UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE SAN LUIS POTOSÍ

(UASLP)
FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS
INGENIERÍA EN ALIMENTOS

LABORATORIO DE BIOQUÍMICA

PRÁCTICA No.2
IDENTIFICACIÓN CUALITATIVA DE CARBOHIDRATOS
(PRUEBA DE MOLISH, BENEDICT, SELLIWANOFF, YODO)

LUNES/MIÉRCOLES 13:00 - 15:00

SEMESTRE AGOSTO-DICIEMBRE 2023

EQUIPO 2
▪MORA PÉREZ DANIELA MONSERRAT
▪MENDEZ RODRÍGUEZ PAOLA VIANEY
▪DEL CASTILLO AMBRIS JOSÉ LUIS
 FUNDAMENTO:
Los carbohidratos o glúcidos son sustancias constituidas por carbono, hidrógeno y oxígeno
que observados desde el punto de vista químico se les considera como derivados cetónicos
y aldehídicos de alcoholes polivalentes que poseen al menos un átomo de carbono
asimétrico.
De acuerdo con su tamaño molecular, los cientos de carbohidratos existentes en la
naturaleza se clasifican en monosacáridos, disacáridos, oligosacáridos y polisacáridos.
Los monosacáridos son los carbohidratos más sencillos, por lo cual no pueden ser
hidrolizados a formas más simples; los más comunes provienen de la familia del D-
gliceraldehído que por adición de grupos –CHOH, integran las tetrosas, pentosas y hexosas.
Además de los monosacáridos que contienen un grupo aldehído, existen los que llevan un
grupo cetona (-C=O). En ambos casos el grupo aldehído o cetona los convierte en agentes
reductores.
Los oligosacáridos, son un grupo de sustancias resultado de la condensación de 3 a 10
monosacáridos mediante un enlace glucosídico.
Los polisacáridos son O-glucosídicos con más de 10 monosacáridos, los cuales, interactúan
con las proteínas, agua y con otros compuestos celulares vegetales a través de enlaces
electrostáticos, puentes de H, uniones hidrofóbicas y hasta covalentes.

Reacción de Molish
Es una reacción que presenta la propiedad de teñir cualquier carbohidrato presente en una
disolución, el nombre de esta reacción se deriva en honor del botánico austríaco Hans
Molish. Forma parte de la composición del reactivo de Molish el α-naftol.
Reacción de Benedict
(detecta la presencia de azúcares reductores) Se basa en la reducción de Cu2+ a Cu+ en
medio básico débil.
Prueba de Selliwanoff
Es una prueba química que se usa para distinguir aldosas y cetosas. Los azúcares son
distinguidos a través de su función como cetona o aldehído. Si el azúcar contiene un grupo
cetona, es una cetosa, y si contienen un grupo aldehído, es una aldosa. Esta prueba está
basada en el hecho de que, al calentarlas, las cetosas son deshidratadas más rápido que las
aldosas.
 RESULTADOS
Tabla No. 1

TUBO MUESTRA PRUEBA MUESTRA PRUEBA MUESTRA PRUEBA

NO. ANALIZADA MOLISH ANALIZADA BENEDICT ANALIZADA SELLIWANOFF
3 got. Almidón +
3 got. Almidón + 3 got. Almidón +
2 got. Reactivo de
1 Molish + 3 got + 3 got. Reactivo de - 3 got. Reactivo de -
Benedict Selliwanoff
H2SO4
3 got. Fructosa +
3 got. fructosa + 3 got. fructosa +
2 got. Reactivo de
2 Molish + 3 got + 3 got. Reactivo de + 3 got. Reactivo de +
Benedict Selliwanoff
H2SO4
3 got. Galactosa +
3 got. Galactosa 3 got. Galactosa
2 got. Reactivo de
3 Molish + 3 got + + 3 got. Reactivo + + 3 got. Reactivo -
de Benedict de Selliwanoff
H2SO4
3 got Glucosa +
3 got. Glucosa + 3 got. Glucosa +
2 got. Reactivo de
4 Molish + 3 got + 3 got. Reactivo de + 3 got. Reactivo de -
Benedict Selliwanoff
H2SO4
3 got Lactosa +
3 got. Lactosa + 3 got. Lactosa +
2 got. Reactivo de
5 Molish + 3 got + 3 got. Reactivo de + 3 got. Reactivo de -
Benedict Selliwanoff
H2SO4
3 got Maltosa +
3 got. Maltosa + 3 got. Maltosa +
2 got. Reactivo de
6 Molish + 3 got + 3 got. Reactivo de + 3 got. Reactivo de -
Benedict Selliwanoff
H2SO4
3 got Sacarosa +
3 got. Sacarosa + 3 got. Sacarosa +
2 got. Reactivo de
7 Molish + 3 got + 3 got. Reactivo de - 3 got. Reactivo de +
Benedict Selliwanoff
H2SO4
3 got Xilosa + 2
3 got. Xilosa + 3 got. Xilosa +
got. Reactivo de
8 Molish + 3 got + 3 got. Reactivo de + 3 got. Reactivo de -
Benedict Selliwanoff
H2SO4
3 got H2O
destilada + 2 got.
9 Reactivo de -
Molish + 3 got.
H2SO4
Papel +
2 got. Reactivo de
10 Molish + 3 got. +
H2SO4
.
Tabla No. 2

RESULTADO RESULTADO RESULTADO

TUBO
CONTENIDO (temperature (al calendar el (al enfriarr el
NO
ambiente) tubo) tubo)

1 1 got. de lugol + - +

1 got. de etanol + 1 got.

2 + - +
de lugol

1 got. de NaOH al 10%

3 + 1 got. de lugol - - -

1 got. de HCL al 10% +

4 1 got. de lugol + - +
 DISCUSIÓN E INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS
Al realizar esta práctica de Identificación cualitativa de carbohidratos, al momento de
comenzar con la Prueba de Molish, preparamos los diez tubos de ensaye, cada uno con su
respectiva solución, se pudo visualizar como al agregar el reactivo de Molish y
posteriormente mezclar, no se veía como tal un cambio en la coloración, hasta que
introducimos las tres gotas de ácido sulfúrico concentrado, observamos la aparición color
violeta en los tubos de ensaye, por lo que obtuvimos como resultados positivos en las
muestras como el almidón, fructosa, galactosa, glucosa, lactosa, maltosa, sacarosa, xilosa y
papel a lo que podemos concluir que en estas soluciones existe la presencia de
carbohidratos y por lo contrario obtuvimos solo una muestra negativa, el agua destilada.
Para la prueba de Benedict utilizamos ocho tubos de ensaye, aplicamos el mismo
procedimiento, añadimos el reactivo de Benedict y agitamos el tubo, al colocar los tubos de
ensaye en el baño de agua, se pudo observar como solo obtuvimos dos pruebas negativas,
el almidón y la sacarosa, por lo contrario las demás muestras (fructosa, galactosa, glucosa,
lactosa, maltosa y xilosa) fueron positivas, es decir que al momento en que hubo un cambio
de color ladrillo por la formación de óxido cuproso, estas muestras fueron azucares
reductores.
En la prueba de Selliwanoff solo rotulamos ocho tubos con las debidas soluciones y llevamos
a cabo los mismos pasos, a lo que obtuvimos como resultado dos muestras positivas
(fructosa y sacarosa) pues obtuvieron un color bronceado al momento de llevar los tubos al
baño de agua, por lo que podemos deducir que en base al resultado que obtuvimos de estas
pruebas, la fructosa y sacarosa son cetosas y las muestras restantes que fueron negativas
(almidón, galactosa, glucosa, lactosa, maltosa y xilosa) son aldosas.
Finalmente para la prueba de Yodo se utilizaron cuatro tubos de ensaye, añadimos tres gotas
de almidón al 1% y añadimos una solución distinta en cada uno, al llevar los tubos al
mechero, obtuvimos como resultados que a temperatura ambiente el tubo tres (NaOH) dio
como resultado negativo, al calentarlos, los cuatro tubos de ensaye resultaron negativos pero
ya al ser enfriados, cambiaron de coloración el tubo uno (lugol), dos (etanol, lugol) y cuatro
(HCl) es decir, en ellos regreso el color azul, menos en el tubo 3, no se vió presencia de
almidón.
Comprendimos que estas cuatro pruebas nos son de gran ayuda para poder distinguir la
presencia de los carbohidratos como su respectiva clasificación, ya que muchos de ellos
tienen muchas aplicaciones en la vida cotidiana.
 CONCLUSIONES:
En esta práctica realizamos cuatro diferentes pruebas cualitativas para la obtención de
carbohidratos (azúcares reductores, cetosas, aldosas y polisacáridos) partiendo de diferentes
sustancias como el almidón, fructosa, galactosa, glucosa, lactosa, maltosa, sacarosa, xilosa,
al igual que agua destilada y papel. La primera prueba también llamada prueba de Molish es
una prueba para los carbohidratos en la cual experimentalmente lo determinábamos por la
formación de un color violeta, lo cual nos arrojó un solo negativo que es el agua destilada, en
nuestra segunda llamada prueba de Benedict solo utilizamos las primeras 8 soluciones, este
método es el encargado de identificar los azúcares reductores, estos azúcares los podemos
determinar por el cambio de coloración a rojo ladrillo, esto por la formación de óxido cuproso,
nuestros resultado en esta prueba fue que los únicos que no son azúcares reductores son el
almidón y la sacarosa. En nuestra tercera también llamada prueba de Selliwanoff nos ayuda
a identificar exclusivamente a las cetosas, lo que nos arrojó una respuesta positiva fueron la
fructosa y la sacarosa. Por ultimo en la prueba del yodo analizamos la presencia de yodo a
temperatura ambiente, a una temperatura alta y a una temperatura baja, lo cual si regresaba
al color azul (dado por el lugol) esto confirmaba la presencia de yodo.
Mediante las pruebas realizadas a las distintas muestras se logró identificar la presencia de
carbohidratos en 9 de las muestras mediante la prueba de Molish, aunque hubo casos en
donde la presencia de carbohidratos no se evidenció inmediatamente, sino hasta después de
agregar un poco más de ácido sulfúrico. Por otro lado, la prueba de Benedict fue realizada
con éxito ya que solo 2 muestras tuvieron un resultado negativo, lo cual era lo esperado,
siendo la muestra de Almidón y Sacarosa, mientras que las 6 muestras restantes resultaron
positivas para azúcares reductores. Con respecto a la prueba de Selliwanoff podemos
concluir que solamente las muestras de fructosa y sacarosa resultaron positivas para
cetosas.
Además, la utilidad de la Prueba de Yodo fue para observar los medios en que la
identificación es positiva o negativa, con base en esta prueba, fue posible para nosotros
observar que un medio básico no permite su identificación.
Yo creo que estas pruebas son de gran importancia, ya que detenidamente podemos darnos
cuenta si en una solución existe la presencia de carbohidratos, por ejemplo, al agregar los
respectivos reactivos a cada muestra obtuvimos resultados tanto positivos como negativos
en cuanto a la coloración que tomaban los tubos de ensaye, también pude identificar que
clasificación de hidratos de carbono existen. Yo creo que se cumplió el objetivo de la práctica
puesto que se reconoció debido a la coloración, con ayuda del baño de agua y el mechero,
fueron de gran importancia para llevar a cabo estas pruebas, y poder reconocer si las
muestras correspondían a azúcares reductores, no reductores, cetosas, aldosas en base a
las propiedades de cada solución.
 BIBLIOGRAFÍA:
1. Manual de Bioquímica (2023). “Identificación cualitativa de carbohidratos”. Página 20.
2. Canosa, E. F., Conde, E. Y., Castineyra, I. B., Magdalena, C. S. R., & Feduchi, B. R.
Y. (2010). Bioquimica / Biochemistry: Concetos Esenciales / Essential Concepts.
Editorial Médica Panamericana.