Universidad de Carabobo

Facultad de Ciencias de la salud

Escuela de Bioanálisis
Asignatura Bioquímica clínica

Evaluación funcional del

páncreas endocrino

Prof (a). Gregoria González Mayo

 Evaluación funcional del páncreas endocrino
La función endocrina del
páncreas depende de la
secreción de las hormonas:
Insulina, Glucagon y Somatostatina

Células Alfa glucagon

Células Beta Insulina

Células delta Somastotatina

Células PP Polipéptido
Pancreático

Tomado de Harvey.(2005) Bioquímica. 3 era edicción

Insulina……………..
Es una hormona polipeptídica, que coordina el uso
de los combustibles en los tejidos, sus efectos metabólicos
son anabólicos: síntesis de glucógeno, triglicéridos y proteínas.

Tomado de Harvey.(2005) Bioquímica. 3 era Edicción

Síntesis de la Insulina………
REGULACIÓN DE LA SECRECIÓN DE INSULINA
Estimulación de la secreción de la
insulina:

GLUCOSA

AMINOÁCIDOS

HORMONAS
GASTROINTESTINALES

Inhibición de la secreción de
insulina:

Disminución de combustibles de la
dieta, estrés Adrenalina
Acciones de la insulina
Determinación Bioquímica:
Muestra: Suero

Insulina basal
PTOG 2 horas

Métodos de determinación: Radioinmulógicos (RIA)

ELISA
Interferencias: reacciones cruzadas con pro-insulina (30%)

Valores de referencia: insulina basal 5-25 mU/mL

2 horas corte de 60 mU/mL
50% de los valores
de la insulina basal
Proporción de insulina/ glucosa: menor de 0.3 Secreción
inadecuada

Hipoglicemia.

HOMA: Indíce de insulinoresistencia :

insulina basal x glicemia basal = < 2.5

22.5
Prueba de tolerancia a la insulina
consiste en: determinar los niveles en ayunas de
glucosa
suministro por vía IV de insulina U/ kg
medición de los niveles de glucosa a los
30, 60, 90,120 min.

Interpretación: repuesta normal: reducción del 50% de la

glucosa a los 30min y retorno a los niveles basales a los
90-120min.

Utilidad: valoración de pacientes con RI

PÉPTIDO C…………..

El péptido C es el conector en la proinsulina

Su presencia en el plasma indica secreción endógena
de insulina

Muestra: suero
Método de determinación: RIA
Valores de referencia: 1-2ng/mL

Utilidad clínica: diagnóstico de insulinomas (hipoglicémicos)

control de la secreción endógena de insulina
de las células beta (pacientes con DM con tto)

remisión o recuperación de la diabetes

(Glicemias normales)
Glucagon……………..
Es una hormona polipeptídica,
la cual junto con la adrenalina, cortisol,
hormona del crecimiento
(hormonas contrarreguladoras)
se oponen a la acción de la Insulina.

Estimulación de la secreción de
Glucagon:
glucosa sanguínea baja
aminoácidos
Adrenalina

Inhibición de la secreción:
Glucosa elevada en sangre
Insulina
Somatostatina: actúa localmente regulando la liberación de
insulina y glucagon por el páncreas.
INSULINA GLUCAGON
Importancia de la regulación de la glicemia

La glucosa es el único nutriente que utiliza en condiciones

Normales: encéfalo, retina, epitelio germinativo de las gónadas.

glucosa formada por gluconeogénesis es utilizada por el

cerebro (entre comidas)

No deben excederse por : deshidratación celular, pérdida de

glucosa por la orina DIURESIS OSMÓTICA

Líquidos y electrolitos del

organismo
EVALUACIÓN DE LA FUNCIÓN ENDOCRINA
DEL PÁNCREAS

Glucosa plasmática en ayunas

Glucosa en orina
Prueba de tolerancia a la glucosa
Niveles de insulina
Niveles de péptido C
Prueba de tolerancia a la insulina
Hemoglobina glicosilada
Fructosamina
Determinación de cuerpos cetónicos
Determinación de Ac receptores de insulina
Determinación de glucosa
La glucosa es una aldohexosa, en la que la forma aldehídica está en
equilibrio con la forma enodiólica ,lo que permite que esta pueda ser reducida
y/o oxidada.

CARACTERÍSTICA FUNDAMENTAL PARA LOS MÉTODOS

DE DETERMINACIÓN.

Métodos químicos: O-toluidina

Métodos enzimáticos Hexoquinasa
glucosa oxidasa Fenilaminofenazona (pto final)
Fenilaminofenazona (cinético)
índice de oxígeno
Método de hexoquinasa
HK
Glucosa +ATP Glucosa-6-P+ ADP

G6pD
Glucosa -6-P +NADP 6-fosfogluconolactona+NADPH

Método glucosa oxidasa

Glucosa +O2 GOD Ácido Glucónico + H 2 O2

H2 O2 + cromógeno Peroxidasa Compuesto coloreado+H 2 O2

(fenilalamina –fenazona)
Interferencias:

Sustancias reductoras inhiben la oxidación de los

cromógenos

La creatinina y ácido úrico pueden producir un

aumento mínimo.

Ácido ascórbico produce una falsa disminución

de los valores de glucosa.

Usar sueros hemolizado ciertos medicamentos actúan

sobre el metabolismo de la glucosa como: AO,
diuréticos tiácidicos, esteroides, anticonvulsionantes.
Consideraciones acerca de las muestras
Suero, plasma, líquidos orgánicos, orina.

Ayuna de 8-16 horas

La glucosa des sangre capilar es 2 a 3 mg/dl más elevados que la sangre

venosa
En período posprandial y en niños es más elevada de 20-30 mg/dlL.

Conservación de la muestra:

Centrifugar la muestra en un plazo no mayor de 30min

En caso de no poder ser procesada la muestra de sangre

debe utilizarse un conservador :fluoruro de sodio (2 mg por cada ml de sangre)

La glucosa es estable en suero o plasma una vez refrigerada por 48 horas.

Variaciones plasmáticas de la glucosa.

En individuos sanos los niveles de glucosa varían ligeramente durante

el día, intervalo de 45-130 mg/dl ( 2,5-7,2 mmol/L)

Después de una comida rara vez aumenta por encima de 15 mg/dL

Los individuos sanos mayores de 65 años presentan niveles elevados

de glucosa hasta 180 mg/dL.

Los RN pueden tener glucosa de 20-80 mg/dL

Antes de los 5 años los niveles de glucosa pueden ser 10-15%
menores que los adultos.

Valores de referencia : 50-100 mg/dL

Interpretación clínica :

Hiperglicemias: >100 mg/dL

Fisiológica :ejercicio intenso, período menstrual
Estrés, Shock traumático , asfixia, anestesia
Diabetes Mellitus
Acromegalia, S. Cushing, tiroides
Fiebre e infecciones agudas
Encefalopatías, Traumatismo cerebral, hemorragias cerebrales
Insuficiencia hepática
Pancreatitis aguda (Destrucción masiva del páncreas)
Diabetes gestacional.

Hipoglicemias: < 54 mg/dL

Posprandial (reactiva) Neonatal
Espontánea (Ayuna)
Glucosa posprandial de 2 horas.
Fundamento fisiológico : se basa en la capacidad que
tiene el organismo de responder frente una carga de CHO
en un período de tiempo determinado.

Consiste en la determinación de glucosa plasmática dos

horas después de que el paciente consume alimentos que
Consume en el desayuno.
Interpretación:
2 horas= los valores deben ser similares a los valores
obtenidos en ayunas.
valores >120 mg/mL: pacientes con DM mal controlada

Utilidad clínica:
Control metabólico de los pacientes con DM
Evaluación del metabolismo de carbohidratos.

Desventaja de la prueba:
El significado del valor obtenido queda limitado por la ausencia
De condiciones controladas como:
cantidad de hidratos de carbono
Edad del paciente
Infecciones
Prueba de tolerancia a la glucosa
Fundamento fisiológico:

Glucosa sangre Metaboliza en los

Absorbida
en intestino insulina tejidos

Absorción, metabolismo y excreción de la glucosa

Condiciones óptimas para la realización de la PTOG

Criterios de Análisis
Estará indicada a:
Pacientes que presentan síntomas clínicos de DM
(polidipsia, polifagia y poliuria) sin glucosuria y glicemia
en ayunas <126mg/dL.

Pacientes con historia familiar de DM , pero sin síntomas.

Pacientes embarazadas que presenten glucosuria , pero con

glicemia basal < 92mg/dL

Mujeres con fetos macrosómicos (niños > 4.5 Kg)

Requisitos (Asociación Americana para la diabetes
(ADA).1997)

Ayuno de 8-16 horas, sólo se le permitirá tomar agua

El paciente puede ingerir tres días antes de la prueba sus
alimentos y tener actividad física habitual.
No debe estar recibiendo hipo o hiperglicemiantes
No debe sufrir ninguna enfermedad endocrina (Acromegalia,
Hipertiroidismo, S Cushing)
El paciente debe ser ambulatorio

Debe suspender tres días antes en lo posible la

administración de medicamentos (corticoides, salicilatos,
anticonvulsionantes)
 Durante la PTOG el paciente debe mantenerse en reposo,
no fumar

En la medida de lo posible , no debe realizarse durante

procesos infecciosos activos o intercurrentes.

Los pacientes con HIV con tratamientos con proteasas pueden t

resultados alterados

Dosis

En niños, la carga de glucosa se calcula 1.75 g

por Kg de peso corporal

75 g de glucosa diluidas en100 mL de agua para el adulto

(solución glucosada comercial)

100 y/ o 75g para las embarazadas

 Procedimientos analíticos

7-9 AM y después de 30 min de reposo , se obtiene

una muestra para determinar la glicemia basal

Administrar por vía oral la dosis de glucosa (no mayor de 5min)

Una vez concluida las dos horas de haber consumido la dosis
de glucosa se tomará una muestra para determinar la glucosa a
las dos horas.

Nota: durante el desarrollo de la prueba el paciente no debe

fumar, ingerir ningún tipo de alimento y tener reposo
moderado.
Interpretación.

Glicemia < 140 mg/dL repuesta normal

Glicemia 140-199 mg/dL Alterada

Glicemia ≥ 200mg/dL Diagnóstico

bioquímico de DM
Prueba intravenosa a la glucosa (PTIVG):
Indicada: pacientes con mala absorción de la glucosa
Dosis: 0,5 g/kg de peso
Glicemia basal y a los 120 min
Interpretación: el valor de glicemia a los 120min debe ser
Igual o inferior al valor basal.
Prueba de tolerancia a la glucosa en embarazadas
Estará indicada en todas aquellas embarazadas que presenten
los siguientes factores de riesgo de diabetes gestacional:

Obesidad o sobrepeso
Antecedentes familiares de DM tipo 2
Antecedentes de diabetes gestacional
Edad mayor de 25 años
Antecedentes de RN macrosómicos ( 4 kg o más)
Antecedentes de abortos repetidos
Presencia de glucosuria
Hipertensión arterial
Antecedentes de dislipidemias
Antecedentes de hiperinsulinemia
Antecedentes de síndrome de ovario poliquístico
 Diagnóstico de diabetes gestacional

Evaluar los factores de riesgo de DG y glicemia en ayunas

Glicemia en ayunas

≥ 92 mg/dL <92mg/dL

Repetir < 92mg/dl PTOG

(24-28 semanas

ANORMAL
≥ 92mg/dL NORMAL

Factores de riesgo
Repetir PTOG
DIABETES GESTACIONAL 4-6 sem

ANORMAL NORMAL
 Criterios de análisis
Glicemia <105 mg/dl
75g 0 100g de glucosa
Glicemia basal y glicemia a las dos horas

Criterio diagnóstico

Ayunas 2 horas

Normal <92 mg/dL < 140 mg/dL

D gestacional ≥ 92 mg/dL ≥ 140 mg/dL

La importancia del diagnóstico de la DG no sólo se limita

al conocimiento del efecto deletéreo sobre la embarazada y
su producto sino que constituye un importante factor de
riesgo para la aparición de DM tipo 2 en la mujer.
Hemoglobina glicada
Glicación:
Adición monoenzimática del grupo amino residual
de las proteínas al azúcar.

Grupo amino
N-terminal de la Valina + Glucosa Adimina

HbA + Glucosa PreHbA1c HbA1c

HbA1c: 3-6% Hb total

Utilidad: Evalúa los niveles promedios de la glucosa en los
últimos 120 días.

Diagnostico, Seguimiento y control del paciente con

DM
Métodos de determinación

Cromatografía (HLPC) y de intercambio iónico

Inmunoquímicos ( turbidimétricos)

Muestra: sangre total con anticoagulante

Valores de referencia: HbA1: 4.5-6.0%

HbA1c: 4-6%
Paciente con DM controlados: 7-9%
Meta < 6.5%
Anticuerpos y receptores de insulina
Anticuerpos antiinsulina
Anticuerpos antireceptores de insulina
Anticuerpos contra células Beta.
Métodos de Determinación:
Inmunoenzimáticos
Inmunofluorescencia Indirecta

Utilidad: diagnóstico diferencial de Diabetes mellitus tipo1

Diabetes mellitus
Es un desorden metabólico de etiología multifactorial,
caracterizado por una hiperglicemia crónica

Resistencia periférica ala insulina

Disfunción de la secreción de la insulina o ambas

Alteraciones en el metabolismo
de CHO, lípidos, proteínas.

Síntomatología: poliurea, polidipsia, polifagia, pérdida de peso, fatiga,

susceptibilidad a infecciones
Diabetes mellitus (DM):
“ Síndrome caracterizado por insuficiencia absoluta o
relativa de la secreción de insulina y la insensibilidad o
resistencia de los tejidos diana a la acción de la insulina”
Clasificación: (ADA;OMS;1997)
Diabetes mellitus tipo 1 autoinmune
idiopática
Diabetes mellitus tipo 2

Otros tipos: defectos genéticos de la función de la célula β

Defectos genéticos en la secreción de la insulina
Enfermedades del páncreas Exócrino
Endocrinopatías
Diabetes inducida por drogas o sustancias químicas

Diabetes gestacional
Factores de riesgo para la diabetes
Clínicos
Alta ingesta de grasa, particularmente saturada

Alta ingesta calórica

Sedentarismo

Grupos étnicos de alto riesgo: afroamericanos,latinos, afroasiáticos

Edad > de 45 años o 30 con IMC > 25Kg/m2

Antecedentes familiares de DM tipo 2 en familiares en pimer grado

Obesidad visceral

Hipertensión arterial

Síndrome de ovario poliquístico

Diabetes gestacional
Metabólicos

Glicemia en ayuna alterada

Intolerancia a la glucosa

Dislipidemia, particularmente triglicéridos >250 mg/dl y HDL < 35 mg/dl

Prueba de tolerancia a las grasas anormal

Niveles elevados de insulina basal

HOMA > 2.5

Hiperuricemia

Microalbuminuria
Síndrome metabólico como factor de riesgo
(Plurimetabólico, Síndrome X, Dismetabólico cardiovascular)

Es un grupo de alteraciones metabólicas y clínicas consideradas

cada una de ellas como de riesgo cardiovascular, que tiene una
tendencia a agregarse, confiriendo un mayor riesgo de diabetes
y de enfermedad cardiovascular

Diagnóstico

Criterios de la OMS Criterios de NCEPATPIII

(1998) (2001)
IG o GGAy/O IR(HOMA) 3 o más de los elementos
+2 o más de los siguientes
Indice cintura/cadera 0.85(mujer) Obesidad abdominal: CC>
82 cm o 0.9(hombre) y/o IMC> 30 Kg/m2 y > 102 cm
(hombres).

Triglicéridos>150mg/dl y/o HDL Trigliceridos >150 mg/dL

< 35 mg/dl(mujer) o 40 mg/dL(hombre)

Presión arterial> 140-90 mmhg HDL <50mg/dL(mujer) o 40

mg/dL(hombre)

Microalbuminuria: EUA: 20mg/min

Relación albúmina/creatinina> 30
Criterios de diagnóstico de la DM e intolerancia a la glucosa

Síntomas clínicos de Diabetes mellitus con una glicemia

al azar ≥200 mg/dL

• En ausencia o presencia de síntomas con glicemia

en ayunas ≥ 126 mg/dL

•Glicemia ≥200 mg/dL a las 2 horas de la sobrecarga

con 75 g de glucosa

•Los expertos consideran un grupo intermediario de sujetos

quienes no pueden ser catalogados con diabetes sino
sensibles a la intolerancia a la glucosa.
pacientes con glicemia en ayunas 100 mg/dL con IMC < 25Kg/m
>100 mg/dL con IMC >25Kg/m