UNIVERSIDAD NACIONAL SAN CRISTÓBAL DE HUMANGA

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

ESCUELA PROFESIONAL DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA

DETERMINACIÓN DE GLUCOSA

PRÀCTICA N.º: 02

ASIGNATURA: BIOQUIMICA II (CF-344)

DOCENTE: Dr. YARLEQUÉ MUJICA, José Alejandro.

ESTUDIANTE: PALOMINO CAHUANA, Lisbeth.

DÌA Y HORA DE PRÀCTICA DE LABORATORIO: miércoles, 10:00 – 1:00 pm

SERIE: 300

AYACUCHO- PERÚ
2023
I. OBJETIVOS

 Interpretar el metabolismo de los glúcidos en la práctica.

 Determinar la glicemia empleando un método enzimático-espectrofotométrico.

II. MATERIALES

 Micropipetas

 Puntas azules y amarillas

 Tubo vacutainer con tapa roja o amarilla

 Espectrofotómetro UV-Vis

 Centrifuga

 Gradillas

 Baño Maria

 Tubos de ensayo

 Agua número 21

 Torundas de algodón

 Alcohol de 70°

 Ligadura

 Suero

 Glicemia enzimática
 III. RESULTADOS

Tabla 1. Determinación de glucosa en suero, obtenida el 14 de junio de 2023

Número de muestras Resultado de Resultado

espectrofotómetro

R1 0.330 97.92 mg/dl

R2 0.275 81.60 mg/dl

Y1 0.206 61.13 mg/dl

Y2 0.309 91.69 mg/dl

Interpretación: Determinamos espectrofotométricamente los compuestos coloreados a

una longitud de onda de 505 nm. De tal forma que obtuvimos un valor de glicemia

dentro de los valores establecidos, mi compañero (R1 y R2) presentó o tiene una

concentración de glucosa 97.92 mg/dl y 81.60 mg/dl. Lo cual nos indica que su glucosa

en sangre es una glicemia normal, ya que los valores de la glucosa en ayuno son de 70

mg/dl – 100 mg/dl. Mientras que de mi compañera (Y 1 y Y2) tiene una concentración de

glucosa en la sangre 61.13 mg/dl y 91.69 mg/dl respectivamente. Lo que también indica

que su glucosa en la sangre es una glicemia normal, solo que el dato de la Y 1 es debido

a errores de paralelaje.
 IV. DISCUSIONES

Los datos obtenidos en la práctica fueron mediante el método enzimático-

espectrofotométrico que nos permitido conocer y también saber si podríamos tener

diabetes o no. Tuvimos inconvenientes al realizar el procedimiento, pero nos dimos

cuenta que los dos de mis compañeros estaban en buenas condiciones. Es decir, que su

glucosa en sangre fue una glicemia normal, excepto de la muestra Y 1 ya que nos dio una

concentración de glucosa en la sangre de 61.13 mg/dl debido al inadecuado uso del

material.

Según Sánchez JT, menciona que la glucosa es una fuente importante de energía para

la mayoría de las células del cuerpo y se obtiene de los alimentos que consumimos día a

día. El cual es almacenado principalmente en el hígado y tiene un papel primordial en el

mantenimiento de los niveles de glucosa en la sangre. Para que esos niveles se

mantengan y el almacenamiento en el hígado sea lo adecuado, se requiere la presencia

de insulina, una hormona liberada por el páncreas. Esta hormona hace que la glucosa en

la sangre entre en los tejidos y sea utilizada en forma de glucógeno, aminoácidos y

ácidos grasos. Cuando la glucosa en la sangre está muy baja, en condiciones normales

por el ayuno, se secreta una hormona llamada glucagón que hace lo contrario para

mantener los niveles de glucosa en la sangre. Cuando la insulina es insuficiente la

glucosa se acumula en la sangre y si sigue manteniéndose así y no baja los niveles de

azúcar en la sangre, da lugar a una serie de complicaciones en distintos órganos. Es por

esta razón que se produce un aumento de glucosa en la sangre. Pero no solo el aumento

de glucosa en la sangre es un problema, sino también una insuficiente glucosa en la

sangre. Los niveles altos de glucosa en la sangre (hiperglucemia) pueden ser un signo de

diabetes, una enfermedad que causa enfermedad al corazón, ceguera, insuficiencia renal,
etc. y los niveles bajos de glucosa en la sangre (hipoglucemia) también puede causar

daño cerebral, etc. (1).

Por tanto, la determinación de glucosa en sangre es útil para el diagnóstico de

numerosas enfermedades metabólicas fundamentalmente de la diabetes mellitus.

También es necesaria esta prueba, una vez diagnosticada la diabetes, para controlar la

dosis de insulina que se debe administrar para tratarla.

Según Cruz LM, menciona que la diabetes es una enfermedad que se presenta

cuando la glucosa en la sangre está muy alta y mientras menos sea el control de la

glucosa en la sangre, existe mayor posibilidad de desarrollar otras enfermedades

asociadas a problemas cardiovasculares, neuropatías, daño renal, ojos, problemas de

piel, depresión, etc.  También se ha encontrado que la diabetes tipo 2 aumenta el riesgo

de desarrollar demencia, como la enfermedad de Alzheimer. Es por ello que el

mantenimiento de la glucemia o azúcar en la sangre en los organismos es fundamental

para el funcionamiento de todos los órganos, al ser la glucosa un metabolito energético

principal (2).
 V. CONCLUSIONES

Determinamos la glicemia empleando el método enzimático-espectrofotométrico. Es un

método que se caracteriza por ser más fiable, preciso, exacto y selectivo.
 VI. CUESTIONARIO

1. Describa y fundamente de otros métodos de determinación de glucosa

Según Rosquete G, and others., mencionan que también se utiliza para la

determinación de glucosa el método de condensación de la o-toluidina. La cual es un

método sencillo, confiable, específico para aldohexosas y, sobre todo, con gran

disponibilidad de reactivos químicos ya que la o-toluidina es la amina aromática y el

ácido acético glacial que se encuentran asequibles.

La o-toluidina está formada químicamente por tolueno y un derivado del petróleo,

que es la anilina. Y demostraron que es el método más específico y más exacto de los

métodos no enzimáticos conocidos para la medición de glucosa. Pero este método

también tiene inconvenientes donde no debe utilizarse en la población pediátrica, ya que

existe gran frecuencia de padecer de ictericia, de ahí que los niveles séricos de

bilirrubina pueden encontrarse altos y este actúa como un artefacto que interfiere en la

especificidad del método (3).

2. Analice y describa los valores de glucosa, insulina y glucagón en estados de

ayuna y posprandial

Según Mansillas LG, and others., mencionan que los valores de azúcar en la sangre en

estado de ayuna son < 100 mg/dl. Se debe a que la glucosa es el azúcar principal que se

encuentra en la sangre. Cuando comemos descomponemos los carbohidratos de los

alimentos o líquidos en azúcar para obtener energía. Pero como estamos en ayunas.

Nuestro cuerpo almacena azúcar en la sangre para su uso posterior. A medida que las
células usan el azúcar en la sangre, los niveles de glucosa e insulina en la sangre

disminuyen. Y los valores de azúcar en la sangre en estado de posprandial son < 140

mg/dl (4).

Según Luna M, and others., menciona que generalmente la insulina en ayunas fue

mayor en el sexo femenino que oscilan entre 8,78 μUl/ ml en el estadio II y 9,35 μUl/Ll

en el estadio IV, y en el sexo masculino entre 6,80 μUl/mL en el estadio I y 12,12

μUl/mL en el estadio II. Y los valores de insulina en estado posprandial son < 140

mg/dl (5).

Según Saz P & Ortiz L, mencionan que el glucagón es el responsable del aumento

importante que se observa en los niveles hepáticos de adrenalina y noradrenalina. La

hipoglucemia inicial es a su vez estimulante del glucagón, lo que lleva a una

intensificación de esta acción. En el ayuno aumentan los valores casi hasta el doble,

facilitando luego la provisión de glucosa por la gluconeogénesis hepática, para luego

disminuir lentamente hasta cifras iguales o ligeramente superiores a las previas al ayuno

3. ¿Qué glúcidos elevan menos la glicemia?

Según Álvarez J & Peña JP, mencionan que los glúcidos que elevan menor la

glicemia son los azúcares complejos (polisacáridos) ya que son los que sufren mayor

procesamiento digestivo y son absorbidos lentamente, lo que ocasionan menor

elevación de la glucemia. Es decir, los carbohidratos con bajo índice glucémico (menor

o igual a 55) son aquellos que tardan más en digerirse y no aumentan mucho los niveles

de glucosa en la sangre, lo cual promueven un mejor control de la liberación de insulina

posprandial. Y generalmente son glúcidos que se encuentran en los alimentos integrales,

fuentes de fibra y los menos calóricos. Es por ello que el bajo índice glucémico de los
alimentos puede ayudar en la dieta de las personas con diabetes, ya que estos alimentos

contribuyen a liberar progresivamente la glucosa en el torrente sanguíneo. Puesto a que

las personas con diabetes tienen una producción de insulina limitada o incluso ausente y

estos alimentos no causan una elevación súbita de glucosa sanguínea, lo que puede

afectar el control de la enfermedad (7).

4. ¿Cómo se sospecha que debiera estar la glicemia de un paciente que ingirió

una dieta alta en fructuosa y fundamente por qué?

Según Castillo P & Gómez RS, mencionan que al consumir una dieta alta en

fructuosa los valores de glucosa en la sangre no varían. Puesto a que la fructuosa tiene

un índice glucémico más bajo y por tanto no eleva considerablemente los niveles de

glucosa en sangre y además porque no requiere insulina para que el organismo la

procese, este tipo de azúcar es mucho mejor tolerada por los pacientes que padecen

diabetes. Además, se observó que el consumo de fructosa en altas concentraciones con

lleva a un riesgo de desarrollar obesidad, resistencia a la insulina, lipogénesis de novo e

inflamación. Debido a que presenta una capacidad edulcorante ligeramente mayor (8).
VII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

1. Sánchez JT. Determinación de la glucemia. 2019; [citado el 21 de junio de

2023]. Disponible en:

chrome-extension://efaidnbmnnnibpcajpcglclefindmkaj/https://www.fmed.uba.a

r/sites/default/files/2020-03/TP%20Determinaci%C3%B3n%20de%20la

%20glucemia.pdf

2. Cruz LM. Diabetes. 2020; [citado el 21 de junio de 2023]. Disponible en:

chrome-extension://efaidnbmnnnibpcajpcglclefindmkaj/https://www.fesemi.org/

sites/default/files/documentos/publicaciones/informacion-diabetes.pdf

3. Rosquete G, Gonzáles E, Londres D, Manzano V. Evaluación de glucemia.

AMC, Camagüey, 2019; 11(2); [citado el 21 de junio de 2023]. Disponible en:

http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1025-

02552007000200005

4. Mansillas LG, Gómez FJ & Rull JA. Diagnóstico y clasificación de la diabetes

mellitus, conceptos actuales. Revista de endocrinología y nutrición. 2020; 10(2):

63-68. [citado el 21 de junio de 2023]. Disponible en:

chrome-extension://efaidnbmnnnibpcajpcglclefindmkaj/https://www.medigraphi

c.com/pdfs/endoc/er-2002/er022d.pdf

5. Luna M, Zerpa Y, Briceño Y, Gómez R, Camacho N, Valeri L, and others.

Valores de insulina basal y post carga de glucosa oral, homa-ir y quicki, en niños

y adolescentes de la ciudad de Mérida, Venezuela. Influencia del sexo y estadio

puberal (estudio credefar). REV. 2019; 12(3); [citado el 21 de junio de 2023].

Disponible en: https://ve.scielo.org/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1690-

31102014000300005

6. D
7. Álvarez J & Peña JP. Fibra dietética: efecto sobre el control glucémico y el

metabolismo de los carbohidratos y lípidos. Rev Esp Nutr Comunitaria

2019;13(1):30-39. [citado el 21 de junio de 2023]. Disponible en: chrome-

extension://efaidnbmnnnibpcajpcglclefindmkaj/https://www.renc.es/imagenes/

auxiliar/files/NUT_0162006_Fibra.pdf

8. Castillo P & Gómez RS. El consumo de fructosa: riesgos para la salud y la

economía. 2021; [citado el 21 de junio de 2023]. Disponible en: chrome-

extension://efaidnbmnnnibpcajpcglclefindmkaj/https://www.revistaciencia.amc.

edu.mx/images/revista/54_2/consumo_fructuosa.pdf
 VIII. ANEXO

Anexo 1. Procedimiento para la determinación de glucosa en la sangre.

 Extracción
Mezclar y llevar
aproximadamente de a baño maria a
Luego se
5ml deuna agrega 20 ul de suero
temperatura
sangre venosa de 37°C Centrifugar a 3500 rpm por 5 minutos
adelos 4dos
tubos
duranterestantes
10 minutos.
compañeros
voluntarios

Colocación dentro de delhaber llevado

Después
espectrofotómetro
durante 10 minutos a baño maria

Al estándar también Añadimos 2 ml de la glicemia

agregar 20 ul de enzimática (A) a los 6 tubos, con la
glicemia enzimática (S) ayuda de una pipeta

Anotar los resultados obtenidos |.|Glucosa∗[Standar ]

[Glucosa] =
para su posterior cálculo |.|Standar
Anexo 1. Método de Trinder.

O2 H2O

H2O2

4H2O
H2O2

Fgu 1. Determinación de glucosa en suero, obtenida el 14 de junio de 2023

El compuesto se colorea de rojo, debido a la enzima glucosa oxidasa que cataliza la

oxidación de glucosa en presencia de oxígeno y agua, formando así el ácido glucónico y

peróxido de hidrógeno. Luego el peróxido de hidrógeno más 4-aminofenazona y fenol

se oxida gracias a la enzima peroxidasa hasta formar este compuesto coloreado, la

quinonimina