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Los siguientes cálculos son aplicados a todos los tubos por lo que sólo se dará el cálculo del tubo 1. PM
invertasa= 200000g/mol
cálculos de moles de enzima
10𝜇𝑔 𝐼𝑛𝑣𝑒𝑟𝑡𝑎𝑠𝑎 1𝑔 1𝑚𝑜𝑙 𝐼𝑛𝑣𝑒𝑟𝑡𝑎𝑠𝑎
1) 0.1𝑚𝐿 ( )( )( )= 5x10^-12 moles de invertasa
𝑚𝐿 1,000,000𝜇𝑔 200000𝑔 𝐼𝑛𝑣𝑒𝑟𝑡𝑎𝑠𝑎
𝐶𝑜𝑛𝑐𝑒𝑛𝑡𝑟𝑎𝑐𝑖ó𝑛 𝑚𝑜𝑙𝑎𝑟 𝑑𝑒 𝑒𝑛𝑧𝑖𝑚𝑎 [𝐸]
5𝑋1012 𝐼𝑛𝑣𝑒𝑟𝑡𝑎𝑠𝑎 1000 𝑚𝐿 𝑚𝑜𝑙𝑒𝑠
2) [𝐸] = ( )( ) = 2.5𝑋10−9 𝐼𝑛𝑣𝑒𝑟𝑡𝑎𝑠𝑎 →
2 𝑚𝐿 1𝐿 𝐿
𝑚𝑜𝑙𝑒𝑠
0.0025 𝑖𝑛𝑣𝑒𝑟𝑡𝑎𝑠𝑎
𝐿
𝐸𝑐𝑢𝑎𝑐𝑖ó𝑛 𝑑𝑒 𝑙𝑎 𝑐𝑢𝑖𝑟𝑣𝑎 𝑡𝑖𝑝𝑜 𝑑𝑒 𝑎𝑧𝑢𝑐𝑎𝑟𝑒𝑠 𝑟𝑒𝑑𝑢𝑐𝑡𝑜𝑟𝑒𝑠
3) Abs540nm= 1.842 (µmoles [AR])-0.0596
Abs540nm+0.0596 0.121nm+0.0596
(µmoles [AR])= →(µmoles [AR])= = 0.0980
1.842 1.842
Anexo 1.2
0.05
0.04 0.0348
0.0336
V0 MMOLES
0.03
0.0195
0.02
0.0098
0.01
0
0.0025 0.005 0.0075 0.01 0.0125
[E]
Anexo 2.1
Los siguientes cálculos son aplicados a todos los tubos por lo que sólo se dará el cálculo del tubo 1.
Ecuación
Abs540nm= 0.1594(µmoles [AR]) -0.2027
(0.301𝑛𝑚)+0.2027
µmoles [AR]= = 3.1599
0.1594
Anexo 2.2
0.6
0.5
0.4
V0
0.3
0.2
0.1
0
0 1 2 3 4 5 6 7 8
pH