Bioquímica I

PROBLEMAS TEMAS 3

1. Para una enzima que sigue la cinética de Michaelis-Menten, ¿cuál es el valor de la Vmáx si v0 es igual
a 1 M/min cuando la concentración de sustrato es 1/10 Km?

Sol: Vmáx = 11 M/min

2. ¿Cuál es la actividad relativa y el grado de inhibición producido por un inhibidor acompetitivo

cuando la [S] = 2 Km y la [I] = 3KI?

Sol: actividad relativa = 33,3 % ; grado de inhibición = 66,7 %

3. La isoenzima M4 de lactato deshidrogenasa de músculo de cerdo cataliza la reacción:

Lactato + NAD+  Piruvato + NADH + H+

La reacción está inhibida por oxamato. Se realizaron una serie de experiencias donde se mantuvo
constante la concentración de NAD+ (2,5 mM) y se trabajó a diferentes concentraciones de lactato
para concentraciones fijas de oxamato. Los resultados aparecen en la siguiente gráfica, en la que las
velocidades iniciales de reacción se expresan en moles/L·min, y las concentraciones de oxamato son
0, 0,1 M y 0,3 M:

0,60
1/v0 (moles/L·min)-1

y = 1,2632x + 0,2501
0,50

0,40
y = 0,8083x + 0,1603
0,30

0,20 y = 0,5769x + 0,1146

0,10

0,00
-0,40 -0,30 -0,20 -0,10 0,00 0,10 0,20 0,30
-0,10 1/[lactato] (mM)-1

-0,20

Determine:
a) el tipo de inhibición.
b) los valores de Km y Vmáx en ausencia y presencia de inhibidor.
c) el valor de KI.
d) el nº de recambio, si la concentración total de enzima es 1 nmol/L.
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Sol: a) Inhibición no competitiva.

b) Vmáx = 8,725 moles/L·min ; Km = 5,034 mM ; Km = Km,ap ; Vmáx,ap (I=0,1 M) = 6,23 moles/L·min ;
Vmáx,ap (I=0,3 M) = 3,998 moles/L·min
c) KI (I=0,1 M) = 0,249 M ; KI (I=0,3 M) = 0,254 M
d) Kcat = 8725 min-1 = 145,4 s-1

4. ¿Cuál es la relación v0/Vmáx cuando la [S] = 4Km?

Sol: v0/Vmáx = 4/5

5. ¿Cuál es la actividad relativa y el grado de inhibición producido por un inhibidor competitivo

cuando [S] = Km e [I] = Ki?.

Sol: actividad relativa = 66,7 % ; grado de inhibición = 33,3 %

6. La cinética de una enzima viene medida como función de la concentración de sustrato en ausencia
y en presencia del inhibidor I, a una concentración 2·10-3 M.

0,30
1/v0 (moles/min)-1

y = 0,0666x + 0,0222
0,25

0,20

0,15
y = 0,0224x + 0,0224
0,10

0,05

0,00
-1,00 0,00 1,00 2,00 3,00 4,00
-0,05
1/[S] (M)-1

a) ¿Cuáles son los valores de Vmáx y Km en ausencia de inhibidor?, ¿Y en su presencia?

b) ¿De qué tipo de inhibidor se trata?
c) ¿Cuál es el valor de KI?

Sol: a) Vmáx = 44,64 moles/min ; Km = 1 M ; Vmáx,ap = Vmáx ; Km,ap = 3 M

b) Inhibición competitiva.
c) KI = 1·10-3 M
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7. Una disolución de 1 mg/L de una enzima pura (peso molecular 25000 Da) cataliza una reacción con
una velocidad de 25 moles/L·min cuando [S] = 3·10-3 M y su y Km = 2·10-5 M. Calcule el número de
recambio de la enzima suponiendo que existe únicamente un centro activo.

Sol: Kcat = 6,29·108 min-1 = 1,048·107 s-1

8. En el estudio de una reacción enzimática se determinaron los valores de las velocidades iniciales
de la reacción para diferentes concentraciones de sustrato en presencia y ausencia de un inhibidor.
Las velocidades iniciales se expresan en moles de sustrato transformado/min, y las concentraciones
de sustrato en mM. Los resultados aparecen en la siguiente gráfica:

0,25
1/v0 (moles de sustrato transformado/min)-1

y = 1,125·10-4x + 0,0906
0,2 [I] = 0,25 M

y = 1,125·10-4x + 0,0438
0,15 [I] = 0,1 M

[I] = 0

0,1 y = 1,125·10-4x + 0,0125

0,05

0
0 200 400 600 800 1000 1200

1/[S] (mM)-1

a) Determine el tipo de inhibición.

b) Calcule todos los parámetros cinéticos.

Sol: a) Inhibición acompetitiva.

b) Vmáx = 80,01 moles/min ; Km = 0,009 mM ; Vmáx,ap (I=0,1 M) = 22,85 moles/min ; Km,ap (I=0,1 M)
= 2,57·10-3 mM ; Vmáx,ap (I=0,25 M) = 11,03 moles/min ; Km,ap (I=0,25 M) = 1,24·10-3 mM
c) KI (I=0,1 M) = 0,04 M ; KI (I=0,25 M) = 0,04 M

9. Si Vmáx = 100 moles/s y Km = 2 mM, ¿cuál es la velocidad de la reacción cuando [S] = 20 mM?

Sol: v0 = 90,9 moles/s

10. ¿Cuál es la concentración de un inhibidor no competitivo (KI = 4·10-6 M) que se requiere para
producir un 65% de inhibición en una reacción catalizada por una enzima?
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Sol: [I] = 7,44·10-6 M

11. Para una enzima determinada, con un valor de Km = 10 mM y Vmáx = 100 mmol/min.
a) Si [S] = 100 mM, qué produciría un mayor aumento de la velocidad: ¿una disminución de 10 veces
en el valor de Km, o un aumento de 10 veces en el valor de Vmáx?
b) Si [S] = 10 mM, qué produciría un mayor aumento de la velocidad: ¿una disminución de 10 veces
en el valor de Km, o un aumento de 10 veces en el valor de Vmáx?

Sol: a) Un aumento de 10 veces en el valor de Vmáx.

b) Un aumento de 10 veces en el valor de Vmáx.