UNIVERSIDAD DE LAS FUERZAS ARMADAS

- ESPE

BIOTECNOLOGÍA INDUSTRIAL.

CINÉTICA ENZIMÁTICA

JOSÉ ÁLVAREZ
JANINA ARIAS
DENISSE PUEBLA
Objetivos

 Estudiar la cinética enzimática.

 Describir los órdenes de reacción 0 y 1 de
las reacciones enzimáticas.
 Analizar los procedimientos de
linealización de la ecuación de Michaelis-
Menten.
TEMA: CINÉTICA ENZIMÁTICA
 Introducción
 Definición enzima, cinética, cinética
enzimática.
 Factores que afectan la actividad
enzimática
 Orden de reacción
 Procedimientos de linealización
INTRODUCCIÓN
Proteína que cataliza las
Definición reacciones bioquímicas
del metabolismo.

Las enzimas actúan

sobre los sustratos y
Función permiten el desarrollo
de los diversos procesos
celulares.

Enzima
Catalizadores biológicos

Proteínas de forma
globular

Características

Aceleran reacciones
específicas químicas.

Actúan en disolución
acuosa, a pH y temp.
Óptimos
Aspectos generales:
catalizadores
específicos
un único
Enzimas
sustrato o
casi siempre
actúa sobre
un grupo muy
reducido de
ellos.

Sustrato: sustancia sobre la que actúa la enzima

INTRODUCCIÓN

Estudio de la velocidad
de cambio de
Cinética
reactivos a productos
durante una rx química.

Estudia la velocidad de
las reacciones
Cinética enzimática
catalizadas por
enzimas.
Los factores que afectan la
actividad
enzimática son:

Concentración de Concentración de
enzima sustrato

pH Temperatura
Mecanismo de Michaelis-Menten
 Ecuación de la V de
Michaelis-Menten

Indica el comportamiento de la V con respecto a la [S]

 Formación rápido equilibro entre la E y el S.

 Se usa V0.
 La V0 es proporcional a la cte. de catálisis y la [ES].
 ORDEN DE
REACCIÓN

Indica la Parámetro
dependencia de la experimental , no
V de la rx con necesariamente
respecto a las debe ser un #
[reactantes] entero.

𝑉 = 𝑘[𝐴]𝛼 [𝐵]𝛽

𝑛 =𝛼+𝛽
Cinética de primer Cinética de orden
orden cero
Cinética de orden 0
V de
formación
de P α [S]

Sugiere una
rx. V=k[S]0
unimolecular
ORDEN CERO DE REACCIÓN

𝑺↔𝑷
𝒅𝑺 𝟎
𝑽=− =𝒌𝑺 =𝒌
𝒅𝒕

𝑆𝑡 𝑡
− 𝑑 𝑆 =𝑘 𝑑𝑡
𝑆0 0

𝑺𝒕 = 𝑺𝟎 − 𝒌𝒕
Representación de la ec.
Integrada de cinética de
orden 0
 Concentraciones
elevadas de
sustrato

Km ≈ 0 [S] >> Km

V es
independiente 10 veces la Km
de [S]
 𝑺↔𝑷
 La V es independiente de la [S]:

[S] >> Km [S] > 10 veces Km

 Entonces:

𝑉𝑚𝑎𝑥 𝑆
𝑉=
𝐾𝑚 ≈ 0 + 𝑆

𝑉𝑚𝑎𝑥 𝑆
𝑉=
𝑆

𝑉 = 𝑉𝑚𝑎𝑥
 𝑑𝑆
𝑉=− = 𝑉𝑚𝑎𝑥
𝑑𝑡

 Integrando entre So y St y entre 0 y t:

𝑆𝑡 𝑡
− 𝑑𝑆 = 𝑉𝑚𝑎𝑥 𝑑𝑡
𝑆0 0

𝑆𝑡 = 𝑆𝑜 + 𝑉𝑚𝑎𝑥 (𝑡)
Cinética de orden 1
V de
formación de
P α [S]

t=1/2 se
consume ½ V=k[S]
del reactante

Sugiere una
[Reactante]
rx.
es f(t)
unimolecular
ORDEN UNO DE REACCIÓN
𝑺↔𝑷
 La V es dependiente de la [S]

𝒅𝑺
𝑽=− =𝒌𝑺
𝒅𝒕
𝑆𝑡 𝑡
𝑑𝑆
− =𝑘 𝑑𝑡
𝑆0 𝑆 0

𝐥𝐧 𝑺𝒕 = 𝐥𝐧 𝑺𝟎 − 𝒌𝒕
Representación de la ec.
Integrada de cinética de
orden 1

-k=cte de V de orden 1 [𝑠 −1 ]

Integración de la ec. de
Michaelis y Menten
S<<<<Km
dS S
v  V max A concentraciones 1/10 Km
dt Km
𝑉𝑚𝑎𝑥 𝑆
St dS V max t 𝑉=
   dt 𝐾𝑚 + 𝑆 ≈ 0
So S Km 0

 ln St  ln So 
V max 𝑉𝑚𝑎𝑥 𝑆
t 𝑉=
Km 𝐾𝑚
So V max
ln  t
St Km
V max
t
St  So  e Km
Procedimientos de
linealización
Constante de
Michaelis: La interpolación Linealización
Concentración gráfica en una mediante la
de sustrato para hipérbola es aplicación de
la cual la Vo es difícil de llevar a técnicas
igual a la mitad cabo. algebraicas.
de Vmax.
LINEWEAVER-BUCK

EADIE HOFSTEE

EISENTHAL Y CORNISH-BOWDEN
LINEWEAVER-BUCK

Representación de 1/v frente

a 1/[S]
EADIE HOFSTEE

𝑽𝟎 𝑽m𝒂𝒙 𝟏
= − 𝑽𝟎
[𝑺] 𝑲m 𝒌m http://sst-
web.tees.ac.uk/external/U0000504/Notes/enzkin/MichaelisMenten/Mich
aelisMenten.html
EISENTHAL Y CORNISH-BOWDEN

Representación lineal directa

𝑥 𝑦
+ =1
𝑎 𝑏 Si la recta que pasa por los
Ecuación Canónica puntos (a,0) y (0,b).
de la Recta

A diferencia de los anteriores, se trata a Vmax y Km como

variables, y a [S] y V como constantes.
EISENTHAL Y CORNISH-BOWDEN

En la ecuación de Michaelis-Menten

𝑉𝑚𝑎𝑥 𝑆
𝑉=
𝐾𝑚 + 𝑆

𝑉. 𝐾𝑚 + 𝑉. 𝑆 = 𝑉𝑚𝑎𝑥 𝑆

𝑉. 𝐾𝑚 𝑉. 𝑆 𝑉𝑚𝑎𝑥 𝑆
+ =
𝑉. 𝑆 𝑉. 𝑆 𝑉. 𝑆

𝑉𝑚𝑎𝑥 𝐾𝑚 𝑥 𝑦
𝑉
+
−𝑆
=1 + =1
𝑎 𝑏
EISENTHAL Y CORNISH-BOWDEN

La rectas intersecan en un punto común de

coordenadas (Km, Vmax).
BIBLIOGRAFÍA
 Nuñez, I., 2001, Enzimología, Editorial Pirámide, Capítulo 4:
Cinética Enzimática.

WEBGRAFÍA
 http://www.uaeh.edu.mx/docencia/P_Presentaciones/icsa/asi
gnatura/cinetica_enzimatica.pdf
 http://www.upo.es/depa/webdex/quimfis/quimbiotec_termo_f
iles/Temas%20y%20programa%20de%20Termo/Tema%207%20B
yN.pdf
 http://docencia.izt.uam.mx/japg/RedVirtualJAP/CursoDRosad
o/3_EnzimologiayBioenergetica/2CineticaEnzimatica.pdf
 http://www.ehu.es/biomoleculas/enzimas/enz3.htm#e
 http://sst-
web.tees.ac.uk/external/U0000504/Notes/enzkin/MichaelisMen
ten/MichaelisMenten.html
 http://docencia.izt.uam.mx/japg/CineticaEnzimaticaPliego021
209.pdf