MICROBIOLOGIA GENERAL 715

Laboratorio
TP N° 20: Pruebas Bioquímicas
Kits: Enterotub y API

Dra. Inés Rebagliati

 Kit comerciales:

Enterotub (Roche)

ENTEROTUB II-BBL (Diagnostic Systems)

EnteroPluri Test (Liofilchem)

 Kit comerciales: ENTEROTUB

Es un sistema de identificación listo para usar que se emplea

en la identificación de la familia Enterobacteriaceae y otros
bacilos gram negativos con resultado negativo a la oxidasa.

Es un tubo de plástico integrado con compartimientos

formado por 12 medios diferentes, que permiten la
determinación de 15 reacciones bioquímicas:
glucosa, producción de gas de glucosa, descarboxilasa de
lisina, descarboxilasa de ornitina, H2S, indol, adonitol,
lactosa, arabinosa, sorbitol, Voges-Proskauer (VP), dulcitol,
desaminasa de fenilalanina (PA), urea y citrato.
 Kit comerciales
Enterotube
La guía o aguja de inoculación adjunta permite la
inoculación de todos los compartimientos en un solo
paso, picando desde una a varias colonias individuales
aisladas.
La combinación de reacciones resultante, junto con la
guía de interpretación “libro de códigos o biocode”,
permite la identificación de la flia. Enterobacteriaceae
con importancia clínica (aproxi´ 25 especies).
Kit comerciales: ENTEROTUB
Procedimiento de siembra:
Kit comerciales: ENTEROTUB
BBL-Enterotube II:
BNNF: Bacilos Negativos No Fermentativos
Kit comerciales:
Sistema A. P. I ®
Sistema Multipruebas para la Identificación de
Microorganismos
BioMérieux
 Características:
• Resultados confiables o fiables
•Solución integral
•Fácil y simple de usar
•Alta calidad
•Rápida
•Permite el perfil bioquímico completo de la cepa
•Rendimiento mundialmente conocido
•Bases de datos integral de identificación completos
•Nuevo software apiweb ™
•para cualquier momento y lugar de identificación
 Descripción general:
Es un sistema miniaturizado de
las pruebas bioquímicas convencionales,
que se emplean en la identificación de microorganismos.

Se trata de microtubos o celdas con sustratos deshidratados

a los que se les agrega una suspensión bacteriana de una cepa pura
aislada de un cultivo de 24 hs.
y se incuban durante 18 a 24 hs a 35-37°C.
En cada microtubo se halla incorporado un sistema indicador.
 1. Luego de la incubación, el sistema es afectado por el
crecimiento y metabolismo de las cepas bacterianas

2. + reactivos de revelación o detección (según la prueba).

3. Se registran los resultados obtenidos en cada microtubo.

4. Se vuelcan los resultados en la guía o tabla de datos,

identificando la cepa en cuestión (género y especie)
 Instrucciones para su uso:
1- Agregar 5 ml de agua en la base (o tapa) de la caja antes
de sacar la tira, para mantener una atmósfera húmeda
durante la incubación
2- Picar con ansa una colonia aislada y resuspender en un
tubo con solución fisiológica estéril y agitar con vortex.
3- Ubicar la tira en la bandeja con agua
4- Sembrar muy suavemente la suspensión bacteriana con
pipeta Pasteur.
 Instrucciones para su uso:

4* - Tener en cuenta que cada microtubo está compuesto por un tubo y

una cúpula y la cantidad de inóculo a agregar a cada uno depende del
tipo de prueba.
Para el llenado se inclina la bandeja y se apoya la punta de la pipeta
contra un costado de la cúpula.
Cada uno de los 20 microtubos se llenan hasta el volumen del tubo.
Los tubos con las pruebas: CIT,VP, y GEL se llenan totalmente (tubo +
cúpula).
Los que tienen los nombres de las pruebas subrayados se llenan hasta
el volumen del tubo y luego se completa el volumen de la cúpula con
aceite vegetal o glicerina o vaspar (anaeróbicos), URE, H2S, etc.
 Instrucciones para su uso:
5- Incubar entre 18 y 24 hs (1° lectura) y 48 hs (2° lectura) a
35-37°C
2- Luego de incubar, agregar los reactivos en los microtubos
de las pruebas que necesiten revelado.
3- Se anotan los resultados obtenidos
4- Volcar los mismos en la tabla correspondiente para la
identificación de la cepa.
 Instrucciones para su uso:
2- Picar con ansa una colonia aislada y resuspender en un
tubo con solución fisiológica estéril y agitar con vortex.
3- Ubicar la tira en la bandeja con agua
 Instrucciones para su uso:
4- Sembrar muy suavemente la suspensión bacteriana con
pipeta Pasteur.
 Instrucciones para su uso:
Los tubos con las pruebas: CIT,VP, y GEL se llenan totalmente (tubo +
cúpula).
Los que tienen los nombres de las pruebas subrayados se llenan hasta
el volumen del tubo y luego se completa el volumen de la cúpula con
aceite vegetal o glicerina o vaspar (anaeróbicos)
 Instrucciones para su uso:
Poner la tira en su propia cámara húmeda de incubación. Previamente poner
agua en los alvéolos de la cámara para proporcionar una atmósfera húmeda
durante la incubación.
Incubar.
 Instrucciones para su uso:
La lectura de los resultados se lleva a cabo por comparación de los colores
de cada pocillo con los de las tablas de lectura.
Y anotando el resultado como positivo o negativo.
 La lectura de las pruebas que necesitan revelado:
Oxidasa: Añadir una gota del reactivo (tetrafenilendiamina) recién preparado.
Positivo = color azul que aparece inmediatamente.
Indol: añadir gota de reactivo de Kovacs. Anillo rojo (+).
TDA: Añadir una gota de FeCl3 10 %. Positivo = color marrón oscuro.
V-P: Añadir una gota del reactivo 1 (KOH al 40%) y una gota del reactivo 2
(C2 H5 OH). Positivo = color rosa fuerte o rojo en 5-10 minutos
Perfil numérico e identificación:
Tablas de lectura
con coloraciones
positivas y
negativas:
Tablas de lectura con coloraciones positivas y negativas:
Batería de pruebas incluida
Tablas de lectura con coloraciones positivas y negativas:
Batería de pruebas incluida
Perfil numérico:
 API 20 E
contiene 20 pruebas bioquímicas para bacterias Entéricas
API 20 NE
contiene 20 pruebas bioquímicas para bacterias No Entéricas
API 20 A
contiene 20 pruebas bioquímicas para Anaerobios
API-STAPH
contiene pruebas bioquímicas para Staphilococcus
API-STREP
contiene pruebas bioquímicas para Streptococcus
API 50CH
contiene 50 pruebas bioquímicas fermentación de Hidratos de
Carbono para identificación de Bacillus
Muchas Gracias por tu atención !!

“ La luna es un recordatorio de que

no importa en qué fase te encuentres…
Siempre estás complet@ ”