BIOMÉRIEUX

20500 07468 - O - 2021/04

®
API STAPH

USO PREVISTO
API® STAPH es un sistema cualitativo estandarizado para la identificación de los géneros Staphylococcus, Micrococcus
y Kocuria. Utiliza pruebas miniaturizadas y una base de datos especialmente adaptada.
La inoculación y la lectura de la galería se realizan manualmente y la identificación se obtiene mediante un software de
identificación.
La lista completa de las bacterias que pueden identificarse utilizando este sistema se encuentra en el Documento
técnico de información sobre el software de identificación.
PRINCIPIO
La galería API® STAPH consta de 20 microtubos que contienen sustratos deshidratados. Estos microtubos se inoculan
con una suspensión bacteriana, preparada en API® STAPH Medium, que reconstituye las pruebas.
Las reacciones producidas durante el periodo de incubación se traducen en cambios de color espontáneos o revelados
mediante la adición de reactivos.
Las reacciones se leen según la tabla de lectura y la identificación se obtiene mediante un software de identificación
(ATB™ NEW o APIWEB™).
CONTENIDO DEL KIT
ENVASE DE 25 PRUEBAS
• 25 galerías API® STAPH (STR)
• 25 ampollas de API® STAPH Medium (MED STAPH)
• 25 cámaras de incubación (INCUB)
• 25 hojas de resultados (SHEET)
• 1 Ficha técnica suministrada en el equipo o a descargar en www.biomerieux.com/techlib.

COMPOSICIÓN
Composición de la galería
La composición de la galería puede verse en la Tabla de lectura de la presente ficha técnica.
Composición del medio

API® STAPH Medium Extracto de levadura 0,5 g

6 mL Bactopeptona (de origen bovino/ 10 g
porcino)
NaCl 5g
Solución de oligoelementos 10 mL
Agua desmineralizada para hacer 1000 mL
pH: 7,0-7,4

Las cantidades indicadas se pueden ajustar en función de los títulos de las materias primas.
REACTIVOS Y MATERIAL NECESARIOS PERO NO SUMINISTRADOS
Reactivos
• Aceite de parafina (Ref. 70100)
• McFarland Standard (Ref. 70900) n.º 0,5 en la escala.
• Reactivos:
◦ VP 1 + VP 2 (Ref. 70422)
◦ NIT 1 + NIT 2 (Ref. 70442)
◦ ZYM A (Ref. 70494)
◦ ZYM B (Ref. 70493)

bioMérieux SA Español - 1
API® STAPH
07468 - O - 2021/04 - es

Materiales
• Pipetas o PSIpettes
• Gradillas para ampollas
• Protege-ampollas
• DENSIMAT (Ref. 99234) (opcional)
• Equipo general de laboratorio de bacteriología
• Software de identificación ATB™ NEW o APIWEB™ (consultar a bioMérieux)

PRECAUCIONES DE UTILIZACIÓN
• Únicamente para diagnóstico in vitro y control microbiológico.
• Exclusivamente para uso profesional. Está previsto que esta prueba la utilicen exclusivamente profesionales de
laboratorio formados.
• Para EE. UU. solamente: Precaución: Las leyes federales de EE. UU. restringen la venta y distribución de
este dispositivo a médicos o personas autorizadas por médicos.
• Este equipo contiene compuestos de origen animal. El origen y/o el estado sanitario de los animales no pueden
garantizar de forma absoluta que estos productos no contienen ningún agente patógeno transmisible; se
recomienda manipularlos con las precauciones de uso relativas a los productos potencialmente infecciosos (no
ingerir; no inhalar).
• Todas las muestras, cultivos microbianos y productos inoculados deberán considerarse infecciosos y manipularse
adecuadamente. Se debe seguir una técnica aséptica y tomar las precauciones habituales para la manipulación del
grupo bacteriano que se esté estudiando durante todo este procedimiento. Consulte CLSI M29-A, “Protection of
Laboratory Workers from Occupationally Acquired Infections” (Protección de los trabajadores de laboratorio contra
las infecciones adquiridas en el trabajo); Directrices aprobadas, revisión actual. Para obtener precauciones
adicionales de manipulación, consulte “Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories” (Bioseguridad en
laboratorios microbiológicos y biomédicos), CDC/NIH, última edición, o la normativa vigente en cada país.
• No utilizar los reactivos después de la fecha de caducidad.
• Antes de usar, comprobar que el envase y su contenido están intactos.
• No utilizar galerías que hayan sufrido una alteración física: por ejemplo, cúpula deformada o la bolsa de
deshidratante abierta.
• La galería es de un solo uso y no debería reutilizarse.
• Antes de su utilización, dejar que los reactivos alcancen la temperatura ambiente.
• Las prestaciones técnicas presentadas en el Documento técnico se han obtenido con la metodología indicada en
esta ficha técnica. Toda desviación de dicha metodología puede alterar los resultados.
• La interpretación de los resultados de la prueba se debe realizar teniendo en cuenta el contexto clínico o de otro
tipo, el origen de las muestras, los aspectos macro y microscópicos de la colonia y, eventualmente, los resultados
de otras pruebas, particularmente del antibiograma.
• Se recomienda realizar una prueba de control de calidad cuando se abre una nueva ampolla de reactivo ZYM B.

CONDICIONES DE ALMACENAMIENTO
Las galerías y los medios se conservan a +2 °C/+8 °C hasta la fecha de caducidad indicada en el envase.
RECOGIDA Y PREPARACIÓN DE MUESTRAS
La galería API® STAPH no debe usarse directamente a partir de muestras de origen clínico o de otro tipo.
Los microorganismos que se desean identificar se deben aislar primero en un medio de cultivo adecuado conforme a las
técnicas microbiológicas estándar.
INSTRUCCIONES DE USO
Preparación de la galería
1. Preparar una cámara de incubación (fondo y tapa) y repartir aproximadamente 5 mL de agua destilada o
desmineralizada [o cualquier tipo de agua sin aditivos o derivados susceptibles de liberar gases (por ejemplo, Cl2,
CO2)] en los alvéolos del fondo para crear una atmósfera húmeda.
2. Anotar la identificación de la muestra en la lengüeta larga de la bandeja. (No hacerlo sobre la tapa, ya que esta
podría extraviarse durante la manipulación).
3. Retirar la galería de su envase justo antes de su uso.
4. Colocar la galería en la cámara de incubación.
Preparación del inóculo
1. Subcultivar el organismo en agar Columbia con sangre u otro agar compatible 18-24 horas a +36 °C ± 2 °C.
2. Comprobar que la cepa pertenece a la familia Micrococcaceae (morfología, tinción Gram, catalasa) y también
comprobar que el cultivo sea puro.

bioMérieux SA Español - 2
API® STAPH
07468 - O - 2021/04 - es

3. Abrir una ampolla de API® STAPH Medium.

Abrir las ampollas con cuidado del modo siguiente:
• Colocar la ampolla en el protege-ampollas.
• Mantener el conjunto en posición vertical en una mano (tapón blanco hacia arriba).
• Presionar bien el tapón.
• Ejercer una presión horizontal con el pulgar sobre la parte estriada del tapón para romper la
extremidad de la ampolla.
• Sacar la ampolla del protege-ampollas y conservar el mismo para posteriores empleos.
• Quitar cuidadosamente el tapón.

4. A partir de colonias aisladas, preparar un inóculo homogéneo en API® Staph Medium con una turbidez equivalente
a 0,5 de McFarland: comparar con un control de turbidez (McFarland Standard) o medir utilizando el DENSIMAT.
Utilizar preferentemente cultivos jóvenes (18-24 horas). Esta suspensión se debe utilizar inmediatamente.
Inoculación de la galería
1. Usando una pipeta o una PSIpette, llenar los microtubos con el API® Staph Medium inoculado. Llenar solo la parte
del tubo de los microtubos, no las cúpulas (llenar ligeramente por debajo de los microtubos). Para evitar la formación
de burbujas en la base de los tubos, inclinar la galería ligeramente hacia adelante y colocar la punta de la pipeta o
PSIpette contra el lado de la cúpula.
2. Asegurar la anaerobiosis en las pruebas de ADH y URE llenando las cúpulas con aceite mineral para formar un
menisco convexo.
3. Cerrar la cámara de incubación.
4. Incubar a +36 °C ± 2 °C durante 18-24 horas en aerobiosis.
LECTURA E INTERPRETACIÓN
Lectura de la galería
1. Después del periodo de incubación, revelar las reacciones añadiendo 1 gota de cada uno de los siguientes reactivos
y luego leer todas las reacciones consultando la Tabla de Lectura al final de las instrucciones de uso:
• Prueba de VP: Reactivos VP 1 y VP 2: Esperar 10 minutos. Un color violeta-rosa indica una reacción positiva.
Un color rosáceo o rosa pálido obtenido después de 10 minutos debe considerarse negativo.
• Prueba NIT: Reactivos NIT 1 y NIT 2. Esperar 10 minutos. Un color rojo indica una reacción positiva.
• Prueba PAL: Reactivos ZYM A y ZYM B (*). Esperar 10 minutos. Un color violeta indica una reacción positiva.
Un color rosado-beige o un color violeta muy pálido obtenido después de 10 minutos debe considerarse
negativo.
(*) Se recomienda controlar cada ampolla de ZYM B antes de usarla por primera vez. Para ello, se recomienda
utilizar la cepa ATCC® 700404™ indicada en el apartado de Control de calidad para eliminar cualquier reactivo
defectuoso.
2. Anotar los resultados en la hoja de resultados.
Prueba de resistencia a la lisostafina
Determinar la resistencia a la lisostafina de acuerdo con las recomendaciones del fabricante.
Esta prueba constituye la 21ª prueba de la galería. Se considera positiva si se determina la resistencia a la lisostafina.
Interpretación

Determinación del perfil numérico

En la hoja de resultados, las pruebas se separan en grupos de tres y se asigna para cada una el valor 1, 2 o 4.
Sumando los números que corresponden a reacciones positivas de cada grupo, se obtienen 7 cifras que constituyen el
perfil numérico.

Identificación
Esto se realiza utilizando el perfil numérico con el software de identificación APIWEB™ o ATB™ NEW. Para más
información sobre el perfil numérico, consulte el software de identificación.
• Los sistemas API® identifican un microorganismo mediante una metodología basada en las características de los
datos y la información que se conozca sobre el microorganismo y las reacciones que se están analizando. Se han
recogido suficientes datos de cepas conocidas para poder determinar las reacciones características de las especies
declaradas ante un conjunto de sustancias bioquímicas discriminantes. Si no se reconoce un patrón de
identificación único, se proporciona una lista de posibles microorganismos o se determina que la cepa no se
encuentra dentro del ámbito de la base de datos. El comentario del software o el informe impreso del laboratorio

bioMérieux SA Español - 3
API® STAPH
07468 - O - 2021/04 - es

contiene sugerencias sobre pruebas complementarias que puedan ser necesarias para llevar a cabo la
identificación. Si las pruebas no son suficientes para llevar a cabo la identificación, deberán consultarse las
referencias microbiológicas y bibliográficas habituales.
• Ciertas especies pueden pertenecer a un taxón mixto. Esto ocurre cuando el patrón biológico es el mismo para los
taxones indicados. Se pueden utilizar pruebas complementarias para separar los taxones mixtos.

Las pruebas complementarias se especifican en el Documento técnico.

A continuación, se muestra un ejemplo de un perfil numérico.

6 706 113 Staphylococcus epidermidis

bioMérieux SA Español - 4
API® STAPH
07468 - O - 2021/04 - es

PROCEDIMIENTO

bioMérieux SA Español - 5
API® STAPH
07468 - O - 2021/04 - es

TABLA DE LECTURA

PRUEBAS COMPONENTES CANT REACCIONES/ENZIMAS RESULTADOS

ACTIVOS (mg/cúp.) NEGATIVO POSITIVO
0 Sin sustrato Control negativo Rojo –
GLU D‑glucosa 1,56 (Control positivo) (D‑glucosa)
FRU D-fructosa 1,4 Acidificación (D-fructosa)
MNE D-manosa 1,4 Acidificación (D-manosa)
MAL D-maltosa 1,4 Acidificación (maltosa)
LAC D-lactosa 1,4 Acidificación (lactosa)
(origen bovino) Rojo* Amarillo

TRE D-trehalosa 1,32 Acidificación (D-trehalosa)

MAN D-manitol 1,36 Acidificación (D-manitol)
XLT Xilitol 1,4 Acidificación (xilitol)
MEL D-melibiosa 1,32 Acidificación (D-melibiosa)
NIT 1 + NIT 2 / 10 min
NIT Nitrato potásico 0,08 Reducción de los nitratos en Incoloro rosa Rojo
nitritos pálido
ZYM A + ZYM B / 10 min
PAL ß-naftil fosfato 0,0244 Fosfatasa alcalina Incoloro/beige- Violeta
rosado/violeta muy
pálido
VP 1 + VP 2 / 10 min
VP Piruvato sódico 1,904 Producción de acetil-metil- Incoloro rosa Violeta-rosa
carbinol (voges proskauer) pálido
RAF D-rafinosa 1,56 Acidificación (rafinosa)
XYL D-xilosa 1,4 Acidificación (xilosa)
SAC D-sacarosa 1,32 Acidificación (sacarosa)
(sucrosa)
Rojo Amarillo
MDG Metil-α D- 1,28 Acidificación (metil-α D-
glucopiranósido glucopiranósido)
NAG N-acetil- 1,28 Acidificación (N-acetil-
glucosamina glucosamina)
ADH L-arginina 1,904 Arginina dihidrolasa Amarillo Naranja/rojo
URE Urea 0,76 Ureasa Amarillo Rojo-violeta

Las pruebas de acidificación deben compararse con los controles negativos (0) y positivos (GLU).
* Cuando MNE y XLT son precedidas o seguidas de pruebas positivas, entonces una prueba de color naranja debe
considerarse negativa
Las cantidades indicadas se pueden ajustar en función de los títulos de las materias primas.
Ciertas cúpulas contienen componentes de origen animal, especialmente peptonas.
CONTROL DE CALIDAD
Los medios, galerías y reactivos se someten a controles de calidad sistemáticos durante las diferentes etapas de su
fabricación.
Se puede utilizar un control de calidad optimizado para confirmar el rendimiento aceptable del sistema después del
envío y el almacenamiento. Este control puede realizarse siguiendo las instrucciones y los criterios esperados a
continuación, en relación con el documento de referencia CLSI M50-A Quality Control for Commercial Microbial
Identification Systems" (M50-A Control de calidad para sistemas comerciales de identificación microbiana del CLSI®).
Las pruebas se pueden realizar utilizando Staphylococcus capitis ATCC® 35661™ para evaluar las prestaciones técnicas
de la prueba XYL. Las pruebas realizadas por bioMérieux han demostrado que las pruebas XYL son las más lábiles de
la galería. Al probar la galería, puede utilizarse Staphylococcus capitis ATCC® 35661™ para detectar la degradación.

bioMérieux SA Español - 6
API® STAPH
07468 - O - 2021/04 - es

Para aquellos usuarios que tengan que realizar pruebas de control de calidad exhaustivas con la galería, se deben
utilizar las siguientes cepas para demostrar una reactividad positiva y negativa en la mayoría de las pruebas.
1. Staphylococcus capitis ATCC® 35661™
2. Staphylococcus xylosus ATCC® 700404™
3. Staphylococcus lentus ATCC® 700403™
0 GLU FRU MNE MAL LAC TRE MAN XLT MEL
1 – + + + – – – V – –
2 – + + + + + + + + –
3 – + + + + + + + V +

NIT PAL VP RAF XYL SAC MDG NAG ADH URE

1 + – + – – –* – – + –
2 + + V – + + – + – +
3 + V V + + + + + – –

* Este resultado puede variar dependiendo del medio de cultivo utilizado.

Perfiles obtenidos tras el cultivo de las cepas en agar sangre de cordero.
Es responsabilidad del usuario realizar el control de calidad conforme a las normativas locales pertinentes.
Las cepas de control de calidad se eligen por su capacidad de reacción y no por su capacidad de identificación.
Por lo general, las cepas de control de calidad se identifican con un solo taxón, con baja discriminación o con taxones
mixtos.
Puede ocurrir que una cepa ATCC® se identifique de forma errónea cuando todas las reacciones de control de calidad
esperadas son correctas.
Nota: Como los nombres de las especies pueden cambiar con el tiempo, consulte la taxonomía oficial para conocer las
últimas actualizaciones.
DOCUMENTO TÉCNICO: INFORMACIÓN RELACIONADA CON EL NUEVO SOFTWARE DE IDENTIFICACIÓN
APIWEB™ Y ATB™
Los siguientes apartados están completamente documentados en el Documento Técnico:
• Límites de la prueba
• Tabla de identificación (%)
• Prestaciones técnicas

Para consultar el Documento técnico, proceda de la siguiente manera:

• APIWEB™
◦
Haga clic en
◦ Haga clic en “DOCUMENTO TÉCNICO”.
• ATB™ NEW:
◦ Abra el “DOCUMENTO TÉCNICO” disponible en su CD-ROM de Documentación.

ELIMINACIÓN DE LOS RESIDUOS

Eliminar tanto los reactivos usados como los no utilizados, así como los materiales desechables contaminados
siguiendo los procedimientos relativos con los productos infecciosos o potencialmente infecciosos.
Es responsabilidad de cada laboratorio la gestión de los desechos y efluentes que produce según su naturaleza y
peligrosidad, garantizando (o haciendo garantizar) su tratamiento y eliminación, según las reglamentaciones aplicables.
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
1. BALDELLON CH., MEGRAUD F.
Characterization of Micrococcaceae Strains Isolated from the Human Urogenital Tract by the Conventional Scheme
and a Micromethod. (1985) J. Clin. Microbiol., 21, 3, 474-477.
2. BRUN Y., FLEURETTE J., FOREY F.
Micromethod for Biochemical Identification of Coagulase Negative Staphylococci. (1978) J. Clin. Microbiol., 8, 5,
503-508.
3. GEMMELL C.G., DAWSON J.E.

bioMérieux SA Español - 7
API® STAPH
07468 - O - 2021/04 - es

Identification of Coagulase-Negative Staphylococci with the API STAPH system. (1982) J. Clin. Microbiol., 16, 5,
874-877.
4. GIGER O., CHARILAOU C.C. and CUNDY K.R.
Comparison of the API Staph-Ident and DMS Staph-Trac Systems with Conventional Methods used for the
Identification of Coagulase-Negative Staphylococci. (1984) J. Clin. Microbiol., 19, 1, 68-72.
5. KLOOS W.E., TORNABENE T.G., SCHLEIFER K.H.
Isolation and Characterization of Micrococci From Human Skin, Including Two New Species : Micrococcus lylae and
Micrococcus kristinae. (1974) Int. J. Syst. Bacteriol., 24, 1, 79-101.
6. LANGLOIS B.E., HARMON R.J., AKERS K.
Identification of Staphylococcus Species of Bovine Origin with the DMS STAPH-TRAC System. (1984) J. Clin.
Microbiol., 20, 2, 227-230.
7. MADDUX R.L., KOEHNE G.
Identification of Staphylococcus hyicus with the API STAPH Strip. (1982) J. Clin. Microbiol., 15, 6, 984-986.
8. MURRAY P.R., BARON E.J., JORGENSEN J.H., PFALLER M.A., YOLKEN R.H.
Manual of Clinical Microbiology. 8th Edition. (2003) American Society for Microbiology, Washington, D.C.
9. PASCOLI L., CHIARADIA V., MUCIGNAT G., SANTINI G. Identification of Staphylococci by the API STAPH, Sceptor,
Rosco and Simplified Lyogroup Systems. (1986) Eur. J. Clin. Microbiol., 5, 6, 669-671.
10. RADEBOLD K., ESSERS L.
Evaluation of the API-STAPH Micro-System for Routine Identification of Staphylococci. (1980) Arzt. Lab 26, 236-238.
11. Clinical and Laboratory Standards Institute, M50-A, Quality Control for Commercial Microbial Identification Systems;
Approved Guideline, Vol. 28 nº 23 (Control de calidad para sistemas de identificación microbiana comerciales:
directriz aprobada, vol. 28, n.º 23)
TABLA DE SÍMBOLOS

Símbolo Significado
Número de catálogo

Producto sanitario para diagnóstico in

vitro
Para Estados Unidos únicamente :
Precaución: La Ley Federal de E.E.U.U
limita la venta de este dispositivo por un
médico diplomado o bajo prescripción
de un médico diplomado
Fabricante

Límite de temperatura

Fecha de caducidad

Código de lote

No reutilizar

Consulte las instrucciones de uso

Contenido suficiente para <n> ensayos

Fecha de fabricación

Atmósfera húmeda

bioMérieux SA Español - 8
API® STAPH
07468 - O - 2021/04 - es

GARANTÍA LIMITADA
bioMérieux garantiza el rendimiento del producto para el uso previsto declarado siempre que todos los procedimientos
para el uso, el almacenamiento y la manipulación, la vida útil (en su caso) y las precauciones se sigan estrictamente
como se detalla en las instrucciones de uso.
A excepción de lo expresamente establecido anteriormente, bioMérieux por la presente renuncia a todas las garantías,
incluyendo cualquier garantía implícita de comerciabilidad y adecuación para un propósito o uso particular, y se exime
de toda responsabilidad, ya sea directa, indirecta o consecuente, de cualquier uso del reactivo, software, instrumento y
desechables (el “Sistema”) distinto a lo que se indica en las instrucciones de uso.
HISTÓRICO DE REVISIONES
Categoría de tipo de cambio
N/A No aplica (primera modificación)
Corrección Corrección de anomalías en la documentación
Cambio técnico Adición, revisión y/o eliminación de información relativa al producto
Administrativo Implementación de cambios no técnicos notables para el usuario

Nota: Los cambios menores de errores tipográficos, gramaticales y de formato no aparecen

incluidos en el historial de revisiones.

Fecha de Versión Tipo de cambio Resumen de cambios

publicación
• Tabla de símbolos
• Histórico de revisiones
Administrativo • Garantía limitada
• Procedimiento
2017/03 07468M
• Presentación
Cambio técnico • Lectura e interpretación
• Tabla de lectura

2019/05 07468N Administrativo Ha habido mejoras para respetar las plantillas y la guía
de estilo de bioMérieux y cumplir las normativas
RECAST.
2021/04 07468O Corrección Control de calidad

BIOMERIEUX el logo de BIOMERIEUX, ATB, API, APIWEB y ATB NEW son marcas utilizadas, depositadas y/o
registradas pertenecientes a bioMérieux o a alguna de sus filiales, o alguna de sus sociedades.
CLSI es una marca registrada que pertenece a Clinical Laboratory and Standards Institute, Inc.
La marca ATCC, la denominación ATCC y todas las referencias de catálogo ATCC son marcas de American Type
Culture Collection.
Los demás nombres o marcas comerciales pertenecen a sus respectivos propietarios.

673 620 399 RCS LYON

Tel. 33 (0)4 78 87 20 00
bioMérieux SA Fax 33 (0)4 78 87 20 90
376 Chemin de l'Orme www.biomerieux.com
69280 Marcy-l’Etoile - France