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Universidad Bernardo OHiggins

Facultad de Salud, deporte y recreacin

INFORME DE BIOQUIMICA
Laboratorio N 4 Enzimologa

Integrantes: Fabiola Jara


Macarena Araya
Williams Knockaert
Docente:

Manuel Gutirrez

Ayudante: Gabriel Cunich


Asignatura: Lab. De Bioqumica
Fecha

Santiago, Chile

: 08/06/2015

INTRODUCCIN

El trmino de protena fue utilizado por primera vez por Gerardus Mulder
(1838), que provena del vocablo griego PROTERIOS, significante de nivel
primario.
Las protenas como grupo de molculas, son multifuncionales ya que poseen
una gran variedad de combinaciones en la composicin y secuencia de sus
aminocidos.
La composicin de la saliva es parecida a la del plasma sanguneo, ya que
posee una gran cantidad de agua, iones de cloruro, bicarbonato, fosfato, moco,
enzimas (ptialina o amilasa que hidroliza el almidn), estaterina y otras
sustancias (inmunoglobulinas, transferrina y lactoferrina), adems del calcio
saturado.
La saliva cumple las funciones de mantener el pH del medio, ayuda a la
cicatrizacin, cumple algunas funciones como: digestiva, gustativa, lubricativas,
de equilibrio y de proteccin.

Referencia: Tratado de qumica patolgica aplicada a la medicina prctica. Bequerel A. 1860.

OBJETIVOS

Generales:
-

Demostrar la accin de la amilasa sobre el almidn

Especficos:
-

Identificar de forma cualitativa las propiedades de la amilasa salival


Conocer el PH y temperatura optima con la que la actividad enzimtica
tenga mejor rendimiento
Demostrar que el pH y la temperatura influyen en la accin de la amilasa

PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
PROCEDIMIENTO N 1, intento 1:
TUBOS
1

CONTENIDO
2ml de saliva, 1ml
cloruro de sodio, 1ml
pH 7.0, 2ml de
almidn
2ml de saliva, 1ml
cloruro de sodio, 1ml
pH 7.0, 2ml de
almidn
2ml de saliva, 1ml
cloruro de sodio, 1ml
pH 7.0, 2ml de
almidn
2ml de saliva, 1ml
cloruro de sodio, 1ml
pH 7.0, 2ml de
almidn
2ml de saliva, 1ml
cloruro de sodio, 1ml
pH 7.0, 2ml de
almidn

TEMPERATURA
0C

LUEGO
Se esper por 15
minutos y se agreg
2 gotas de lugol

37 C

Se esper por 15
minutos y se agreg
2 gotas de lugol

100 C

Se esper por 15
minutos y se agreg
2 gotas de lugol

T ambiente

Se esper por 15
minutos y se agreg
2 gotas de lugol

T ambiente

Se esper por 15
minutos y se agreg
2 gotas de lugol

RESULTADOS:

Figura 1: Se observa los 5 tubos a efectos en diferentes temperaturas,

DISCUSIN:
Al actuar los tubos con el lugol a diferentes temperaturas, no se pudieron
observar grandes diferencias a nivel de actividad enzimtica ya que en este
caso, el lugol que nos dara la funcin de indicador, fue insuficiente para medir
las diferenciaciones enzimticas.

PROCEDIMIENTO N 1, intento 2:

TUBO
1

CONTENIDO
2ml de saliva, 1ml
cloruro de sodio,
1ml pH 7.0, 2ml de
almidn
2ml de saliva, 1ml
cloruro de sodio,
1ml pH 7.0, 2ml de
almidn
2ml de saliva, 1ml
cloruro de sodio,
1ml pH 7.0, 2ml de
almidn
2ml de saliva, 1ml
cloruro de sodio,
1ml pH 7.0, 2ml de
almidn
2ml de saliva, 1ml
cloruro de sodio,
1ml pH 7.0, 2ml de
almidn

TEMPERATURA
0C

37 C

100 C

T ambiente

T ambiente

LUEGO
Se esper por 15
minutos y se
agreg 2 gotas de
lugol
Se esper por 15
minutos y se
agreg 2 gotas de
lugol
Se esper por 15
minutos y se
agreg 2 gotas de
lugol
Se esper por 15
minutos y se
agreg 2 gotas de
lugol
Se esper por 15
minutos y se
agreg 2 gotas de
lugol

RESULTADOS

Figura 2: En la imagen se observan los tubos una vez transcurridos 15 minutos a diferentes
temperaturas

DISCUSIN
Conforme al anlisis simple del color de los tubos pudimos observar que los
tubos a medida que la temperatura en que se expusieron aumentaba o
disminua, stos presentaban diversos cambios en su actividad enzimtica.
En el tubo n 1 la reaccin enzimtica fue incompleta ya que el fro impidi la
actividad enzimtica. Los tubos n 2 y 4 fue donde hubo mayor actividad
enzimtica, de color incolora porque reaccion con el almidn a una
temperatura ptima. En el tubo n 3 se torn azul se debe a que el lugol en
presencia de almidn cambia de color, por lo tanto la amilasa de desnaturaliza
y no se puede obtener actividad enzimtica, mientras que el tubo n 5, present
actividad enzimtica, ya que su color era morado intenso.
Podemos decir entonces que mientras ms baja sea la temperatura, ms lento
se ejerce la actividad enzimtica, al aumentar la temperatura esto hace que la
muestra se desnaturalice y no ejerza actividad; pero en los rangos de
temperatura ambiente, la actividad enzimtica se ejerce con gran desempeo.

PROCEDIMIENTO N 2

TUBOS

CONTENIDO

pH

TEMPERATURA

TIEMPO
DE
ESPERA

AGREGAMOS

1ml de
saliva,1ml
cloruro de
sodio,2ml
almidn
1ml de
saliva,1ml
cloruro de
sodio,2ml
almidn
1ml de
saliva,1ml
cloruro de
sodio,2ml
almidn
1ml de
saliva,1ml
cloruro de
sodio,2ml
almidn

4.0

T ambiente

15 minutos

1 gota de lugol

6.0

T ambiente

15 minutos

1 gota de lugol

7.0

T ambiente

15 minutos

1 gota de lugol

8.0

T ambiente

15 minutos

1 gota de lugol

RESULTADOS

Figura 3: Resultados experimentales obtenidos durante la determinacin de pH ptimo de la


enzima amilasa salival

DISCUSIN

Para el tubo n 1 de ensayo que estaba con una solucin a pH 4.0 observamos
que no hubo una actividad enzimtica ya que la coloracin fue de color negro,
esto se debe a que al llevarlo a pH 4 se encontrara muy lejos de su pH optimo
ya que es muy acido para que la enzima pueda desarrollar una actividad
cataltica.
En el tubo n 2 de pH 6.0 se observa igualmente que el en primer tubo pero
un color ms claro que le anterior.
En el tubo n 3 de pH 7.0 se observa que hay actividad enzimtica
presentndose una solucin incolora, lo que quiere decir que la enzima a
degrado el almidn, esto nos indica que este pH es ptimo para esta enzima y
lo podemos corroborar con la teora pues dice que el pH ptimo para la amilasa
est en un rango de 6,8 - 7,4.
En el tubo n 4 de pH 8.0 la coloracin fu transparente, para este caso lo
encontramos un poco ms entendible ya que esta se acerca ms a el rango
optimo que tiene la amilasa por lo tanto era ms probable que esta si diera
positiva.

CONCLUSION

El objetivo de esta prctica se cumpli adecuadamente, ya que se pudo


observar la hidrolisis enzimtica del almidn, la cual se llevaba a cabo por la
presencia de la enzima amilasa que se encuentra en la saliva, quedando claro
que estas enzimas es muy importante ya que os ayuda a poder sintetizar
grandes molculas de almidn en unas ms pequeas, para que
posteriormente puedan ser digeridas.
La actividad de la enzima , en nuestro caso de la amilasa salival se ver
limitada al ser expuesta a temperaturas muy elevadas as como tambin al ser
expuestas a medios muy cido o muy bsicos , lo que conlleva a una
desnaturalizacin de la misma.

BIBLIOGRAFIA

1. Quiones Zahira, MD. Identificacin de Carbohidratos y Proteinas.


Santiago, Area de Ciencias Biologicas. Dpto de Medicina. Pdf
2. http://www.pucmmsti.edu.do/cienciasfisiologicas/BQMA-SIB2.PDF
3. http://es.scribd.com/doc/2309987/Proteinas-y-sus-reacciones
4. http://www.uco.es/organiza/departamentos/bioquimica-biol-

mol/pdfs/10%20CROMATOGRAF%C3%8DA%20PAPEL%20AAs.pdf

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