weil, P. (2019). Harper. Bioquímica
ilustrada. LANGE. 31ª Edición. McGraw-Hill

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PRÁCTICA 7. DETERMINACIÓN DE COLESTEROL

INTRODUCCIÓN

El colesterol es una sustancia cerosa y parecida a la grasa que se encuentra en todas las
células de un cuerpo, este metabolito es producido por el hígado. También se encuentra en
algunos alimentos ingeridos, en mayor o menor proporción, de la carne, los huevos, el
hígado, etc.

El colesterol es un producto de origen animal y no existe en los alimentos de origen vegetal,


ya que estos no contienen colesterol, sino otro tipo de esteroles. Es importante mencionar
que el cuerpo necesita algo de colesterol para funcionar bien, pero si tiene demasiado
colesterol en la sangre, tiene un mayor riesgo de desarrollar enfermedad arterial coronaria.

Las tres cuartas partes del colesterol del cuerpo es producido por el mismo organismo. El
colesterol, como cualquier grasa, no se disuelve en el agua y por lo tanto tampoco en el
suero de la sangre, por lo que necesitan unirse a proteínas (lipoproteínas) para facilitar su
transporte.

El análisis de colesterol es uno de los análisis más frecuentemente utilizados en el


diagnóstico de las perturbaciones del metabolismo graso, muy especialmente en la
comprensión de algunos problemas clínicos como, por ejemplo, obesidad y arteriosclerosis.

Es importante tomar en cuenta los siguientes valores de colesterol total en sangre para
evitar complicaciones a la salud y tener un mejor estilo de vida.

● Normal: menos de 200 mg/dl


● Normal-alto: entre 200 y 240 mg/dl. Se considera hipercolesterolemia a los niveles
de colesterol total superiores a 200 mg/dl.
● Alto: por encima de 240 mg/dl

PROPÓSITOS DE APRENDIZAJE

Determinar y analizar los niveles de colesterol total en sangre, a través de la prueba en


espectrofotómetro, para determinar el estado de salud de la persona muestra, así como
para conocer el procedimiento del análisis de colesterol en sangre y la interpretación de
resultados.

MATERIAL BIOLÓGICO

● Suero de los alumnos

MATERIAL

● Kit de determinación de colesterol


● Tubos de ensaye
● Racks con puntas para micropipeta de 100 µl
● Racks con puntas para micropipeta de 1000 µl

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● Micropipeta de 100 µl
● Micropipeta de 1000 µl
● Contenedores para desecho

EQUIPO

● Espectrofotómetro
● Centrífuga clínica
● Micropipetas de diferentes volúmenes

DIAGRAMA DE FLUJO

PROCEDIMIENTO

Primero preparamos los materiales a utilizar, le colocamos la punta correcta a la micropipeta


y se destapa el tubo de ensayo que se utilizará.

1. Con la micropipeta de 1000 µl se toma una muestra del reactivo y se coloca con
constancia en la pared del tubo de ensayo. Se tira la punta.
2. Con la micropipeta del 100 µl se toma el suero y se le coloca en el tubo de ensayo.

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3. Se agita levemente para que se incorporen bien las sustancias.


4. Ponemos el tubo en el centrifugador por 5 minutos.
5. Ponemos la manguera hasta el fondo del tubo para que succione la muestra
6. Se presiona la palanca de arranque para que así comience a succionar.
7. En la pantalla se mostrarán los resultados

RESULTADOS Y OBSERVACIONES.

Para esta práctica de determinación de colesterol en sangre se tomó una muestra


postprandial para realizarla, con la ayuda de las micropipetas tanto de 1000 µl, como de 100
µl se tomó un poco de la muestra para poder ser mezclada con el reactivo de esta práctica y
así poder generar la reacción, en nuestro caso se obtuvieron valores de 85.8 mg/dl los
cuales son normales en una persona saludable ya que es recomendable contar con menos
de 200 mg/dl de este lípido en sangre, para la buena toma de muestra es necesario de una
buena técnica para así no tener el error de llegar a infectar la muestra y por lo tanto no tener
resultados correctos para su estudio.

DISCUSIÓN

Los resultados arrojados por el espectrofotómetro fueron de 85.8 mg/dL, una cantidad
relativamente baja si lo comparamos con los niveles normales de colesterol total en sangre

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(menos de 200 mg/dl). Podría decirse que este resultado se debe al estado de la persona,
pues se encontraba en un ayuno de 3-4 horas aproximadamente.

Sin embargo, el procedimiento pudo no haberse realizado correctamente, por lo que la


reacción suero-reactivo no ocurrió adecuadamente y no permitió una correcta lectura de la
muestra. Pensando en qué es lo que pudo haber ocurrido, nos dimos cuenta de que en el
paso de agitar el tubo muestra para mezclar el contenido, se perdió un poco de muestra, lo
que redujó su volumen y por lo tanto, los resultados se vieron afectados.

De igual manera creemos que las cantidades de suero y reactivo utilizadas no fueron las
suficientes, así como el tiempo de incubación, pues hizo falta tiempo para que ocurriera la
reacción.

Aunque, es importante tener en cuenta que si estos resultados son reales, indican que está
pasando algo en el paciente muestra, pues su cantidad de colesterol total es un poco baja y
puede desarrollar una hipolipidemia, ya sea por causas genéticas o factores asociados al
estilo de vida, por lo que será necesario aumentar en la dieta su consumo de colesterol a
través de alimentos que proporcionen este metabolito y mejorar su calidad de vida.

CONCLUSIÓN

La prueba del perfil de lípidos, es responsable de los niveles de colesterol miden la cantidad
que se encuentra en la sangre a partir de las sustancias cerosas del organismo, los alimentos
con demasiadas grasas pueden hacer que el hígado secrete más colesterol del necesario dando
así, dos tipos principales de lipoproteínas de baja densidad (LDL) y de alta densidad (HDL), los
niveles altos de LDL pueden poner en riesgo la mortalidad de nuestro pasiente que es el reflejo
de la acumulacion de la placa que sella a las arterial,si se bloquea el flujo la sangre del corazón
desencadena infartos, en el cerebro accidentes cerebrovasculares y en las extremidades una
enfermedad arterial periférica.

esta prueba nos permitió considerar los niveles de LDL, HDL, colesterol total y los triglicéridos,
niveles de VLDL, es importante que se tomara la prueba en estado de ayuno para tener una
mejor captura de frecuencia de las pruebas, en general los niveles bajos de LDL, y altos de
HDL reflejan un diagnóstico sano, un nivel en este estado garantiza dependiendo de la edad, el
historial familia que presenta una fase fuera de peligro.

Un nivel de colesterol sano puede depender de su edad, historial familiar y otros factores de
riesgo de enfermedad cardíaca, como niveles altos de triglicéridos. Su profesional de la salud
puede explicarle qué es lo mejor para usted.En caso contrario es importante prevenir con un
seguimiento de dieta saludable, peso acorde a la edad y talla y mantener actividad física
constante.Para finalizar que aunque el procedimiento presencial de esta prueba fue bien
realizado, pudimos inferir los factores de variación del volumen y tiempo,en cuanto a la práctica
de laboratorio y como repercute en nuestro diagnóstico basado en el conocimiento teórico
mencionado,.

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BIBLIOGRAFÍA

● Medline Plus. (2021) Niveles de Colesterol.


https://medlineplus.gov/spanish/cholesterollevelswhatyouneedtoknow.html
● McKee, T., McKee, J. R., Araiza Martínez, M. E., & Hurtado Chong, A. (2014).
Bioquímica: Las bases moleculares de la vida. 5a.ed. México D.F.: Mc Graw-Hill.
● Rodwell, V., Bender, D., Botham, K., Kenelly, P. & Weil, P. (2019). Harper. Bioquímica
ilustrada. LANGE. 31ª Edición. McGraw-Hill

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