UNMSM- FACULTAD DE MEDICINA - E.P.

MEDICINA HUMANA
DPTO.CIENCIAS DINÁMICAS. SECCIÓN BIOQUÍMICA Y BIOLOGÍA MOLECULAR.
CURSO: BIOQUÍMICA SEMESTRE 2022-II 27 de octubre, 2022

PRÁCTICA N˚7

DETERMINACIÓN DE GLUCOSA EN SUERO

INTRODUCCIÓN:

Las células dependen de reacciones bioquímicas complejas y coordinadas y los carbohidratos

son una fuente de energía importante que impulsan estas reacciones. La glucosa (Glu), principal
fuente de energía para las células proviene de la hidrólisis de los carbohidratos de la dieta, es
esencial para el cerebro, sistema nervioso periférico, eritrocitos y la médula renal. Después de
las comidas la Glu se oxida para producir energía, la insulina estimula su transporte al tejido
adiposo y muscular, la concentración de insulina en sangre aumenta cuando el alimento se
digiere y aumenta la glicemia.
En el hígado y en el músculo la insulina promueve la síntesis de glucógeno (glucogénesis) y
triglicéridos, cuando hay exceso de Glu. El glucógeno se degrada (glucogenólisis) en Glu y el
hígado lo libera al torrente sanguíneo cuando los niveles de Glu bajan.
La Glu también puede sintetizarse a partir de precursores diferentes a los carbohidratos
(gluconeogénesis).
Durante el ayuno, la insulina disminuye y el glucagón aumenta, promoviendo la glucogenólisis y
gluconeogénesis en el hígado, de modo que se mantiene la glicemia. La glicemia se regula por la
insulina (agente hipoglicemiante) y por el glucagón (hiperglicemiante). La insulina y el glucagón
son producidas por el páncreas, en las células beta se produce la insulina y en las células alfa de
los islotes de Langerhans, el glucagón. La acción conjunta de estas hormonas mantiene a la Glu
en un rango de 70 a 115 mg/dL en sangre.
La hiperglicemia en ayuno y posprandial caracteriza a la Diabetes Mellitus tipo 2 (DM2); la
hiperglicemia en ayuno es resultado de la resistencia hepática a la insulina, y la posprandial
resulta de la secreción anormal de insulina y de la toma inadecuada de Glu por los tejidos
periféricos sensibles a la insulina, particularmente en músculo esquelético.

La Glu normalmente no se encuentra en la orina y cuando está, es señal que ha rebasado el

umbral renal, es decir la capacidad del riñón para reabsorber la Glu filtrada; esto ocurre cuando
los niveles de glicemia sobrepasan los 180mg/dL. En este caso, la glucosuria revela la falta de
control de la hiperglicemia asociada a la diabetes.
Se diagnostica DM2 si el resultado es mayor a 126mg/dL en dos ocasiones.
Los niveles entre 100 y 126 mg/dL se consideran alteración de la Glu en ayunas o prediabetes.
Dichos niveles se consideran factores de riesgo para la DM2 y sus complicaciones.

COMPETENCIAS:
Al finalizar la práctica, el alumno será capaz de:
1. Explicar el fundamento del método enzimático GOD - PAP.
2. Determinar la glicemia en una muestra problema.

Dra. Doris Huerta Canales

UNMSM- FACULTAD DE MEDICINA - E.P. MEDICINA HUMANA
DPTO.CIENCIAS DINÁMICAS. SECCIÓN BIOQUÍMICA Y BIOLOGÍA MOLECULAR.
CURSO: BIOQUÍMICA SEMESTRE 2022-II 27 de octubre, 2022

FUNDAMENTO:

En la práctica se utiliza el método enzimático por acción de la glucosa oxidasa. La glucosa

presente en el suero, por acción de la enzima glucosa oxidasa produce ácido glucónico y
peróxido de hidrógeno; éste último, por acción de la peroxidasa oxida a la 4-aminoantipirina +
fenol, generando un compuesto de color rosado (quinoneimina), color que es proporcional a la
cantidad de glucosa presente en la muestra, y medible a 500 nm.

GOD
GLUCOSA+02 ÁCIDO GLUCÓNICO + H2O2

POD
2 H2O2 + Aminoantipirina + Fenol QUINONEIMINA + 4H2O (Reacc Trinder)

MATERIALES Y REACTIVOS: Ver el inserto

Solución estándar de glucosa 100 mg/dL

PROCEDIMIENTO DEL ENSAYO: Ver el inserto

Leer en el espectrofotómetro a 500 nm.

Hacer los cálculos para la determinación de la glicemia, según las fórmulas que corresponda.

[𝑆𝑡] 𝑉𝑡𝑚𝑝
MP = 𝐴𝑏st
* Ab MP * Fd * 𝑉𝑡𝑆𝑡
Si: VSt =VMP

𝑚𝑔𝑆𝑡 100 𝑉𝑡𝑚𝑝

MP= 𝐴𝑏𝑆𝑡
* Ab MP * 𝑉𝑅
*
𝑉𝑡𝑆𝑡
Si: VSt ≠ VMP

Calcular la concentración de glucosa en una muestra problema si la Absorbancia del Standard

es 0.320 y la absorbancia de la muestra problema es 0.380.

Interprete su resultado.

VALORES DE REFERENCIA- AYUNAS

Glucosa normal: 70 a 110 mg%

Diabético: > 126 mg%

Dra. Doris Huerta Canales