Facultad de Bioanálisis, Veracruz

Manual de Prácticas de Hematología

MANUAL DE PRÁCTICAS DE LABORATORIO

SERIE BLANCA
ELABORÓ:

Q.C. MARIA ESTHER DESCHAMPS LAGO

Serie Blanca

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SERIE BLANCA: PRACTICA NO.1 OBTENCIÓN DE LA MUESTRA DE SANGRE
1. INTRODUCCIÓN Obtención De Sangre Capilar Es el método empleado cuando se necesita tan solo una pequeña cantidad de sangre, ya que los estudios a realizar así lo requieren. El sitio más apropiado para obtener sangre capilar es la yema del dedo. En los niños más pequeños, es más conveniente obtenerla del talón ó del dedo pulgar del pie. Los detalles relativos a los recipientes y portaobjetos que se utilizan, se indican a continuación. VENTAJAS. • con que puede obtenerse • ente útil en pacientes geriátricos y en niños, en particular, recién nacidos. Facilidad Especialm

DESVENTAJAS. • Sólo logra obtenerse una pequeña cantidad de sangre que puede ser insuficiente. • Es un método por lo general tardado y que tiende a provocar hemólisis de la muestra • En pacientes inmunocomprometidos puede provocar infecciones, excepto cuando se realiza la punción después de 8 a 10 min. de contacto con la piel con un buen antiséptico. Obtención De Sangre Venosa . Es el principal método de extracción de sangre en el laboratorio de análisis clínicos, ya que es relativamente fácil de realizar. VENTAJAS. • Nos permite hacer múltiples exámenes y en repetidas veces si se desea, con la misma muestra. • Las alícuotas de plasma y suero pueden congelarse para futura referencia. DESVENTAJAS • Puede provocar la coagulación de la sangre si el procedimiento lleva mucho tiempo. • Algunos componentes no son estables en sangre anticoagulada. • Puede dificultarse en niños, pacientes obesos ó en estado de shock.

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• Puede ocasionarse hemólisis de las muestras afectando ciertas determinaciones, por las siguientes causas: • Por forzar el paso de la sangre al tubo • Por agitar el tubo enérgicamente • Por extraer sangre de un hematoma Anticoagulantes Empleados. Estas sustancias impiden la formación de coágulos. El mecanismo por el que se evita la coagulación, varía según el anticoagulante; por ejemplo, EDTA, citrato y oxalato se unen con el calcio, mientras que la heparina impide la conversión de protrombina en trombina. Ejemplos de anticoagulantes son EDTA, citrato de sodio, y heparina en forma de sal de litio ,Los tubos deben invertirse varias veces para asegurar la mezcla adecuada después e la recolección, de acuerdo con las instrucciones del fabricante. 2. PRINCIPIO Y METODOLOGÍA . El sitio más práctico para obtener sangre venosa es la flexura anterior del brazo, de preferencia justo por arriba de alguna de las ramas venosas que allí se encuentran. Las venas superficiales de la cara anterior del antebrazo son las más comúnes para la venopunción. Las tres venas principales que se utilizan son: 1) vena cefálica, ubicada en la parte superior del antebrazo y del lado del pulgar de la mano; 2) vena basílica, ubicada en la parte inferior del antebrazo y del lado del dedo meñique de la mano; y 3) vena cubital mediana, que conecta las venas basílica y cefálica en la fosa antecubital ( flexión del codo) y es la vena de elección.Si el paciente aprieta el puño después de aplicar el torniquete, la vena se tornará más prominente. El torniquete facilita la obtención. En los niños pequeños se pueden utilizar otros sitios; si es así, es mejor que la sangre la obtenga alguna persona con experiencia. Usar una aguja puntiaguda, nunca menor de calibre 21 y una jeringa de 5 ml ó de 10 ml. Tanto la aguja como la jeringa deberán estar limpias, secas y estériles. Con práctica se puede obtener sangre usando sólo una aguja con un tubo de goma por el que se deja correr la sangre hasta los tubos en los que se recoge la muestra. Para esta técnica se utilizan agujas de calibre 19. 3. LISTA DE REQUERIMIENTOS 3.1 Materiales de Laboratorio CANTIDAD 2 1 1 1 1 1 1 DESCRIPCIÓN Tubos de recogida de muestras con EDTA Aguja de Vacutainer Contenedor de Vacutainer Jeringa Lanceta Torundas de algodón con alcohol isopropílico Ligadura

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4. PROCEDIMIENTO. 4.1 Punción Capilar 4.1.1 Indicaciones. En lactantes, se realiza en la superficie plantar interna ó externa del talón.En niños de más de un año, en la superficie palmar de la última falange del segundo, tercero ó cuarto dedo de la mano.La punción no deberá realizarse en una parte edematosa ó congestionada, ó donde la piel se encuentra fría y cianótica. 4.1.2 Identificación del Paciente

 Asegurarse de que el paciente llegue en condiciones óptimas y tranquilizarlo.  Colocar al paciente adecuadamente.  Checar el material para la extracción: 4.1.3 Técnica. 4.1.3.1 Limpiar cuidadosamente la piel en el sitio de punción y a su alrededor con algodón mojado en algún desinfectante , como alcohol de 70%. 4.1.3.2 Secar el área con gasa estéril seca. 4.1.3.3 Puncionar con una lanceta estéril ó aguja desechable. El movimiento debe ser rápido y la punción suficientemente profunda para asegurar que la sangre fluya libremente.La salida de la sangre puede facilitarse ejerciendo una suave presión en la cara lateral del dedo. A corta distancia del sitio de punción.

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2 Técnica 1. prefiriéndose la cubital mediana. Retirar la jeringa de la aguja y sustituirla por otra jeringa que contenga la solución anticoagulante de citrato de sodio. lo que la puede hacer inapropiada para estudio. Desinfectar nuevamente el sitio de punción. la vena basílica. que la jeringa no contenga aire. 5. limpiándola con una gasa seca y dejar el sitio de punción limpio y seco. 9. Serie Blanca 5 . se emplea el mismo procedimiento y cantidad de anticoagulante. 10. cuidando que la técnica sea aséptica. se diluirá con los líquidos tisulares.2.3. que puede ser sentado ó recostado. 3. tobillo y mano. Deben usarse tubos graduados para obtener la proporción adecuada de anticoagulante y sangre.4 Manual de Prácticas de Hematología La sangre deberá fluir libremente. Debe indicarse al paciente la posición correcta. O directamente introducir el tubo del sistema de vacío. las venas de la muñeca. Si se ejerce demasiada presión. 4. Asegurarse de que el émbolo de la jeringa esté hasta el fondo . Veracruz 4. 8.1. 2.3. retirando después la aguja con un solo movimiento. Desinfectar la piel en el sitio de punción con algodón mojado en un desinfectante apropiado como alcohol de 70%. la cefálica. Insertar la aguja de la jeringa en una vena con un movimiento preciso. y secar la piel con algodón ó gasa limpios.1.1 Indicaciones. aspirando la sangre con pipeta ó colocándola en un portaobjetos.3. 4. 4.6 Obtener la cantidad requerida de muestra. secos y estériles. Obtener el volumen de sangre deseado jalando el émbolo muy despacio. Aplicar un torniquete en el brazo ( por arriba del sitio de punción). Elegir la vena adecuada. apoyando bien el brazo en posición horizontal. Jalar lentamente el émbolo y obtener 2 a 3 ml de sangre. ya que resultan fáciles de palpar. ó en su defecto la aguja con el contenedor en el caso del sistema de tubos al vacío. Preparar la jeringa y la aguja. Soltar el torniquete y colocar una gasa seca sobre el sitio de la punción. suficientemente apretado para que restrinja el flujo de la sangre venosa. 7.2. 6. Presionar ligeramente la gasa sobre el sitio de punción durante algunos momentos y después pedir al paciente que continúe aplicando la presión durante unos minutos. 11.2 Punción Venosa 4. es decir. 4.Facultad de Bioanálisis. 4. Cuando la sangre se obtiene empleando sólo una aguja sin jeringa.1.5 Descartar siempre la primera gota de sangre.

. -Realizar esquemas de punción venosa y de las principales venas empleadas. -Realizar esquemas de punción capilar . Serie Blanca 6 . Veracruz Manual de Prácticas de Hematología Actividades: .Practicar la toma de sangre capilar.Facultad de Bioanálisis.Practicar la toma de sangre venosa.

sistema vacutainer y sus partes. Serie Blanca 7 . Veracruz Manual de Prácticas de Hematología -Realizar esquema de los diferentes sistemas de extracción: jeringa y sus partes.Facultad de Bioanálisis. de acuerdo con el anticoagulante empleado . tipos de tubos y colores de tapones empleados en el sistema vacutainer.

los leucocitos y las plaquetas. Un frotis no deberá ser ni grueso ni delgado. la tinción será de mejor calidad.LISTA DE REQUERIMIENTOS 3. Los frotis de sangre deben confeccionarse con láminas portaobjetos de vidrio que previamente se hayan lavado y secado de manera conveniente.1 Materiales de Laboratorio Serie Blanca 8 . INTRODUCCIÓN. Los frotis de sangre son esenciales para el estudio morfológico y cuantitativo de las células sanguíneas. las cuales son igualmente satisfactorias. pero otras también lo son. Los extendidos de sangre se realizan dentro del estudio del hemograma completo. Se deben teñir con una de las tinciones de Romanowsky las cuales varían en sus propiedades de tinción. con la finalidad de eliminar cualquier resto de grasa que pudiera quedar en ellos y evitar así una mala calidad en la tinción.Facultad de Bioanálisis. 2 “EXTENDIDOSDE SANGRE” 1. En un frotis bien realizado. PRINCIPIO Y METODOLOGÍA . Cuando un frotis se encuentra bien realizado. es importante seleccionar una y familiarizarse con ella. aunque puede variar la tinción de un lote a otro de colorante. y por lo tanto.En ellos se pueden estudiar los eritrocitos. pues en ninguno de ellos se podrán apreciar bien las áreas antes mencionadas.Reporte de resultados. Leishman ó May-Grünwald. ó bien de manera aislada . Veracruz Manual de Prácticas de Hematología . y el propósito de ello es determinar las características morfológicas de cada tipo celular y evaluar la frecuencia relativa de los distintos tipos de leucocitos. 2. La coloración de Wright es muy confiable y sencilla. el cuerpo ó zona media y la cola ó área final del mismo.____________________________________________ _______________________________________________________________ _______________________________________________________________ _______________________________________________________________ SERIE BLANCA:PRÁCTICA No. 3. se podrán distinguir en él tres áreas importantes: la cabeza ó zona de inicio. tales como la de Giemsa.

1.5-1. Técnica de los dos Portaobjetos. PROCEDIMIENTO. del lóbulo de la oreja ó por extracción venosa. 5. una pequeña gota desangre ( del tamaño de 3 cabezas de alfiler) obtenida por punción capilar del talón. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología 4. 3. -Realizar esquema muestra que las partes de un frotis . para lograr una película delgada de sangre. Colocar a una distancia de 1. NÚMERO 2 1 1 1 1 1 1 DESCRIPCIÓN Tubos de recogida de muestras Aguja de Vacutainer Contenedor de Vacutainer Jeringa Torundas de algodón con alcohol isopropílico Ligadura Caja de portaobjetos limpios ACTIVIDADES: -Realizar 10 frotis correctamente confeccionados. dejando que hagan contacto y que por capilaridad éste se extienda a lo largo del borde. el frotis deberá realizarse lo más pronto posible.Facultad de Bioanálisis. Serie Blanca 9 . 2. Si se emplea sangre venosa mezclada con anticoagulante. dejar secar y teñir. Se desliza el portaobjetos extensor hacia el extremo contrario. 4. Aproximar el portaobjetos extensor a la gora.9 cm del extremo derecho de un portaobjetos. debido a que el contacto prolongado con éste altera la morfología celular.

Veracruz Manual de Prácticas de Hematología -Realizar esquema de tres frotis: demasiado grueso. Serie Blanca 10 . demasiado delgado y correctamente realizado.Facultad de Bioanálisis.

Son aquellas sales de ácido incoloro y base coloreada como el clorhidrato de azul de metileno. INTRODUCCIÓN La finalidad de la tinción de Wright es lograr que el alumno se sienta capacitado para preparar adecuadamente algunos de los reactivos y colorantes más comúnmente empleados en las áreas de hematología y microbiología. ha sido la base de las coloraciones panópticas utilizadas en la actualidad ya que ha tenido un gran éxito en la tinción diferencial de la Serie Blanca 11 . que emplea estos colorantes.____________________________________________ _______________________________________________________________ _______________________________________________________________ _______________________________________________________________ SERIE BLANCA: PRACTICA NO. Estos colorantes tiñen por lo general algunos elementos del núcleo. los más empleados en hematología. 2) Basicos. que como químico clínico tiene la obligación de conocer y dominar. Son aquellas sales con el ácido y la base coloreados. 3) Neutros. los eosinatos de azul y azur de metileno . A los colorantes de les puede clasificar en tres grupos: 1) Acidos. PRINCIPIO Y METODOLOGÍA . Veracruz Manual de Prácticas de Hematología . A este grupo pertenecen las eosinas. 2.Facultad de Bioanálisis. COLORANTES. El método de Romanowsky. por ejemplo. 3 “TINCIÓN DE WRIGHT Y REACTIVOS COMUNMENTE EMPLEADOS EN HEMATOLOGIA “ 1. Estas soluciones se usan para la coloración citoplasmática ó coloración de fondo. Son aquellos constituídos por sales cuya base es incolora y cuyo ácido es coloreado.Reporte de resultados.

sequestrene ( EDTA ). pueden emplearse para impedir la coagulación de la sangre destinada a transfusiones. se disuelven en alcohol metílico. la mezcla de oxalatos. ya que produce un fondo azul en aquéllas que son teñidas con el colorante de Wright. por ser tóxica. artefactos en los núcleos de los linfocitos y monocitos. sin embargo. La mayor parte de estos colorantes policromos derivados del método de Romanowsky. Precipitación de colorante ANTICOAGULANTES. es muy útil el citrato trisódico. no se forman alteraciones ni artefactos en las células sanguíneas. pero para estudios morfológicos. buen menisco de colorante durante la tinción. Los más conocidos de todos ellos. la fijación con la tinción. Tipo de Error Tinción demasiado azul Causas Tiempo excesivo de tinción Lavado deficiente Ph muy alcalino Como se Corrige Disminuir el tiempo de tinción Lavar adecuadamente Acidificar el pH Tinción demasiado rosa Tiempo insuficiente de tinción Aumentar el tiempo de tinción Lavado excesivo Lavar adecuadamente pH muy ácido Elevar el pH Colorante no filtrado Filtrado de colorante Secado de la laminilla durante la Procurar que siempre haya un tinción. Los oxalatos pueden usarse para determinaciones como hemoglobina. no. etc. Se le compara con el oxalato para el estudio del hematocrito y hemoglobina. Los 3 primeros impiden la coagulación sustrayendo el calcio del plasma sanguíneo por precipitación ó fijación en forma no ionizada. La heparina también puede usarse para determinaciones como hematocrito y hemoglobina. El citrato trisódico. fagocitosis de los cristales de oxalato. son los de Giemsa y de Wright. Los 4 anticoagulantes más usados son: mezcla de oxalato amónico y de potasio ( ó simplemente oxalato amónico ). hematocrito y recuentos globulares. aunque para extensiones sanguíneas puede usarse tan sólo en los primeros minutos. aún después de un buen tiempo de estar hecha la mezcla. pues con él. el EDTA y la heparina. El EDTA ó sequestrene es tal vez el anticoagulante más usado para el recuento de células sanguíneas. pues más tarde pueden desarrollarse alteraciones de las células sanguíneas como formas dentadas de los hematíes.Además no deben emplearse para determinaciones químicas de nitrógeno y potasio. La heparina neutraliza la trombina y otras fases de la activación de los factores de coagulación. vacuolización en el citoplasma de los granulocitos. y heparina. pero no de óptimos resultados en las extensiones sanguíneas.Facultad de Bioanálisis. Para investigaciones de coagulación. es todavía mejor. Serie Blanca 12 . combinando así. citrato trisódico. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología mayoría de las estructuras normales y anormales de la sangre. si la sangre se refrigera ( 2 horas a 24 horas ).

8g 1. 1 2 3 4 5 6 7 NOMBRE DEL REACTIVO Colorante de Wright Metanol Na2HPO4 KH2PO4 EDTA Oxalato de amonio Agua destilada CANTIDAD 0.56 g 6.3 Materiales de Laboratorio NUM 1 2 3 4 5 6 7 8 9 CANTIDAD 1 2 1 4 1 3 1 1 10 DESCRIPCIÓN Mortero Probetas de 100 ml Matraz Volumétrico de 100 ml Varillas de vidrio Frasco de vidrio color ámbar de 1L de capacidad Frascos de vidrio color ámbar de 150 ml de capacidad Jeringa ó sistema vacutainer para toma de muestra Ligadura Portaobjetos 3. LISTA DE REQUERIMIENTOS 3.66 g 3g 0.1 g 60 ml 2.5L 3. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología 3. NUM.4.1 Reactivos.4 Preparación de los reactivos 3.2 Equipo de Laboratorio Balanza Granataria Balanza Analítica 3.1Colorante de Wright: Serie Blanca 13 .Facultad de Bioanálisis.

hasta completar disolución. Esta operación debe durar 30 min.1 Técnica: Tinción de Wright.1. EDTA Agua destilada 3g 100 ml Mezclar el EDTA poco a poco con el agua destilada. hasta aforar a 1 L.1. Se deja reposar dos días y se filtra.Amortiguador ó Buffer de fosfatos Na2HPO4 KH2PO4 Agua destilada para aforar a 2. ésto se hace poco a poco.4.1 g 60 ml Se tritura el colorante con el alcohol en un mortero.66 g 1L Mezclar las sales con poca cantidad de agua destilada. 3. 4. se utiliza 1 gota de solución por ml de sangre. 4.2 . Oxalato de amonio Agua destilada 0.PROCEDIMIENTO. En ambos. Veracruz Colorante de Wright: Metanol: Manual de Prácticas de Hematología 0.EDTA. que tenga la orilla relativamente lisa. 3. Serie Blanca 14 .3. 3.56 g 6. 4. Guardar en un frasco ámbar de 1 L.4.8 g 80 ml Mezclar poco a poco el oxalato de amonio con el agua destilada. e ir agregando poco a poco más agua.4. Seleccionar un portaobjetos nuevo de 25 X 75 mm para hacer extendidos.4 -Solución de Oxalato de amonio.Facultad de Bioanálisis.

5 Fijar el extendido de sangre en alcohol metílico absoluto durante 2 a 3 minutos. 4. El alumno deberá ensayar tiempos hasta ajustar aquellos que más convengan para una óptima coloración.3Colocar una pequeña gota de sangre a 2 ó 3 mm de la orilla de un portaobjetos limpio y seco. se escribe con lápiz el nombre del paciente en una orilla del portaobjetos. con tres frotis más deberá ensayar: 2 minutos de colorante y 4 de amortiguador. Después de 3 minutos añadir un volumen igual de amortiguador.2 Resultados Esperados. Gránulos neutrófilos del citoplasma. El grueso del extendido de sangre puede regularse modificando el ángulo del portaobjetos de extensión. Citoplasma de los linfocitos. 4.1. azul claro. 4. Núcleos de los leucocitos de azul púrpura. Serie Blanca 15 .7 Después de 5 minutos enjuagar cuidadosamente con agua de la llave ó amortiguador de fosfatos. Así. Limpiar el reverso del portaobjetos en posición erecta. Colocar el portaobjetos para hacer extendido en un ángulo de 30 a 45 grados con respecto al portaobjetos que tiene la muestra y hacer contacto cn la gota. El color del extendido de sangre cambiará de rojo a café claro. Esta fijación es recomendable aunque el colorante que se vaya a emplear se encuentre diluído en alcohol metílico absoluto. 6 minutos de colorante y 6 minutos de amortiguador. Se puede usar sólo aceite de inmersión en una preparación temporal. Esta debe extenderse rápidamente a lo largo de la orilla del portaobjetos para hacer los extendidos. lila ó violeta Gránulos eosinófilos.1. la presión ó la velocidad de extensión. variando el tamaño de la gota de sangre. ligero azul. cubrir el portaobjetos con un cubreobjetos rectangular y fijarlo con una gota de líquido de montaje.1. Citoplasma de los monocitos. Cuando se haya secado. Deslizar el portaobjetos de extensión sobre la superficie dispersando la muestra de sangre.4 El extendido de sangre se seca con el aire. 4. púrpura tirando a azul oscuro. Una vez seco. 4. Gránulos basófilos. al principio con chorro delgado y suavemente y después con el chorro fuerte para eliminar todo exceso de colorante. Plaquetas. 6 minutos de colorante y 11 minutos de amortiguador.6 Cubrir el portaobjetos completamente con el colorante. rojo tirando a naranja. El extendido de sangre debe medir aproximadamente 30 mm de largo . 4.1. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología 4.Facultad de Bioanálisis.1. El portaobjetos de extensión no se despegará hasta haber extendido toda la sangre.2 Obtener una pequeña cantidad de muestra de sangre periférica. con la cromatina y paracromatina netamente diferenciadas. Soplar ligeramente para mezclar uniformemente. Los resultados esperados en la tinción serán los siguientes: Hematíes en color rosa.1. Aparecerá un brillo metálico verde. color lila oscuro.

puede considerarse significativa. la presencia de solo una única célula con ciertos cambios. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología Actividades: -Practicar la tinción de Wright con frotis de sangre periférica. en otros.Un error común consiste en comenzar el examen con el objetivo de inmersión. la anormalidad se considera importante sólo si un número significativo de células se ven afectadas. y puede ser también de ayuda en el diagnóstico de otras enfermedades. Incluso.______________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ SERIE BLANCA:PRÁCTICA No. . éste puede ser evaluado en búsqueda de anormalidades.INTRODUCCIÓN.Reporte de resultados . La morfología de los eritrocitos puede verse alterada con cambios en el tamaño.Ciertos problemas de la muestra y anormalidades morfológicas significativas pueden pasarse por alto a menos que todos los objetivos sean empleados. en la forma. Una vez que se ha hecho y teñido un frotis satisfactorio. errores encontrados en la tinción. con alto poder ( 40 ó 45 X). e inmersión ( 100X ). 4 “EVALUACIÓN DE SANGRE PERIFÉRICA” 1. La presencia de eritrocitos anormales en el frotis de sangre periférica a menudo brinda importantes claves en el diagnóstico diferencial de las anemias. en las propiedades tintoriales de células individuales ó por la presencia de ciertos materiales dentro de ellas. -Corregir de acuerdo al recuadro .Facultad de Bioanálisis. Serie Blanca 16 . Cada examen debería incluir análisis con bajo poder ( 10X ).

Veracruz Manual de Prácticas de Hematología Asimismo. en el área "aplumada" ó terminal del frotis. sino únicamente en médula ósea. Algunas anormalidades pueden requerir que se indique le severidad del cambio. moderado ó severo. las células pueden interpretarse como microcíticas en forma equivocada. La intensidad de la formación de "rouleaux" depende de la concentración de las proteínas plasmáticas. p. O bien un sistema " por cruces" :1+. Los laboratorios actualmente tratan de controlar estas inconsistencias desarrollando criterios para estandarizar la evaluación de la morfología. Serie Blanca 17 . en la serie blanca. En un frotis en " cuña ". esferocitosis. aún cuando los nuevos contadores electrónicos den un resultado anticipado del mismo. 3+. 2. es importante realizar el recuento diferencial. También la elevación de gama globulinas. En enfermedades inflamatorias. En el área gruesa del frotis. conduciendo a una variación considerable en el análisis del mismo frotis de sangre. los márgenes individuales de las células son difíciles de distinguir y dan una imagen como de pilas de monedas que han sido empujadas y tiradas. las células más pequeñas de sangre periférica. demuestran cambios que pueden considerarse patológicos. ya que sólo puede confirmarse éste por medio de dicha lectura. Esto corresponde a una área en donde los eritrocitos se tocan pero no se enciman. En el verdadero Roleaux.Se puede hacer un recuento indirecto de las mismas cuando así se requiera. 2+. muchos laboratorios usan un método semicuantitativo de evaluación. Lo mismo aplica para las plaquetas. así como la presencia de células que normalmente no se ven en sangre periférica. imagen que persiste aún en las áreas más delgadas del frotis. y buscar anormalidades en su forma y en su tamaño. 2. el área ideal para examinar un frotis. provoca formación de "rouleaux".1 Análisis con bajo poder. células en "diana ". es aquella que contiene aproximadamente 200-250 células por campo a seco fuerte. macrocitosis. También tenderán a formar apilamientos ( rouleaux ) en esta área. se buscarán anormalidades en las células blancas y éstas se reportarán. especialmente el fibrinógeno. a menos que exista alguna patología presente. consistente en los términos: leve. Tan importante como el que haya consistencia entre los observadores. Del mismo modo. los niveles de fibrinógeno pueden aumentar. Por ello. como se observa en el Mieloma múltiple. y la morfología puede ser difícil de evaluar. Todas estas determinaciones pueden diferir de observador a observador.Facultad de Bioanálisis. etc. PRINCIPIO Y METODOLOGÍA .e. Así. aunque ahí exista menor cantidad de células. es importante también la selección de una área apropiada del frotis para la evaluación. etc.

se acumularán más en estas áreas. eritrocitos y plaquetas ) deben observarse en búsqueda de anormalidades morfológicas.Si la mayoría de las células se encuentran en el borde aplumado. ya que esta evidencia de coagulación podría interferir con muchas pruebas hematológicas.Las células blancas deberían verse fácilmente con este aumento. también debe poder estimarse y los tres tipos de células ( leucocitos . para lograr esto. multiplicado por un factor de corrección que a menudo está entre 2000 y 2. La cuenta diferencial consiste en identificar cuando menos 100 leucocitos consecutivos. Los extremos laterales y aplumado deben evaluarse en búsqueda de un número desproporcionado de leucocitos. Con este objetivo. así como las del cuerpo del frotis. Estando en el área ideal.El borde aplumado debe ser examinado para buscar cúmulos de plaquetas ó filamentos de fibrina. En primer lugar. Si la cuenta de leucocitos es muy baja. se debe seleccionar el área apropiada para iniciar la cuenta diferencial. 2. el frotis deberá descartarse y prepararse uno nuevo. tienden a acumularse más en estos lugares y si el frotis está mal hecho. donde los eritrocitos se tocan pero no se Serie Blanca 18 . Es importante incluir las células de los márgenes. el frotis debe ser nuevamente teñido.Si no es asi. indicando esto que debe realizarse una nueva toma.Las células más grandes ( por ejemplo los neutrófilos y los monocitos. y reportar estos valores como un porcentaje.El segundo problema por resolver con este objetivo. la cuenta diferencial de leucocitos debe estimarse. Así. contar el número de células blancas observadas en cinco a diez campos y determinar el promedio. será estimar la cuenta total de leucocitos. Empleando la misma área que para la cuenta diferencial. puede ser necesario incluir áreas fuera del área ideal con el fín de encontrar suficientes células blancas.500 ( 2 a 2. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología Este objetivo debe utilizarse para evaluar la calidad de la tinción. 2. Esta debe ser donde los eritrocitos se tocan pero no se sobreponen.. El promedio. es decir. Con este objetivo existen dos problemas por resolver. la cuenta de plaquetas.2 Análisis con alto poder.Facultad de Bioanálisis.3 Análisis con objetivo de inmersión. y puede ser un área en donde se encuentren 200 eritrocitos por campo.5 en miles) representará la cuenta total del leucocitos. las cuales están fuera del área ideal de observación. debe seguirse el patrón de observación de la imagen siguiente: El número de plaquetas también puede ser estimado con este objetivo.

1Seleccionar el área apropiada para iniciar la cuenta diferencial. 4.2 Materiales de Laboratorio CANTIDAD 1 DESCRIPCIÓN Frotis de sangre periférica teñido con colorante de Wright 4. Deberá calcularse el número promedio de plaquetas por campo. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología sobreponen. sería evaluar la morfología celular.1 Análisis con bajo poder.2. 4. como se hizo con la cuenta de leucocitos. 4. Microscopio de Luz 3.3Evaluar extremos laterales y aplumado en búsqueda de leucocitos desproporcionados. Este número será convertido en no. la cuenta total de plaquetas sería de 180.000 / μl. Serie Blanca 19 . Por ejemplo. 4.2.000 / μl en el segundo caso.2Examen en el borde aplumado del frotis en búsqueda de cúmulos de plaquetas ó filamentos de fibrina. LISTA DE REQUERIMIENTOS.2 Análisis con alto poder.3Estimar la cuenta total de leucocitos. observada representa 15.1 Equipo de laboratorio.Facultad de Bioanálisis.000 plaquetas ó 20. Cualquier anormalidad ó inclusión en células rojas y blancas. Las plaquetas también deberán evaluarse en su tamaño y forma. La última actividad a realizar con este objetivo. de plaquetas/μl de sangre. ó 240. Más de una forma inusualmente grande de plaquetas. ó demasiado gruesas. cada plaqueta. entonces. Si se llegaron a observar un promedio de 12 plaquetas por campo.000/ μl en el primer caso. 4.1Evaluar la calidad de la tinción. 3.1. en cada cinco campos deberán ser reportadas . 4.1. deben contarse las plaquetas en al menos diez campos. y dicho número se multiplicará por un factor determinado por el propio laboratorio en base a la combinación de los objetivos y oculares empleados en sus microscopios. Esto puede irse haciendo a medida que se va realizando la cuenta diferencial. PROCEDIMIENTO. Las células suelen distorsionarse en áreas muy delgadas. 3. 4. También es importante evaluar la forma y el tamaño de los eritrocitos en esta misma área.1. deberá reportarse.

____________________ _____________________________________________________________________ 2.Facultad de Bioanálisis. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología 4.2 Estimar la cuenta total de leucocitos.________________ ___________________________________________________________________ 2.1 Calidad de la tinción:_________________________________________________ __________________________________________________________________ 1. ACTIVIDADES: . 2.3.2Realizar el recuento indirecto de plaquetas.Reporte de resultados 1.1 Recuento diferencial Serie Blanca 20 . contando cien células en total. Análisis con bajo poder.1Realizar el recuento diferencial. 4.3 Examen de los extremos laterales y aplumado del frotis. Análisis con alto poder.3. 4.3Buscar anormalidades morfológicas tanto de los leucocitos como de los eritrocitos y de las plaquetas.3. y diferenciando la línea celular a la que pertenecen. 4._____________________________________ ______________________________________________________________________ 3.2 Examen del borde aplumado del frotis ___________________________________ __________________________________________________________________ 1. 3. Análisis con objetivo de inmersión. 1.3Análisis con objetivo de inmersión.1 Seleccionar el área apropiada para iniciar la cuenta diferencial.

y se comparará contra los siguientes valores normales . en base a su morfología y características tintoriales.7 ) -VALORES NORMALES. y así compararlos con los valores normales de cada una de ellas. 5 “FORMULA LEUCOCITARIA Ó RECUENTO DIFERENCIAL” 1. A partir de estos valores y de la cuenta total de glóbulos blancos obtenidos en microlitros. los valores normales absolutos. podremos calcular los valores absolutos de cada línea celular en sangre periférica. de acuerdo como se indica en el procedimiento.2 Busqueda de anormalidades morfológicas de: leucocitos ___________________________________________________________ SERIE BLANCA:PRÁCTICA No.PRINCIPIO Y METODOLOGÍA .INTRODUCCIÓN. Se realizará el recuento diferencial.Se anexan también. La fórmula leucocitaria nos da información sobre el porcentaje de leucocitos de cada tipo. ( para obtenerlos. TIPO CELULAR Metamielocitos Bandas Segmentados Linfocitos Monocitos PORCENTAJE ( % ) 0-2 0-11 40-74 12-46 1-13 LÍMITES ABSOLUTOS <10-500 100-800 2000-6000 1000-4200 100-800 Serie Blanca 21 . ver práctica no. además de los valores normales en %.Facultad de Bioanálisis. que indican el número de cada estirpe celular expresado por microlitro . 2. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología Metamielocitos Bandas Segmentados Linfocitos Monocitos Eosinófilos Basófilos _____ _____ _____ _____ _____ _____ _____ 100 3.

2 Materiales de Laboratorio CANTIDAD 1 DESCRIPCIÓN Frotis de sangre periférica teñido con colorante de Wright 4. donde las células se tocan pero no se sobreponen. identificar cuando menos 100 leucocitos consecutivos en un frotis teñido con Wright.Facultad de Bioanálisis. El recorrido debe hacerse de manera vertical. ACTIVIDADES. para no omitir células de los márgenes y para no salirse del área ideal para el recuento. y reportar estos valores en por ciento. Veracruz Eosinófilos Basófilos 0-7 0-3 Manual de Prácticas de Hematología <100-200 <10-20 3. Microscopio de Luz 3. PROCEDIMIENTO. REPORTE DE RESULTADOS: TIPO CELULAR Metamielocitos Bandas Segmentados Linfocitos Monocitos Eosinófilos Basófilos PORCENTAJE ( % ) VALORES ABSOLUTOS Serie Blanca 22 . Con el objetivo de inmersión. LISTA DE REQUERIMIENTOS 3.Se aconseja identificar el área ideal para la observación: el área del cuerpo del frotis.1 Equipo de Laboratorio 1. con valores por arriba y por debajo de lo normal. Investigar en qué casos pueden encontrarse cada una de las líneas celulares reportadas en la cuenta diferencial.

PRINCIPIO Y METODOLOGÍA . Las pipetas empleadas para el recuento manual de glóbulos blancos. lo que podría deberse en realidad a una hemoconcentración. que con frecuencia es acompañada por incremento de los granulocitos neutrófilos. siempre que se le asocie a la clínica que ésta presenta.Facultad de Bioanálisis. 6 “RECUENTO DE GLÓBULOS BLANCOS” 1. Es menos frecuente que aumenten todas las líneas celulares. la grabación 0. y en la inferior. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología SERIE BLANCA:PRÁCTICA No. que es en Serie Blanca 23 . se llama leucocitosis. lo cual indica una dilución distinta.5. La medición del número total de leucocitos sirve en ocasiones de guía para evaluar la severidad de una enfermedad.Un aumento de los glóbulos blancos por encima de 10.000 /μl. aunque no es la única causa. 2. La evaluación de los glóbulos blancos considera el conteo total de leucocitos y la cuenta diferencial de cada uno de ellos.INTRODUCCIÓN. Una disminución en el recuento de glóbulos blancos por debajo de los valores normales establecidos. la grabación 11. se conoce como leucopenia. pero presentan en su capilar superior. son similares a las que se usan para el recuento de glóbulos rojos.

Se emplea la misma cámara cuentaglóbulos llamada cámara de Neubauer.Facultad de Bioanálisis.1 Reactivos NUM 1 NOMBRE DEL REACTIVO Acido Acético CONCENTRACIÓN 2% CANTIDAD 50 ML 3. 3. en 25. y el cuadrado central. Los cuadrados de las cuatro esquinas están subdivididos en 16 cuadrados.2 Equipo de Laboratorio Serie Blanca 24 . La cámara cuentaglóbulos presenta un retículo con una superfcie total de 9mm². de 1 mm² cada uno.LISTA DE REQUERIMIENTOS. nada más que el conteo y los cálculos se realizan de diferente manera. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología este caso de 1:20. Cuadrículas ( L ) para recuento de glóbulos blancos 3.

5 Dejar reposar 4. 4.3 Mezclar en el agitador por 2 minutos.Facultad de Bioanálisis.7 Realizar cálculos como indica la fórmula: N______x______20______x______10 = 4 En donde: N X 50 Serie Blanca 25 .Agregar 1 gota de azul de metileno líquido 5 PROCEDIMIENTO. Microscopio de Luz Manual de Prácticas de Hematología 3. 4.2 Preparación del reactivo 4.1.2.1. 4.1. 5.4 Cargar la cámara con la dilución bien homogeneizada 4.2 Limpiar cuidadosamente con una gasa o papel suave el extremo de la pipeta y completar con el líquido de dilución hasta la marca de 11.1.1.1Líquido de Turk ó hemolizante: -solución de ácido acético al 2% .1 Técnica.1. Veracruz 1.6 Contar los leucocitos contenidos en los cuatro retículos de las esquinas.1 Pipetear sangre hasta la marca de 0. Estos se encuentran divididos en 16 cuadros cada uno.1.3 Material de Laboratorio CANTIDAD 1 1 1 1 DESCRIPCIÓN Cámara de Neubauer Pipeta para recuento de glóbulos blancos Tubo de ensaye de 13 X 100 Boquilla 4.5 4. 4.

15. evitar la compresión exagerada y prolongada. Para evitar dicho error.3 4. Real de leucocitos= 15.3. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología N = suma de los leucocitos encontrados en los 4 retículos 20 = Título de la dilución 10 = Corrección de la cámara para llevar a 1 mm³ 4 = número de retículos.750 No.1 4.000 .000 – 3. De leucocitos contados – Y Ejemplo: No.10. Pipetas mal calibradas Dilución agitada insuficientemente Carga de la cámara con la primera gota de la pipeta Distribución desigual de la cámara Incorrecto ajuste del cubreobjetos Cuenta defectuosa de los elementos celulares Confundir a los eritroblastos con leucocitos. De leucocitos= 15.3.000/ mm³ 4.3.4 4. Real de leucocitos= 11.5 4.3.3.Facultad de Bioanálisis.2 4.000 % de eritroblastos= 35 Y= 100 No.3 Causas de error 4.000 .3.000 .000 / mm³ Recién nacidos: 10.2 Valores Normales: Adultos: 5.15. 4.000 / mm³ Niños hasta 5 años: 6.7 4. Realizar un esquema de la pipeta empleada para el conteo de Glóbulos Blancos.000 Serie Blanca 26 .250 ACTIVIDADES.3.3. se debe realizar una corrección con la siguiente fórmula: Y = %_eritroblastos_contados X No.8 Recolección de la sangre en condiciones de cianosis. 35 + _ 35 x 15.6 4. De leucocitos contados 100 + % de eritroblastos contados Numero real de leucocitos= No. Si se practica la punción venosa.

Veracruz Manual de Prácticas de Hematología Enlistar causas de leucocitosis así como de leucopenia. Serie Blanca 27 .Facultad de Bioanálisis.

que pareciera la sangre periférica que se analiza en pacientes con leucemia mielocítica crónica.______________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________ SERIE BLANCA:PRÁCTICA No.INTRODUCCIÓN. Normalmente la cuenta de neutrófilos también se encuentra aumentada. es tan marcada.P. el aumento en la cuenta total de blancos y la aparición de formas neutrofílicas jóvenes. 2. El hallazgo de un número aumentado de Serie Blanca 28 . 7 “EVALUACIÓN DE FROTIS DE S. y casi siempre se debe a alguna alteración . no siempre es así: puede estar elevada a causa de un incremento en los linfocitos ( linfocitosis). es un incremento en las bandas. El término " Reacción Leucemoide " es el indicado en esta situación. una cuenta de glóbulos blancos elevada. Se deberán buscar tanto en el frotis sanguíneo como por medio del recuento de glóbulos blancos en el contador electrónico ó por el método manual. por lo que algunos autores se refieren a la primera circunstancia como un " cambio regenerativo hacia la izquierda ".Aunque más frecuentemente se debe a un aumento en los neutrófilos ( neutrofilia ). con cuenta normal ó baja de leucocitos. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología .Reporte de resultados . CON LEUCOCITOSIS Y DESVIACIÓN A LA IZQUIERDA” 1. Esto puede ser referido como una " desviación hacia la izquierda ". En general. Este exceso de salida de estas formas a la circulación. y a la segunda . de hecho sí es debido a algún otro proceso patológico y debe ser distinguido de leucemia. Ocasionalmente. el número aproximado de leucocitos en una muestra que previamente haya sido analizada y de la cual se haya reportado leucocitosis y desviación a la izquierda. particularmente si formas aún más jóvenes son encontradas en la circulación. como un " cambio degenerativo hacia la izquierda ". Un cambio en sangre periférica que no está asociado con ningún cambio morfológico celular pero que está asociado con enfermedad.PRINCIPIO Y METODOLOGÍA . ya que si no es así. ésto puede indicar un peor pronóstico para el paciente.Facultad de Bioanálisis. en los eosinófilos ( eosinofilia ). se conoce como “leucocitosis”.

Veracruz Manual de Prácticas de Hematología banda y leucocitos y el de formas jóvenes que incluyan principalmente formas en metamielocitos. . ACTIVIDADES. 4.Facultad de Bioanálisis.______________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ Serie Blanca 29 . confirmarán dicho diagnóstico . Observar imágenes en laminillas y/ó diapositivas correspondientes con estas alteraciones.PROCEDIMIENTO.Reporte de resultados .

CON EOSINOFILIA” 1. Si los valores absolutos de los eosinófilos se encuentran por arriba de lo normal. Serie Blanca 30 . se podría decir que hay “eosinofilia”.INTRODUCCIÓN. 8 “EVALUACIÓN DE FROTIS DE S. y ciertas parasitosis. sin embargo. puede haber un incremento en los eosinófilos que lleven a una leucocitosis. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología SERIE BLANCA:PRÁCTICA No. Observar imágenes en laminillas y/ó diapositivas correspondientes con estas alteraciones. Como ya se ha mencionado. 3.Facultad de Bioanálisis. 3. 2. es la más común. Se analizarán muestras en las que exista el hallazgo de eosinofilia. se podría decir que puede haber eosinofilia.1 Equipo de Laboratorio Microscopio de Luz 3.P. la elevación de los glóbulos blancos a partir de neutrófilos.PRINCIPIO Y METODOLOGÍA . no son las únicas. y ésto se determinará en base al cálculo de los valores absolutos.LISTA DE REQUERIMIENTOS.2 Materiales de Laboratorio CANTIDAD 1 DESCRIPCIÓN Frotis de sangre periférica teñido con colorante de Wright 4. PROCEDIMIENTO. Sin embargo. Aun cuando la cuenta de glóbulos blancos no estuviera elevada. Son dos las causas más comunes de esta condición: las enfermedades y reacciones alérgicas. haciéndose el recuento diferencial así como la determinación de los valores absolutos de los eosinófilos.

______________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ Serie Blanca 31 . Veracruz Manual de Prácticas de Hematología ACTIVIDADES.Facultad de Bioanálisis.Reporte de resultados . Realizar una lista de enfermedades en las que se encuentren elevados los eosinófilos. .

INTRODUCCIÓN. El núcleo del neutrófilo normalmente es algo picnótico. estas células son evidencia de que el organismo está " perdiendo la batalla " en un paciente con infección. de mal pronóstico aunque podría ser un artificio originado por la toma de la muestra a través de algún catéter contaminado.1 Equipo de Laboratorio Microscopio de Luz 3. CON PICNOSIS Y MICROORGANISMOS INTRACELULARES” 1. 3. 9 “EVALUACIÓN DE FROTIS DE S.Facultad de Bioanálisis.2 Materiales de Laboratorio CANTIDAD DESCRIPCIÓN Serie Blanca 32 . e indica una septicemia abrumadora.P. Las células pueden distinguirse como neutrófilas porque el citoplasma retiene el tiente rosa habitual. 3.Las células muertas ó las que están a punto de morir. • Picnosis. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología __________________________________________________________________________ _______________________________________________________________ SERIE BLANCA:PRÁCTICA No. Los lóbulos pueden estar separados ó puede haber un único y redondo núcleo en degeneración. Se analizarán muestras en las que exista el hallazgo de picnosis y microorganismos intracelulares. sin embargo. ya que una sola célula que presente un microorganismo es significativo. Estos cambios también pueden encontrarse como resultado de una prolongada exposición al EDTA. En una muestra fresca. 2. Estas células también pueden ser identificadas como necrobióticas.LISTA DE REQUERIMIENTOS. Esta es un tipo de inclusión muy rara de encontrar e indica la presencia del organismo infectante. tendrán un núcleo obscuro y redondo sin evidencia de estructura nuclear. • Organismos intracelulares. también pueden aparecer en pacientes que reciben quimioterapia.PRINCIPIO Y METODOLOGÍA . y puede observarse intra ó extracelularmente. ó bien una levadura. Puede ser o bien una bacteria. pero pueden distinguirse la paracromatina y la cromatina.

______________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ Serie Blanca 33 .Reporte de resultados . .PROCEDIMIENTO. Veracruz 1 Manual de Prácticas de Hematología Frotis de sangre periférica teñido con Wright 4. ACTIVIDADES. Observar imágenes en laminillas y/ó diapositivas correspondientes con estas alteraciones.Facultad de Bioanálisis.

Estas inclusiones son a menudo encontradas junto con las granulaciones tóxicas y/ó vacuolización. y además aquellas que en verdad presenten granulaciones tóxicas. Las granulaciones tóxicas pueden ser vistas en una variedad de desórdenes inflamatorios ó tóxicos. • Vacuolización. A veces pueden ser la única evidencia de un proceso Serie Blanca 34 . Estas son identificadas morfológicamente como " hoyos " dentro del citoplasma. Ya que la principal función de los neutrófilos es la fagocitosis. La vacuolización puede encontrarse frecuentemente cuando el paciente tiene una infección bacteriana.Facultad de Bioanálisis. pueden haber numerosas vacuolas dentro del citoplasma como una evidencia de ésto. otras. debe sospecharse un artificio del frotis.P. lo harán en variedad de grados. pueden contener muchos. si existe actividad fagocítica aumentada. artritis reumatoide.INTRODUCCIÓN. Si estos gránulos fueran realmente debidos a un proceso patológico. Algunas células pueden contener sólo unos pocos gránulos. • Granulaciones Tóxicas. También es frecuente observarlas junto con las granulaciones tóxicas. no serían vistos en todas las células. ataque al corazón. Pueden deberse al menor número de mitosis realizadas durante la maduración celular. Al igual que en las granulaciones tóxicas. si todas las células se ven afectadas en el mismo grado. • Cuerpos de Döhle. CUERPOS DE DOHLE Y AGRANULACIÓN CITOPLÁSMICA” 1. los cuales se tiñen de color azul-púrpura con la tinción de Wright como sucede con los del promielocito. CON CAMBIOS MORFOLÓGICO-BENIGNOS: GRANULACIONES TÓXICAS. ésto debe considerarse como un artificio del frotis. Si todas las células se ven afectadas y en el mismo grado de intensidad. gota. Sin embargo. especialmente con las bacterias piógenas . Este cambio representa la presencia de gránulos primarios no específicos. Una granulación aumentada también puede ser vista cuando el frotis es teñido por mucho tiempo. así como en respuesta a una neoplasia. en infección bacteriana. como por ejemplo. VACUOLIZACIONES. ésto también puede ser el resultado de una exposición prolongada al EDTA. 10 “EVALUACIÓN DE FROTIS DE S. aunque no siempre. insuficiencia renal. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología SERIE BLANCA:PRÁCTICA No.

LISTA DE REQUERIMIENTOS. En algunas células. 2. aunque no siempre.2 Materiales de Laboratorio CANTIDAD 1 DESCRIPCIÓN Frois de sangre periférica teñido con Wright 4. aunque cada uno de ellos puede verse individualmente. • Agranulación citoplásmica. y a menudo estos cambios se asocian con aumento en las formas en banda y cuenta elevada de leucocitos. Tienen el característico color azul tenue del RNA y se les encuentra frecuentemente cerca de la membrana citoplasmática de la célula. Los cuerpos de Döhle son pedazos de RNA residual ( retículo endoplásmico rugoso ) en el citoplasma. la única evidencia de neutrófilos activados es una área clara agranular en la periferia de la célula. y los cuerpos de Döhle. Se analizarán muestras con alteraciones en las que exista el hallazgo de varios cambios morfológico-benignos. Estas células también se distinguen por un borde citoplásmico irregular en contraste con el borde redondo usual del neutrófilo. . 3. Observar imágenes en laminillas y/ó diapositivas correspondientes con estas alteraciones. pueden ser muy prominentes. En ocasiones.1 Equipo de Laboratorio Microscopio de Luz 3. 3. ACTIVIDADES. También ésto puede ser visto junto con las granulaciones tóxicas. que indica la formación de un pseudópodo.Reporte de resultados . pequeños y muy tenues.PRINCIPIO Y METODOLOGÍA . la vacuolización.______________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ Serie Blanca 35 .Facultad de Bioanálisis. En ocasiones pueden observarse los tres tipos de cambios tóxicos en la misma célula. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología tóxico ó reactivo en un paciente. PROCEDIMIENTO. y en otras. y pueden pasarse por alto si el observador no tiene suficiente cuidado en la observación.

Puede aplicarse el término " linfocitos variantes " ya que no todos los cambios son " reactivos " ó asociados con infección viral. 2+. indentado ó lobulado y tiene una apariencia más abierta y color más tenue que lo usual. ha sido utilizado para describir cualquier forma que varíe del criterio morfológico empleado para un linfocito normal. pueden ser especialmente difíciles de distinguir de los monocitos. y virus de hepatitis B y C. Siempre que más del 10% sean clasificados como variantes. por ejemplo. La mayoría de las formas variantes están asociadas con infecciones virales. y contiene áreas de un azul más intenso. y el patrón cromatínico es más delicado y fino.INTRODUCCIÓN. dando una apariencia monótona.P. el hallazgo es considerado clínicamente significativo y debe ser reportado. el cual puede ser más gris. el citoplasma es predominantemente azul cielo. las células tienden a ser muy similares morfológicamente. Debe recordarse entonces que en casos de leucemia. En cambio. Por otro lado. puede seguirse una regla general que menciona que si hay muchos linfocitos en el frotis. algunos laboratorios los reportan como un porcentaje separado de leucocitos. marcado ó severo ". especialmente con el grupo herpes virus ( por ejemplo. sífilis ó tuberculosis. Otros pueden usar un método semicuantitativo. para indicar su frecuencia relativa. 11 “EVALUACIÓN DE FROTIS DE S. Algunos rasgos útiles para distinguirlos es que los monocitos son células que empujan a otras y tienden a indentarlas cuando están muy próximas a ellas. homogénea. como puede verse. Son grandes. Otra de las formas se asemejan muy a menudo a un monocito. si se está en duda. el virus Epstein-Barr-la causa de mononucleosis infecciosa. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología SERIE BLANCA:PRÁCTICA No. También pueden encontrarse en casos de toxoplasmosis. Debido a que varias formas son el resultado de infección viral. doblado. hay quien puede confundir estas células con formas malignas ó blastos. No presenta nucleolos. El término " atípico ". A veces. En un momento dado. como " 1+. especialmente al Serie Blanca 36 . El núcleo del monocito. citomegalovirus ó herpes simplex tipos 1 y 2 ). El núcleo puede ser redondo. Debido a que ocasionalmente puede encontrarse algún linfocito atípico y considerarse normal. la célula que se sospecha más seguramente es un linfocito también. 3+ " ó " leve. los linfocitos más fácilmente sufren esa indentación . CON LINFOCITOS ATÍPICOS” 1. especialmente en donde hace contacto con las células que la rodean. que tienden a irradiar del núcleo ó a concentrarse en la periferia de la célula. con citoplasma abundante y a menudo vacuolado. Estas células. comparando con el usual color azul cielo del linfocito normal. respectivamente. el término " reactivo" y el más específico de " virocito " han sido asociados con esta respuesta. típicamente es más doblado ó lobulado. A esta característica se le conoce como basofilia radial ó basofilia periférica. un porcentaje de linfocitos normales y un porcentaje de formas variantes.Facultad de Bioanálisis.

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observarse con pocos aumentos.En contraste, las enfermedades asociadas con variantes, demostrarán una apariencia muy heterogénea. 2.PRINCIPIO Y METODOLOGÍA . Se analizarán muestras en las que exista el hallazgo de linfocitos atípicos. 3.LISTA DE REQUERIMIENTOS. 3.1 Equipo de Laboratorio Microscopio de Luz 3.2 Materiales de Laboratorio CANTIDAD 1 DESCRIPCIÓN Frotis de sangre periférica teñido con Wright

4. PROCEDIMIENTO. Observar imágenes en laminillas y/ó diapositivas correspondientes con estas alteraciones. ACTIVIDADES. - Reporte de resultados .______________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________

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SERIE BLANCA:PRÁCTICA No. 12 “EVALUACIÓN DE FROTIS DE S.P. CON LINFOCITOS PLASMOCITOIDES”
1.INTRODUCCIÓN. Una de las formas en que se presenta el linfocito atípico, comparte rasgos con la célula plasmática, la cual no es encontrada normalmente en sangre periférica. Ambas tienen un citoplasma azul muy intenso y pueden medir de 15-20 µ .Los dos pueden distinguirse por su patrón de cromatina nuclear. En el linfocito " plasmacitoide ", el núcleo tiene una apariencia abierta y laxa y tiene un color rojo-púrpura más tenue. Pueden verse también nucleolos. Esto es en contraste con la apariencia amontonada, abultada del núcleo de la célula plasmática y su localización excéntrica dentro de la célula. No hay una área clara perinuclear en el linfocito plasmacitoide como la hay en la célula plasmática. Los linfocitos plasmocitoides son comúnes de encontrar en ciertas enfermedades virales como el dengue y las enfermedades exantemáticas de la infancia.

2.PRINCIPIO Y METODOLOGÍA . Se analizarán muestras que tengan el hallazgo de linfocitos plasmocitoides. 3.LISTA DE REQUERIMIENTOS. 3.1 Equipo de Laboratorio Microscopio de Luz 3.2 Materiales de Laboratorio CANTIDAD 1 DESCRIPCIÓN Frotis de sangre periférica teñido con Wright

4. PROCEDIMIENTO. Observar imágenes en laminillas y/ó diapositivas correspondientes con estas alteraciones. ACTIVIDADES.

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- Reporte de resultados .______________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________

SERIE BLANCA:PRÁCTICA No. 13 “EVALUACIÓN DE FROTIS DE S.P. CON HIPERSEGMENTACIÓN NUCLEAR EN NEUTRÓFILOS”
1.INTRODUCCIÓN. Los núcleos de los neutrófilos normalmente tienen de dos a cinco lóbulos nucleares.La mayoría tendrán dos ó tres. Si existe un aumento en las células con cuatro ó cinco lóbulos, el observador debería buscar cuidadosamente células con más de cinco lóbulos.La presencia de una sola célula con seis distintos lóbulos nucleares, puede tener significancia clínica. Por otro lado, si más del 5% de los neutrófilos tienen cinco lóbulos ó si la mayoría tienen cuatro, ésto también puede ser un hallazgo importante. Los neutrófilos hipersegmentados son la indicación más temprana en sangre periférica de anemia megaloblástica ( por deficiencia de vitamina B12 ó de folatos ), y es importante que se reporten. Cuando menos deben identificarse seis lóbulos distintos para que la célula sea identificada como hipersegmentada.En casos severos, pueden encontrarse células con nueve lóbulos ó aún más. 2.PRINCIPIO Y METODOLOGÍA . Se analizarán muestras que tengan el hallazgo de hipersegmentación nuclear en neutrófilos 3.LISTA DE REQUERIMIENTOS. 3.1 Equipo de Laboratorio Microscopio de Luz 3.2 Materiales de Laboratorio CANTIDAD DESCRIPCIÓN 1 Frotis de sangre periférica teñido con Wright 4. PROCEDIMIENTO. Observar imágenes en laminillas y/ó diapositivas correspondientes con estas alteraciones.

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ACTIVIDADES. - Reporte de resultados .______________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________

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estudiar el estroma medular y obtener material para estudios bacteriológicos. En estos casos. Fiebre de origen desconocido.Facultad de Bioanálisis. de citometría de flujo y genéticos entre otros. o que haya disminución del tejido hematopoyético y se requiera determinar con certeza la celularidad. micobacterias y hongos. Serie Blanca 41 . El estudio medular permite identificar las diferentes series hematopoyéticas. El tipo de procedimiento utilizado para el estudio de la médula ósea (aspirado.INTRODUCCIÓN. En la actualidad el estudio medular hace parte integral del estudio sistematizado de un importante número de enfermedades hematológicas. Sospecha clínica o se desee estudiar una enfermedad infecciosa por bacterias. En estos casos está mejor indicada la biopsia medular. 14 “ESTUDIO DE MÉDULA ÓSEA” 1. de los hallazgos en sangre periférica y de la información que se requiere en algunos casos específicos. Los hallazgos medulares esperados (o inesperados) en parte dependen del cuadro clínico. como en las anemias y leucemias. En estos casos. biopsia o ambos). se debe solicitar estudio de cultivos de material medular obtenido por aspirado. infiltrativas y neoplásicas que están bien protocolizadas. micológicos. en donde se debe solicitar un estudio de aspirado y biopsia. La decisión de solicitar un estudio de médula ósea debe basarse en la hipótesis de que los hallazgos que se esperan del estudio justifiquen someter al paciente al riesgo y la molestia. como en la anemia aplástica. está mejor indicado el aspirado medular o mielograma. Estudio medular . En términos generales se plantean cuatro posibilidades: Compromiso de precursores hematopoyéticos con alteraciones citológicas. Puede ser realizado tanto por aspirado (mielograma) como por biopsia percutánea según las características clínicas del paciente y el diagnóstico presuntivo. Compromiso de las estructuras de soporte del tejido hematopoyético o del mismo hueso como en la mielofibrosis. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología SERIE BLANCA:PRÁCTICA No. El estudio medular es un procedimiento especializado de gran utilidad clínica. metástasis o granulomas. depende de la sospecha clínica. el estudio se recomienda en todos los casos en donde se pueda justificar un probable beneficio con la información obtenida. Debido a que el aspirado de médula ósea está virtualmente libre de riesgo (excepto si se hace en el esternón) y que la biopsia medular es un procedimiento invasivo mínimo. a pesar de éstos ser mínimos.

2. Esta proporción se denomina “relación mielo eritroide” (M:E). Una disminución en la relación mielo-eritroide se presenta cuando se disminuyen los precursores mieloides como en la anemia aplástica o cuando aumentan los precursores eritroides como en las anemias hemolíticas y megaloblásticas. Los extendidos de médula ósea se colorean con Wright siguiendo la técnica usual. Se observa aumento en la relación mielo-eritroide. hasta donde sea posible. monocítica. las espinas ilíacas superiores anterior o posterior. cuando se aumentan los precursores mieloides como sucede en los procesos inflamatorios agudos. En forma simultánea se realiza una valoración cuidadosa de la morfología de las diferentes líneas celulares: serie eritroide. A partir del primer año de vida se toma similar a la del adulto. leucemias o cuando se disminuyen los precursores eritroides como en la insuficiencia renal crónica. puede recurrir que tipo de procedimientos especiales están indicados para confirmar el diagnóstico. Después de la observación en 10X el extendido se examina con objetivo de 100X localizando los campos donde se hallan las partículas y se procede al análisis de las células sanguíneas que habitan en la médula ósea. Para estimar esta relación es necesario la identificación y tabulación de 300 500 células nucleadas. normocelular e hipercelular. La punción esternal.1 Principio. la cresta ilíaca y las apófisis espinosas de las vértebras. linfoide. debido al riesgo de lesión cardiovascular. Inicialmente son observados macroscópicamente para determinar la presencia de partículas. Como la médula ósea es un tejido blando. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología Algunos pacientes con coagulopatía (especialmente los hemofílicos) requieren terapias de reemplazo para hacer el procedimiento cuando está indicado hacer el estudio. granulocítica. Serie Blanca 42 . no se debe hacer de rutina. de acuerdo con los resultados obtenidos el hematólogo apoyado en los hallazgos de sangre periférica y en el examen físico. Se establece la relación del número de las células blancas frente al número de células rojas nucleadas.Facultad de Bioanálisis. células plasmáticas y otras células. 2. Los sitios donde se puede obtener médula ósea en los adultos y niños mayores de un años son: el esternón. En niños menores de un año se puede tomar material medular por aspirado en el tubérculo tibial.PRINCIPIO Y METODOLOGÍA . cuando es por biopsia. Luego el extendido es examinado en bajo poder (10X) para apreciar la relativa cantidad de grasa y de contenido celular hematopoyético de acuerdo al cual la médula se puede clasificar como: hipocelular. Procedimientos especiales en el material medular Las muestras de médula ósea son coloreadas con Wright cuando son obtenidas por aspiración y con hematoxilina-eosina. se pueden obtener muestras introduciendo una aguja adecuada en la médula y aspirando con jeringa. megacariocítica.

Ausencia ó Aumento del No. Serie Blanca 43 . Serie linfoide. De Células grasas y/ó megacariocitos.2. alteraciones de la madurez citoplásmica.Facultad de Bioanálisis. aumento de células Cebadas ó de Macrófagos. Monocítica y Megacariocítica: 60%. • Celularidad Global.2. Eosinofilia. -Presencia de células no hematopoyéticas: células metastásicas.2.2 Características Morfológicas: -Aumento de Mieloblastos -Aumento de Linfocitos ó células plasmáticas -Basofilia. 2. -Serie Eritoide con cambios Megaloblásticos ó diseritropoyesis. megacariocitos de tamaño muy pequeño.1 Seco Débil ó 10X.2. 20%. 2.1 Recuento Global: Serie Granulocítica con predominio:mielocitos y metamielocitos : Serie Eritrocítica: Predominio: Policromatófilos y Ortocromáticos. 2. • Celuraridad Hematopoyética -Normal -Aumentada: hiperceluraridad -Disminuída: hipoceluraridad ó aplasia.2 Metodología Estudio de Médula Osea El estudio de médula ósea. -Megacariocitos: hipo ó hipersegmentación nuclear.2 Examen a Gran Aumento ó 100X. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología 2.2. comprende los siguientes aspectos: 2.2. 20%.

4-17.0 10.7 -31 0.1-4. LÍMITES DE NORMALIDAD (%) Serie Blanca Mieloblastos Promielocitos Mielocitos Metamielocitos Bandas + segmentados Serie Roja Proeritroblastos Eritroblastos Basófilos Eritroblastos Policromáticos Eritroblastos Ortocromáticos Linfocitos Basófilos y Células Cebadas Megacariocitos Monocitos + macrófagos Plasmocitos Relación Mieloide-Eritroide 3.2-1.5 2.1-23.1 Equipo de Laboratorio 1 Microscopio de Luz 50.5-3.2 0.1 8. 3.Facultad de Bioanálisis.8 0.9 1.6 11.4-3. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología 2.0.1 0-0.4-4.LISTA DE REQUERIMIENTOS.3 0.2 0-0.26.4 17.3 Reporte del Mielograma y Valores Normales.2.9-29.5-2.3 0.2-1.3 Serie Blanca 44 .4 0-0.4-70.8 15.

PROCEDIMIENTO.Facultad de Bioanálisis. -Observación de laminillas y/ó diapositivas con imágenes de aspirados de médula ósea normal . Veracruz Manual de Prácticas de Hematología 3. -Reportar un mielograma normal.2 Material de Laboratorio CANTIDAD DESCRIPCIÓN 1 Laminillas y/ó diapositivas con muestra de aspirado de médula ósea 4. ACTIVIDADES. Observar las laminillas ó diapositivas y reportar el mielograma de acuerdo con el formato que aparece en el reporte de resultados. Serie Blanca 45 .

Las leucemias mieloides son neoplasias malignas del Sistema Hematopoyético. Serie Blanca 46 .Facultad de Bioanálisis. Veracruz R E P O RT E Serie Blanca Mieloblastos Promielocitos Mielocitos Metamielocitos Bandas + segmentados Serie Roja Proeritroblastos Eritroblastos Basófilos Eritroblastos Policromáticos Eritroblastos Ortocromáticos Linfocitos Basófilos y Células Cebadas Megacariocitos Monocitos + macrófagos Plasmocitos Relación Mieloide-Eritroide DE Manual de Prácticas de Hematología MIELOGRAMA SERIE BLANCA:PRÁCTICA No. CON LEUCEMIA GRANULOCÍTICA CRÓNICA” 1. 15 “ INTRODUCCIÓN A LAS LEUCEMIAS Y EVALUACIÓN DE FROTIS DE S.INTRODUCCIÓN.P.

2. como la CTH ó las CFC: Las leucemias pueden ser agudas ó crónicas LEUCEMIAS CRÓNICAS • En las Leucemias Crónicas. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología Como las neoplasias en general. por lo cual es un término inapropiado. Las LEUCEMIAS son neoplasias clonales que provienen de una sola célula maligna original la cual tiene una gran capacidad proliferativa.factores inhibidores de la apoptosis .factores de crecimiento . Esta autonomía en la reproducción celular se debe a mutaciones en los genes que codifican para: . las células leucémicas: • • • Proliferan de manera independiente de sus factores de crecimiento ( producidos por las células estromales de su microambiente) Tampoco responden a factores que las inhiben pues están protegidas de la apoptosis.proteínas fosforiladoras( que meten a la célula en ciclo celular) .Facultad de Bioanálisis.factores de transcripción . 2. que madura terminalmente hacia todas las líneas celulares.PRINCIPIO Y METODOLOGÍA . pero lo hace de predominantemente hacia la línea granulocítica.1 Datos Característicos en el Diagnóstico: Serie Blanca CTH CFC GEMM CTH 47 . LEUCEMIA GRANULOCÍTICA CRÓNICA La mutación original se produce en una CTH. las células neoplásicas maduran terminalmente • No producen la muerte en las etapas iniciales • El número de células maduras es normal ó aumentado Según el predominio de la línea celular hacia la cual maduran pueden distinguirse: • • • • • Leucemia Granulocítica Crónica Leucemia Mielomonocítica Crónica Policitemia Vera Trombocitemia esencial Mielofibrosis crónica idiopática con metaplasia mieloide.factores inhibidores del ciclo celular El término LEUCEMIA significa “ aumento de leucocitos neoplásicos en la sangre”. y frecuentemente hacia la megacariocítica.

3.Facultad de Bioanálisis.2 Datos Definitivos Para El Diagnóstico Datos Citogenéticos : • Presencia del Cromosoma Philadelphia: translocación recíproca entre los cromosomas 9 y 22.LISTA DE REQUERIMIENTOS. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología • Leucocitosis generalmente por arriba de 50. ( aumento de tirosina kinasa intracelular) • Presencia de translocación con formación del gen híbrido BCR/abl 3. por arriba de 100.000.1 Equipo de Laboratorio Microscopio de Luz 3. y en más del 70% de los casos.000leucocitos totales. 2. • Eosinofilia y sobre todo basofilia absolutas • Presencia de eritroblastos • Anemia moderada ó ausencia de ésta • Plaquetas normales ó aumentadas • Fosfatasa alcalina en leucocitos disminuída. • Médula Óea con Hiperplasia de células granulocíticas en todas las etapas de maduración y con abundantes megacariocitos.2 Materiales de Laboratorio CANTIDAD 1 1 DESCRIPCIÓN Frotis de sangre periférica teñido con Wright y/ó diapositivas Aspirado de médula ósea teñido con Wright y/ó diapositivas Serie Blanca 48 . • Presencia de granulocitos en todas las etapas de maduración.

Veracruz Manual de Prácticas de Hematología 4.Reporte de resultados . CON POLICITEMIA VERA Y MIELOFIBROSIS IDIOPÁTICA CON METAPLASIA MIELOIDE” 1. Serie Blanca 49 .INTRODUCCIÓN. ACTIVIDADES.PROCEDIMIENTO. Y M. Observar imágenes en laminillas y/ó diapositivas correspondientes con estas alteraciones.P. 16 “EVALUACIÓN DE FROTIS DE S.______________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ SERIE BLANCA:PRÁCTICA No.Facultad de Bioanálisis. .O.

granulocitosis con células no más inmaduras que los mielocitos.1 POLICITEMIA VERA Policitemia ( elevación de los glóbulos rojos ó masa eritrocítica total) de orígen primario en la que hay que descartar otras causas de policitemia secundaria como son: • • • • Enfermedades con dificultad en la oxigenación sanguínea: tabaquismo crónico.PRINCIPIO Y METODOLOGÍA . a esta neoplasia se le llama Mielofibrosis con Metaplasia Mieloide.Facultad de Bioanálisis. En sangre periférica usualmente hay un cuadro leucoeritroblástico. Cuando la proliferación es predominantemente hacia la línea de los megacariocitos. 1.Sin embargo la Biometría Hemática no es definitiva. 2. Si la maduración predomina hacia la línea de los eritrocitos. lo cual lleva a la mielofibrosis.eritroblastos . Al ocuparse el tejido medular por el tejido fibroso. se tendrá:Policitemia vera. liberando los factores de crecimiento fibroblásticos. pero éstos se mueren en la etapa de megacariocito maduro. se origina la hematopoyesis extramedular. Fístulas arteriovenosas ó cardiopatías congénitas. Hemoglobinas anormales que producen hipoxi tisular. eosinofilia.2 MIELOFIBROSIS CRÓNICA IDIOPÁTICA CON METAPLASIA MIELOIDE Se origina también en una CTH que madura hacia todas las líneas mieloides pero predominantemente hacia los megacariocitos En la Médula Ósea existe aumento de todas las líneas.1 Criterios para el Diagnóstico de Policitemia Vera: • Proliferación de la CTH hacia todas las lineas con predominio hacia la línea eritrocítica:plaquetas . la CTH tienen todavía más capacidad de dividirse que una CTH normal. Tumores productores de eritropoyetina.( elevación del número de granulocitos inmaduros y muchos eritroblastos 2. pero predominantemente hacia los megacariocitos los cuales mueren en la etapa de megacariocitos maduros. Serie Blanca 50 . Veracruz Manual de Prácticas de Hematología En las leucemias mieloides crónicas.basofilia . síndrome de Pickwick. 1.

Mielofibrosis desde el principio en algunos pacientes. • Células Grasas disminuídas ó ausentes. anemia y poiquilocitos ( sobre todo dacriocitos ). aumento de todas las líneas. cuadro leucoeritroblástico ( granulocitos inmaduros y muchos eritroblastos . aunque no en todos. Realizar diagnóstico diferencial con otras enfermedades que causan mielofibrosis.Facultad de Bioanálisis.000/ μl sin fiebre ó infección Aumento de fosfatasa alcalina leucocitaria sin fiebre ó infección. Estudio de Cortes Histológicos de Médula Ósea en Policitemia Vera • Hiperplasia notable. pero predominantemente hacia los megacariocitos. ocasionada por liberación de factores de crecimiento fibroblástico por los megacariocitos malignos. • • En médula ósea. con aumento de todas las líneas celulares.000/ μl Leucocitosis > 12.( los demás sindromes mieloproliferativos crónicos ). • El 30% de pacientes desarrollan mielofibrosis con metaplasia mieloide. • • • 3.1 Equipo de Laboratorio Microscopio de Luz 3. 2. Veracruz • • • • • Manual de Prácticas de Hematología Trombocitosis > 400. principalmente eritroblastos y megacariocitos.2 Materiales de Laboratorio CANTIDAD 1 DESCRIPCIÓN Frotis de sangre periférica teñido con Wright y/ó diapositivas Serie Blanca 51 . En sangre periférica. En sangre periférica puede haber elevación o disminución de plaquetas y granulocitos . Aumento de vitamina B12 sérica ó transcobalamina Cromosoma Philadelphia negativo. 3.LISTA DE REQUERIMIENTOS.2 Criterios para el Diagnóstico de Mielofibrosis Idiopática Crónica con Metaplasia Mieloide. que se demuestra con gruesas fibras de colágena en médula ósea y sustitución de la celuraridad normal por tejido fibroso.

. Observar imágenes en laminillas y/ó diapositivas correspondientes con estas alteraciones. Serie Blanca 52 . ACTIVIDADES.Facultad de Bioanálisis. Veracruz 1 Manual de Prácticas de Hematología Aspirado de médula ósea teñido con Wright y/ó diapositivas 4.INTRODUCCIÓN.PROCEDIMIENTO.Reporte de resultados .O. CON LEUCEMIA MIELOMONOCÍTICA CRÓNICA Y TROMBOCITEMIA ESENCIAL” 1.P. 17 “EVALUACIÓN DE FROTIS DE S. Y M.______________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ SERIE BLANCA:PRÁCTICA No.

Pacientes esplenectomizados. Cuando la maduración predomina hacia las plaquetas. como:Deficiencia de Hierro.000/μl • Hemoglobina < 13 g/dl • Ausencia de Cromosoma Philadelphia ó del gen híbrido BCT/abl • Fibrosis medular ausente ó menos de 1/3 de la biopsia • Ausencia de otra causa de trombocitosis ( trombocitosis secundaria ) • Médula Ósea con hiperplasia moderada de las líneas eritroblástica y granulocítica y aumento marcado de megacariocitos.Hemorragias crónicas. • • • • • • Monocitos displásicos. se trata de Trombocitemia esencial.2 Criterios para el Diagnóstico de Trombocitemia Esencial • Cuenta de Plaquetas por arriba de 600. Serie Blanca 53 . Procesos inflamatorios ó infecciosos crónicos. 2. 1. Anemia leve. ó células híbridas entre mielocitos y monocitos. 2. 1.PRINCIPIO Y METODOLOGÍA . que madura hacia todas las líneas.2 TROMBOCITEMIA ESENCIAL ( Primaria ó Hemorrágica ) La célula que sufre la mutación neoplásica. Cuadro parecido al de la LGC. Cambios displásicos +++. Neoplasias malignas no hamatopoyéticas.1 Criterios para el Diagnóstico de Leucemia Mielomonocítica Crónica.( apéndices nucleares . Veracruz Manual de Prácticas de Hematología Cuando la maduración de la CTH es predominantemente hacia los neutrófilos y monocitos. Menos del 15% de los granulocitos son inmaduros. núcleos de neutrófilos muy largos ) Más de 1000 monocitos /μl ( ó más del 3% ). 2. la leucemia se llama Leucemia Mielomonocítica Crónica. pero con predominio hacia la línea de megacariocitos-plaquetas. pero con un incremento en la maduración hacia la línea de los monocitos .1LEUCEMIA MIELOMONOCÍTICA CRÓNICA Leucemia Mielomonocítica Crónica ó Mielodisplasia Tipo IV. • Descartar otras causas de Trombocitosis Secundaria. es la CTH. En médula ósea los mieloblastos son <20%.Facultad de Bioanálisis.

Serie Blanca 54 . . ACTIVIDADES. las células neoplásicas no maduran teminalmente. generalmente maduran hasta la etapa de blasto ó un poco más allá.______________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ _________________________________________________________________________ SERIE BLANCA:PRÁCTICA No.LISTA DE REQUERIMIENTOS. 18 “EVALUACIÓN DE FROTIS DE S.PROCEDIMIENTO.1 Equipo de Laboratorio Microscopio de Luz 3.P.O. Observar imágenes en laminillas y/ó diapositivas correspondientes con estas alteraciones.Reporte de resultados .Facultad de Bioanálisis. Y M. 3.2 Materiales de Laboratorio CANTIDAD 1 1 DESCRIPCIÓN Frotis de sangre periférica teñido con Wright y/ó diapositivas Aspirado de médula ósea teñido con Wright y/ó diapositivas 4. CON LEUCEMIA MIELOIDE AGUDA M0 ” 1.INTRODUCCIÓN. LEUCEMIAS AGUDAS • En las leucemias agudas. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología 3.

2. 3. Demostrar la ausencia de esterasas específicas. granulocitopenia. que descartan Leucemia M7 ó Megacarioblástica.LISTA DE REQUERIMIENTOS. Y de Precursores T: CD2. La muerte sobreviene por hemorragias.O. por la plaquetopenia e infecciones. CD3. plaquetopenia. Criterios para el diagnóstico de la Leucemia Aguda M0  Demostrar con anticuerpos anti-mieloperoxidasa. CD7 y TDT. la presencia de esta enzima ( MPO) en el Retículo Endoplásmico Rugoso ó en el Aparato de Golgi. CD19. Ó Demostrar la presencia de proteínas de membrana CD13 ó CD33 con anticuerpos monoclonales . Veracruz • • • • Manual de Prácticas de Hematología Para que se consideren agudas deben tener > 20% de blastos en M. La Leucemia M0. Los pacientes tienen anemia.  Demostrar la ausencia de marcadores megacariocíticos como CD41 ó CD61. Ó Demostrar la ausencia del marcador monocítico CD14 y que descartan la Leucemia M5a ó monoblástica .2 Materiales de Laboratorio CANTIDAD 1 1 DESCRIPCIÓN Frotis de sangre periférica teñido con Wright y /ó diapositivas Aspirad de médula ósea teñido con Wright y/ó diapositivas Serie Blanca 55 .Facultad de Bioanálisis.PRINCIPIO Y METODOLOGÍA . Las células blásticas inhiben la proliferación de las clonas normales. es una leucemia aguda cuya cuenta típica de Médula Osea es la siguiente: 96% de Mieloblastos ( 1a) 4% de eritroblastos ( eritroblastos y granulocitos en maduración: muy disminuídos ).  3.1 Equipo de Laboratorio Microscopio de Luz 3. y TDT. que son propias de la serie monocítica. CD5.  Demostrar la ausencia de marcadores de linfocitos que descartan leucemia linfoblástica: de Precursores B: CD10. Por lo tanto: 0-3% de los blastos son positivos para tinción citoquímica de MIELOPEROXIDASA.

O.Reporte de resultados .INTRODUCCIÓN.______________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ SERIE BLANCA:PRÁCTICA No.Facultad de Bioanálisis. . ACTIVIDADES.P. 19 “EVALUACIÓN DE FROTIS DE S. CON LEUCEMIA MIELOIDE AGUDA M1 ” 1. La cuenta típica de la leucemia aguda M1 es: Mieloblastos: 83% Promielocitos: 3% Serie Blanca 56 .PROCEDIMIENTO. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología 4. Y M. Observar imágenes en laminillas y/ó diapositivas correspondientes con estas alteraciones.

Manual de Prácticas de Hematología Los criterios para el diagnóstico de la leucemia aguda M1. promielocitos .LISTA DE REQUERIMIENTOS. Veracruz Mielocitos: 2% Eritroblastos: 12% 2.Facultad de Bioanálisis. trombocitopenia 3. mielocitos.______________________________________________________ __________________________________________________________________________ Serie Blanca 57 . ( que pueden ser: mieloblastos 1b ( mieloperoxidasa + ) .1 Equipo de Laboratorio Microscopio de Luz 3. . • 90% de células son mieloblastos sin gránulos ( mieloblastos 1ª =negativos para mieloperoxidasa ) • Hay anemia. 3. Observar imágenes en laminillas y/ó diapositivas correspondientes con estas alteraciones. son: • >3% y < 10% de células tienen gránulos MPO positivos ó bastones de Auer observables con la tinción citoquímica para MPO ó son células con un poco más de maduración . mieloblastos 2. ACTIVIDADES.PRINCIPIO Y METODOLOGÍA . granulocitopenia.Reporte de resultados .2 Materiales de Laboratorio CANTIDAD DESCRIPCIÓN 1 Frotis de sangre periférica teñido con Wright y/ó diapositivas 1 Aspirado de médula ósea teñido con Wright y/ó diapositivas 4.PROCEDIMIENTO.

Y M. La Leucemia mieloide aguda M2. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ SERIE BLANCA:PRÁCTICA No.O.INTRODUCCIÓN. presenta la siguiente cuenta típica de Médula Osea: Mieloblastos: Promielocitos: 52% 33% Serie Blanca 58 . 20 “EVALUACIÓN DE FROTIS DE S.Facultad de Bioanálisis.P. CON LEUCEMIA MIELOIDE AGUDA M2 ” 1.

LISTA DE REQUERIMIENTOS.PRINCIPIO Y METODOLOGÍA .2 Materiales de Laboratorio CANTIDAD 1 1 DESCRIPCIÓN Frotis de sangre periférica teñido con Wright y/ó diapositivas Aspirado de Médula ósea teñido con Wright y/ó diapositivas 4.Facultad de Bioanálisis. aunque con diferenciación a cada línea respectiva 3. son similares a la M2. .______________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ Serie Blanca 59 .PROCEDIMIENTO. Criterios para el diagnóstico de la Leucemia Aguda M2: 7% 3% 5% Manual de Prácticas de Hematología Entre 30 y 89% de células de médula ósea ( excluyendo eritroblastos ) son mieloblastos y > 10% de células son promielocitos ó granulocitos más maduros. ACTIVIDADES. Observar imágenes en laminillas y/ó diapositivas correspondientes con estas alteraciones.1 Equipo de Laboratorio Microscopio de Luz 3. ) El rango puede ser: desde 20% de blastos con 80% de promielocitos ó células más maduras . 3. hasta 80% de blastos con 20% de promielocitos ó células más maduras Las llamadas Leucemias Agudas de Eosinófilos. de Basófilos y de Células cebadas.Reporte de resultados . Veracruz Mielocitos: Granulocitos más maduros: Eritroblastos: 2.

la célula neoplásica original es la CFC GEMM y no la CTH. Y en donde el 90% de las células de médula ósea maduran hasta la etapa de promielocitos. 21 “EVALUACIÓN DE FROTIS DE S. la cual se evita con el Acido Transretinoico. que favorece la diferenciación de las celulas malignas.P. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ SERIE BLANCA:PRÁCTICA No. en la cual.INTRODUCCIÓN. Y M. . La leucemia M3 es una leucemia aguda. Serie Blanca 60 .O.Facultad de Bioanálisis. CON LEUCEMIA MIELOIDE AGUDA M3 ” 1. Su complicación principal y la causa de su gravedad es la CIVD.

1 Equipo de Laboratorio Microscopio de Luz 3. tinciones de Mieloperoxidasa Y esterasas dobles: MPO M3 M5b +++ + +++ Esterasas 3. 90% de células de Médula Osea maduran hasta la etapa de PROMIELOCITOS . en la que los gránulos pueden no verse claramente. los cuales son anormales.PRINCIPIO Y METODOLOGÍA .2 Materiales de Laboratorio CANTIDAD 1 1 DESCRIPCIÓN Frotis de sangre periférica teñido con Wright y/ó diapositivas Aspirado de médula ósea teñido con Wright y/ó diapositivas Serie Blanca 61 . por lo cual debe realizarse para su diagnóstico.Facultad de Bioanálisis. algunas células pueden madurar hasta neutrófilos segmentados y las células que maduran más pueden presentar anomalía de Pseudo-Pelger. de aspecto monocitoide. teniendo estos casos el núcleo plegado. en el 90% de las células ) 2) La Variedad Microgranular. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología 2. y cristalizan formando bastones de Auer.LISTA DE REQUERIMIENTOS. y en mayor cantidad que los promielocitos normales. Pueden ser de dos variedades: 1) Variedad de gránulos grandes. 3. Criterios para el diagnóstico de la leucemia aguda M3. llamados faggots. los cuales son observables. generalmente en cantidad múltiple. por lo que puede ser confundida con una leucemia M5b ( monoblástica ).

por lo que la morfología es compatible tanto con una M2 como con una M5. la maduración de la clona neoplásica se dirige hacia dos líneas de manera simultánea: la de los granulocitos y la de los monocitos.PROCEDIMIENTO. CON LEUCEMIA MIELOIDE AGUDA M4 ” 1.Reporte de resultados .INTRODUCCIÓN. Observar imágenes en laminillas y/ó diapositivas correspondientes con estas alteraciones.Facultad de Bioanálisis. 22 “EVALUACIÓN DE FROTIS DE S. . Veracruz Manual de Prácticas de Hematología 4. Y M. Cuenta típica en Médula Osea: Serie Blanca 62 .P. ACTIVIDADES. En la leucemia M4.O.______________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ SERIE BLANCA:PRÁCTICA No.

2 Materiales de Laboratorio CANIDAD 1 1 DESCRIPCIÓN Frotis de sangre periférica teñido con Wright y/ó diapositivas Aspirado de médula ósea teñido con Wright y/ó diapositivas 4.000 células de estirpe monolítica ). 45% 8% 43% 4% Criterios para el diagnóstico de la Leucemia Aguda M4 • • • 20% de las células son blastos. promonocitos y granulocitos más maduros.LISTA DE REQUERIMIENTOS. ACTIVIDADES.( Los granulocitos y células de estirpe monolítica se encuentran en proporciones muy similares. .Reporte de resultados . monoblastos 1 y 2 y promonocitos ( ó más de 5. Observar imágenes en laminillas y/ó diapositivas correspondientes con estas alteraciones. que inluyen: mieloblastos 1 y 2. sería una M5 3.PRINCIPIO Y METODOLOGÍA . Más del 20% y < 80% de células son blastos. 3.PROCEDIMIENTO.Facultad de Bioanálisis.1 Equipo de Laboratorio Microscopio de Luz 3. Si > 80% de células fueran de estirpe monocítica. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología Mieloblastos y promielocitos: Mielocitos: Monoblastos y promonocitos: Eritroblastos: 2.______________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ Serie Blanca 63 .

Y M. Cuenta típica de la leucemia M5a: Serie Blanca 64 . El diagnóstico se realiza al encontrar en M. promonocitos y monocitos en una cuenta sin eritroblastos. 23 “EVALUACIÓN DE FROTIS DE S.Facultad de Bioanálisis.CON LEUCEMIA MIELOIDE AGUDA M5 ” 1. y la M5b ó bien diferenciada.O.P.O. Se distinguen dos tipos de leucemias Monoblásticas: la M5a ó poco diferenciada.INTRODUCCIÓN. > 80% de células de estirpe monocítica: monoblastos. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología SERIE BLANCA:PRÁCTICA No.

M5a M5b > 80% de células son de estirpe > 80% de células son de estirpe monocítica: monocítica: monoblastos. promonocitos y monocitos en monocitos en una cuenta sin eritroblastos.PRINCIPIO Y METODOLOGÍA.Facultad de Bioanálisis. Veracruz Monoblastos: Promonocitos y monocitos: Eritroblastos: Cuenta típica de la leucemia M5b: Monoblastos: Promonocitos: Monocitos: Eritroblastos: 6% 85% 7% 2% 90% 6% 4% Manual de Prácticas de Hematología 2. Criterios para el diagnóstico de la Leucemia M5. una cuenta sin eritroblastos. promonocitos y monoblastos. >80% de células de estirpe monocítica <20% de células de estirpe monocítica son son monoblastos monoblastos Serie Blanca 65 .

se forma de Puede confundirse son la monoblastos 1b y 2 y ---es positiva para microgranular esterasas no específicas.Facultad de Bioanálisis.1 Equipo de Laboratorio Microscopio de Luz 3. M3 variedad 3.Debe distinguirse de la M0 ó de la L2: -usando anticuerpos monoclonales para CD14 -Demostrando la presencia de esterasas no específicas en el RER con el microscopio electrónico. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología La M5a poco diferenciada ( equivalente a la M0) se forma de monoblastos 1ª y constituye el 15% de los casos de M5a. Observar imágenes en laminillas y/ó diapositivas correspondientes con estas alteraciones. CD36 y CD68.LISTA DE REQUERIMIENTOS.PROCEDIMIENTO. éstos se distinguen por sus gránulos azurófilos con Wright La M5a bien diferenciada. ó la ausencia de MPO. -MPO negativa. Serie Blanca 66 . -es positiva para anticuerpos monoclonales anti CD14. 3. pero ocasionalmente positiva.2 Materiales de Laboratorio CANTIDAD DESCRIPCIÓN 1 Frotis de sangre periférica teñido con Wright y/ó diapositivas 1 Aspirado de médula ósea teñido con Wright y/ó diapositivas 4. > 80% de las células de estirpe monocítica son promonocitos y monocitos.

P. Y M. .O.INTRODUCCIÓN.Facultad de Bioanálisis.Reporte de resultados . 24 “EVALUACIÓN DE FROTIS DE S.______________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ SERIE BLANCA:PRÁCTICA No. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología ACTIVIDADES. Serie Blanca 67 .CON LEUCEMIA MIELOIDE AGUDA M6 ” 1.

• 30% -49% de células medulares sean eritroblastos con alteraciones morfológicas notables Y que al menos 30% de células de Médula Osea sean mieloblastos ó promielocitos • O bien los siguientes criterios reunidos:  Cuadro de leucemia aguda  Severa anemia  Otras citopenias  La mayoría de las células de la Médula Osea sean eritroblastos muy anormales en distintas etapas de maduración ó con predominio de eritroblastos. 3. pero no siempre.LISTA DE REQUERIMIENTOS.Facultad de Bioanálisis. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología En esta leucemia.2 Materiales de Laboratorio CANTIDAD 1 1 DESCRIPCION Frotis de sangre periférica teñido con Wright y/ó diapositivas Aspirado de médula ósea teñido con Wright y/ó diapositivas Serie Blanca 68 . la CTH maligna madura de manera simultánea hacia las líneas eritroblástica y granulocítica. a lo que antes se llamaba MIELOSIS ERITRÉMICA. • Al menos 50% de células de Médula osea deben ser eritroblastos que frecuentemente. que por lo general evoluciona hacia una M6 típica con > 30% de mieloblastos. tienen anormalidades morfológicas Y al menos 30% de células de la médula ósea deben ser mieloblastos ó promielocitos que pueden tener bastones de Auer. también llamada eritroleucemia.1 Equipo de Laboratorio Microscopio de Luz 3. 3.  Frecuentemente no más de 5% de mieloblastos. 2.PRINCIPIO Y METODOLOGÍA . Criterios para el diagnóstico de la leucemia M6.

Las células proliferantes en las M7 maduran hasta megacarioblastos y en ocasiones hasta promegacariocitos y megacariocitos. Y M.P. Observar imágenes en laminillas y/ó diapositivas correspondientes con estas alteraciones. ACTIVIDADES. formadas casi exclusivamente por células de aspecto blástico sin diferenciación morfológica. Serie Blanca 69 .O. y diagnosticables principalmente a través de técnicas inmunocitoquímica. se les llama “leucemias” megacarioblásticas ó M7.INTRODUCCIÓN.______________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ SERIE BLANCA:PRÁCTICA No.PROCEDIMIENTO.CON LEUCEMIA MIELOIDE AGUDA M7 ” 1. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología 4.Facultad de Bioanálisis. 25 “EVALUACIÓN DE FROTIS DE S.A este tipo de neoplasias . .Reporte de resultados .

PRINCIPIO Y METODOLOGÍA . Observar imágenes en laminillas y/ó diapositivas correspondientes con estas alteraciones. . 3. ACTIVIDADES. • >30% de blastos en Médula osea.2 Materiales de Laboratorio CANTIDAD 1 1 DESCRIPCIÓN Frotis de sangre periférica teñido con Wright y/ó diapositivas Aspirado de médula ósea teñido con Wright y/ó diapositivas 4.Facultad de Bioanálisis. Pudiendo presentar plaquetas normales y aumentadas ó morfológicamente anormales ( gigantes y sin gránulos.LISTA DE REQUERIMIENTOS. En ambas se observa también proliferación de otras líneas celulares. Con frecuencia presentan fibrosis medular. ( técnicas inmunocitoquímicas ) • Mieloperoxidasa negativa en los blastos ( megacarioblastos ) • Esterasas no específicas positivas focalmente en el aparato de Golgi. • Las células son positivas para los anticuerpos anti CD41 y CD61. • De acuerdo con la etapa hasta la cual llegan a madurar las células se consideran: • M7a: La clona proliferante madura hasta la etapa de megacarioblasto. especialmente de eritroblastos.Reporte de resultados . Veracruz Manual de Prácticas de Hematología 2.______________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ Serie Blanca 70 . Criterios para el Diagnóstico de la leucemia M7. • M7b: La clona proliferante madura hasta promegacariocitos e incluso megacariocitos. 3. que ponen en evidencia las glicoproteínas plaquetarias.PROCEDIMIENTO.1 Equipo de Laboratorio Microscopio de Luz 3. de los cuales: >50% deben pertenecer a la línea de los megacariocitos.

Leucemia Linfocítica Crónica B Esta es la más común de las leucemias linfoides. CON LEUCEMIA LINFOCÍTICA CRÓNICA Y LEUCEMIA DE CÉLULAS PELUDAS ” 1.P.Cursa con linfocitosis notable. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ SERIE BLANCA:PRÁCTICA No. En ella.Se presenta con crecimiento ganglionar Serie Blanca 71 .Facultad de Bioanálisis. el resto de la hematopoyesis se conserva normal.INTRODUCCIÓN. 26 “EVALUACIÓN DE FROTIS DE S.

• Inmunofenotípicamente. CD11 y CD25. 2. tiene fibrosis. • • • Serie Blanca 72 .Los linfocitos tienen pocas inmunoglobulinas de superficie.2 Criterios para el diagnóstico de la Leucemia Linfocítica Crónica T CD8+ ó de Linfocitos Grandes Granulares. • Linfocitos con capacidad de inhibir la proliferación de células hematopoyéticas.El Linfoma de Linfocitos bien diferenciados es la manifestación tisular (ganglionar ) de la misma enfermedad. La médula ósea es difícil de aspirar. éste último los caracteriza por tener la capacidad de formar autoanticuerpos. como rebanadas de pastel. • En su evolución pueden aparecer prolinfocitos acompañados por citopenias variables. 2. sin otra causa de linfocitosis. • Inmunofenotípicamente son células positivas a CD2. CD20 y a CD5. Inmunofenotípicamente son positivas para CD19 y CD20. Células con gránulos azurófilos citoplásmicos y cromatina gruesa.3 Criterios para el diagnóstico de la Leucemia de Células Peludas. Las células tienen característicamente gránulos con fosfatasa ácida resistente al ácido tartárico.Las células proliferantes tienen una morfología característica que ayuda a su diagnóstico. 2. • • Linfocitosis menos notable. ya que. pero cromatina no tan densa. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología bilateral. pero no segmentada.Facultad de Bioanálisis. CD3 y CD8 2.PRINCIPIO Y METODOLOGÍA .1Criterios para el diagnóstico de la leucemia Linfocítica Crónica B. cromatina gruesa. • Rasgos morfológicos característicos de ayuda al diagnóstico por bases morfológicas:  Células pequeñas  Citoplasma muy pálido y con muchas microvellosidades filiformes  Núcleos pequeños como los de los linfocitos. como es típico. • Hallazgo de linfocitosis y linfadenomegalias en pacientes de más de 50 años de edad. sin linfadenomegalias y con anemia ó citopenias. • El cuadro leucémico se acompaña de neutropenia ó pancitopenia. los linfocitos son positivos a CD19. • Rasgos Morfológicos: numerosos linfocitos pequeños con escaso citolasma. Leucemia de Células Peludas Las tricoleucemias o leucemia de células peludas se presenta generalmente con esplenomegalia. “segmentada”.

Reporte de resultados . Observar imágenes en laminillas y/ó diapositivas correspondientes con estas alteraciones. .2 Materiales de Laboratorio CANTIDAD 1 1 DESCRIPCIÓN Frotis de sangre periférica teñido con Wright y/ó diapositivas Aspirado de médula ósea teñido con Wright y/ó diapositivas 4. L2. y L3.1 Equipo de Laboratorio Microscopio de Luz 3. Serie Blanca 73 . 27 “EVALUACIÓN DE FROTIS DE S. independientemente de su inmunofenotipo.P. CON LEUCEMIA LINFOBLÁSTICA ” 1. 3.Facultad de Bioanálisis.INTRODUCCIÓN.PROCEDIMIENTO.______________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ SERIE BLANCA:PRÁCTICA No.LISTA DE REQUERIMIENTOS. La clasificación FAB señala 3 tipos fundamentales: L1. ACTIVIDADES. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología 3.

2 Criterios para el diagnóstico de la Leucemia L2. las de tamaño intermedio.Tienen mal pronóstico 2. Casi todos los casos corresponden a células B. como los de los mieloblastos. aunque no tanto como la de los mieloblastos Ocasionalmente.Tienen un peor pronóstico que las L1 Leucemia L3.Facultad de Bioanálisis. 2. Corresponden al tipo más común de leucemia aguda infantil y es la que tiene el mejor pronóstico de las 3.  Células muy variables en tamaño  Las células más grandes tienen cromatina fina y nucleolos bien demarcados.  hay homogeneidad en cuanto al tamaño celular y densidad cromatínica.  Las células son morfológica e inmunofenotípicamente indistinguibles de las que proliferan en el linfoma de Burkitt. generalmente sin gránulos y con pocas ó ninguna vacuola. 2.  blastos muy pequeños.PRINCIPIO Y METODOLOGÍA . con citoplasma basófilo repleto de vacuolas claras. la cromatina es gruesa y pueden confundirse con linfocitos pequeños. en donde el núcleo ocupa la mayor parte de la superficie y por lo tanto hay muy escaso citoplasma.1Criterios para el diagnóstico de la Leucemia L1. los núcleos tienen múltiples indentaciones “cerebriformes” ( en cuyo caso.3 Criterios para el diagnóstico de la Leucemia L3  Células muy características. tienen cromatina más gruesa.  Los linfoblastos ocasionalmente adquieren forma de “raqueta de mano”. y las más pequeñas.  la cromatina es fina. Serie Blanca 74 . el cual carece de vacuolas ó presenta muy escasas. que contienen lípidos neutros.  Citoplasma más abundante que en las L1.  Con frecuencia. positivas con rojo oleoso y PAS negativas  Núcleos con cromatina fina granular y enormes nucleolos. corresponden a leucemias T y tienen un mal pronóstico). Leucemia L2. tienen cromatina condensada. 2. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología Leucemia L1. si se acompañan de gránulos positivos a la fosfatasa ácida y a α-naftil acetato esterasa.

______________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ SERIE BLANCA:PRÁCTICA No.INTRODUCCIÓN.Cuando llegan a salir las células Serie Blanca 75 . 28 “EVALUACIÓN DE FROTIS DE S. 3.CON MIELOMA MÚLTIPLE ” 1.Facultad de Bioanálisis.2 Materiales de Laboratorio CANTIDAD 1 1 DESCRIPCIÓN Frotis de sangre periférica teñido con Wright y/ó diapositivas Aspirado de médula ósea teñido con Wright y/ó diapositivas 4. Neoplasia hematopoyética. Observar imágenes en laminillas y/ó diapositivas correspondientes con estas alteraciones. . que han madurado independientemente de una estimulación antigénica.Reporte de resultados . Veracruz Manual de Prácticas de Hematología 3.PROCEDIMIENTO.P.LISTA DE REQUERIMIENTOS.1 Equipo de Laboratorio Microscopio de Luz 3.O. ACTIVIDADES. Y M. en la que proliferan células plasmáticas.

ocasionando zonas de osteólisis reconocidas por radiografías. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología plasmáticas a la circulación.La proliferación se restringe a la médula ósea.1 Equipo de Laboratorio Microscopio de Luz 3. 2. constituídos por inmunoglobulinas ó cristales azurófilos alargados.2 Materiales de Laboratorio CANTIDAD 1 1 DESCRIPCIÓN Frotis de sangre periférica teñido con Wright y/ó diapositivas Aspirado de médula ósea teñido con Wright y/ó diapositivas 4.Reporte de resultados . el diagnóstico que se establece en el de “ Leucemia de células plasmáticas”. Dichas células forman inmunoglobulinas homogéneas. y que se manifiestan clínicamente por dolor ósea y fracturas patológicas y por hipercalcemia.Facultad de Bioanálisis. ACTIVIDADES. Observar imágenes en laminillas y/ó diapositivas correspondientes con estas alteraciones.  En el aspirado de médula ósea:  Aumento notable de células plásmáticas ( lo normal es <3%)  Algunas células presentan núcleos irregulares y multilobulados. . 2.1 Criterios para el diagnóstico del Mieloma Múltiple. 3.  Células plasmáticas con cristales múltiples intracelulares.  Células plasmáticas con bordes citoplásmicos irregulares y de color rojo ( células en flama). 3.PROCEDIMIENTO. que se reconocen por electroforesis de proteínas.PRINCIPIO Y METODOLOGÍA .LISTA DE REQUERIMIENTOS. monoclonales.______________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ Serie Blanca 76 .

INTRODUCCIÓN La citoquímica constituye en la práctica hematológica un complemento indispensable de la morfología óptica convencional. Serie Blanca 77 . Veracruz Manual de Prácticas de Hematología SERIE BLANCA: PRACTICA NO. 29 “TINCIÓN CITOQUÍMICA PARA MIELOPEROXIDASA “ 1.Facultad de Bioanálisis.

A menudo resulta difícil diferenciar los blastos leucémicos de la leucemia linfoblástica aguda de los de la leucemia mieloblastica (M1). monoblástica aguda (M5A) y la leucemia megacarioblástica aguda (M7) utilizando solamente extensiones con las coloraciones de MayGrünwald-Giemsa. Los linfocitos. Dicha enzima se combina in vivo con peróxido de hidrógeno transformándose en un potente agente bactericida. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología Su finalidad es estudiar la presencia de ciertos componentes químicos (enzimas o sustancias diversas) en el interior de las células sanguíneas tanto hematopoyéticas como circulantes en sangre periférica. apareciendo un precipitado amarillo ocre en el lugar del citoplasma en donde se ha producido la reacción. bencidina. puede establecerse un diagnóstico preciso en la mayoría de los casos. en presencia de peróxido de hidrógeno. La actividad peroxidasa puede faltar en algunos neutrófilos tóxicos de pacientes con infección y leucemia aguda. Los eosinófilos muestran una actividad intensa. Diversos procedimientos de tinción citoquímica contribuyen a llevar a cabo esta distinción. Recientemente se ha propuesto estudiar las leucemias agudas basándose en tres niveles secuenciales de investigación que son: los métodos citoquímicos en primer lugar.PRINCIPIO Y METODOLOGÍA . de donde pasa a las cisternas del aparato de Golgi quedando localizada fundamentalmente en la granulación prim aria o azurófila.Facultad de Bioanálisis. La mieloperoxidasa se sintetiza en el retículo endoplasmático rugoso. La demostración citoquímica de esta enzima se basa en la acción oxidante de la peroxidasa sobre el substrato. incubación y contraste. Estas tinciones pueden realizarse sobre sangre periférica. extensiones de medula ósea. preparaciones de nódulos linfáticos u otros tejidos. viricida y fungicida. y en casos raros de deficiencia congénita de mieloperoxidasa.1 Reactivos. muestra actividad en todos los estadios del desarrollo de los neutrófilos y se halla en los gránulos azurófilos. Cuando se utilizan las reacciones citoquímicas adecuadas junto con el aspecto morfológico de las extensiones con tinción de Wright-Giemsa. Desde el punto de vista técnico todas las reacciones citoquímicas tienen en común 3 etapas fundamentales: fijación. NUM NOMBRE DEL REACTIVO CONCENTRACIÓN CANTIDAD Serie Blanca 78 . Así.LISTA DE REQUERIMIENTOS 3. basófilos y las formas eritroides no se tiñen. 3. La tinción citoquímica de mieloperoxidasa es fundamental en el diagnóstico diferencial de las leucemias agudas (positiva en las mieloblásticas y negativa en las linfoblásticas). el inmunofenotipo intracelular en segundo lugar y por último el inmunofenotipo de membrana. 2.

7H2O al 3.8% Acetato de sodio 3H2O 100 ml 0.3 Material de Laboratorio CANTIDAD 2 2 1 2 1 2 10 DESCRIPCIÓN Vasos de precipitados de 100 ml Matraces aforados de 100 ml Pipeta graduada de 10 ml Pipetas graduadas de 5 ml Pipeta graduada de 1 ml Frascos de 250 ml Frotis de sangre periférica 3.7ml 1.3 g 1 ml 1 g 10 ml 90 ml Serie Blanca 79 .2 Solución Colorante Modo de Preparación: Etanol al 30% ( v/v en agua ) Dihidrocloruro de bencidina ZnSO4.2 Equipo de Laboratorio Balanza granataria Balanza analítica 3.3g 1ml 1g 0.7H2O Acetato de sodio3H20 H202 NaOH Safranina Manual de Prácticas de Hematología 37% 10ml 90ml 0.1 Solución Fijadora Formol al 37% Etanol absoluto 3.8% 3% 1. Veracruz 1 2 3 4 5 6 7 8 Formol Etanol absoluto Dihidrocloruro de bencidina ZnSO4.4.Facultad de Bioanálisis.5ml 0.2g 3.4.0N 3.4 Preparación de los Reactivos 3.

puede usarse de manera repetida por meses. Serie Blanca 80 . 4.5 ml 0.1.Facultad de Bioanálisis. 4.2 4. 30 “ALFA NAFTIL ACETATO ESTERASA EN LEUCOCITOS “ 1.3 4. 4.6 4.7 4.1.8 4.2 g Manual de Prácticas de Hematología Los reactivos se mezclan en el orden indicado.1 Técnica: 4. Lavar con agua de la llave Contrateñir por 30 segundos con solución acuosa de safranina al 1% Lavar con agua de la llave Secar al aire Sellar con resina sintética y cubrir con cubreobjetos del #1 Actividades: -Practicar la tinción citoquímica para Mieloperoxidasa con frotis de sangre periférica.7 ml 1. INTRODUCCIÓN.1. Al añadir el sulfato de zinc se forma un precipitado que se disuelve al añadir los demás reactivos.1.0 N Safranina 0. 4. La bencidina a veces contiene un material insoluble.PROCEDIMIENTO.00 + 0.1. La solución se filtra y se guarda a temperatura ambiente.______________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ __________________________________________________________________________ SERIE BLANCA: PRACTICA NO.1.4 4.1.1.Reporte de resultados . . Veracruz H2O2 al 3% NaOH 1.05.9 Los frotis se fijan por un minuto con la solución formol etanol Lavar con agua de la llave Secar al aire PERFECTAMENTE Sumergir en la solución colorante por 30 segundos.2 Resultados Esperados.1.5 4. El pH de la solución debe ajustarse a 6.1.

Veracruz Manual de Prácticas de Hematología Las esterasas son un grupo de enzimas capaces de hidrolizar ésteres en sus componentes ácidos y alcoholes. α -naftil-butirato. los cuales al ser hidrolizados en presencia de una sal diazoica dan un precipitado insoluble en el lugar de la reacción. se obtiene una intensa positividad en la serie monocítica que. PRINCIPIO Y METODOLOGÍA .LISTA DE REQUERIMIENTOS.Facultad de Bioanálisis. Existen diferentes variedades según el substrato empleado.25 ml 50 mg 2.2 Equipo de Laboratorio Balanza granataria Balanza analítica Serie Blanca 81 .5 ml 1. Su utilidad diagnóstica se centra básicamente en el reconocimiento de células blásticas mieloides. NUM 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 NOMBRE DEL REACTIVO Na2HPO4 KH2PO4 Formaldehido Acetona Na2HPO4 KH2PO4 Cloruro de Pararosanilina HCl Alfa Naphthyl acetato Etilén glicol monometil Eter Nitrito de sodio CONC. 3.1 Reactivos. Utilizando como substrato el naftol-AS-D-acetato. es fluoruro sensible. Se utilizan 4 substratos: naftol-AS-C-cloroacetato.5 ml Concentrado 4% 3. 3. α -naftil-acetato.366 2. cuya positividad es intensa y se manifiesta en forma de un precipitado difuso por todo el citoplasma. Utilizando como substrato el naftol-AS-C-cloroacetato (CAE) se detecta una esterasa que es específica de la granulopoyesis neutrófila en la que es positiva a partir del mieloblasto y se expresa en forma de un precipitado rojo anaranjado muy brillante. a diferencia de las restantes células hematopoyéticas. si bien su aparición es más tardía que la de la mieloperoxidasa aunque iguala a ésta en especificidad. naftol-AS-D-acetato. 2. Dada su positividad más restrictiva es preferente usar el substrato αnaftil-acetato o α-naftil-butirato para marcar la serie monocítica y sus precursores.267 g 250 mg 1. 37% CANTIDAD 20 mg 100mg 25 ml 45 ml 2.

4.3 Materiales de Laboratorio CANTIDAD 2 2 2 2 1 1 3 4 2 2 2 10 Manual de Prácticas de Hematología DESCRIPCIÓN Vasos de precipitados de 100 ml Vasos de precipitados de 500 ml Probetas de 100 ml Probetas de 500 ml Matraz volumétrico de 50 ml Tubo de 13X100 ml Pipetas de 10 ml Pipetas de 5 ml Goteros de 10 ml Goteros de 100 ml Frascos de 500 ml Frotis de sangre periférica 3.4 Preparación de Reactivos Soluciones de Fijación 3. Veracruz 3.4.1 Solución A Na2HPO4 KH2PO4 Agua destilada 3.366 g 250 ml 2.3 Amortiguador de fosfatos 1/15 M pH 7.2 Solución de fijación pH 6.Facultad de Bioanálisis.4.6 Formaldehído al 37% Acetona Solución A ( #1 ) ( Esta solución se guarda a 4°C ) 25 ml 45 ml 30 ml 20 mg 100 mg 30 ml 3.6 a) Na2HPO4 H2O destilada b) KH2PO4 H2O destilada 2.267 g 250 ml Serie Blanca 82 .

Facultad de Bioanálisis.4.7 Mezcla de incubación.5 ml ( Esta solución se prepara fresca.6 Solución de Pararosanilina hexazotizada Solución de Naphthyl acetato Ajustar el pH a 6.5 ml 7. 3.4 Solución de Pararosanilina Cloruro de Pararosanilina Agua destilada HCl concentrado Manual de Prácticas de Hematología 42. en cada ocasión ). Buffer de Fosfatos 1/15 M. pH 7.5 ml ( Esta solución se prepara fresca .5 ml 250 mg 5 ml 1. Veracruz Preparación del amortiguador: Solucion a) Solución b) Soluciones de Tinción 3.25 ml Disolver calentando suavemente y agitando.4. Serie Blanca 83 .6 Solución de Pararosanilina hexazotizada Solución de Pararosanilina Nitrito de sodio al 4% recién preparado 1.5 ml 4.5 Solución de Alfa Naphthyl acetato Alfa Naphthyl acetato Etilén glicol monometil Eter 50 mg 2. en cada ocasión ).1+ 0.3 con NaOH 1N y filtrar ( Esta solución se prepara fresca .PROCEDIMIENTO.4. 3. en cada ) 45 ml 3 ml 2.5 ml 1.4. Dejar enfriar la solución y filtrar ( Esta solución se conserva a temperatura ambiente ) 3.

______________________________________________________ __________________________________________________________________________ ___________________________________________________________________________ _____________________________________________________________ BIBLIOGRAFÍA 1 . Veracruz 4.Facultad de Bioanálisis. Peripheral Smear Evaluation.5 Lavar con agua de la llave 4.1.1.7 Lavar con agua de la llave 4. . Fijar los frotis a 4°C por 30 segundos 4.1.1.Reporte de resultados .1.3 Dejar secar a temperatura ambiente 4. Manual 1.American Society of Clinical Pathologysts.BLOOD CELL MORPHOLOGY.1.1.1.4 Colocar los fotis en la mezcla de incubación a temperatura ambiente por 45 minutos en la oscuridad 4. Serie Blanca 84 .1.2 Lavar los frotis con agua de la llave 4.Lynn Maedel and Sandra Sommer.1 Técnica: Manual de Prácticas de Hematología 4.1.Chicago.8 Secar a temperatura ambiente 4.9 Sellar con resina sintética y cubrir con cubreobjetos del #1 Actividades: -Practicar la tinción citoquímica para Esterasas con frotis de sangre periférica.6 Contrateñir con hematoxilina de Gill por 10 minutos 4.

udl.es/dept/medicina/citoweb/libro/pass/paginas/contenido/libro/citoquim.htm Serie Blanca 85 .Dr.El Atlas de Hematología.Joan Lluis Vives. Benign or Reactive Changes in WBCs and Plateletes. 6.Instituto de Hematopatología AVL Society.Manual de Técnicas de Laboratorio en Hematología.Facultad de Bioanálisis. Lynn Maedel and Sandra Sommer. Veracruz Manual de Prácticas de Hematología 2. http://web.Josep Lluis Aguilar.Citoquímica.Manual 3. Joaquín Carrillo Farga 4.BLOOD CELL MORPHOLOGY.Masson.Chicago. 5.Manual de Técnicas Básicas para el Laboratorio de Hematopatología. 3.American Society of Clinical Pathologysts.Segunda edición.

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