INFORME DE LABORATORIO NO.

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ACTIVIDAD ENZIMATICA.
Nombre
Katherine Crdenas Rodrguez
Leidy Snchez Lozano
Camilo Santofimio Cardoso
Laura Fernanda Castro Amador
Resumen

Cdigo
Email
20571413818
kathe_9610@hotmail.com
20571417850
leidyjosalo@hotmail.com
20571414029
camilosantofimio@hotmail.com
20571419201
lalacaa@hotmail.com
Efecto del lugol sobre el almidn

Se prepar una disolucin de cuajo en tres tubos de

ensayo respectivamente depositando leche en cada
uno de ellos teniendo en cuenta un previo
calentamiento y el tiempo en que empez a cuajar.
A continuacin en tres tubos de ensayo se aplica
almidn, saliva, agua y gotas de lugol colocadas a
bao maria a distintas temperaturas evaluando la
actividad enzimtica de la amilasa salival.

El color del almidn con el lugol se debe a un

proceso fsico (el efecto ptico del I cuando se
introduce en las hlices de la amilosa), se puede
calentar el tubo de ensayo - que, tras aadir el
lugol, tiene un color azul oscuro- con el mechero de
alcohol: poco a poco ir perdiendo ese color hasta
volverse prcticamente incoloro (debido a que el
calor desnaturaliza la estructura helicoidal y
desaparece el efecto ptico).

Finalmente en 6 tubos de ensayo, se coloca

almidn, saliva y agua, aplicando prueba Benedict
permitiendo identificar los azucares reductores en
cada uno de ellos; obteniendo que a mayor saliva
menos cantidad de almidn debido al efecto
cataltico de la amilasa sobre la estructura qumica
de este polisacrido.

Al calentar almidn en presencia de una acido

concentrado almidn se hidroliza formando glucosa.
El color azul caracterstico para reaccin de
almidn con el iodo depende de la estructura
helicoidal de amilosa. Al desaparecer esta,
desaparece color azul. Color marrn es color de
lugol.

Introduccin

Amilasa Salival

Prueba Benedict
En qumica, la reaccin o prueba de
Benedict identifica azcares reductores
(aquellos que tienen su OH libre del C
anomrico), como la lactosa, la
glucosa, la maltosa, y celobiosa. En
soluciones alcalinas, pueden reducir el
Cu2+ que tiene color azul a Cu+, que
precipita de la solucin alcalina como Cu2O de
color rojo-naranja.

La amilasa es la enzima responsable de convertir el

almidn en el azcar maltosa, que es un disacrido.
Esta enzima, presente en la saliva, es el
componente clave en la germinacin de las plantas.
El almidn presente en las semillas es convertido a
azcares, brindando energa a la planta antes de
que sta pueda hacer fotosntesis. Los
experimentos con amilasa demuestran cmo la
enzima reacciona con el almidn y las variables que
afectan la velocidad de la reaccin. La temperatura
optima es de 37.

El reactivo de Benedict consta de:

Renina

Sulfato cprico;
Citrato de sodio;
Carbonato Anhidro de Sodio.
Adems se emplea NaOH para alcalinizar
el medio.

El paso inicial en la fabricacion del queso es hacer

que participen las enzimas coagulantes de la leche,
es decir las proteinas encargadas de crear una
masa a partir de la leche. La renina que es un tipo
de enzima que cataliza la rotura de un enlace
simple de la casena (una proteina) que esta en la
leche a cierta temperatura. Esto desestabiliza la
proteina y promueve su precipitacion formando as
la cuajada.
Resultados

Datos obtenidos durante la prctica

saliva, 5 de agua y 3
de lugol

Coagulacin de leche

Mues
tra
1
2
3

Disoluc.
cuajo
1 mL
0,5 mL
0,25 mL

Cant
leche
1 mL
1 mL
1 mL

Cant.
de agua
1 mL
1 mL

Tiempo de
coagulacin
2 min 40 seg
3 min 30 seg
3 min 45 seg

La tabla nos da a conocer los resultados obtenidos

durante el desarrollo de la prctica, en donde se
puede deducir que la cantidad de renina (cuajo ) es
directamente proporcional al tiempo que la leche
dura en formar los primeros grumos. Entre tanto es
de resaltar que a el tubo de ensayo numero 1 no se
le agrego agua, y fue la prueba que duro menos
tiempo en mostrar cogulos de la leche es decir de
cuajada.
El
intervalo
de
tiempo
es
aproximadamente de minuto y medio entre muestra
y muestra.

Para el tubo #1 cuya temperatura es de 4, la

amilasa desnaturaliza el almidn, el yodo se
introduce en su hlice y genera tal reaccin, es
decir el lugal se encuentra todava en la prueba
mientras que la saliva no.
En el tubo 37 la saliva no se desnaturaliza debido
a que su temperatura es la ptima y por lo tanto su
accin se realiza con total xito; por ello se torna un
color un poco azul violeta pero con poca intensidad.
En el tubo de 90 se desnaturaliza por completo la
amilasa ya que rompe por completo con su
estndar de temperatura e inhibe su accin
catalizadora como enzima. Su color es intenso.
Sin embargo, los resultados se vieron alterados ya
que previo a efectuar el paso correspondiente a
temperatura, las muestras se dejaron en reposo
unos minutos.

Efecto concentracin

Tiempo de coagulacin
4
3
2
1
0

Serie 1

Mue
stra
1
2
3
4
5

Actividad enzimtica

Muestr
a
1

Composicin

37

90

2,5 disoluc. de
almidon, 20 gotas de
saliva, 5 de agua y 3
de lugol
2,5 disoluc. de
almidon, 20 gotas de
saliva, 5 de agua y 3
de lugol
2,5 disoluc. de
almidon, 20 gotas de

Composicin
25 gotas de saliva
20 gotas de saliva y 5
de agua
15 gotas de saliva y 10
de agua
10 gotas de saliva y 15
gotas de agua
5 gotas de saliva y 20
de agua
25 gotas de agua

Prueba
Benedict
Positiva
Positiva
Positiva
Negativa
Negativa
Negativa

Color
Blanco

Azul no
muy
intenso
Azul
violeta

En los tres primeros tubos la prueba Benedict dio

positiva, teniendo en cuenta que en estas la
concentracin de saliva fue mayor, su coloracin
fue roja-naranja lo cual lleva a pensar que hay
presencia de azucares reductores en estas tres
muestras. La muestra 4,5 y 6 dio negativa a prueba
Benedict, su coloracin no fue ninguna puesto que
se tiene en cuenta que a mayor saliva menos
almidn, lo que genera una degradacin del
polisacrido.

Conclusiones

Se tiene que a mayor cantidad de saliva,

menor cantidad de almidon ya que su accin
cataltica lo degrada y hace que pierda
presencia en la muestra y por lo tanto su
accin.
El proceso de coagulacin de la leche es un
mecanismo comn en donde actua una
enzima llamada renina que permite el
cambio de leche- cuajo.
Los periodos de tiempo a los que se
someten estos procesos estn directamente
relacionados con la cantidad de cuajo-lecheagua-tiempo; a mayor cantidad de cuajo, el
efecto se visualizara en un lapso de tiempo
ms corto.
Se deben respetar las temperaturas
establecidas de accin de las enzimas, por
lo que se trabaj temperaturas de 37 con
amilasa y renina, apreciando en el
transcurso de la actividad que al sobrepasar
estas
temperaturas
hay
una
desnaturalizacin de estos biocatalizadores
inhibiendo su accin.
La prueba Benedict identifica azucares
reductores tindolos de color rojizo,
especficamente en el tubo 1,2 y 3 debido a
la relacin efecto concentracin ( mayor
cantidad de saliva que de otro compuesto)

Bibliografa

Anexos
Qu sucede con la concentracin de almidn a
medida que aumenta la concentracin de la saliva?
La saliva contiene una enzima proteica llamada
amilasa, esta se encarga de catalizar la
degradacin del almidn que es un polisacrido de
reserva vegetal. Asi pues, a mayor concentracin
de saliva mayor es la degradacin del almidn.
Qu
sucede
con
la
concentracin
monosacridos y disacridos a medida
aumenta la concentracin de la enzima?

de
que

Al aumentar la concentracin de la amilasa, se

transforman los monosacridos y disacridos en
molculas ms pequeas que el cuerpo puede
utilizar como energa.