Saliva en la salud y la enfermedad, la biología

química de
Tibor K. Fabian and Pal Fejerdy
Peter Csermely

La saliva es un fluido corporal secretado por tres pares de glándulas salivales mayores
(parótida, submandibular y sublingual) y por muchas de las glándulas salivales
menores.
La saliva se complementa con varios componentes que se originan a partir de suero de la
sangre, de la mucosa intacta o destruida y las células inmunes y a partir de
microorganismos orales intactos o destruidos que resultan en una mezcla compleja de
una variedad de moléculas.
La saliva tiene un papel importante en la formación de la película adquirida en las
superficies dentales, la homeostasis en el crecimiento de los cristales, la adhesión
bacteriana, la formación de placa, en el mantenimiento de la integridad de la mucosa
de las superficies de las mucosas orales y gastrointestinalessuperiores (por su rol
lubricante). También juega un papel importante en la defensa físico-química, la defensa
antimicrobiana, y la curación de heridas.
Muchos componentes de la saliva que incluyen proteínas, carbohidratos, lípidos, e iones,
interactúan bajo regulación fina para cumplir estas tareas importantes. Trastornos locales y
sistémicos pueden perturbar e interrumpir estas funciones equilibradas, lo que puede
provocar daños a mucosas y dientes. En otros casos, los trastornos sistémicos inducen
cambios salivales sin efectos locales significativos. Muchos de estos cambios son de alto
interés diagnóstico, ya que se pueden utilizar para la detección y diagnóstico precoz de
varios trastornos locales y sistémicos.

La saliva es un determinante importante de la cavidad oral y sirve como una herramienta

de diagnóstico fácilmente disponible de las condiciones sistémicas. En consecuencia, la
investigación más intensa de saliva se puede observar en las últimas décadas, lo que
conduce a una gran cantidad de datos científicos presentados por numerosos
investigadores que participan de este campo de gran alcance. Con el rápido crecimiento
del conocimiento, existe necesidad de resumir los datos obtenidos de este interesante
campo. En este artículo se ofrece una breve introducción a los aspectos más importantes
de la biología química de la saliva.

Origen de los componentes químicos salivales

Los componentes salivales pueden proceder de varias fuentes, lo que conduce a una
colección bastante compleja de moléculas. Para entender la importancia y el significado de
un determinado componente, es crucial conocer el origen y el mecanismo de excreción del
componente.

Componentes de origen de las glándulas salivales

Los componentes de origen de las glándulas salivales (agua, iones, proteínas, hidratos de
carbono, lípidos) pueden ser liberados de las glándulas salivales mayores como parótida,
submandibular y glándulas sublinguales, y de las glándulas salivales menores labial, bucal,
lingual, palatogloso, y la mucosa palatina.

Sobre la base de las características de saliva secretada primaria, los acinos de las glándulas
salivales se pueden caracterizar como seroso, seromucoso, o mucoso.
 Los acinos de la glándula parótida son principalmente seroso y seromucoso
 Los de la glándula submandibular son principalmente seromucoso
 Los de la glándula sublingual son principalmente mucosos.
 Los acinos de las glándulas salivales menores tienen varias características que
dependen de su ubicación.

La saliva primaria se modifica en los conductos intercalado, estriado, y

excretor(colector), que van desde los acinos hacia la boca. Se cree que el transporte de
agua y electrolitos en la saliva ocurre en los conductos intercalados. Los conductos
estriados son los responsables del transporte de electrolitos, tales como la secreción de
potasio y reabsorción de iones de sodio. Un transporte de proteínas como IgA, lisozima, y
kallrkrein [puede haber Hsp70], probablemente existe en el conducto estriado. También se
sospecha un transporte de electrolitos en los conductos excretores (colectores).

Stimulated
Component Resting saliva
saliva
Water -94% -94%
pH 5.75-7.05 up to 8.0
Bicarbonate 5-10mM/L up to 40-60
Phosphate 4-5 mM/L 4-5
mM/LmM/L
Sodium 1-5 mM/L up to 100 mM/L
Chloride 5 mM/L up to 70 mM/L
Potassium 15 mM/L 30-40 mM/L
Calcium 1 mM/L 3-4 mM/L

Table 1
The most important inorganic components of saliva

Constituyentes de otros orígenes

Cualquier componente de la sangre puede entrar en la cavidad oral a través de la
hemorragia intraoral. Exudados de suero también alcanzan la saliva ya sea desde el fluido
crevicular gingival o a través de la mucosa oral, y de las glándulas salivales a través de
difusión transcelular y ultrafiltración (a través de uniones estrechas). Microbios orales y sus
productos de fermentación, enzimas, ARN, ADN, y elementos estructurales también son
constituyentes habituales de la saliva. Fragmentos de las superficies mucosas
queratinizadas, células de la mucosa con orgánulos celulares de las superficies no
queratinizadas, y algunas células inmunes también están presentes. Fragmentos celulares,
productos citoplasmáticos, enzimas, elementos estructurales, membranas, ARN y ADN de
estas células también son constituyentes salivares habituales. También se puede encontrar
cierta cantidad de expectorado bronquial y secreción nasal, constituyentes de los alimentos,
los medicamentos administrados, el humo (de fumar), pastas de dientes, enjuagues
bucales, y las moléculas liberadas de las prótesis.

Molecular Participants of Saliva Chemical Biology

De acuerdo con lo anterior, existen muchos constituyentes en la saliva humana. A pesar de
que todos puedan merecer interés científico, sólo algunos tienen el foco de nuestra
atención. Los más importantes se resumen a continuación.

Inorganic components
El agua es el componente más abundante de saliva (aprox 94%). El pH de la saliva en
reposo es ligeramente ácido, que varía entre pH 5,75 y 7,05, y aumenta con el aumento de
velocidad de flujo hasta pH 8. Además de la tasa de flujo, el pH también depende de la
concentración de proteínas salivales, bicarbonato (HCO3- ) y fosfato (PO43-), iones que
tienen una considerable capacidad amortiguadora.
 La concentración de bicarbonato es de 5 a 10 mM / L en condiciones normales, y
puede aumentar hasta 40-60 mM / L con la estimulación.
 La concentración de fosfato es de 4 a 5 mM / L en la saliva independientemente de
la velocidad de flujo.
Además de bicarbonato y fosfato, una cantidad significativa de otros iones están presentes
para mantener la osmolaridad ligeramente hipotónica de saliva.
Los iones más importantes son:
 El sodio (1-5 mM / L; 100 mM / L estimulado)
 Cluoruro (5 mM / L en reposo; 70 mM / L estimulado)
 Potasio (15 mM / L en reposo; 30-40mm / L estimulado)
 Calcio (1,0 mM / L en descanso; 3-4 mm / L estimulada).
Muchos otros iones tales como amonio (NH4 +), bromuro de cobre, fluoruro, yoduro, litio,
magnesio, nitrato (NO3-), ClO4-, tiocianato (SCN), y así sucesivamente se pueden
encontrar en toda la saliva en concentraciones más bajas.
(Los datos están en la Tabla 1.)
Proteins
 Toda la saliva humana tiene un contenido de proteína de aproximadamente 0,5 a 3
mg / ml.
 La saliva parótida tiene un contenido de proteína de aproximadamente 0,4 a 4 mg /
mL.
 La saliva submandiblar y sublingual de aproximadamente 0,6 a 1,5 mg / mL.
La concentración de proteínas es bastante estable e independiente de la velocidad de flujo.
Además de mantener la capacidad osmotica y tampón, las proteínas salivales también
participan en varias funciones específicas. El número de proteínas salivales distintas, es
aproximadamente entre 100 y 140, de las que aproximadamente el 30-40% son producidas
por las glándulas salivales, mientras que otras se originan a partir de suero, de las mucosas
y / o de las células inmunes, o de microorganismos.
Las proteínas más importantes de origen glandular son:
 Alfa-amilasa
 Glicoproteínas con sustancias de los grupos sanguíneos
 Cistatinas
 Factor de crecimiento epidérmico (EGF)
 Gustin
 Histinas (HRP)
 Lactoferrina
 Lisozima
 Mucinas (MUC5B, MUC7)
 Peroxidasa salival
 Proteínas ricas en prolina (PRP) y estaterin.
Las proteínas más importantes derivadas de suero son:
 Albúmina
 Alfa-1-antitripsina
 Factores de coagulación de la sangre (VIII; IXa; XI)
 Miembros del “fibrinolytic sistem” (proactivators, rastros de activador del
plasminógeno).
Las proteínas más importantes que se originan a partir de células inmunes son:
 Mieloperoxidasa
 Calprotectina (Ca2 + de unión de leucocitos pro¬tein L1)
 Catepsina G
  Defensinas
 Elastasa
 Inmunoglobulinas (90% a 98% sIgA, 1% a 10% de IgG, unos pocos IgM, IgD , IgE).
Las proteínas constituyentes más importantes de origen desconocido- o mixto
microbial- son:
 Alfa2-macroglobulina
 Peptidasas cisteína
 ADNasas y ARNasas
 Calicreínas
 Secretoras de proteasa inhibidora de leucocitos (SLPI)
 Fibronectina
 Chaperona molecular (Hsp70)
 Inhibidor de estreptococos
(Los datos se resumen en la Tabla 2.)

Carbohydrates
En la saliva existe una cantidad significativa de hidratos de carbono unidos a proteínas.
Algunas proteínas pueden contener hidratos de carbono hasta en el 80% de la molécula,
pero 10 a 40% de fracción del carbohidrato es bastante habitual en el caso de cualquier
glicoproteína.
Los constituyentes más importantes son:
 Amiinoazúcares
 Galactosa
 Manosa
 Ácido siálico (ácido N-acetilneuramínico).
 Cadenas de mucinas contienen residuos de ácido siálico y sulfato
predominantemente, aunque las cadenas con propiedades de antígenos de grupos
sanguíneos contienen aproximadamente cantidades iguales de 6-desoxigalactosa,
glucosamina, Galactosamina y galactosa.
Otros constituyentes habituales de las cadenas de carbohidratos de las
glicoproteínas salivales son:
 N-acetilgalactosamina, N-acetylglucosamin, y ácido glucurónico.
La cantidad total de carbohidratos unidos a proteínas en la saliva es de 300-400 pg / ml, de
los cuales la cantidad de ácido siálico es de aproximadamente 50 pg / ml [hasta 100 pg /
ml]. La función más importante de los hidratos de carbono unidos a proteínas es el aumento
de la viscoelasticidad de la saliva, la prevención de proteolisis a través del transporte
a distancia proteasas, la prevención de la precipitación con ácido en el caso de
muchas glicoproteínas (es decir: antígenos de grupo sanguíneo solubles en ácido,
mucinas), y la función de etiquetado/antígeno.

Bacterial, unknown,
Glandular origin Serum derived Immune cell
mixed
Alpha-amylase Albumin Myeloperoxidase Alpha2-macroglobulin
Blood-group Alpha 1-antitrypsin Calprotectin Cystein peptidases
Cystatins
proteins Blood-clotting factors Cathepsin G DNases
EGF Fybrinolytic system Defensins RNases
Gustin Elastase Kallikrein
Histatins Immunoglobulins Protease inhibitor SLPI
Lactoferrine Fibronectin
Lysozyme Salivary chaperon Hsp70
Mucins Streptococcal inhibitor
Salivary peroxidase
Proline-rich proteins
Statherin
Table 2 Origin of the most important salivary proteins

Lipids
La saliva contiene aproximadamente 10 a 100-PG / lípidos ml.
Los lípidos más frecuentes en la saliva son:
 Glucolípidos (como glyceroglucolípidos sulfatados)
 Lípidos neutros (ácidos grasos libres, ésteres de colesterol, triglicéridos y
colesterol)
 Una parte algo más baja de fosfolípidos (fosfatiletanolamina, fosfatidilcolina, y
fosfatidilserina)
Lípidos salivales son en su mayoría de origen glandular, pero se cree que algunos (como
el colesterol y algunos ácidos grasos) difunden directamente a partir de suero.
Los lípidos se originan de varias membranas, tales como vesículas secretoras,
microsomas, balsas de lípidos, y otras fragmentos de membranas tanto plasmáticas
como intracelulares, de bacterias y células muertas por lisis,, aunque el porcentaje
más bajo de fosfolípidos indica que los lípidos salivales no son principalmente de origen
membranoso. Una gran parte de los lípidos salivales se asocia con las proteínas,
especialmente a las glicoproteínas de alto peso molecular (es decir, mucinas) y PRPs.
Los lípidos salivales pueden desempeñar un papel en la película adquirida, la placa
dental, cálculo, sialolito, y la formación de caries.

Other molecules
Como se ha mencionado, existen muchas otras moléculas en la saliva, incluyendo ácidos
nucleicos (ARN, ADN), varias hormonas, factores de crecimiento y neurotransmisores,
aminoácidos y sus derivados, urea, lactato, citrato, vitaminas, creatinina, prostaglandinas,
drogas, y componentes químicos de los alimentos, cosméticos, pastas de dientes,
materiales dentales, y varias otras moléculas originadas a partir del cuerpo y el medio
ambiente.

Biología química de la saliva en la salud y la enfermedad

Constituyentes de la saliva juegan un papel en varios procesos orales, y que llevan a
cabo funciones de defensa importantes en la cavidad oral. Por otra parte, la saliva
puede ser usada para fines de diagnóstico. El conocimiento más importante relacionado
con esto, se resumirá brevemente en la sección siguiente.

Saliva and bacterial adhesion

La base de la adhesión bacteriana se da por la formación película adquirida en las
superficies dentales. Esta película (aprox 0,5-1 um) es una capa delgada de varias
proteínas de la saliva con propiedades de unión a hidróxido de calcio.
Los más importantes de tales proteínas son:
 Amilasa salival
 Cistatinas (S, SA, y el tipo SN)
 Histatina (HRP1)
 Mucina (MG1)
 Ácidos PRPs
 Estaterina
 Inmunoglobulinas (sIgA)
La unión de estas proteínas de la superficie se produce principalmente a través de
interacción iónica de grupos cargados positivamente de la cadena de polipéptido de
las proteínas y la superficie del diente cargada negativamente (proteínas globulares se
exprimen en la superficie del diente durante la unión).
Aunque la superficie del diente está cargadanegativamente, en algunos casos, regiones de
proteínas cargadas negativamente son responsables de la unión (región N-terminal de
PRP). Puentes de calcio (formación de complej de Ca2+) entre las cargas negativas puede
ser un mecanismo de dicha unión.
En primer lugar, la adhesión bacteriana (usualmente cocos Gram-positivos y bacterias
filamentosas) se produce principalmente a través de formación de complejo de Ca2+ entre
carboxilo (COO-) y grupos fosfato (HPO3-) de superficie bacteriana y película adquirida.
Aunque las fuerzas de van der Waals y fuerzas electrostáticas repulsivas también están
presentes. Algunas proteínas de la superficie bacteriana specihc también sirven como
adhesinas para receptores específicos en película adquirida.

La saliva y la formación de Biofilm (placa) bacterial

Después de la adhesión de la primera capa de bacteria (p. ej., Streptococcus mutans) el
proceso de acumulación bacterial es iniciada por la actividad de glicosiltransferasas
extracelulares (GTFs) de S. mutans. En la presencia de sacarosa, GTFs sintetiza varias
formas "del alto peso molecular" ramificadas de glicanos extracelulares (p. ej., dextrano),
que conduce a productos polisacaridos pegajosos, resultando en una adhesion mas fuerte
a la superficie y la facilitación de adhesion de más proteinas superficiales bacterianas por
via glicano. Restos de alimentos en la saliva pueden servir como la reservorio de sucralosa
en este proceso.

La saliva y la homeostasis de la mineralización

(crecimiento de cristal)
En general, la saliva (así como el ¿fluido de la placa?) está sobresaturada de sales de
fosfato-calcio, previene la tendencia de los cristales de los dientes a disolverse. Además, la
precipitación de las sales de fosfato de calcio que incluyen hidroxiapatita
(desmineralización) también puede ocurrir en las lesiones tempranas de la superficie del
diente herido por ácidos bacterianos (p. ej., el ácido láctico). El fluoruro salival facilita la
precipitación de fosfato de calcio, y tales cristales (p. ej., fluorapatita) presentan baja
solubilidad frente al acido que desemboca en un efecto preventivo aumentado sobre la
caries. El aumento de pH (la capacidad amortiguadora y el pH de saliva, así como ureolisis
en la placa dental) también facilita la precipitación de cristal y la desmineralización.

De modo similar, la sobresaturación de sales de fosfato de calcio en la saliva es la fuerza

motriz en la formación de cálculos (placa dental mineralizada) y sialolitos (cálculos en el
conducto salival). En estos casos, los fosfolípidos cargados negativamente juegan un papel
crucial: Ca2 + los iones se unen a las cargas negativas de tales lípidos, y fosfato inorgánicos
asociados que, junto al calcio, forman un complejo de Calcio-fosfato-fosfolípido, que es un
núcleo excelente de deposición de fosfato de calcio. Proteínas salivales también pueden
desempeñar un papel en este proceso porque tal formación compleja ocurre
predominantemente sobre los lípidos que están asociados a proteínas. El aumento de pH
facilita estos procesos.

Como la precipitación de fosfato de calcio llevaria a un “crecimiento confluente” de

superficies dentales y la formación intensiva de sarro y sialolitos, la precipitación debe ser
controlada. Para tales objetivos, las proteinas asociadas a calcio y/o hidroxiapatita como
calprotectina, histatinas (HRP1), estaterina, acido PRPs, y cistatina (la S, SA, y el tipo SN)
están presentes en la saliva. Todas inhiben la mineralizacion, mientras que la estaterina
también inhibe la precipitación espontánea tardía (inhibición de la nucleacion). De modo
interesante, las inmunoglobulinas asociadas a la placa dental también inhiben el
crecimiento de cristal durante la formación de sarro. Los iones Mg+2 también tienen algún
efecto inhibitorio en la nucleación.

La saliva y la protección superficial

Además de la participación en la formación de la pelicula adquirida sobre las superficies
dentales (dentadura o implante), mucinas del tipo MUC5B cubren todas las superficies
orales de un grosor aproximado 10-20 µm. Además, las mucinas del tipo MUC5B forman
un gel hidrófilo viscoelastico (ya en concentración baja) que causa una matriz de alta
viscosidad en la saliva. Estas propiedades de las mucinas (MUC5B), juntos con los efectos
similares de PRPs glisolidas, logran el efecto lubricante de saliva que defiende contra
heridas físicas durante la masticación. Proteínas salivales, sobre todo PRPs básicas, iones
bicarbonato, e iones fosfato también pueden actuar como amortiguadores sobre los ácidos
de alimentación y/o la fermentación bacteriana. PRPs y sobre todo HRPs son potentes
precipitadores de taninos, que son un compuesto de extendido fenolico de las plantas
(flavonoide) de alimentación con un gusto desagradable y propiedades para la precipitacion
de proteinas. Protease con efecto inhibitorio de saliva (HRP5 contra proteasas tipo tripsina,
cistatinas contra proteinasas cisteinas, y SLPI contra proteasas serinas) también puede
servir como la defensa superficial disminuyendo la degradación proteolitica de proteínas
superficiales y proteínas de defensa salivales. La chaperona salival Hsp70 es también una
proteína de defensa potente contra el daño de superficie celular; además, Hsp70 puede
reparar proteínas agregadas y/o desnaturalizadas de la saliva. Peroxidasas también
protegen las células anfitrionas que transforman H2O2 (producido por microorganismos y
durante reacciones inmunes/inflamatorias) al anión reactivo hipocianato (OSCN-) que tiene
un efecto antibacteriano más fuerte, pero un pequeño efecto perjudicial sobre la célula, en
comparacion al H2O2. El efecto diluyente de la saliva y el despacho desde la boca
(tragando hacia el estómago y/o la expectoración) de muchas proteínas, moléculas unidas
o libres, y microbios también sirve como un mecanismo de defensa superficial eficaz.

Los efectos antimicrobianos de saliva

Una red salival de defensa antimicrobiana incluye numerosas proteínas salivales. Aunque
algunas moléculas de defensa estén presentes en una concentración bastante baja en la
saliva, debería ser considerado que las concentraciones locales de estas proteínas cerca a
la superficie mucosal (mucosal trasudado), surco gingival (fluido crevicular gingival), heridas
orales y úlceras (trasudado) pueden ser mucho mayores. Además, los efectos son
sinergístico, y en muchos casos reforzados por reacciones inmunes y/o inflamatorias.
Algunas proteínas de defensa están implicadas principalmente en la activación inmune. La
inmunoglobulina salival participa en la eliminación de hongos de bacteria y virus por la union
inmuno-especifica y aglutinación. La inmunoglobulina actúa por la vía de formación de
ozono inducida por anticuerpo. La chaperona molecular Hsp70 actúa como una señal de
peligro que conduce a una respuesta inmune especifica y una activacion compementaria, y
participa en la presentación de antigenos (bacterial, micotico, y viral). La Cistatin C tiene
propiedades quimiotacticas, y esto desempeña un papel en la presentación antigenos de
celulas dendriticas presentes en la mucosa oral. Además, cistatina S, C y D muestran
actividad antiviral; cistatina C, SA y SN muestran actividad antiparasitaria; y la cistatina S
muestra actividad antibacteriana.
Otras proteínas son responsables de la eliminación no inmune de microbios. La amilasa
salival es propuesta para realizar el efecto inhibitorio sobre el crecimiento de
microorganismo. Calprotectina tiene propiedades fungicidaa y el bactericida. HRPs
muestran actividades antibacterianas y antifungicas no especificas. Lactoferrina tiene el
efecto bacteriostatica. Lisosima es bacteriolitico para las bacteria gram positiva. El leucocito
secretor de proteinasa inhibidora muestra actividad antibacteriana, antifungica y antiviral.
Defensinas poseen propiedades antimicrobianas y citotóxicas. Mucinas (sobre todo MUC7)
son sumamente afines a microorganismos, atrapan y aglutinan bacterias, hongos y
partículas virales. Peroxidasas tienen propiedades antivirales, antifungicas y
bacteriostaticas, por la producción del anión reactivo hipocianato. PRPs acida se une a
bacterias, PRPa básica ata hongos (Candida albicans) y virus, mientras que las PRPs
glicosiladas se une a bacterias y virus, lo que indica un papel del PRPs en el despacho de
de estos microorganismos hacia el estómago.

La saliva y la cicatrización
Además de la prevención de infecciones de herida por los susodichos efectos
antimicrobianos, la saliva también juega otros papeles en la curación de heridas orales.
EGF salival acelera el proceso de curación por su efecto angiogenetico y proliferador
celular. Otro factores de crecimiento presentes en la saliva como factor transformador de
crecimiento beta, factor de crecimiento fibroblastico, factores de crecimiento parecidos a la
insulina, y el factor de crecimiento de nervios también contribuye al proceso de curación.
Además, la saliva contiene varios factores de coagulación sanguínea (IXa, VIII, XI) en un
nivel comparable al del plasma, la saliva puede sustituir plaquetas en la generación de
trombina. Esta propiedad de saliva es sumamente importante en la cicatrización oral ya
que, aunque la saliva diluye los factores de coagulación sanguínea de origen de sanguineo,
la coagulación sanguínea puede ser iniciada de todos modos. Una cantidad relativamente
alta de kallikreina salival sugiere que desempeñaa un papel en la vasodilatacion alrededor
de heridas mucosales para facilitar la curación y la defensa del área herida.

La saliva en la caries dental

Además de las alteraciones en la adhesion bacterial, la formación de placa los mecanismos
de defensa salivales detallados antes, algunos cambios mas o menos perceptibles de saliva
están la conexión con la formación de caries, y esto puede ser usado para reconocer a
pacientes de riesgo y mantener la prevención. La tasa de flujo reducida de saliva, la
capacidad amortiguadora reducida, el número aumentado de S. mutans y Lactobacilos por
lo general es asociado con prevalencia mayor de caries. Asimismo, el nivel disminuido de
ciertas proteínas salivales como proteínas ricas en prolina (PRP1, PRP3), histatina 1, y
estaterina, está asociado con una susceptibiladad de caries considerablemente más alta.

La saliva y desórdenes periodontales

Varios efectos importantes de la saliva sobre la adherencia bacteriana, la placa y formación
de sarro y la eliminación de microorganismos fueron descritos antes. Además de estos
efectos y midiendo varias proteínas marcadas, la saliva podria ser usada para evidenciar
desordenes periodontales. Los niveles de la enzima proteolitica elastasa granulocitica, el
inhibidor proteasa alpha1-antitripsian y el inhibidor elastasa alpha2-macroglobulina pueden
aumentar bastante cuando se tiene gingivitis y/o periodontitis. Además, el nivel de alpha2-
macroglobulina es también un buen indicador de estado periodontal individual. Los niveesl
salivales de ácidos grasos 3-hydroxy (el componente de lípido de endotoxinas
lipopolisacaridas de varias bacteria anaerobias) son buenos indicadores de periodontitis
crónica. La Albumina también puede tener correlación con la inflamación gingival. Aunque
la enfermedad periodontal solo puede ser diagnosticado bajo un examen dental, los últimos
datos sobre el papel de la enfermedad periodontal en condiciones cardiovascular y
cerebrovascular, y también en el nacimiento prematuro puedan aumentar la importancia de
un “marcaje rápido” de la saliva.

La saliva y xerostomia
Existen cinco motivos principales para la sensación subjetiva de boca seca (xerostomia):
desórdenes de glándulas salivales, desórdenes sistémicos, medicación, radioterapia, y
envejecimiento. En gente sana, la tasa de flujo salival normal o en descanso está alrededor
(o algo debajo) 1 mL/min, aunque en algunas condiciones, como la deshidratación, el
dormir, la relajación, o cambió de estados mentales (el hipnosis, el estímulo fotoacústico)
la tasa de flujo podría no exceder 0.25 mL/min. Bajo estímulo, la tasa de flujo en individuos
sanos aumenta a un valor habitual de entre 1.5-2.3 mL/min, pero este puede aumentar a
3.7 mL/min. La Xerostomia por lo general aparece cuando la tasa de flujo salival en
descanso y sin estimulos es menor que 0.1-0.2 mL/min y el flujo estimulado es menor a 0.4-
0.7 mL/min. En otros casos (~25 % de pacientes), el flujo norma disminuyel, pero el flujo
estimulado permanece normale. En otros pacientes (~22 %), tanto el flujo en descanso
como el estimulado esta normal. En casos serios, la saliva muestra menor capacidad
amortiguadora de pH, concentracion de albumina y sodio aumentadas, la proporción de
amilasa/proteína disminuida, concentracion alta de lactobacilos y levadura. Las
concentraciones de mucinas tipo MUC5B Y MUC7 también están disminuidos.

Cambios salivales bajo medicación

Las numerosas clases de medicaciones como anticolinergicos, antidepresivos,
antipsicoticos, diuréticos, benzodiazepinas, agentes antihipertensivos, relajantes
musculares, analgesicos, y antihistamínicos, como se ha relatado, inducen xerostomia,
Aunque algunos (antipsicoticos, benzodiazepinas y medicinas de antihipertensivos)
también puedan inducir sialorrea. Medicinas antiepilépticas también inducen cambios
significativos en la saliva; sin embargo, en este caso el flujo y pH por lo general permanece
normal. Fentoina, valproato, y carbamazepina aumentan la amilasa y la concentración total
de proteina y disminuyen la concentración de cistatina S (pero no cistatina C). También bajo
antiepilepticos se evidencio una degradación de la mitad de glicanos de mucinas salivales
y otras glicoproteinas, y una efectividad disminuida de agregación de bacterias inducidas
por mucina. Sin embargo, también debería ser considerado que la degradación y disminuida
la agregación bacterial probablemente fue causada por la higiene bucal pobre en este
grupo.

Cambios salivales en condiciones sistémicas

La Ansiedad y la depresión pueden conducir a una disminución en el flujo salival y una
posterior xerostomia. Condiciones de tensión agudas también inducen cambios
significativos salivales como una disminución en la IgA secretora, aumento de las
concentraciones de amilasa salival y la chaperona molecular Hsp70, y cambios inmediatos
de la adhesion de bacterias a mucinas salivales. En el sindrome de Sjogren, el bajo nivel
de flujo salival en descanso y estimulado, así como el nivel aumentado de sodio, cloruro,
IgA, IgG, lactoferrina, albumina, ß2 microglobulina, lípidos, cistatina C, cistatina la S,
prostaglandina E2, interleukina-6, el receptor soluble interleukina-2, y kallikreina fueron
descritos. Un nivel disminuido de fosfato en la saliva también fue encontrado. La fibrosis
cística induce la elevación de electrólitos (el sodio, el cloruro, el calcio, y el fósforo) y los
niveles de lípido en la saliva submandibular que conducen a la formación aumentada de
sarro. Una forma inusual de EGF con pobre actividad biológica y prostaglandina salival E2
elevada anormalmente también fue encontrada en pacientes de fibrosis císticos. La
enfermedad de injerto-contra-anfitrión causa una reducción media de 55-90% del flujo
salival con una elevada concentración de sodio, magnesio, proteína total, albúmina, EGF,
y IgG, mientras que la cantidad de IgA salival y IgM disminuye; las concentraciones de
potasio, calcio y fosfato no presentaron cambios

El diagnóstico salival de enfermedades sistémicas

En algunos casos, saliva puede ser usada como un instrumento diagnostico sumamente
eficaz de condiciones sistémicas. Niveles sin-suero hormonales en el caso de varias
hormonas no peptidicas como el cortisol, testosterona, estriol, estradiol, progesterona,
aldosterona, androstendiona, dihidroandostendiona e insulina pueden ser calculados de
niveles hormonales salivales. Los niveles de saliva de pequeños neurotransmisores de tipo
de péptido como met-encephalina, la sustancia p y ß-endorfina. melatonina (un unico
derivado de aminoacido) también pueden referirse a niveles plasma. Los niveles salivales
de epinefrina, norepinefrina y dopamina, no tienen mucha relación con niveles de suero,
pero aumentar especificamente en condiciones de tensión. La supervisión del nivel
sistémico de varias medicaciones es también posible desde la saliva. Asimismo, también
puede ser supervisada la medicación, el consumo de drogas, el fumar (activo o pasivo) y el
consumo de etanol. La deteccion de infecciones virales a través de anticuerpos especificos
contra virus (hepatitis y VIH) en la mucosa ricamente trasudada es un método simple, bien
tolerado, y exacto. Marcadores de tumor (c-erbB-e, antigeno p53, CA125) presentes en la
saliva también pueden ser usado para la deteccion y el temprano diagnóstico de
malignidades que aparecen en varias regiones del cuerpo (tumores no exclusivamente
orales) (3). El hecho que, en adicion al transcriptoma salival normal (~180 mRNA), una alta
cantidad (~3.000) de otro mRNA es detectable en varias condiciones sistémicas, ello será
de alto valor diagnóstico en el futuro (32, 34). Asimismo, el fluido oral también proporciona
una fuente disponible de ADN microbiano o humano, aunque el contenido de ADN sea
bastante bajo. Este hallazgo es útil para el marcaje biologico de bacterias orales,
enfermedades orales o sistémicas, y para la identificación forense.

Técnicas Químicas Usadas en el Análisis de Saliva

La metodología de análisis salival es la amplia e incluye casi todas las técnicas usadas
comúnmente en otros campos de bioquímica. Los métodos usados el más con frecuencia
para el análisis de saliva son resumidos brevemente debajo.

Colección de saliva
La muestra debería ser hecha en el tiempo estandarizado, según el ciclo diurno (y/o la
respuesta y el tiempo de recuperación) del analito. Los sujetos no debería comer dentro de
60 minutos antes de la elaboracion de la muestra. Para la recolección desde glándulas
salivales; el alcohol, cafeína y productos lácteos deberían ser evitados. La saliva de
descanso puede ser recogida evitando cualquier estimulo químico (ácidos), físico (presión,
temperatura), biológico (el gusto, la masticación), y psychologic (imaginación de una
comida). La saliva estimulada es recogida comunmente bajo el estimulo de masticacion
(cera de parafina), y/o con el estímulo de gusto (caramelo, limón). La saliva entera puede
ser recogida simplemente babeando en un frasco con la cabeza inclinada o permitiendo a
la saliva para acumularse en la boca y luego escupiendola en un frasco. La saliva de la
parotida puede ser recogido con una conexion directa al conducto parotideo o con el empleo
del gorro parotido (un contenedor plástico con un bolsillo que ejerce succion para sostener
el dispositivo sobre la superficie de mucosa). La saliva surtida de submandibular y la
glándula sublingual puede ser recogida con conexión directa al conducto submandibular.
La saliva de glándulas menores puede ser recogida con pipetas o con un pequeño pedazo
de papel adsorbente. Un fluido enriquecido en mucosa trasudada y liquido gingival
crevicular puede ser recogido colocando una almohadilla adsorbente entre la mejilla y la
encía.
Manejo y almacenaje de saliva
La Saliva por lo general es homogeneizada sobre un mezclador de vórtice durante un
minuto y pre-limpiada por la centrifugación (10.000 × la g; 4°C; 10 minutos) para quitar
restos de alimentos, bacteria, células mucosa, y otras partículas. La saliva también puede
ser limpiada por filtros del tamaño de un poro (0.2 µ m), pero sólo pequeñas cantidades,
porque los poros-filtro son bloqueados por componentes de altos peso molecular. La saliva
prelimpiada puede ser almacenada sobre el hielo (+4°C) sin cambios significativos de
actividad enzimatica (amilasa) o degradación de proteína, sólo por pocas horas. La adición
de inhibidores de proteasa es ventajoso para procedimientos analiticos muy demandantes
de tiempo. La congelación puede conducir a la precipitación significativa de proteína,
incluso si es usada la congelación rápida (nitrogeno liquido). La muestra congelada puede
ser almacenada a -20°C por algunos días sin sufrir mucho daño. El almacenaje algo más
largo es posible en nitrógeno líquido o a -80°C.

La detección de iones
El pH puede ser medido con electrodos selectivos de hidrógeno; sin embargo, debería ser
notado que, el potencial de hidrógeno de la saliva es dependiente del nivel de CO2 disuelto,
para obtener un pH verdadero, la saliva debe ser recogida sin pérdida de CO2, para evitar
medir un potencial de hidrógeno más alto que verdadero. Iones como el sodio y el calcio
también pueden ser medidos con electrodos de ion selectivo. Con el empleo de fotometria
de llama la cantidad total de sodio, potasio y calcio pueden ser medidos. Con el empleo de
la espectrometria de absorcion atomica, la cantidad total de calcio, magnesio, cobre y
algunos otros iones dentales (como el zinc, el hierro, el cobalto, y el cromo) son detectados.
Métodos fotométricos (colorimétricos) pueden ser usados para medir la cantidad total de
cloruro, calcio, bicarbonato, y el fosfato. En caso del calcio y fosfato un alto porcentaje (~50
% y hasta el 20 %, respectivamente) puede estar unido a proteínas y/o lípidos. La
determinación de la proporción entre las forma ionica y la unida de calcio puede ser
realizada por comparando los datos de fotometría de llama y los datos del electrodo. En
caso del fosfato, una discriminación exacta es sólo posible después de un aislamiento
cuidadoso de proteínas y lípidos de la saliva.

Análisis de proteínas salivales

El contenido protéico de la saliva es determinado por lo general con la reacción modificada
biuret [el método de Lowry].
El análisis cualitativo de proteína es el realizado el más con frecuencia con la electrofóresis
de gel, específicamente “sodium-dodecyl-sulphate poliacrylamide gel electrophoresis, y el
enfoque isoeléctrico en ambos casos es unidimensional (1D) o bidimensional (2D). La
cromatografía de líquido de alto rendimiento tanto 1D como 2D (HPLC) también es usada
extensamente.
Estos métodos son combinados con frecuencia con métodos immunológicos como
“Western-bolt analysis” (en el caso de geles) y la enzima”inmunoasa” (ELISA, EIA) y la radio
immunoasa en el caso de muestras de saliva o fracciones de esta (por ej. HPLC fracciones).
Las medidas de actividad enzimàtica con la adición de sustratos son métodos comunes
para la determinación de amilasa y lizosomasa salival. Accesos más recientes usan “in-gel-
tryptic-digestion” de las proteínas separadas. La digestión es seguida de la extracción de
los péptidos y la fragmentación con la espectrometría en una maneraque permite a la
determinación computacional de la secuencia de péptidos. La identificación de la proteína
de la cual fue sacado el péptido, puede ser atraves de la busca en bases de datos de
proteínas.
En el último análisis directo de complejos de proteínas multidimensionales, “tripsin
digestion” es el primer paso, seguido de la cromatografía de los fragmentos de péptido y el
análisis.

Analysis of carbohydrate structures

El resto de carbohidrato puede ser aislado después de la degradación de la proteína y el
aislamiento de los hidratos de carbono que lleva partículas a través de filtración en gel y / u
otros métodos cromatográficos.
El análisis cualitativo y cuantitativo de las cadenas de carbohidratos se puede llevar a cabo
después de la digestión enzimática con glucosidasas y después de la determinación de los
componentes de hidratos de carbono con los métodos químicos estándar basados en la
colorimetría o cromatografía gas-líquido.
El mapeo estructural de cadenas de carbohidratos puede realizarse con el uso de la
digestión enzimática secuencial por exoglucosidasas (PD-galactosidasa, PN-acetilenos
aniñada, Ad-manosidasa, etc.), y la reconstrucción de la secuencia de cadena supuesta
con el análisis de los componentes liberados de hidratos de carbono.
Además de los métodos químicos inmunológicos como ELISA, se utilizan
inmunotransferencia y transferencia de lectina.

Analysis of salivary lipids

De los lípidos salivales se debe extraer el análisis previos por medio de cloroformo-metanol
(2: 1) de acuerdo con el método de Folch. A partir de entonces, los lípidos pueden ser
separados y cuantificados por cromatografía de capa fina o con cromatografía de gas-
líquido.
Los lípidos salivales también pueden fraccionarse mediante cromatografía de columna de
ácido silícico.

Analysis of other salivary constituents

En la saliva nos encontramos con muchos otros constituyentes que por supuesto pueden
ser estudiados. Para tales fines, la literatura relacionada es la posesión, teniendo en
cuenta los conocimientos básicos de la química de la saliva biológica se resumen
brevemente en este artículo.