UNIVERSIDAD NACIONAL DEL CENTRO DEL PERÚ

FACULTAD DE INGENIERÍA EN INDUSTRIAS ALIMENTARIAS

MICROBIOLOGIA

Práctica N° 2: Microscopia

CATEDRA: Microbiología
CATEDRATICO: Ing. Mabel Cindy De la Cruz Carhuamaca.
SEMESTRE: IV
FECHA: 09\10\2022

Integrantes:
Apellidos y nombres
1. Córdova Medrano, Keila.
2. Dávila Samaniego, Jesus.
3. Vázquez Coca, Julia.
4. Vílchez Ccance, Fabiola.

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MICROSCOPIA

I. INTRODUCCIÓN

Como bien sabemos, el microscopio es un instrumento laboratorio muy

usado en nuestros tiempos, puesto que simplemente es un instrumento
óptico que amplifica la imagen de un objeto pequeño. Mediante un sistema
de lentes y fuentes de iluminación se puede hacer visible un objeto
microscópico. Esta a su vez, pueden aumentar de 100 a cientos de miles de
veces el tamaño original. Existen dos tipos de microscopios: el óptico y el
electrónico. En el microscopio óptico el aumento del objeto se consigue
usando un sistema de lentes que manipula el paso de los rayos de luz
entre el objeto y los ojos. El microscopio electrónico utiliza un rayo de
electrones controlado por un campo magnético.
Los diversos elementos que existen en la naturaleza, presentan tamaños,
formas y composiciones distintas, la mayoría de ellas pueden verse,
algunas a simple vista, y otras mediante instrumentos, como es el
microscopio. En este trabajo mostraré la importancia de ésta, sus partes y
algunos ejemplos que ayudarán a entender mejor el funcionamiento de
este instrumento.

II. OBJETIVOS

a) Conocer las partes del microscopio

b) Funcionamiento del microscopio enfocadas en las muestras

III. FUNDAMENTO

El microscopio es un instrumento óptico que aumenta la imagen de los

objetos. En los últimos tres siglos ha permitido ampliar el campo de
las investigaciones biológicas y se ha convertido en el instrumento básico
para abrir nuevas fronteras en la biología.
Antoine Van Leeuwenhoek, Hans y Zacharias Jansen fueron tres
holandeses que contribuyeron significativamente al desarrollo de la
microscopia a principios del siglo XVII. Leeuwenhoek fue uno de los
primeros en dejar constancia de sus observaciones, describiendo bacterias,
protozoarios, glóbulos rojos y espermatozoides.
El microscopio compuesto consiste en dos sistemas de lentes, el objetivo y el
ocular, montados en extremos opuestos de un tubo cerrado. El objetivo está
compuesto de varios lentes que crean una imagen real aumentada del objeto
examinado. Las lentes de los microscopios están dispuestas de forma que el
objetivo se encuentre en el punto focal del ocular. Cuando se mira a través del
ocular se ve una imagen virtual aumentada de la imagen real. El equipamiento
adicional de un microscopio consta de un armazón con un soporte que sostiene
el material examinado y de un mecanismo que permite acercar y alejar el tubo
para enfocar la muestra. Los especímenes o muestras que se examinan con un
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microscopio son transparentes y se observan con una luz que los atraviesa; se
suelen colocar sobre un rectángulo fino de vidrio.

El soporte tiene un orificio por el que pasa la luz. Bajo el soporte se encuentra
un espejo que refleja la luz para que atraviese el espécimen. El microscopio
puede contar con una fuente de luz eléctrica que dirige la luz a través de la
muestra.
El microscopio al aumentar la imagen de los objetos, nos permite analizar la
estructura interna de células, tejidos y organismos, hacer mediciones y estimar
el tamaño de una población de microorganismos.

III. MATERIALES Y METODOS

A) MATERIALES

III. MATERIALES Y MÉTODOS

1) Materiales de bioseguridad

2) Materiales de limpieza
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3) Equipos y materiales de laboratorio

• Todo tipo de microscopios

B) METODOS Y PROCEDIMIENTO

Manejo y uso del microscopio óptico compuesto

A) Partes de un microscopio óptico Sistema óptico:

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OCULAR: Lente situada cerca del ojo del observador. Amplía la imagen del
objetivo.

OBJETIVO: Lente situada cerca de la preparación. Amplía la imagen de ésta.

CONDENSADOR: Lente que concentra los rayos luminosos sobre la

preparación.

DIAFRAGMA: Regula la cantidad de luz que entra en el condensador.

FOCO: Dirige los rayos luminosos hacia el condensador. Sistema mecánico

SOPORTE: Mantiene la parte óptica. Tiene dos partes: el pie o base y el brazo.

PLATINA: Lugar donde se deposita la preparación.

CABEZAL: Contiene los sistemas de lentes oculares. Puede ser monocular,

binocular.

REVÓLVER: Contiene los sistemas de lentes objetivos. Permite, al girar,

cambiar los objetivos. TORNILLOS DE ENFOQUE: Micrométrico que aproxima
el enfoque y micrométrico que consigue el enfoque correcto.

B) Manejo del microscopio óptico

1. Colocar el objetivo de menor aumento en posición de empleo y

bajar la platina completamente. Si el microscopio se recogió
correctamente en el uso anterior, ya debería estar en esas
condiciones.
2. Colocar la preparación sobre la platina sujetándola con las pinzas
metálicas.
3. Comenzar la observación con el objetivo de 4x (ya está en
posición) o colocar el de 10 aumentos (10x) si la preparación es
de bacterias.
4. Para realizar el enfoque:

i. Acercar al máximo la lente del objetivo a la preparación, empleando el tornillo

macrométrico. Esto debe hacerse mirando directamente y no a través del
ocular, ya que se corre el riesgo de incrustar el objetivo en la preparación
pudiéndose dañar alguno de Partes de un microscopio óptico corre el riesgo de
incrustar el objetivo en la preparación pudiéndose dañar alguno de ellos o
ambos.

ii. Mirando, ahora sí, a través de los oculares, ir separando lentamente el

objetivo de la preparación con el macrométrico y, cuando se observe algo nítida
la muestra, girar el micrométrico hasta obtener un enfoque fino.
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5. Pasar al siguiente objetivo. La imagen debería estar ya casi

enfocada y suele ser suficiente con mover un poco el
micrométrico para lograr el enfoque fino. Si al cambiar de objetivo
se perdió por completo la imagen, es preferible volver a enfocar
con el objetivo anterior y repetir la operación desde el paso 3. El
objetivo de 40x enfoca a muy poca distancia de la preparación y
por ello es fácil que ocurran dos tipos de percances: incrustarlo en
la preparación si se descuidan las precauciones anteriores y
mancharlo con aceite de inmersión si se observa una preparación
que ya se enfocó con el objetivo de inmersión.
6. Empleo del objetivo de inmersión:

a. Bajar totalmente la platina.

b. Subir totalmente el condensador para ver claramente el círculo de luz que

nos indica la zona que se va a visualizar y donde habrá que echar el aceite.

c. Girar el revólver hacia el objetivo de inmersión dejándolo a medio camino

entre éste y el de x40.

d. Colocar una gota mínima de aceite de inmersión sobre el círculo de luz.

e. Terminar de girar suavemente el revólver hasta la posición del objetivo de

inmersión.

f. Mirando directamente al objetivo, subir la platina lentamente hasta que la

lente toca la gota de aceite. En ese momento se nota como si la gota
ascendiera y se adosara a la lente.

g. Enfocar cuidadosamente con el micrométrico. La distancia de trabajo entre

el objetivo de inmersión y la preparación es mínima, aun menor que con el de
40x por lo que el riesgo de accidente es muy grande.

h. Una vez se haya puesto aceite de inmersión sobre la preparación, ya no se

puede volver a usar el objetivo 40x sobre esa zona, pues se mancharía de
aceite. Por tanto, si desea enfocar otro campo, hay que bajar la platina y repetir
la operación desde el paso 3.

i. Una vez finalizada la observación de la preparación se baja la platina y se

coloca el objetivo de menor aumento girando el revólver. En este momento ya
se puede retirar la preparación de la platina. Nunca se debe retirar con el
objetivo de inmersión en posición de observación.

j. Limpiar el objetivo de inmersión con cuidado empleando un papel especial

para óptica. Comprobar también que el objetivo 40x está perfectamente limpio.

Mantenimiento y precauciones
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1. Al finalizar el trabajo, hay que dejar puesto el objetivo de menor aumento en

posición de observación, asegurarse de que la parte mecánica de la platina no
sobresale del borde de la misma y dejarlo cubierto con su funda.

2. Cuando no se está utilizando el microscopio, hay que mantenerlo cubierto

con su funda para evitar que se ensucien y dañen las lentes. Si no se va a usar
de forma prolongada, se debe guardar en su caja dentro de un armario para
protegerlo del polvo. 3. Nunca hay que tocar las lentes con las manos. Si se
ensucian, limpiarlas muy suavemente con un papel de filtro o, mejor, con un
papel de óptica.

4. No dejar el portaobjetos puesto sobre la platina si no se está utilizando el

microscopio.

5. Después de utilizar el objetivo de inmersión, hay que limpiar el aceite que

queda en el objetivo con pañuelos especiales para óptica o con papel de filtro
(menos recomendable). En cualquier caso se pasará el papel por la lente en un
solo sentido y con suavidad. Si el aceite ha llegado a secarse y pegarse en el
objetivo, hay que limpiarlo con una mezcla de alcohol-acetona (7:3) o xilol. No
hay que abusar de este tipo de limpieza, porque si se aplican estos disolventes
en exceso se pueden dañar las lentes y su sujeción.

6. No forzar nunca los tornillos giratorios del microscopio (macrométrico,

micrométrico, platina, revólver y condensador).

7. El cambio de objetivo se hace girando el revólver y dirigiendo siempre la

mirada a la preparación para prevenir el roce de la lente con la muestra. No
cambiar nunca de objetivo agarrándolo por el tubo del mismo ni hacerlo
mientras se está observando a través del ocular.

8. Mantener seca y limpia la platina del microscopio. Si se derrama sobre ella

algún líquido, secarlo con un paño. Si se mancha de aceite, limpiarla con un
paño humedecido en xilol

9. Es conveniente limpiar y revisar siempre los microscopios al finalizar la

sesión práctica y, al acabar el curso, encargar a un técnico un ajuste y revisión
general de los mismos.

IV. RESULTADOS Y DISCUSIÓN

Características de los microscopios electrónicos

Los microscopios electrónicos, permiten alcanzar ampliaciones de objetos

hasta 5.000 veces más potentes que la que los mejores microscopios de
ópticos. Estas máquinas pueden lograr esto debido a que la longitud de onda
de los electrones es mucho menor que la de los fotones. Por otra parte, hay
que mencionar que un microscopio de electrónico está compuesto por una
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fuente de electrones, la cual es equivalente a la fuente de luz de un

microscopio óptico convencional.

Principales diferencias (entre un microscopio óptico y electrónico)

• La principal diferencia radica en que el microscopio óptico utiliza luz
visible, mientras que el electrónico emplea electrones.
• Por otro lado, la lente del microscopio óptico es de vidrio. En cambio, del
microscopio electrónico es electromagnética.
• El tamaño de los microscopios electrónicos es mucho más grande que
los ópticos.
• Las imágenes del microscopio electrónico no tienen color, mientras que
las del óptico si son a color.

- Microscopio electrónico de campo oscuro:

El contraste de campo oscuro se utiliza habitualmente para las

muestras no teñidas. La imagen que se ve tiene la apariencia de un
fondo oscuro, casi negro con objetos brillantes resaltados en él, produciendo a
menudo unas imágenes espectaculares muy reconocibles. Estas muestras,
por su falta de tinción, sondifíciles de ver con la técnica de campo claro.
Las aplicaciones son en su mayoría muestras biológicas, los frotis de
sangre, cultivo de tejidos u organismos unicelulares propios del agua no
tratada.

- Microscopio contraste de dos fases de fluorescencia:

El microscopio de contraste de fases permite observar células sin

colorear y resulta especialmente útil para células vivas. La mayoría de los
organismos vivos no pueden ser teñidos debido a que los colorantes
utilizados pueden dañar su estructura celular hasta el punto de su
muerte. Esta técnica de microscopía aprovecha las pequeñas
diferencias de los índices de refracción en las distintas partes de una célula y
en distintas partes de una muestra de tejido. La luz que pasa por
regiones de mayor índice de refracción experimenta una deflexión y queda
fuera de fase con respecto al haz principal de ondas de luz que pasaron la
muestra. Aparea otras longitudes de onda fuera de fase por medio de una
serie de anillos ópticos del objetivo y del condensador, anula la amplitud de la
porción fuera de fase inicial del haz de luz y produce un contraste útil sobre la
imagen. Las partes oscuras de la imagen corresponden a las
porciones densas del espécimen; las partes claras de la imagen
corresponden a porciones menos densas. Por lo tanto, estos microscopios se
utilizan para observar células vivas, tejidos vivos y cortes semifinos no
coloreados.
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Muestras observadas

MUESTRA NOMBRE

Tricodermos

Mucor/tinte azul

Mucor/tinte rojo

Tejido animal
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Aspergilius

Penicilium

HORMIGA

V. CONCLUSIONES

• El microscopio sin duda es una herramienta muy importante

para los seres humanos ya que con el podemos
observar microorganismos que con otros objetos no podrían
ser visibles.
• Cada uno tiene una función, y cada uno también tiene su manera
de ajustarse a nuestra visión.
• Para poder analizar con precisión en el microscopio debemos
estar concentrados con lo que hacemos, si algo sale mal con
algún instrumento, demás está decir que cada uno debe hacer
responsable.
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• El microscopio es una herramienta muy factible ya que ayuda a la

medicina y su evolución lo hace aún más satisfactorio para la
investigación de determinadas bacterias, virus etc.

VI. RECOMENDACIONES

CUIDADOS Y PROTECCIONES DURANTE EL USO DEL

MICROSCOPIO:

1. Por ser el microscopio un instrumento de precisión y de elevado valor

económico, se recomienda tener cuidado en la conservación de sus
lentes, evitando una manipulación que pueda rayas los lentes y
empleando el material adecuado para su limpieza.
2. Para transportar el microscopio utilizar las dos manos, tomar el brazo del
mismo con una mano y con la otra sostener su base, Nunca transportar
el microscopio invertido ni muy inclinado ya que la lente ocular no está
fija y puede caer al piso.
3. Al colocar el microscopio sobre la mesa, colocarlo a unos 10 o 15 cm.
del borde.
4. Nunca hay que tocar los lentes con las manos. Si se ensucian no utilizar
pañuelo o los dedos para limpiar las lentes ya que puede rayar la
superficie óptica. Siempre usar el papel para lentes que provea el
laboratorio.
5. 5. No dejar el portaobjetos puesto sobre la platina si no se
está utilizando el microscopio.
6. Después de utilizar el objetivo de inmersión, hay que limpiar el aceite
que queda en el objetivo con pañuelos especiales para óptica. En
cualquier caso, se pasará el papel por la lente en un sentido y con
suavidad. Si el aceite ha llegado a secarse y pegarse en el objetivo, hay
que limpiarlo con una mezcla de alcohol-acetona (7.3) o xilol. No hay
que abusar de ese tipo de limpieza, porque si se aplican
esos disolventes en exceso se pueden dañar las lentes y su sujeción.
7. No forzar nunca los tornillos giratorios del microscopio
(Macrométrico, micrométrico, platina, revólver y condensador).
8. El cambio de objetivo se hace girando el revólver y dirigiendo siempre la
mirada a la preparación para prevenir el roce de la lente con la muestra.
No cambiar nunca de objetivo agarrándolo por el tubo del mismo ni
hacerlo mientras se está observando a través del ocular.
9. Mantener seca y limpia la platina del microscopio. Si se derrama sobre
ella algún líquido, secarlo con un paño. Si se mancha de aceite,
limpiarla con un paño humedecido en xilol.
10. Al finalizar el trabajo, hay que dejar puesto el objetivo de menor aumento
en posición de observación, asegurarse de que la parte mecánica de la
platina no sobresale del borde de la misma y dejarlo cubierto con su funda.
Nunca deje el microscopio con el objetivo de mayor aumento en la
posición de observación.
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11. Cuando no se está utilizando el microscopio, hay que mantenerlo cubierto

con su funda para evitar que se ensucie y dañe las lentes. Si no se va a
usar de forma prolongada, se debe guardar en su caja dentro de un
armario para protegerlo del polvo.
12. Es conveniente limpiar y revisar siempre los microscopios al finalizar
la sesión práctica y, al acabar el curso, encargar a un técnico para un
ajuste y revisión general de los mismos.

VII. REFERENCIA BIBLIOGRAFICA:

IBETH M. (2019) MICROSCOPIO recuperado de:

https://www.studocu.com/pe/document/universidad-nacional-jorge-basadre-
grohmann/biologia/informe-microscopio/10274944

Rita M.(2015) Historia del microscopio y su repercusión en la Microbiología

http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1727-
81202015000200010

Li. Belem Benítez Vargas

Wilde, Oscar: El Príncipe Feliz y otros cuentos. Editores Mexicanos Unidos S.A.,
México, 1ra. Edición, enero de 1998.

Wilde, Oscar. Los mejores cuentos de Oscar Wilde. Ediciones Leyenda S.A.
2010.

Pascual (2005) Manejo y uso del microscopio óptico compuesto

https://www2.ulpgc.es/hege/almacen/download/35/35697/uso_microscopio_opti
co.pdf

https://lasdiferencias.com/microscopio-optico-electronico-diferencias/

https://es.wikipedia.org/wiki/Apertura_num%C3%A9rica

VIII. CUESTIONARIO (EN CASO ESTÉ CONSIDERADO EN LA GUIA DE

PRÁCTICA)

1. ¿cuándo se dice que el microscopio posee la propiedad de

ser porfacal?

El microscopio simple o también llamado lupa, consta de una de sólo una lente
biconvexa o plano- convexa, que proporciona una amplitud moderada del
objeto.
Los microscopios de luz, compuestos u ópticos, usan lentes, para enfocar y
amplificar los rayos de luz que pasan a través de un espécimen o rebotan en él.
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La capacidad de definición de estos microscopios es de aproximadamente de

1 micra (una millonésima parte de metro).

2. De qué factores depende el poder de resolución del

microscopio

La resolución en microscopia depende de la calidad del sistema óptico del

microscopio y la longitud de onda de luz usada para construir la imagen –
longitudes de onda más cortas dan mejor resolución.

3. Cuál es la diferencia entre la apertura numérica del objetivo y

la apertura numérica del condensador

la apertura numérica (AN) de un sistema óptico es un número adimensional

que caracteriza el rango de ángulos para los cuales el sistema acepta luz.
Recíprocamente, también está relacionado con el ángulo de salida del sistema.
No hay definición exacta del término ya que esta varía según las diferentes
áreas de la óptica.

IX. ANEXOS (RESUMEN DE ARTICULO

RESUMEN

El microscopio nos permite observar especímenes invisibles al ojo humano, en

el laboratorio de Biología se utiliza el microscopio compuesto u óptico, a través
de este trabajo conocerás sus componentes y aprenderás a utilizarlo.
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Palabras clave: Microscopio, Tipos de microscopios, Partes y uso del

microscopio óptico.
MICROSCOPIO
Es un vocablo que proviene del griego micro, que significa pequeño, y scopein,
mirar. Este aparato permite observar lo que es invisible a simple vista. Existen
diversos tipos de microscopios, desde la lupa, formada por una sola lente, hasta
el microscopio electrónico.
El microscopio simple o también llamado lupa, consta de una de sólo una lente
biconvexa o plano- convexa, que proporciona una amplitud moderada del objeto.
Los microscopios de luz, compuestos u ópticos, usan lentes, para enfocar y
amplificar los rayos de luz que pasan a través de un espécimen o rebotan en él.
La capacidad de de definición de estos microscopios es de aproximadamente de
1 micra (una millonésima parte de metro).
Este microscopio es el que utilizamos dentro del laboratorio de Biología, en el
que más adelante identificaremos sus partes y aprenderás como usarlo.
El microscopio estereoscópico o de disección, es un microscopio compuesto
doble, en estos aparatos las imágenes conservan los relieves que pueden
observarse simultáneamente con los dos ojos. El aumento que se obtiene es
relativamente bajo, sin embargo, pueden realizarse micro disecciones sobre la
platina a la par que la persona se encuentra observando por los oculares.
Los microscopios electrónicos utilizan haces de electrones en vez de luz. Los
electrones se enfocan con campos magnéticos, no con lentes. Cuando un haz
de electrones incide en el vacio sobre un objeto, las partículas incidentes pueden
ser absorbidas, transmitidas y modificarse de distintas formas. Algunos tipos de
microscopios electrónicos pueden distinguir estructuras de unos cuantos
nanómetros (milmillonésimas de metro).
Existen 2 tipos de microscopios electrónicos:

• Microscopios electrónicos de transmisión: que hacen pasar electrones a

través de un espécimen delgado y revelan los detalles de la estructura
celular interior de manera bidimensional, por ejemplo, los organelos
celulares.
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• Los microscopios electrónicos de barrido: rebotan electrones de

especímenes que se han recubierto con metales y proporcionan
imágenes tridimensionales, sirven para ver detalles superficiales de
estructuras.

COMPONENTES DEL MICROSCOPIO DE LUZ, COMPUESTO U ÓPTICO:

• Sistema Mecánico:

El sistema mecánico es el esqueleto o armazón del microscopio, el cual

proporciona soporte y estabilidad al equipo. Está integrado por:
El tubo de microscopio: El cual es de forma cilíndrica, en su parte superior
sostiene a la lente o lentes oculares y en la parte inferior se encuentra el sistema
de lentes objetivos.
Revólver: Es la parte circular en la que se encuentran atornilladas las diferentes
lentes objetivos, al girar el revolver cambian las lentes objetivos sin que se
desenfoque la preparación.
Platina: Pieza metálica cuadrada o circular, con un orificio central sobre el que
se colocan las preparaciones a observar y por el que atraviesa el rayo luminoso.
Puede ser fija o estar provista de tornillos de desplazamiento que nos permiten
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centrar la preparación o buscar diferentes campos de observación.

Base o Pie: Es la base sobre la que descansa el aparato y le da estabilidad.
Brazo o columna: Esla parte que sostiene el tubo y su mecanismo de
desplazamiento vertical formado por los tornillos macrométrico y micrométrico.

• Sistema Óptico:

El sistema Óptico está formado por 2 sistemas de lentes: Oculares y Objetivos.

Los lentes oculares van montados en la parte superior del tubo del microscopio.
Su nombre se debe a la cercanía de la pieza con el ojo del observador y sus
poderes de aumento van desde 4x hasta 20x.
Los lentes objetivos se encuentran en el revólver y quedan cerca del objeto a
observar. Hay 2 tipos de objetivos: Objetivos secos y de Inmersión
Los objetivos secos se utilizan sin colocar alguna sustancia entre ellos y la
preparación, únicamente el aire. Proporcionan poco aumento que va desde 10x
, 20x,40x hasta incluso 60x; dicho aumento se encuentra grabado en el exterior
de cada objetivo, en este caso encontramos 10x o también llamado seco débil y
40x o seco fuerte.
Los objetivos de inmersión se utilizan colocando una sustancia entre ellos y la
preparación, por lo general, se emplea el aceite de cedro. Proporcionan un mayor
aumento y definición, de 100x; los podemos identificar ya que son los más largos
y traen grabada en el exterior la palabra oil (aceite).
REFERENCIA BIBLIOGRAFICA:
María I. (2015) EL MICROSCOPIO: EQUIPO FUNDAMENTAL EN EL LABORATORIO DE
BIOLOGÍA
https://www.uaeh.edu.mx/scige/boletin/prepa3/n1/m9.html