Variante Du

PROCEDIMIENTOS TÉCNICOS
Fecha de elaboración:
Octubre 2018
Elaborado por:
HOSPITAL MARIA JOSÉ ROMA
Q.B.P Alejandra Janeth Bernal Mendoza
IDENTIFICACIÓN DE LA VARIANTE Du
Técnico Laboratorista/Químico
Identificación de la
variante (Du)e la
variante (Du)
Colocar en un tubo una

gota de eritrocitos lavados
a estudiar al 5% más 1
gota de anti-D
Centrifugar a 2000
rpm/1min
Si
Aglutinación Factor RH Positivo
No
Agregar 1 gota de reactivo

Gamma LO-ION
Incubar a 37 °C 15 min.
Lavar 4 veces los

eritrocitos
Agregar 1 gota de suero de

Coombs
Si
Centrifugar 2000rpm/1min Aglutinación Variante Du Positivo
No
Variante Du Negativo
www.hospitalmariajose.com.mx
Octubre 2018
Elaborado por:
COOMBS DIRECTO
Técnico Laboratorista/Químico Responsable
Coombs directo
variante (Du)
Colocar en un tubo una

gota de eritrocitos lavados
a estudiar al 5% más 1
gota de suero de Coombs
Centrifugar a 2000 rpm/ 1

min
Si
Aglutinación Positivo
No
Negativo
Octubre 2018
Elaborado por:
COOMBS INDIRECTO
Realizar una suspensión de

eritrocitos de hombre del
grupo “O” RH: Positivo al 5 %
y lavarlos 4 veces
Lavarlos 4 veces
Colocar una gota de los eritrocitos

lavados más 1 gota del suero de la
mamá
Centrifugar a 2000 rpm/1 min
No
Aglutinación Negativo
Reportar positivo sin titulo

Si
No
Colocar 10 tubos y rotularlos
como 1, 2, 4,8, 16, 32,64,128, 256
y 512
Si Reportar titulo (Hasta el
Aglutinación último tubo donde
presento aglutinación)
Lavar 4 veces los

eritrocitos
Centrifugar a 2000 rpm/ 1 min
Colocar 100 µl de solución salina

en cada uno de los tubos excepto
en el primero, ahí colocar 200 µl
Incubar a 37 ° C de 30 a 60 min
de suero de estudio
bs
Del tubo 1 pasar 100 µl al tubo 2 Añadir a cada uno de los tubos
y de este 100 µl al tubo 3, así 100 µl de eritrocitos “O” RH:
hasta el 10, en el último tirar los Positivo al 5 %
100 µl
Octubre 2018
Elaborado por:
RETICULOCITOS
Colocar 100 µl de
colorante azul de cresil
brillante en un tubo
Adicionar 100 µl de sangre

total
Incubar a temperatura
ambiente 10 min
Mezclar y realizar un
extendido sanguíneo
delgado
Observar a 100 x
Contar 500 células incluidos los reticulocitos
N° de reticulocitos X 2 = % Reticulocitos
Contar 500 células y 10

realizar el calculo
Octubre 2018
Elaborado por:
EXAMEN GENERAL DE ORINA
Homogenizar la
muestra
Verter en un tubo de
ensayo 7 ml de orina
Realizar el examen físico,

Examen químico Examen microscópico
color, olor y turbidez.
Sumergir tira reactiva en el Centrifugar muestra a

tubo, limpiar el excedente 1500/rpm 5 min
Colocar la tira en el porta Decantar sobrenadante y

tiras del DIRUI-H 100 resuspender
Se imprime resultado al Leer al menos 10 campos a

finalizar la lectura 40 X.
Reportar
Octubre 2018
Elaborado por:
TIEMPOS DE COAGULACIÓN
Obtención de plasma
citratado
En la pantalla del equipo utilizar

las flechas para seleccionar el
método y presionar ENTER
TP TTP
Colocar en una cubeta de Colocar en una celda de

reacción 50 µl de muestra reacción 50 µl de plasma y 50
µl de APTTest ellágico
Colocar la cubeta en los

canales de medición para la Colocar la cubeta en los
incubación (1 min) canales de medición para la
incubación (2 min)
Finalizada la incubación
dispensar 100 µl de Finalizada la incubación
Soluplastin colocar 50 µl de CaCl2.
Se inicia la
medición
Se imprime el
resultado
Reportar
Octubre 2018
Elaborado por:
REACCIONES FEBRILES EN PLACA
Colocar 20 µl de control o
muestra (suero) en cada
uno de los 6 círculos de la
placa
Adicionar 50 µl de reactivo al
círculo apropiado. Dil (1:80)
Con ayuda de un palillo

mezclar extendiendo por
toda la superficie del círculo
Homogenizar la placa con

movimientos circulares
suaves 1 min
No Si Realizar diluciones con 5

Reportar Negativo Aglutinación µl y 10 µl de muestra más
50 µl de reactivo.
Reportar según la tabla

1.
Volumen de suero Titulo

Aglutinación con 20 µl Positivo 1:80
Si la aglutinación con 5 es muy evidente Positivo mayor a 1:320
ya no se realizará otra dilución.
Octubre 2018
Elaborado por:
BIOMETRIA HEMATICA
Realizar toma de
muestra
(sangre total con EDTA)
Homogenizar la muestra
Introducir los datos del

paciente al equipo Counter
19
Introducir la muestra al
equipo
Imprimir el resultado
Realizar un extendido
sanguíneo y realizar tinción
de wright
Leer a 100 X el extendido

para la cuenta diferencial
Reportar
Octubre 2018
Elaborado por:
ELECTROLITOS
Tomar 200 µl del suero

problema y colocarlos
en una copilla
Salir de modo pausa con

el botón “Yes”
Efectuar limpieza,
acondicionamiento y
mantenimiento diario si no
se le ha realizado
Abrir la tapa de la aguja e

introducir la muestra
Imprimir resultado
Entrar a funciones de
operador y seleccionar
“proseguir con modalidad
pausa”
Reportar
Octubre 2018
Elaborado por:
GASOMETRIA CON LACTATO

Obtener una muestra de

sangre total con
heparina
Partiendo de la pantalla
“listo” lea el código de
barras del sobre del casete
Abra la cámara de medición

de muestras
Seque el casete e
introdúzcalo en la cámara
de medición
Cierre la tapa de la cámara

de medición
Mezcle bien la muestra
Cuando se le indique,
coloque la jeringa en el
adaptador de jeringa
Introducir la información del

paciente
Esperar que termine el

proceso y oprimir el botón
Reportar
“arriba” para imprimir el
resultado.
Octubre 2018
Elaborado por:
TINCIÓN DE WRIGHT
Realizar un extendido
sanguíneo
Cubrir la laminilla de colorante de

Wright y homogenizarlo
Soplar sobre el frotis

suavemente 1 min hasta Método 1 Método 2 Dejar actuar el colorante
visualizar un cambio de color durante 8 minutos
azul a violeta
Añadir buffer de fosfatos,

Cubrir con buffer de fosfatos,
homogenizar en todo el frotis
homogenizar en todo el frotis
soplando suavemente
soplando.
Enjuagar inmediatamente al Esperar 6 min y enjuagar al

chorro de agua. chorro de agua
Poner a secar y leer a 100 x Poner a secar y leer a 100 X.
Reportar
Octubre 2018
Elaborado por:
TINCIÓN DE GRAM
Coloque el frotis sobre

el puente de tinción
Cubra el frotis con

colorante violeta de
Genciana y espere 1 min
Escurra el exceso de
colorante y enjuague al
chorro de agua
Cubra el frotis con yodo y

espere 1 min.
Escurra el exceso de
colorante y enjuague al
chorro de agua
Decolorar con alcohol

acetona de 10 a 15
segundos
Enjuague al chorro de agua
Cubrir el frotis con

safranina y esperar 1 min.
Escurra el exceso de Dejar secar y leer a 100

colorante y enjuague al X.
chorro de agua
Octubre 2018
Elaborado por:
QUÍMICA SANGUÍNEA
Tomar una muestra de sangre

en un tubo de tapón dorado
Centrifugar a 3500 rpm/ 10 min
Encender el Cobas Mira
Preparar los reactivos necesarios

y colocarlos en las posiciones
correctas de los racks
Programar la lista de trabajo
Preparar las copas de muestra y

colocarlas en la posición
correcta.
Colocar o cambiar los segmentos

de reacción si es necesario
Presionar START para iniciar el

funcionamiento
Reportar
Octubre 2018
Elaborado por:
DETECCIÓN DE GONADOTROPINA CORIÓNICA HUMANA (HCG) CUALITATIVA

Recolectar una muestra de

orina o suero
Las muestras almacenadas en

refrigerador y pruebas deben
llevarse a temperatura ambiente
Abrir la envoltura un poco antes

del uso y retire la prueba.
Coloque la prueba en posición

horizontal sobre la mesa y
adicione 100 µl de muestra en la
ventana oval de muestra S que se
encuentra en la parte inferior
Lea la prueba entre los primeros

4 y 10 minutos
Interpretar resultados
Reportar
Octubre 2018
Elaborado por:
PROTEÍNA C REACTIVA
Obtenga una muestra de

suero
Transfiera una gota del suero del

paciente al circulo de la prueba
en la placa.
Homogenizar el reactivo de látex,

con el cuentagotas proporcionado
agregue una gota al círculo de la
placa
Mezcle las gotas usando el

agitador disponible asegurando
la cobertura del círculo
Suave y uniforme rote la placa de

la prueba por dos minutos
Prepare un serie de diluciones No

del suero del paciente con Si
Aglutinación Reportar
solución salina (1/2,1/4, 1/8 y
1/16)
Repita el método de la prueba Ejemplo: si el título de la

para cada dilución según lo aglutinación aparece en 1/8 de la
descrito arriba concentración del suero PCR es
8 X 6=48 mg/l.
La concentración de suero
PCR se calcula multiplicando
el factor de la dilución (2,4,6,8) Reportar
por el limite de detección que
es 6.
Octubre 2018
Elaborado por:
ANTI- ESTREPTOLISINA O (ASO)

Obtenga una muestra de

suero
Esperar a que los reactivos

y muestras estén a temperatura
Transferir una gota de suero del

paciente al círculo de la placa
Homogenizar el reactivo de látex,

con el cuentagotas proporcionado
agregue una gota al círculo de la
placa
Mezcle las gotas usando el

agitador disponible asegurando
la cobertura del círculo
Suave y uniforme rote la placa de

la prueba por dos minutos
Prepare un serie de diluciones

del suero del paciente con Si No
solución salina (1/2,1/4, 1/8, Aglutinación Reportar
1/16)
Ejemplo: si el título de la
Repita el método de la prueba aglutinación aparece en 1/8 de la
para cada dilución según lo concentración del suero ASO es
descrito arriba 8 X 200=1600 IU/mL
La concentración de suero
ASO se calcula multiplicando
el factor de la dilución (2,4,6,8) Reportar
por el límite de detección que
es 200.
Octubre 2018
Elaborado por:
PRUEBA DE INFLUENZA TIPO A Y B
Agregar 0.3 ml del buffer de

extracción al tubo de ensayo.
Tomar una muestra de exudado

nasofaríngeo con los hisopos
proporcionados en el kit
Coloque el hisopo de muestra en

el tubo de ensayo.
Mezclar vigorosamente en la
solución girando el hisopo con
fuerza contra el lado del tubo al
menos 10 veces
Retirar el hisopo y coloque la tira

de prueba (flechas apuntando
hacia abajo).
Esperar 10 min e interpretar el

resultado
Reportar
INFLUENZA A POSITIVA RESULTADO NEGATIVO
INFLUENZA B POSITIVA RESULTADO INVALIDO
Octubre 2018
Elaborado por:
PROCALCITONINA
Recolectar una muestra de

suero o plasma
Retirar el dispositivo de prueba

de la bosa sellada y coloque el
dispositivo en una superficie
nivelada.
Sostenga el gotero de la muestra

de forma vertical y añada 3 gotas
de la muestra sin burbujas en el
pocillo de muestra que esta
marcado con una flecha.
Lea los resultados en 30 min.
Interpretar y reportar
INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS
NEGATIVO Aparece una barra de color rosa nicamente en el área de control, indicando una
concentración de PCT por debajo de los 0.5 ng/ml
POSITIVO Aparece una banda de control de color rosa claro y una banda de prueba detectable en sus
respectivas regiones indicando un resultado positivo para PCT.
INVALIDO No hay bandas visibles en el área de control.
Octubre 2018
Elaborado por:
ANTÍGENO VDRL
Obtener 3 ml de sangre por

punción venosa, centrifugar
Si No

Variante Du

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Colocar en un tubo una

Agregar 1 gota de reactivo

Lavar 4 veces los

Agregar 1 gota de suero de

Técnico Laboratorista/Químico Responsable

Colocar en un tubo una

Centrifugar a 2000 rpm/ 1

Realizar una suspensión de

Colocar una gota de los eritrocitos

Centrifugar a 2000 rpm/1 min

Reportar positivo sin titulo

Lavar 4 veces los

Centrifugar a 2000 rpm/ 1 min

Colocar 100 µl de solución salina

Adicionar 100 µl de sangre

Contar 500 células y 10

EXAMEN GENERAL DE ORINA

Técnico Laboratorista/Químico Responsable

Realizar el examen físico,

Sumergir tira reactiva en el Centrifugar muestra a

Colocar la tira en el porta Decantar sobrenadante y

Se imprime resultado al Leer al menos 10 campos a

Técnico Laboratorista/Químico Responsable

En la pantalla del equipo utilizar

Colocar en una cubeta de Colocar en una celda de

Colocar la cubeta en los

REACCIONES FEBRILES EN PLACA

Técnico Laboratorista/Químico Responsable

Con ayuda de un palillo

Homogenizar la placa con

No Si Realizar diluciones con 5

Reportar según la tabla

Volumen de suero Titulo

Técnico Laboratorista/Químico Responsable

Introducir los datos del

Leer a 100 X el extendido

Tomar 200 µl del suero

Salir de modo pausa con

Abrir la tapa de la aguja e

GASOMETRIA CON LACTATO

Obtener una muestra de

Abra la cámara de medición

Cierre la tapa de la cámara

Mezcle bien la muestra

Introducir la información del

Esperar que termine el

Técnico Laboratorista/Químico Responsable

Cubrir la laminilla de colorante de

Soplar sobre el frotis

Añadir buffer de fosfatos,

Enjuagar inmediatamente al Esperar 6 min y enjuagar al

Poner a secar y leer a 100 x Poner a secar y leer a 100 X.

Coloque el frotis sobre

Cubra el frotis con

Cubra el frotis con yodo y

Decolorar con alcohol

Enjuague al chorro de agua

Cubrir el frotis con

Escurra el exceso de Dejar secar y leer a 100

Tomar una muestra de sangre

Centrifugar a 3500 rpm/ 10 min

Encender el Cobas Mira