DETERMINACIÓN

DE ACIDO URICO EN SUERO

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1. OBJETO/PROPOSITO Dosificar el acido úrico según metodología de Trinder – Enzimático

2. ALCANCE/ Estudios de rutina en el perfil reumático
CAMPO DE ACCION Estudios de rutina en el perfil renal
Ordenes de laboratorio que soliciten determinación de ácido úrico
3. RESPONSABLES Bioquímicos del área de Química sanguínea y Emergencias
4. DEFINICIONES
5. DESARROLLO DEL Fundamento o principio
PROCEDIMIENTO El esquema de reacción es el siguiente:

ácido úrico + 2 H2O + O2 uricasa alantoína + H2O2 + CO2

2 H2O2 + DHBS + 4-aminoantipirina POD antipirilquinonimina + 4 H2O

El ácido úrico es oxidado por la uricasa a alantoína y peróxido de hidrógeno. En

presencia de la peroxidasa, el peróxido de hidrogeno reacciona con el DBHS y
la 4- aminoantipirina, formado el cromógeno antipirilquinonimina. La intensidad
del color rojo formado es directamente proporcional a la concentración del acido
úrico en la muestra
Especificaciones
Límite de detección: El reactivo proporciona una linealidad de hasta 20 mg/dl
Sensibilidad metodológica: El límite de detección fotométrica es de 0,034
mg/dl
Especificidad Analítica: Este método tiene una especificidad metodológica
adecuada (y = 1,030x-0,137; r = 0,996 y un error sistemático de 0,7%)
Muestra
Suero, obtenido de la manera habitual (en ayunas). Si la muestra no se va
analizar en ese momento, el analito se mantiene estable 3 días entre 2 y 8ºC y
6 meses a -10 ºC.
Reactivos
Reactivo 1:
Contiene tampón 80 mmol/L pH 7,0; 4-aminoantipirina 0,82mmol/L y octil fenol
polioxietanol 1 g/L
Reactivo 2:
Contiene tampón 80 mmol/L pH 7,0; 3,5 –dicloro -2-hidroxibenceno sulfonato
(DHBS) 10 mmol/L; uricasa ≥500 U/L; octil fenol polioxietanol 1 g/L y azida
sódica 0,8 mmol/L
Reactivo 3:
Estándar: solución de ácido úrico 6 mg/dl.
Materiales
Tubos de hemólisis
Cubetas de plástico espectrofotométricas de caras paralelas.
Micropipetas para medir los volúmenes indicados
Reloj o timer.
Equipos
Espectrofotómetro
Baño maría a 37ºC
Instrucciones detalladas
Preparación de la muestra “Suero”
Suero, libre de hemólisis y lipemia
Preparación del “Reactivo de Trabajo”
Transferir el contenido de un frasco de reactivo 2 a un frasco de reactivo 1 y
homogeneizar por inversión.
Una vez preparado el reactivo anotar la fecha de preparación y la fecha de
vencimiento del reactivo preparado que es estable 5 días entre 15 y 25 ºC y 90
días entre 2-8 ºC )El reactivo reconstituido debe ser refrigerado
constantemente.
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Técnica
Una vez separado el suero
Disponer de tres tubos de hemólisis y proceder como se expone a
continuación
Blanco Estándar Suero Control Muestra
Estándar (R3) 20 ul
Suero control 20 ul
Muestra 20ul
Reactivo de trabajo 1 ml 1 ml 1 ml 1 ml
Mezclar e incubar por 10 minutos en baño maría a 37ºC
Leer la concentración, del estándar, suero control y muestra ajustando a 0 con
el blanco con ayuda del auxiliar Nro. 21. El color es estable por 15 minutos.
Registrar el resultado que indica la pantalla del equipo
 Espacio físico y condiciones ambientales
Esta prueba se realiza en el área de Química Sanguínea, en el mesón
correspondiente y a temperatura de 37ºC
 Seguridad, Bioseguridad y manejo del medio ambiente
Toda muestra debe ser considerada como infecciosa por los tanto se deben
utilizar las medidas de Bioseguridad estándares
 Interferencias
No usar plasma porque se obtienen resultados falsamente disminuidos.
Valores de bilirrubina de hasta 19 mg/dl, hemoglobina hasta 90 mg/dl y
triglicéridos hasta 1800 mg/dl no producen interferencias significativas.
Valores de hemoglobina entre 90 y 180 mg/dl producen valores falsamente
elevados.
Medicamentos: las sustancias fuertemente reductoras, tales como el ácido
ascórbico (vitamina C), la Buscapina (butil bromuro de hioscina), etc. en dosis
elevadas interfieren. Por tal razón debe suspenderse la medicación, siempre
que sea posible, 24 horas antes de la toma de muestra
 Cálculo de resultados
Acido úrico (mg/dl) = absorbancia de la muestra x 6
absorbancia de estándar
 Intervalos de referencia.
El rango de valores obtenidos en suero de pacientes normales oscila entre:
Niños Hombre 1,5 a 6,0 mg/dl
Mujer 0,5 a 5,0 mg/dl
Adultos Hombre 2,5 a 7,0 mg/dl
Mujer 1,5 a 6,0 mg/dl
Cuando el resultado sobrepasa los valores intervalos de referencia y no hay una
causa aparente se debe repetir la prueba desde la extracción de la muestra.
 Validación de resultados
Los resultados se validan a través de la determinación en paralelo del suero
control
 Interpretación de resultados
El ácido úrico es un metabolito de las purinas, ácidos nucleicos y
nucleoproteínas. Habitualmente la concentración de ácido úrico en suero varía
de un individuo a otro de acuerdo a diversos factores tales como: sexo, dieta,
origen étnico, constitución, genética, embarazo.
Niveles anormales de ácido úrico en suero son índice de desorden en el
metabolismo de las sustancias que lo originan o de inadecuada eliminación.
Valores elevados de ácido úrico se observan en pacientes con gota, falla renal,
ateroesclerosis, diabetes hipotiroidismo, Su disminución se encuentra asociada
a la enfermedad de Wilson
 Informe y archivo de resultados
El resultado se registra en el cuaderno de Química Sanguínea, luego se
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transcribe al cuaderno general y finalmente a través del programa de

Laboratorio se elabora el informe final cuyo destinatario es el paciente,
quedando el resultado guardado en la base de datos.
 Describir los controles internos necesarios para cada etapa
Control de la muestra
Verificar que la muestra esté libre de hemólisis y lipemia además que no
contenga eritrocitos
Control del reactivo
Verificar el correcto almacenamiento del reactivo preparado (4ºC a 8ºC)y la
fecha de expiración
 Calibración de instrumental y mantenimiento de equipos
La limpieza del espectrofotómetro se realiza al finalizar la jornada
6. FORMULARIOS Y REGISTROS El cuaderno de Química Sanguínea
7. REFERENCIAS Insertos de reactivos Lab test y Wiener
8. ANEXOS Formulario del cuaderno de Química Sanguínea
9. LISTA DE Gestión de Calidad: Dra. Geovana Achá
DISTRIBUCIÓN Química Sanguínea: Dra. Geovana Achá
Emergencias: Dra. Eddy Ancasi
REDACTADO POR REVISADO POR: APROBADO POR
Dra. Geovana Achá Dra. Pompeya Muñoz
FECHA DE REDACCIÓN FECHA DE REVISION FECHA DE APROBACION
3 de enero 2011 2012
VERSION ORIGINAL ACTUALIZACION Nº 1
FECHA DE VIGENCIA 2011 FECHA DE VIGENCIA 2010