UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE SAN LUIS POTOSÍ

(UASLP)
FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS
INGENIERÍA EN ALIMENTOS

LABORATORIO DE BIOQUÍMICA

PRÁCTICA No. 4
HIDRÓLISIS ENZIMÁTICA DE AZÚCARES NO REDUCTORES
(ALMIDÓN Y SACAROSA)

LUNES/MIÉRCOLES 13: - 15:00

SEMESTRE AGOSTO-DICIEMBRE 2023

EQUIPO 2
▪MORA PÉREZ DANIELA MONSERRAT
▪MENDEZ RODRÍGUEZ PAOLA VIANEY
▪DEL CASTILLO AMBRIS JOSÉ LUIS
 FUNDAMENTO:

Hidrólisis enzimática del almidón:

La hidrólisis produce azucares que son directamente utilizados por todos los microorganismos
vivos, las enzimas más comunes son α y β amilasa. Para una eficiente hidrólisis enzimática
por las amilasas conviene que este gelatinizado, por consecuencia se realiza un cocimiento
del almidón antes de la adición de dichas enzimas.

Reacción de hidrólisis:

La amilasa tiene la función de dirigir el glucógeno y el almidón para formar azucares simples,
se produce principalmente en las glándulas salivares y en el páncreas.

Hidrólisis enzimática de la sacarosa:

La hidrólisis de la sacarosa produce una molécula de glucosa y una de fructosa, por lo cual los
productos cambian la dextro-rotación a levo-rotación, formando un azúcar invertido, la enzima
que produce la hidrólisis en la sacarosa se llama sacarasa o invertasa.
En presencia de HCI y a temperatura, la sacarosa se hidroliza, incorporando una molécula de
agua y se descompone en los monosacáridos que la forman, glucosa y fructosa, que son
reductores.
La sacarosa tiene un conjunto de propiedades únicas, no presenta mutarrotación y no es un
azúcar reductor, estas propiedades son resultado de poseer una unión glicosídica α- 1,2 en
lugar de una unión glicosídica.

La sacarasa es una enzima con actividad similar a la invertasa encontrada en plantas

y microorganismos.
Tiene funciones digestivas de suma importancia, pues la sacarosa no puede ser transportada
como disacárido hacia el interior de las células intestinales y, por ende, su hidrólisis permite la
absorción intestinal de sus monosacáridos constituyentes.
 RESULTADOS:
Reacción
𝑹𝒆𝒂𝒄𝒕𝒊𝒗𝒐 𝒅𝒆 𝒃𝒆𝒏𝒆𝒅𝒊𝒄𝒕 + 𝑬𝒛. 𝒉𝒊𝒅𝒓𝒐𝒍𝒊𝒛𝒂𝒅𝒂
→ 𝑮𝒍𝒖𝒄𝒐𝒔𝒂 + 𝒇𝒓𝒖𝒄𝒕𝒐𝒔𝒂
a) Hidrólisis enzimática del almidón.
Tubos A B C

0.25 ml de solución de 3 ml de enzima + 0.25 ml de solución de

almidón al 2% + llevar a ebullición por almidón al 2% + 3 ml
Contenido del de enzima + 0.5 ml de
3 ml de enzima. 60 segundos + 0.25 ml
tubo ácido clorhídrico al
de solución de
almidón. 10%.
Tiempo Resultados

30 s Negativo (-) Positivo (+) (+)(-)

60 s Negativo (-) Positivo (+) (+)(-)
90 s Negativo (-) Positivo (+) (+)(-)
120 s Negativo (-) Positivo (+) (+)(-)

b) Hidrólisis enzimática de la sacarosa.

Contenido Resultados
2 ml de sacarosa al 1%
+ 3 ml de enzima invertasa y coloque el tubo
en un baño a 40°C durante 5 minutos + gota Positivo (+)
del reactivo de Benedict.
 DISCUSIÓN DE RESULTADOS:
Al realizar la práctica de Hidrólisis Enzimática de Azúcares no reductores nosotros como
equipo, logramos obtener en cuenta el objetivo, ya que comenzamos con la Hidrólisis
enzimática del almidón por lo que utilizamos tres tubos de ensaye, los rotulamos como A, B y
C y los preparamos debidamente a como se indicaba, el tubo A (0.25 ml de solución de almidón
y 3 ml de enzima), el tubo B (3 ml de enzima, llevamos a ebullición por 60 segundos, se agregó
0.25 ml de solución de almidón) y el tubo C (0.25 ml de solución de almidón, 3 ml de enzima y
0.5 ml de ácido clorhídrico), colocamos los tres tubos en un baño de agua específicamente a
40°C, preparamos la placa de porcelana introduciendo una gota de lugol en cada orificio y
ahora sí, cada 30 segundos, tomábamos una gota de cada tubo y la agregábamos arriba de la
gota de lugol, observamos como nuestra prueba resultó favorable, ya que al observar la placa
de porcelana y ya pasado el debido tiempo, pudimos notar que en el tubo A y B, no hubo
reacción de la muestra, solo se observó una coloración turbia con un poco de color amarillo,
pero a comparación del tubo B, pudimos notar como fue que en un momento la gota de lugol
absorbió por completo a la gota del tubo B tomando una coloración intensa un poco más roja,
a lo que pudimos deducir que lo que los factores que afectaron a que esta prueba diera positiva
en el tubo B, fue la que la muestra se sometió a ebullición.
Para la Hidrólisis enzimática de la sacarosa agregamos en un tubo de ensaye 2 ml de sacarosa
y 3 ml de enzima invertasa, colocamos el tubo en un baño a 40°C tomando como referencia 5
minutos, pasando este tiempo tomamos una gota de la muestra y agregamos una gota del
reactivo de Benedict y ahora lo llevamos a ebullición, pudimos comprobar cómo se llevó a cabo
el proceso de hidrólisis, ya que observamos un cambio en la coloración de la muestra,
observamos como al tener coloración azul del reactivo de Benedict, cambio a una coloración
rojiza, por lo que podemos analizar que en esta práctica nuestros resultados fueron muy
favorables ya que se logró obtener la hidrólisis del almidón y la sacarosa (rompimiento de los
enlaces glucosídicos).
 CONCLUSIONES:
En esta práctica realizamos la hidrólisis enzimática de azucares reductores como la primera
parte analizamos la del almidón dando como positivo la hidrolización en el tubo B, así
comprobamos que para que ocurra una hidrolizarían enzimática se necesita tener una
temperatura alta., por otro lado al realizar la hidrolización de la sacarosa con ayuda de la
enzima invertasa nos dio un resultado positivo, esto lo pudimos determinar con ayuda del
reactivo de Benedict ya que recordando la práctica pasada este reactivo es utilizado para
identificar los azucares reductores.
El efecto que tienen las enzimas activas es muy acelerado e implica una obtención de
resultados “inmediata”, actuando sobre ese sustrato especifico, en este caso de la práctica,
hidrolizando de forma efectiva, teniendo como inconvenientes de la reacción inhibidores que
pusimos en práctica con la presencia de un pH diferente y del aumento de temperatura
desnaturalizando los complejos proteicos de la enzima. Seguimos recurriendo a la prueba de
Benedict para detección de monosacáridos reductores, en esta ocasión con el objetivo de
comprobar que la enzima si realizó su función de hidrolizar el polisacárido llevando a las
moléculas a su estructura fundamental, siendo el caso de la sacarosa viéndose degradada
hasta fructosa y glucosa, ambas azucares reductores que interactúan con el reactivo de
Benedict.
Esta práctica me pareció muy interesante ya que pude observar cómo es que se lleva a cabo
el proceso de hidrólisis en los azúcares no reductores, al momento de realizar cada
procedimiento y ver el cambió de coloración en al momento de llevar los tubos a baño de agua
o ebullición, pude darme cuenta que este paso es muy importante ya que se requiere llevar el
proceso a una temperatura debida para reconocer más fácil los cambios, también
reconociendo que estos factores aceleran la reacción dando resultados positivos y negativos,
en este caso, yo creo que las dos pruebas que realizamos (almidón y sacarosa), nos resultaron
favorables, a lo que podemos deducir que nuestras muestras fueron preparadas
adecuadamente y respetando los tiempos indicados para cada tubo.
 BIBLIOGRAFÍA:
Facultad de Ciencias Químicas. Bioquímica I. Amilasa. (s. f.). Recuperado de:
https://www.quimica.es/enciclopedia/Amilasa.html el 10 de septiembre de 2023.