MANUAL DE PROCEDIMIENTOS DE

HEMATOLOGÍA

HOSPITAL SAN PEDRO CLAVER

 TOMA DE MUESTRA

OBTENCIÓN DE SANGRE VENOSA

EQUIPO MATERIAL

Camilla o silla de extracción Agujas adultos 19 - 20 o 21 G * i ¼ “o ½ “

Basurero . Preferentemente 21 G * 1- 1 ¼ bisel largo
Niños 22 G * 1”o 1 ¼ “
Jeringa descartadle de capacidad adecuada
A la cantidad de muestra a obtenerse.
Tubos y frascos para le recolección de la muestra.
Torundas de algodón
Antiséptico
Anticoagulantes
Ligadura
Guantes
Tubos Vacutainer pueden reemplazar la aguja y
jeringa

PROCEDIMIENTO

1.-Anote y registre los datos del paciente tanto en los cuadernos de registro como en los tubos
donde se colocará la muestra.
2.-Ubicar al paciente en la camilla ó en la silla de extracción, se debe estandarizar la posición.
3.- Explicar al paciente en lenguaje claro el procedimiento al cuál será sometido.
4.-Colocarse guantes
5.-Localice la vena adecuada para la punción.
6.-Ligue unos 7 cm. arriba de la fosa ante cubital (pliegue del codo)
7.-Pida que el paciente cierre la mano pero que no lo haga con mucha fuerza.
8.-Localice la vena palpando y visualizando cuál es más apta.
9.-Desligar, esperar que el flujo sanguíneo se restablezca.
10.-Limpie el sitio de punción con torunda de algodón impregnada de alcohol 70% u otro
antiséptico cutáneo, con movimiento circular desde adentro hacia la periferia.
11.-Espere que la piel este bien seca.
12.-Ligue.
13.- Pida al paciente que cierre la mano.
14.- Con el dedo índice ó el pulgar de la otra mano fije la vena en un lugar próximo al de la
punción par evitar que esta se mueva.
15.- Introducir la aguja con una inclinación de 45 a 60º respecto a la vena con el bisel hacia
arriba.
16.-Retirar el torniquete (ligadura) y aspirar la sangre, ni muy lento (puede coagularse) ni muy
rápido (se hemoliza).
17.-Tomar la cantidad necesaria.
18.-Indique al paciente que abra la mano.
19.-Aplicar algodón seco estéril y retirar la aguja de la vena.
20.-Preferentemente con el brazo extendido, ejercer presión sobre el algodón en el lugar de la
punción por 2 a 5 minutos.
21.-Vaciar la muestra retirando la aguja, haciendo deslizar suavemente por las paredes del
tubo.

RECOMENDACIONES

- Registrar los nombres y apellidos del paciente.

- El paciente debe estar en ayunas por lo menos 8 horas(no indispensable pero si
recomendable para el hemograma)Para cuantificación de triglicéridos, bilirrubina el
ayuno prolongado incrementa los valores.
- El paciente debe estar en reposo ( por lo menos dos minutos) y tranquilo, estandarizar
la hora de toma y posición del paciente.
- Siempre observar cuál es la vena adecuada, buscando ambas extremidades.
- Solicitar colaboración de otra persona cuando se trata de niños para que mantengan la
posición adecuada ya que es preferible actuar con firmeza antes que realizar varios
“pinchazos”.
- El torniquete no debe estar más de un minuto ya que produce alteración en la
composición de la sangre por eso:
- Desligar previamente a la punción si se ligo largo tiempo buscando la vena accesible.
- Desligar una vez que se canaliza la vena.
- No aspirar muy rápido ya que se crea vació en la vena que colapsa las paredes.
- Cuando suceda lo anterior, solicitar al paciente que realice movimientos de abrir y
cerrar la mano.
- Siempre esperar que el antiséptico se evapore ya que de otra manera se produce
hemólisis.
- Se debe “preparar” la jeringa antes de canalizar la vena, pues es necesario destrabar el
émbolo deslizándolo varias veces y ajustar la aguja de tal manera que el bisel quede
hacia arriba a la par que la escala de volumen de la jeringa.
- No se debe tapar la aguja de la jeringa con su cobertor esto para evitar pinchazos con
variables consecuencias. (Normas de Bioseguridad).
 - Eliminar la aguja en un recipiente de paredes rígidas y bien identificado, para ese fin
puede emplearse botellas plásticas de refresco.

FUNCIÓN CUTÁNEA O CAPILAR

MATERIAL

Elementos de asepsia y antisepsia

Lanceta descartable estéril
Tubos capilares heparinizados.

PROCEDIMIENTO

1.-Realizar la antisepsia del lugar elegido (lóbulo de la oreja .pulpejo del dedo anular, planta
del pie en lactantes).
2.-Dejar secar el área.
3.-Puncionar con rapidez y firmeza de tal manera que ingrese toda la punta de la lanceta.
4.-Descartar la primera gota.
5.-Tomar la sangre que fluye libremente, llenando ¾ partes del capilar, una vez realizado esto
deben ser sellados con plastilina.
6.-Realizar hemostasia por compresión.

RECOMENDACIONES

- En niños el lugar de punción es a los bordes externo o interno de la planta del pie,
nunca en el talón (centro o en el arco plantar) pues hay riesgo de llegar al hueso o
lastimar los tendones.
- Informar claramente en los resultados que la muestra es de origen capilar.
- No efectuar presión para lograr obtener la muestra ya que da hematocrito falsamente
disminuido.
- Calentar la piel del lugar a puncionar.
- El daño tisular libera tromboplastina y consecuentemente puede dar recuento de
plaquetas falsamente bajo.
 TIPIFICACION DE GRUPO SANGUINEO A B
Y FACTOR Rh

MATERIAL REACTIVOS

Porta objetos Antisuero A

Varillas o palillos Antisuero B
Reloj o cronometro Antisuero D (anti Rh)

FUNDAMENTO Y UTILIDAD

La tipificación de grupo sanguíneo y factor Rh se basa en la aglutinación, producto de la

unión de los antigenos que poseen los glóbulos rojos con los antisueros respectivos. Es de
utilidad para recibir y/o donar sangre.

MUESTRA

Sangre entera (puede ser con o sin anticoagulante) ó glóbulos rojos lavados.

PROCEDIMIENTO: (técnica en placa o portaobjetos)

Antes de realizar la prueba, atemperar los antísueros:

1.-Colocar tres gotas de sangre (una en cada extremo del portaobjetos y una al centro).
2.-Adicionar a cada una el antisuero correspondiente (una gota) de acuerdo al siguiente orden:
Para la gota de la izquierda, el antisuero A
Para la gota del medio, el antisuero B
Para la gota de la derecha, el antisuero D Dibujo
3.-Mezclar con varilla o palillo la gota de sangre con su respectiva antisuero.
4.-Rotar suavemente por dos minutos, máximo tres.
LECTURA

Efectuar la lectura directamente buscando aglutinación.

INTERPRETACION

La visualización de aglutinación indica una reacción positiva:

Para el factor Rh:

Aglutinación = Rh Positivo (+)

No aglutinación = Rh Negativo (-)

Para el grupo sanguíneo:

Aglutinación con el antisuero A solamente = grupo sanguíneo “A “

Aglutinación con el antisuero B solamente = grupo sanguíneo “B “
Aglutinación con antisuero A y B = grupo sanguíneo “AB “
Ausencia de aglutinación en A y B = grupo sanguíneo “O “

RESULTADOS

Se informa el grupo sanguíneo en letras mayúsculas, acompañados del factor Rh, este último
escrito y entre paréntesis el signo sea (+) ó (-)

Ejemplo grupo sanguíneo = A, Rh: Positivo (+).

PRUEBA CONFIRMATORIA (EN TUBO)

Para los casos de factor Rh Negativo, si bien hay varios procedimientos recomendamos el
siguiente:

1.- Lavar los glóbulos rojos (a confirmar) con solución fisiológica en tres oportunidades y
preparar una suspensión de los mismos al 5% en solución fisiológica.
2.-Colocar dos gotas del Antisuero D y una de la suspensión en un tubo de hemólisis.
3.-Mezclar y centrifugar a 3.500 rpm por 20 segundos.
4.-Agitar el tubo para desprender las células buscando aglutinación.
5.-Si no hay aglutinación se procede de la siguiente manera:
- Incubar el mismo tubo 15 a 30 minutos a 37 grados C.
- Centrifugar y volver a leer como en los puntos 3 y 4.
- De persistir la ausencia de aglutinación realizar la Prueba de la antiglobulina (Coombs
directo) o mandar al laboratorio de nivel superior.
- Si no hay aglutinación, se confirma que el Rh es negativo.
- Si hay aglutinación, significa que es un Du (débil positivo)

RECOMENDACIONES

- Cuando el factor Rh sea NEGATIVO realizar prueba confirmatoria o pasar al

laboratorio de nivel superior.
- Puede realizarse la prueba confirmatoria en tubo, también para el Grupo Sanguíneo
- Aunque los antísueros tienen anticoagulante, si la muestra es depositada directamente
(sin anticoagulante) debe mezclarse ésta con el antisuero respectivo lo más rápido
posible.
- Las gotas de la muestra y antisuero deben ser de volumen semejante para evitar el
fenómeno de prozona que da resultados falsos ( en placa)
- Usar varillas diferentes para mezclar cada antisuero con su respectiva gota de muestra
(sangre).
- Al iniciar un nuevo reactivo se debe probar con controles conocidos.
- Eliminar las lancetas en un recipiente de paredes rígidas y bien identificado, para este
fin puede emplearse botellas plásticas de refresco.
 ANTICOAGULANTES

En hematología debe saber elegirse siempre el anticoagulante idóneo y mantener una adecuada
proporción entre éste y el volumen de sangre extraída.

El anticoagulante idóneo para hematología debe cumplir los siguientes requisitos:

1.- No alterar el volumen de los eritrocitos.

2.- No producir hemólisis.
3.- Evitar la agregación de las plaquetas.
4.- No alterar la morfología leucocitaria.

Entre los anticoagulantes más usados tenemos:

Sales sódicas o potásicas del ácido etilen diamina tetra acético (EDTA)

Modo de acción: Estos compuestos realizan su acción mediante un efecto quelante sobre el
calcio, fijándolo pero sin llegar a precipitarlo.

En la practica se han empleado sales di sódicas, di potásicas y tripotásicas del EDTA, siendo
las de potasio más recomendables que las de sodio por su mayor solubilidad en la sangre
especialmente en su forma seca.

Usos y ventajas: El ICSH considera como anticoagulante de elección en hematimetría a la sal

di potásica del EDTA (EDTA – K2), ya que posee las siguientes ventajas:

1.- Respeta la morfología eritrocitaria y leucocitaria, de manera que permite una demora de 2
horas en la realización de la extensión sanguínea después de la extracción.
2.- Asegura la conservación de las células sanguíneas durante 24 horas si la sangre se
mantiene a 4º C.
3.- Al suministrarse en forma seca no ejerce ningún efecto de dilución sobre la sangre total.
4.- Al inhibir la aglutinación de las plaquetas, facilita su recuento o su apreciación
semicuantitativa a partir de la extensión
La concentración de EDTA-K2 recomendada es de 1-2 mg por cada milímetro (ml) de sangre..

Mezcla de oxalato amónico y potásico (mezcla de Wintrobe)

Este anticoagulante empleado durante mucho tiempo para la realización del hemogra, ha sido
sustituido en la actualidad por el EDTA. Actúa por precipitación del calcio, es de fácil
preparación, pero tiene el inconveniente de que al alterar sensiblemente la morfología
Eritrocitaria, puede producir variaciones imprevisibles del VCM. Se emplea en forma de
polvo, constituido por oxalato amoniaco y oxalato potásico en la proporción de 3 a 2
respectivamente.

Su composición es:

Oxalato de potasio 4 g
Oxalato de amonio 6 g
Agua destilada 500 ml

La cantidad recomendada es de 2 mg de mezcla por cada ml de sangre.

Heparina

Es un anticoagulante fisiológico y, por tanto, ideal para evitar la coagulación sanguínea in

vivo. Es el mejor anticoagulante para la prevención de la hemólisis y para las pruebas de
fragilidad osmótica. Aunque tiene la ventaja de no alterar el volumen eritrocitario ni la
morfología de los leucocitos, no es recomendable su empleo para la realización de la extensión
sanguínea, ya que mediante los colorantes habituales produce una coloración de fondo
excesivamente azulada.

La heparina (de sodio o de litio) puede usarse en forma seca o líquida.

La proporción aconsejable es 0.1 – 0.2 mg de heparina por 1 ml de sangre.
Un miligramo de heparina en polvo equivale aproximadamente a 125 UI.

Citrato sódico

Es el anticoagulante de elección para determinar la eritrosedimentación o velocidad de

sedimentación globular (VSG) y para las pruebas de coagulación. Actúa a través de la
precipitación del calcio.

Se emplea en forma de solución de citrato trisodico.

Para la determinación de la VSG, la proporción utilizada es de 1 vol. De solución de citrato

trisodico al 3.2 % y 4 vol. De sangre.

Para las pruebas de coagulación, la proporción utilizada es de 1 vol. De solución de citrato

trisodico al 3.2 % (109 mmol/L) y 9 vol. De sangre. La proporción de sangre/anticoagulante
puede variar según el hematocrito pero siempre la concentración final del citrato debe ser 109
mmol/l en la mezcla final.

FROTIS DE SANGRE

MATERIAL

Portaobjetos desengrasados y limpios

Cubreobjetos
Lápiz graso o similar

UTILIDAD

Realizar un extendido delgado y uniforme para posteriormente teñirlo y apreciar sus

constituyentes.

PROCEDIMIENTO

1.- Se deposita en el portaobjetos (próximo a un extremo) una gota de sangre con

anticoagulante, puede ser también directamente de la jeringa.
2.- Se sujeta firmemente el portaobjetos.
3.- Se aplica el borde de un cubreobjetos al portaobjetos dejando que la gota de sangre se
difunda por el área de contacto.
4.- Con un ángulo de aproximadamente 45º se desplaza el cubreobjetos sobre la superficie del
portaobjetos con un movimiento uniforme.
5.- Se deja secar.

RECOMENDACIONES

- Si se usa EDTA como anticoagulante, se debe realizar el frotis en las 2 primeras horas
de extraída la muestra.
- El grosor del extendido depende de la rapidez y el ángulo, mientras más rápido más
grueso y cuanto más agudo más grueso.
- Si se aplica mucha fuerza entre el cubreobjetos y porta se produce hemólisis y
equinocitos (crenocitos)
 - Los frotis elaborados con cubreobjetos salen más finos y uniformes (dejan márgenes a
los bordes), en caso de no disponerse de los mismos puede emplearse portaobjetos de
bordes muy rectos y biselados.
- Un buen frotis es regular y largo sin escotaduras ni agujeros, flecos ni estrías, con la
“cola” tornasol.
- Puede realizarse el frotis sin anticoagulante, en este caso no se puede estimar la
cantidad de plaquetas ni su morfología.

TINCIÓN DE WRIGHT

INGREDIENTES ACTIVOS
Frotis de sangre

- Metanol 89%
- Wright Giemsa Stains 1%

INGREDIENTES NO ACTIVOS

- Alcohol Soluble Buffer

- Agentes solubilizantes.

PROCEDIMIENTO

1.- Cubrir el frotis con el colorante

2.- Cronometrar el tiempo.
3.- Dejar actuar 15 segundos (tiempo variable según la marca y lote)
4.-Lavar con agua destilada.
5.-Secar al medio ambiente.

RECOMENDACIONES

- Los tiempos varían según el colorante (preparación) y deben acomodarse para lograr la
mejor coloración.
- - Es recomendable, no indispensable el uso de buffer, según la calidad del agua
empleada (ph).
-
OPCIONES

Tinciones como Giemsa, May Grunwald Giemsa también pueden ser empleadas.

CONTROL DE CALIDAD
Hay diferentes aspectos que nos guían para definir una tinción bien realizada:

- Los neutro filos deben presentar sus granulaciones tenues color salmón
- Los eritrocitos deben ser ligeramente acidó filos (rojos)
- Las plaquetas deben teñirse de tal manera que deben hacerse visibles tanto su
hialomero y el granuló mero (áreas claras y granular)
- Los gránulos de los eosinofilos deben ser brillantes color rojo ladrillo
- La coloración de los núcleos debe ser azul.

MICROHEMATOCRITO

EQUIPO MATERIAL

Centrifuga para Tubo capilar de diámetro uniforme

Micro hematocrito (75 mm largo x 1 mm diámetro)
Escala de lecturas o regla Plastilina

FUNDAMENTO Y UTILIDAD

Es de utilidad para el diagnostico y seguimiento de anemias y eritrocitosis. Se basa en que

gracias a la fuerza centrifuga el paquete globular es empleado en un delgado tubo de vidrio
(capilar).

MUESTRA

Sangre con anticoagulante o sangre tomada por punción cutánea en capilar heparinizado (2
UI).

PROCEDIMIENTO

1.- Mezclar la muestra por inversión (20 veces)

2.- Llenar por capilaridad el tubo hasta los 2/3 a ¾, mínimo 2 capilares por paciente.
3.- Sellar un extremo con plastilina.
4.- Colocar los tubos en la centrifuga con el extremo sellado hacia fuera.
5.- Centrifugar 5 minutos a10 g (aproximadamente 12.000r.p.m.)
6.- En hematocrito superior a 60% se debe centrifugar por 5 minutos más para disminuir el
plasma atrapado.

LECTURA
Si se usa la escala de lectura (ábaco): se enrasa a 0 con la base de la columna (límite con la
plastilina) y a 100 con el tope de la muestra (plasma)

Se lee el nivel superior de los eritrocitos, no se debe incluir la capa leucoplaquetaria.

Con regla milimetrada: se mide el total de la columna (muestra) y se divide entre la columna
de eritrocitos.

También puede emplearse tablas confeccionadas especialmente para el fin.

INFORME

Se informa en litro/litro (L/L), ya que la unidad es respecto al litro, si bien se tiene la

costumbre de informar en % debe reemplazarse por % (L/L).

RECOMENDACIONES

- El hematocrito por métodos automatizados electrónicos es 3% más bajo que el micro

método.
- El torniquete aplicado por más de 1 minuto da un falso hematocrito aumentado en 2.5 a
5%.
- La concentración de EDTA debe ser óptimo ya que si es sobre 2 mg/ml da hematocrito
falsamente bajo.
- Muestras con coágulos invalidan el proceso.
- Mezcla inadecuada antes de cargar los tubos, en especial cuando hay VES muy
acelerada.
- Se acepta máximo 3% de diferencia entre las muestras pareadas.
- Debe controlarse la velocidad y tiempo adecuados.
- Debe usarse capilares de diámetro uniforme.
- No usar calor para sellar el capilar.
- Es importante notar las particularidades de color del plasma y la cantidad de la placa
leucocitaria.
- Esta última correlacionarla con el recuento leucocitario.
- La toma con capilar heparinizado no debe presentar burbujas.
- Considerar que el hematocrito por punción capilar es más bajo (aprox.2 mm)

CONTROL DE CALIDAD

El control de calidad se realiza con muestras de sangre estabilizadas.

Si se emplea EDTA puede repetirse muestras del día anterior.
Realizar muestras pareadas.
 VELOCIDAD DE SEDIMENTACION GLOBULAR
(V. S. G. – V. S. E.)

MATERIAL

Pipetas de Westergren
Soporte para pipetas de Westergren
Reloj o cronometro.

FUNDAMENTO Y UTILIDAD

Se basa en la relación entre factores corpusculares y plasmáticos que hacen que la columna de
sangre descienda lentamente en relación al tiempo, es de utilidad ante procesos de naturaleza
sistémicos, orgánicos. Como ser inflación (reactantes de fase aguda de naturaleza plasmática)
así como, por la cantidad de elementos formes (eritrocitos como factores corpusculares)

MUESTRA

Sangre nitratada en una proporción de 4 a 1 (muestra – anticoagulante)

(Citrato 109 mmol/L (3.2%) en forma dihidratada Na3 C6 H5 O7 2h2O.

PROCEDIMIENTO

1.- Cargar la pipeta hasta la marca O con la muestra.

2.- Colocar la pipeta en el soporte (Vertical).
3.- Leer al cabo de una hora el nivel en milímetros lineales desde el 0 al que llegó la columna.

RECOMENDACIONES

- No debe emplearse otro anticoagulante.

- Se debe respetar la proporción adecuada de anticoagulante con muestra.
- Idealmente la temperatura ambiente debe estar entre 18 – 23 º C.
 - Evitar incluir en la lectura la capa leucoplaquetaria por que es incorrecto.
- Es bueno apreciar las particularidades del color del plasma, su turbidez, así como las
características de la capa leucocitaria para correlacionar con otras pruebas o
diagnósticos.
- Evitar que ingresen burbujas a la pipeta cargada.
- Es preferible realizar el procedimiento con las condiciones indicadas antes que realizar
el índice de Katz (2 horas de lectura).
- La gradilla con las pipetas cargadas debe estar en posición vertical (estricta)
- El procedimiento acelerado (a 45 grados de inclinación por 15 minutos) solo debe
emplearse en casos de extrema urgencia (error del 30%) y debe informarse por escrito
si se realizo este procedimiento.
- Es recomendable el empleo de pro pipeta para el cargado (Normas de Bioseguridad).

INFORME

En mm/hora.

CONTROL DE CALIDAD

No hay soluciones estables para dicho propósito, más la correlación clínica así como las
características del frotis respecto a los glóbulos rojos son de gran utilidad.
 HEMOGLOBINOMETRIA

El método recomendado por el Comité Internacional para la estandarización en Hematología

(ICSH) es:

- El de la cianmetahemoglobina.
- El método de la hematina ácida no debe usarse ya que tiene un error del 15 al 25%.
- Peor el cálculo en base al hematocrito que solo da una aproximación

METODO DE LA CIANMETAHEMOGLOBINA (HiCN)

EQUIPO MATERIAL REACTIVOS

Espectrofotómetro o Micro pipetas de 20 microlitos Solución de Drabkin

Foto colorímetro Tubos de ensayo
Gradillas para tubos
Pipeta volumétrica de 5 ml

FUNDAMENTO Y UTILIDAD

Se basa en la mezcla de la solución de Drabkin que contiene ferrocianuro, con la muestra que
convierte el hierro de la hemoglobina en férrico, formando meta hemoglobina, la que al
reaccionar con el cianuro potásico forma cianmetahemoglobina. La absorbancia de la solución
es medida en espectrofotómetro a 540 nm o con filtro verde – amarillo, si se dispone de foto
colorímetro.

Es de gran importancia para cuantificar la hemoglobina en el diagnostico de anemias y

eritrocitosis.

MUESTRA

Sangre venosa, arterial o capilar, con o sin anticoagulante.

PROCEDIMIENTO

1.- Colocar 5 ml de la solución de Drabkin en un tubo de 10 ml

2.- Mezclar bien la muestra (15 a 20 veces por inversión suave sin formar espuma)
3.-Tomar 0.02 ml (20 microlitros) de la muestra, limpiar la parte externa de la pipeta (micro
pipeta o pipeta de Salí)
4.- Expulsar suavemente la muestra en la solución.
5.- Mezclar bien por inversión 20 veces (o en Vortex) y esperar según el tipo de Drabkin
6.-Leer a 540 nm o con filtro amarillo – verde.
CALCULO DE RESULTADOS

Para realizar los cálculos hay varias maneras, lo ideal es realizar diluciones de una solución
estándar de hemoglobina y con los valores obtenidos de las diferentes lecturas puede:

- Introducirse en la memoria del foto colorímetro.

- Introducirse en una calculadora científica
- Graficar en papel milimetrado (DO. en ordenada y la concentración de las diluciones
de Hb en absisa).
- Empleo de un factor obtenido con la solución estándar.

La absorbancia obtenida de las muestras puede llevarse al la gráfica para obtener la

concentración de HB de la muestra o si se dispone de calculadora ó computadora incluida en
el foto colorímetro el resultado es calculado automáticamente.

INFORME

Se informa en g/L, la unidad corrientemente empleada g/dl debe ser reemplazada

RECOMENDACIONES

- El éxtasis venoso producido por el empleo del torniquete superior a 1 minuto produce
aumento de la concentración de hemoglobina.
- La muestra debe mezclarse adecuadamente
- Evitar los errores de pipeteo o dilución
- Presencia de coágulos invalida el procedimiento
- Calibrar adecuadamente el foto colorímetro o espectrofotómetro
- La solución de Drabkin es muy estable, pero debe ser guardado en frasco ámbar en
ambiente oscuro
- Cuando el Drabkin está hecho con bicarbonato debe dejarse “madurar” unos 5
minutos, si está hecho en base de fosfatos, la mezcla con la solución a partir de los 3
minutos ya está lista, lo mejor es estandarizar la lectura a un tiempo determinado. Lo
ideal es leer a los 20 minutos.
- Tener precaución en la preparación y manejo del reactiva de Drabkin, ya que posee CN
que es muy tóxico

CONTROL DE CALIDAD

- Cada día o en cada lote debe pasarse un control cuyo valor obtenido debe graficarse en
la carta de control para valorar el procedimiento
- El control de calidad de Drabkin se realiza midiendo su densidad óptica (absorbancia)
a 540 nm. respecto a agua destilada, debiendo dar cero.
 RECUENTO DE GLOBULOS
BLANCOS – METODO MANUAL

EQUIPO MATERIAL REACTIVOS

Microscopio Pipeta de 0.02 ml (20 Microlitros) Solución de Turk

O pipeta de Thoma para leucocitos (Hayem II)
Tubos de ensayo de 5 ml
Cámara de Neubauer (preferentemente
Con fondo brillante)
Cubre cámara.

FUNDAMENTO Y UTILIDAD

Para cuantificar el número total de leucocitos por litro, la muestra es diluida con un reactivo
que lisa los eritrocitos y es llevada a una cámara que ayuda al conteo de los glóbulos blancos
MUESTRA

Sangre venosa, arterial con EDTA (puede usarse la mezcla de Wintrobe).

PROCEDIMIENTO

En tubo: (método recomendado)

- Depositar 0.38 ml. de solución de Turk en un tubo de ensayo.
- Absorber 20 microlitros de la muestra, limpiar la superficie externa de la puntilla (tip)
y depositarla en la solución de tal manera que quede completamente limpia.
- Se logra una dilución final de 1/20
Si se emplea pipeta de Thoma:

- Cargar la muestra hasta la marca de 0.5

- Absorber el diluyente de Turk hasta la marca de 11
- Se logar una dilución de 1/20
- Agitar hasta lograr una mezcla uniforme.
1.-Cargar la cámara con la mezcla, cuando se emplea pipeta de Thoma desechar las tres
primeras gotas, cuando se emplea dilución en tubo, mezclar muy bien para el cargado.
2.-Dejar sedimentar 2 a 3 minutos
3.-Leer en microscopio con objetivo de 10 X
Se efectúa el recuento en los cuadrados grandes de las cuatro esquinas (1mm2 cada uno) se
incluyen las células que están en contacto con la primera línea.
CALCULO DE RESULTADOS

El factor es variable según: La cantidad de cuadrantes ledos, la dilución (que puede variar
según la que se emplee)y la profundidad de la cámara (estándar de 0.1 mm)

Usualmente: Se lee cuatro cuadrantes, se emplea una dilución de 1/20 y la profundidad de la

cámara = 0.1 mm, obteniéndose un factor de 50 el que debe multiplicarse por la cantidad total
de leucocitos leídos en los cuatro cuadrantes

INFORME

Se informa la cantidad respecto al litro =1x 10 9/L, la unidad referida a mm3 debe ser
cambiada por el Sistema Internacional respecto al litro.

RECOMENDACIONES

- Tener cuidado con el lavado y secado correcto del material

- Emplear el anticoagulante en proporción adecuada
- Los coágulos. invalidan el procedimiento
- No usar pipetas dañadas
- Evitar errores de pipeteo o presencia de burbujas
- Mezclar bien la muestra y agitar la pipeta por tres minutos como mínimo ( es bueno
emplear agitador mecánico tipo Vortex)
- Repetir el cargado si se halla una diferencia mayor a 10 leucocitos entre alguno de los
cuadrantes leídos que implica una distribución no uniforme en los retículos
- Es recomendable el recuento electrónico si se dispone.

CONTROL DE CALIDAD

- Existen controles comerciales con partículas (látex o similares) o glóbulos rojos de ave
(nucleados)
- Correlacionar con los leucocitos del frotis
- Correlacionar con la placa leucocitaria del hematocrito
- Correlacionar con la clínica.
 OBSERVACION DE FROTIS SANGUINEO
Y FORMULA DIFERENCIAL

EQUIPO MATERIAL REACTIVOS

Microscopio Portaobjetos Aceite de inmersión

Piano o contador
Hematológico

FUNDAMENTO Y UTILIDAD

La lectura del frotis de sangre resume una apreciación semi-cuantitativa de los elementos
figurados: Eritrocitos, Leucocitos, plaquetas, recuento diferencial de los leucocitos y la
apreciación cualitativa: morfología de estos elementos.

MUESTRA

Frotis de sangre venosa (preferentemente con EDTA) o sangre capilar.

PROCEDIMIENTO.-

1.- Poner una gota de aceite de inmersión en el frotis.

2.- Examinar el extendido con amplificación de baja resolución (objetivo x 10), para
conseguir una impresión total del número de leucocitos y si estos están distribuidos
uniformemente y si se ven cúmulos de plaquetas, particularmente en la cola del extendido.

3.- Seguidamente cambiar la amplificación (objetivo x 100) y examinar colocando el objetivo

de tal manera que el lado frontal de la lente toque la gota de aceite.

. Para la lectura seguir el siguiente trayecto:

4.- La morfología de las células rojas deberá ser examinada en el área de la placa donde los
glóbulos rojos están sueltos o apenas tocándose y no amontonados unos encima de otros.

5.- Realizar el recuento porcentual (recuento diferencial) de las diferentes variedades de

leucocitos.

6.- Cuantificar estimativamente la cantidad de plaquetas y su morfología.

7.- Hacer una descripción morfológica de los glóbulos rojos y de los leucocitos.

INFORME

Se informa los valores porcentuales hallados, junto a los valores absolutos, así coma la
descripción morfológica encontrada.

RECOMENDACIONES

- Para estudio de la morfología de las diferentes células son esenciales frotis de sangre
bien hechos y bien teñidos.
- La práctica de observar la placa solamente con objetivo de inmersión no es
recomendada
- Una vez observada la placa limpiar con algodón empapado en gasolina para eliminar el
aceite de inmersión y guardar. El alcohol y el xilol decoloran las tinciones.

CONTROL DE CALIDAD

El control de calidad se puede hacer correlacionando el estudio de los frotis sanguíneos con la
clínica y a través del intercambio de las placas de sangre con otros laboratorios.
 RECUENTO DE PLAQUETAS EN CAMARA

EQUIPO MATERIAL REACTIVO

Microscopio Tubos de 75 x 12 mm (plástico) Solución de oxalato de
Micro pipeta de 20 microlitros amonio al 1% (almacenar
o pipeta de Thomas refrigerada y filtrar antes
Cámara de Neubauer de usar).
Cubre Cámara.
FUNDAMENTO Y UTILIDAD
Se mezcla la muestra sanguínea anticoagulada con un diluyente apropiado que produce la lisis
de los glóbulos rojos y blancos permitiendo al microscopio su conteo en cámara
Es de utilidad en trastornos de la coagulación, padecimientos auto inmunes.
MUESTRA
Sangre venosa con EDTA
PROCEDIMIENTO

1.- Colocar 0.38 ml del diluyente en el tubo de plástico.

2.- Añadir 0.02 ml de sangre (20 microlitros) lavando bien la pipeta.
3.- Mezclar por lo menos 5 minutos, mejor en agitador mecánico.
4.- Dejar en reposo 15 minutos.
5.- Cargar la cámara previo mezclado idealmente en agitador; dejar en reposo en cámara
húmeda de 15 a 20 minutos.
6.- Observar al microscopio (idealmente con contraste de fases) con ocular 10x y objetivo
de 40x
7.- Contar las plaquetas que se encuentran en el cuadrante central (para conteo de glóbulos
rojos) abarcando 5 cuadrantes (cada uno de 16 cuadraditos).

CALCULO DE RESULTADOS

Multiplicar la cantidad de plaquetas obtenidas por 1000, así se obtiene en mm3.Para emplear
la unidad internacional (litro) multiplicar por 10.
INFORME DE RESULTADOS

Se informa la cantidad respecto al litro =1x10 /L, la unidad corrientemente en mm3 debe ser
cambiada por el sistema Internacional.

RECOMENDACIONES

- Tener cuidado en el lavado y secado correcto del material.

- Se debe emplear el anticoagulante en proporción adecuada.
- Los coágulos invalidan el procedimiento
- Evitar errores de pipeteo o presencia de burbujas
- Mezclar bien la muestra
- No es recomendable tomar la muestra directamente de punción capilar ya que las
plaquetas se adhieren al tejido expuesto.
- Filtrar siempre el diluyente.

CONTROL DE CALIDAD

Siempre correlacionar con la cantidad de plaquetas halladas en el frotis.

No aceptar más del 5% de diferencia entre cuadrantes.
Es bueno realizar dos procedimientos para la cuantificación.

PROCEDIMIENTO MODIFICADO

1.- Colocar 1 ml del diluyente en el tubo plástico

2.- Añadir 0.01 ml de sangre (10 microlitros) lavando bien la pipeta.
3.- Los pasos 4-5-6 igual que en el procedimiento antes descrito
7.-Contar todas las plaquetas que se encuentran en alguno de los cuadrantes empleados para
leer leucocitos (ver figura adjunta).

CALCULO

Multiplicar por el factor 1000 el total de plaquetas contadas en el cuadrante

ARGUMENTO

Al leer una mayor superficie (1 mm2) se obtiene una muestra más representativa, en el
procedimiento antes descrito sólo se lee un quinto de milímetro cuadrado (1/5 mm2).
Al realizar la dilución de 1:100 se obtiene una cantidad de plaquetas que se cuentan
fácilmente.
 RECUENTO DE RETICULOCITOS

EQUIPO MATERIAL REACTIVO

Microscopio Tubos de 25 x 75 mm Nuevo azul de metileno

Baño termorregulador (1g/100ml solfis)
Contador o piano También puede usarse
Hematológico azul cresil brillante o el
Azul B.

FUNDAMENTO Y UTILIDAD

El recuento de reticulocitos es una manera muy útil de estimar la producción medular de

eritrocitos.

Los colorantes supravitales tiñen los remanentes de RNA presentes en los eritrocitos jóvenes.

MUESTRA

Sangre con EDTA.

PROCEDIMIENTO

1.- Colocar 3 gotas de sangre con EDTA en tubo de 25 x 75 mm

2.- Añadir una gota de colorante (filtrado)
3.- Incubar 15 minutos en baño termorregulador a 37º C o 1 hora a temperatura ambiente
4.- Luego realizar frotis delgados y uniformes.
5.- Una vez bien secos leer con objetivo 100x.

CALCULO DE RESULTADOS

Se cuenta por ,o menos 1000 glóbulos rojos y de estos cuantos son reticulocitos, se saca la
proporción respecto a 100 células.

Ejemplo
1000 ---------------- cantidad de reticulocitos hallados
100 ----------------- x

INFORME DE RESULTADOS

Se informa en % también es de suma importancia informar el índice Reticulocitario ya que por

si solo el porcentaje tiene poca significación:
INDICE RETICULOCITARIO

Factor de correlación (Maduración)

Para Hto 45 factor 1

35 1.5
25 2
15 2.5

RECOMENDACIONES

Se debe realizar la lectura cerca de la cola donde los eritrocitos están separados y
uniformemente distribuidos.

CONTROL DE CALIDAD

Siempre correlacionar con la clínica. Correlacionar con el grado de policromatofilia

PROCEDIMIENTO MODIFICADO

Seguir los pasos1,2 y 3 del procedimiento antes descrito

4.- Realizar una dilución.1:4 con solución fisiológica de la muestra coloreada

5.- Inmediatamente realizar los extendidos.
6.- Una vez bien secos, leer con objetivo 100 x.

Argumento: Al realizar la dilución, se obtiene menos reticulocitos por campo, así se facilita el
conteo, incrementándose radicalmente la precisión, recomendamos este procedimiento.

RECOMENDACIONES

El frotis debe realizarse inmediatamente se realiza la dilución, ya que la tinción se decolora

con rapidez.
 PRUEBAS DE HEMOSTASIA

Las siguientes pruebas son las más empleadas para iniciar un estudio de la hemostasia, además
que son de gran utilidad en el preoperatorio.

TIEMPO DE COAGULACION – METODO DE LEE – WHITE

EQUIPO MATERIAL
Baño termorregulador a 37º C 3 tubos limpios de 75x10 mm (vidrio)
Cronómetro Material para venopunción

FUNDAMENTO Y UTILIDAD
Estudiar la coagulación. Mediante la vía intrínseca. El tiempo de coagulación es el tiempo que
requiere la sangre venosa en coagular, en ausencia de factores titulares.

Está técnica debe ser reemplazada por el Tiempo de Recalcificación ya que es de muy baja
sensibilidad y especificidad.

PROCEDIMIENTO
1. Recolectar 3 ml, de sangre venosa.
2. Cronometrar el tiempo una vez que la sangre entre en la jeringa
3. Saque la aguja y vierta la sangre por las paredes depositando 1 ml en cada tubo
4. Colocar las muestras en baño termorregulador a 37º C
5. Después de 5 minutos, incline el primer tubo a 45º cada 30 segundos hasta que se
forme el coágulo, anotar el tiempo transcurrido.
6. Continuar con el segundo y tercer tubo de igual manera.

LECTURA
Directa, se obtiene de cada tubo al momento que se forma el coágulo.

INTERPRETACION
El tiempo de coagulación corresponde al promedio de las tres lecturas.
También se puede informar el tiempo del tercer tubo.

Según el procedimiento a seguir (promedio o tercer tubo) el resultado final variará, razón por
la que: cada laboratorio debe obtener sus valores de referencia.

INFORME
Se realiza en minutos y segundos, indicando siempre los valores de referencia logrados por
cada laboratorio.

VALORES DE REFERENCIA
Cada laboratorio debe obtener sus valores de referencia.
RECOMENDACIONES

- La venopunción debe ser directa y rápida con el menor trauma posible, evitando la
contaminación con fluido tisular.
- Una vez obtenida la muestra siempre distribuir de esta, primero para la prueba de
coagulación
- Evitar que entren burbujas a la muestra.
- No emplear tubos mal lavados o húmedos.
- Controlar la temperatura del baño termorregulador.
- Este método DEBE ser reemplazado por el tiempo de recalcificación.
 TIEMPO DE SANGRIA

MATERIAL REACTIVOS

Lanceta estéril decartable Alcohol etílico

Cronómetro
Papel filtro

FUNDAMENTO Y UTILIDAD

Es el tiempo (en minutos y segundos) que tarda en detenerse la hemorragia producto de

una pequeña incisión estandarizada cutánea. Estudia la función plaqueta ría (Hemostasia
primaria)

PROCEDIMIENTO

1.- Limpiar el sitio de punción con alcohol, permitiendo que seque por completo.
2.- Realizar una pequeña punción con lanceta en la yema de un dedo de la mano ó en el
lóbulo del pabellón auricular, y activar el cronómetro.
3.- Absorber la sangre de la herida con papel filtro cada 30 segundos, sin ejercer presión
en la herida.
4.- Una vez que la sangre deja de fluir, detener el cronómetro, si el sangrado continúa por
más de 20 minutos, suspender la prueba y aplicar presión sobre el sitio.
5.- Aplicar finalmente una curación seca y estéril al paciente, después que se detenga el
sangrado, para garantizar la no infección de la zona de la punción.

LECTURA
Directa del cronómetro

INTERPRETACION
El resultado final es el tiempo que marca el cronómetro una vez que se detuvo el sangrado.

RESULTADO
Se expresa en minutos y segundos junto al rango de referencia establecido en cada
laboratorio.

RECOMENDACIONES
La presión excesiva sobre el sitio de sangrado con el papel filtro, altera el tapón plaqueta
río y prolonga el tiempo de sangrado.
 TIEMPO DE PROTROMBINA – PROCEDIMIENTO MANUAL

EQUIPO MATERIAL REACTIVOS

Baño termorregulador Cronómetro Tromboplastina cálcica

A 37º C Micro pipetas de 100 y Citrato de sodio al
200 Microlitros 3.2 % (109 mmol/l)

FUNDAMENTOS Y UTILIDAD

El plasma citratado en presencia de tromboplastina y cloruro cálcico se coagula a una

velocidad dependiente de las actividades de la pro trombina (factor II), los factores V, VII, X y
el fibrinogeno.

Mide la vía extrínseca de la coagulación.

MUESTRA

Sangre con citrato de sodio como anticoagulante en proporción de 9:1 (muestra –

anticoagulante)

METODO

Se deben seguir estrictamente las instrucciones del fabricante del reactivo utilizado en cuanto
a procedimiento, volúmenes, tiempo y temperatura de incubación.

LECTURA

La misma es directa del cronómetro.

INTERPRETACION

El resultado final es el tiempo que marca el cronómetro una vez que se lo detuvo al mismo
tiempo que se formo el coagulo.

INFORME

Se informa en segundos y décimas, junto al valor del control normal y al I.N.R.

ISI: (elevar a la potencia)

ISI: Índice de Sensibilidad Internacional de cada lote

RECOMENDACIONES

- Realizar la separación del plasma en las dos primeras horas de haber tomado la
muestra y se debe procesar máximo las primeras cuatro horas.
- Mantener estrictamente el tipo y cantidad de anticoagulante
- Se debe realizar la prueba por duplicado, la diferencia de ambos valores no debe ser
mayor al 10 % de otro modo debe repetirse.
- Centrifugar la muestra para obtener el plasma 15 min. a 3.000r.p.m. para obtener
plasma pobre en plaquetas.
- No usar reactivos que hayan pasado la fecha de vencimiento.
- Tener mucho cuidado con la reconstitución del reactivo
- Usar agua de inyectables para dicho fin
- El pH. de la reacción debe estar entre 7.2 a 7.4
- Se recomienda usar gancho de metal para observación del coágulo, empleando buena
iluminación.
- Una vez reconstituido el reactivo, fraccionarlo en alícuotas para su conservación a 4º
- Cada laboratorio deben realizar su propia curva de calibración.

CONTROL DE CALIDAD

- Se usa plasma liofilizado comercial o pool de plasma normales alícuotas y congelados

a menos 20º C.
- Efectuar la determinación del control por duplicado y el valor medio graficar en la
carta control.
 TIEMPO DE TROMBOPLASTINA PARCIAL ACTIVADA
(TTPA) PROCEDIMIENTO MANUAL

EQUIPO MATERIAL REACTIVOS

Baño termorregulador Tubos de plástico Reactivo de

Gradilla Tromboplastina parcial
Asa o gancho de alambre con activador
Micro pipetas de 200 ul Cloruro de calcio
Cronómetro 0.025 M
Citrato de sodio al
3.2 % (109 mmol/l)

FUNDAMENTO Y UTILIDAD

El plasma citratado coagula en presencia de cefalina (mezcla de fosfolipidos) y cloruro cálcico

a una velocidad dependiente de la concentración de todos los factores de la vía intrínseca
Mide la vía intrínseca de la coagulación.

MUESTRA

Sangre con citrato de sodio al 3.2 % como anticoagulante en una proporción de 9 – 1.

PROCEDIMIENTO

Para realizar la técnica se deben seguir exactamente las instrucciones del fabricante del
reactivo.

LECTURA

La misma es directa del cronómetro.

RESULTADOS

El resultado se informa en segundos y décimas de segundo, junto con el rango de referencia

determinado por el laboratorio.

VALORES DE REFERENCIA

Deben ser obtenidos para la población usuaria de cada laboratorio además que varían de
acuerdo al fabricante.
RECOMENDACIONES

- Tener sumo cuidado al guardar las proporciones de muestra/anticoagulante.

- Evitar la contaminación con heparina.
- Exigir un lavado prolijo del material.
- Tener cuidado con los tiempos de incubación, pH de la reacción (7.2 a 7.4) así
como la temperatura
- Cuidar la calidad del agua y volúmenes de reconstitución

CONTROL DE CALIDAD

Existen plasmas especiales para este propósito, también puede emplearse alícuotas de un pool
(refrigerar a – 20 grados C).
 PRUEBA DE COOMS DIRECTO

EQUIPO MATERIAL REACTIVOS

Centrifuga Tubos de vidrio de Khan Solución salina al 0.9 %

Serológica (12 x 75 mm) Suero antiglobulina
(o SEROFUGE) Portaobjetos humana poli específico
Micro pipetas Anti (IgG +C3d)
FUNDAMENTO
Es una prueba de aglutinación que consiste en detectar anticuerpos del tipo IgG o fracciones
del complemento (C3d) adheridos a la membrana del glóbulo rojo, mediante el uso de suero
antiglobulina humana.
UTILIDAD
Es de gran valor diagnostico en:
a) Enfermedad hemolítica del recién nacido
b) Anemia hemolítica auto inmune (AHA)
c) Anemia hemolítica y sensibilización inducida por drogas.
d) Investigación de reacciones transfucionales.
MUESTRA
Sangre anticoagulada con EDTA o ACD o sin anticoagulante.
PROCEDIMIENTO
1.- En un tubo coloque dos gotas de hematíes del paciente y lave tres veces por 1 minuto con
solución salina fisiológica.
2.- Prepare una suspensión al 5 % de los hematíes en solución salina
3.- En un tubo limpio coloque una gota de la suspensión de los hematíes y dos gotas del suero
de COOMBS (previamente atemperado).
4.- Centrifugue a 3.000 rpm durante 15 a 20 segundos o a 1000 rpm. durante 1 minuto.
5.- Busque la presencia de aglutinación.
Si el resultado es negativo mantenga el tubo a temperatura ambiente durante cinco minutos
y vuelva a centrifugar y busque si aglutinó.
6.- Anote los resultados.
Si el resultado es negativo, añada una gota de hematíes células control de COOMBS
(CCC) para controlar la técnica. Si después de añadir los hematíes controles el resultado es
positivo considere como valido el resultado negativo obtenido con el paciente.

Si el resultado es negativo con los hematíes controles (CCC), la prueba debe repetirse para lo
cuál se deberá realizar los lavados adicionales a los hematíes del paciente, antes de repetir el
procedimiento.

Si el resultado es positivo, ver la especificidad de anticuerpo (IgG o C3d)

RESULTADOS

Si existe aglutinación macroscópica la prueba es positiva, lo que implica la presencia de

inmunoglobulinas fijadas en la superficie de los eritrocitos.
Si no existe aglutinación macroscópica la prueba es negativa.

RECOMENDACIONES

- Para la prueba de COOMBS DIRECTO debe utilizarse suero de COOMBS con

actividad Anti IgG y C3d.
- La prueba debe realizarse tan rápido como sea posible máximo en las dos horas
después de haber tomado la muestra.
- En los hematíes conservados a 4º C pueden unirse componentes del complemento y
éste puede provocar falsos positivos.
- Siempre procesar junto a un control, empleando glóbulos rojos (ccc).
Eritrocitos normales no sensibilizados (Rr) control negativo
Eritrocitos sensibilizados con IgG (Rr+ anti- D) control positivo
Eritrocitos sensibilizados con complemento (control positivo)
- Mal lavado de los eritrocitos también puede dar falsos positivos
- Cantidades elevadas de reticulocitos también puede dar falsos positivos
- Hay casos de presencia de IgA que puede dar falsos negativos ya que la mayoría de los
sueros antiglobulina humana no está dirigido contra esta inmunoglobulina.
- Igualmente el lavado inadecuado de los eritrocitos que elimina los auto anticuerpos
fijados
- Se debe emplear material muy bien lavado.
- Evitar contaminación con proteínas, por ejemplo, cuando se tapa el tubo con el dedo
para mezclar o resuspender los eritrocitos.
 PRUEBA DE COOMBS INDIRECTO

EQUIPO MATERIAL REACTIVOS

Centrifuga Tubos de cristal de 12 x 75 mm Solución salina al 0.9 %
Sexológica o 13 x 100 mm Solución de COOMBS
Baño Maria a 37º C

FUNDAMENTO

Es una prueba de aglutinación donde se pesquisa la presencia de anticuerpos en el suero del

paciente empleando el suero antiglobulina humana.

MUESTRA
Suero

PROCEDIMIENTO

1.- En un tubo mezcle 2 gotas de suero con una gota de suspensión de eritrocitos al 5% con
fenotipo conocido (similar al del paciente).
2.- Incube en Baño Maria a 37º C durante 45 a 60 minutos.
3.- Examine si hay presencia de aglutinación o de hemólisis.

Si no hay presencia de aglutinación:

Lavar tres veces los eritrocitos con sol. Fisiológica durante 1 minuto a 2500 o 3000 rpm
Después del tercer lavado, decante bien el sobrenadante.
Al botón de hematíes, añada dos gotas de suero COOMBS y mezcle.
Centrifugar 15 a 20 segundos a 3000 rpm o 1 minuto a 1000 rpm.
Leer golpeando suavemente el fondo del tubo para desprender el botón, buscando
aglutinación o si los glóbulos rojos se distribuyen homogéneamente.

Si el resultado es negativo, mantenga el tubo a temperatura ambiente por 5 minutos, vuelva

a centrifugar y lea nuevamente.

Si la prueba sigue siendo negativa, añada una gota de hematíes controles, si esta prueba es
positiva, se avala el resultado negativo

Si el resultado con los hematíes controles es negativo, la técnica debe repetirse

(generalmente lavados incompletos).

RESULTADOS

La presencia de aglutinación implica positividad (presencia de anticuerpos circulantes)

La ausencia de aglutinación implica negatividad
RECOMENDACIONES

- Evitar la contaminación química o bacteriana de la muestra.

- Respetar los tiempos de incubación y la temperatura.
- Centrifugar exactamente el tiempo y a la velocidad indicados.
- Evitar agitar excesivamente el tubo para despegar los glóbulos rojos aglutinados.
- Realizar un lavado adecuado de las células.
- El almacenamiento prolongado produce la pérdida de los antígenos adheridos.
- La solución salina debe estar controlada ya que con el tiempo baja el pH.