LABORATORIO 1 Uso y Manejo Del Microscopio 2024

A
LAB OR TO
RI O
UNIVERSIDAD DEL QUINDÍO
FACULTAD DE CIENCIAS BÁSICAS
PROGRAMA DE QUÍMICA
GUÍA PRÁCTICA LABORATORIO DE BIOLOGÍA
E
ÍA
D
2024
BI OLO G
ELABORADO POR EL : DOCENTE RICARDO SOTO AGUDELO
PRÁCTICA DE LABORATORIO Nº
USO Y MANEJO DEL MICROSCOPIO
OBJETIVOS:
1
• Reconocer la importancia del microscopio como instrumento de apoyo para la
identificación de las unidades constitutivas de los seres vivos y de los organismos
microscópicos.
• Explicar el uso y manejo del microscopio óptico compuesto.
• Identificar las partes y el funcionamiento del microscopio óptico compuesto.
• Aprender a estimar el tamaño de una muestra microscópica.
INTRODUCCIÓN:
La microscopía es el conjunto de métodos que se utilizan para visualizar objetos muy pequeños que
están fuera del alcance de resolución del ojo humano. La microscopía utiliza instrumentos
especiales como la lupa y el microscopio (del griego mikros = pequeño, skopein = observar), que
permiten magnificar el tamaño de estructuras imperceptibles, para lo cual emplea medidas de
longitud que se detallan en la siguiente tabla.
Tabla 1. Medidas empleadas en microscopía y sus equivalencias
MAGNITUD SÍMBOLO EQUIVALENCIA (en mm)

Milímetro mm 1
Micra (micrón) µ 0,001 = 10-3
Nanómetro nm 0,000001 = 10-6
Angstrom Å 0,0000001 = 10-7
El desarrollo del microscopio en los últimos tres siglos, ha permitido ampliar el campo de las
investigaciones biológicas y se ha convertido en instrumento básico para abrir nuevas fronteras en
la biología.
La lupa es el microscopio más simple. El tipo de microscopio más utilizado es el microscopio

óptico compuesto (el que usted empleará en el laboratorio), que se sirve de la luz visible para crear
una imagen aumentada del objeto.
El microscopio óptico compuesto consiste en dos sistemas de lentes, el objetivo y el ocular,

montados en extremos opuestos de un tubo cerrado. El objetivo está compuesto de varias lentes que
crean una imagen real aumentada del objeto examinado. Las lentes de los microscopios están
dispuestas de forma que el objetivo se encuentre en el punto focal del ocular. Cuando se mira a
través del ocular se ve una imagen virtual aumentada de la imagen real. El aumento total del
1
A
LAB OR TO
RI O
E
ÍA
D
2024
BI OLO G
microscopio depende de las distancias focales de los dos sistemas de lentes. La capacidad de
análisis del microscopio óptico está limitada por las longitudes de onda visibles, solo se haya
indicado para estructuras de un diámetro superior a 0.3 μ (1 μ = micra = 1 milésima de milímetro).
Como los microscopios son instrumentos ópticos, es necesario obtener el aumento total de la
combinación del aumento del ocular y el aumento del objetivo, y se obtiene de la siguiente manera:
el ocular tiene un determinado aumento, que generalmente es de 10 aumentos o de 10X, los
objetivos tienen diferente poder de resolución que puede ser: 4X, 10X, 40X y 100X, el resultado
final de número de aumentos se da multiplicando el aumento del ocular por el aumento del objetivo
que se está utilizando; ejemplo: ocular 10X y el objetivo es de 40X, el resultado será 400 aumentos
o 400X.
Para su estudio, se pueden distinguir tres partes: mecánica, óptica y de iluminación.
Los microscopios que se utilizan en entornos científicos cuentan con varias mejoras que permiten
un estudio integral del espécimen, con base en esto, se han construido microscopios altamente
especializados para una gran variedad de usos. Estos microscopios comprenden: el microscopio
convencional o microscopio óptico compuesto (campo claro), el binocular o de disección, el de
campo oscuro en el cual el objetivo se ilumina solo con rayos oblicuos y el uso de la luz polarizada,
que acentúa las configuraciones moleculares altamente ordenadas de las células, el de contraste de
fases, se basa en que las distintas partes de la célula tiene regiones de diferentes índices de
refracción. En un plano más avanzado se encuentra el microscopio electrónico de barrido, que
genera imágenes en tres dimensiones.
Poderes del Microscopio
Poder de aumento permite magnificar la imagen. En general el aumento (A) está dado por la
relación:
A= Tamaño del objetivo x tamaño del ocular
Poder de resolución se refiere a la capacidad de un sistema óptico de distinguir dos puntos

próximos, es decir, la distancia mínima requerida para presentar dos objetos como distintos o
separados. Este poder a su vez depende de la longitud de onda (λ) y de la apertura numérica del
objetivo (NA). Esta última relaciona el ángulo de apertura de los rayos de luz, que provienen de la
muestra, con el índice de refracción. En el caso del objetivo de inmersión el aceite de inmersión se
coloca entre el preparado y la lente. El aceite tiene un índice de refracción igual al de la lente y evita
la refracción de los rayos luminosos.
El poder de resolución (PR) está dado por:
PR= λ /2 x NA
El poder de definición permite formar imágenes claras con contornos definidos, mientras que con
el poder de profundidad de foco es posible observar varios planos de la imagen con un mismo
enfoque.
2
A
LAB OR TO
RI O
E
ÍA
D
2024
BI OLO G
MATERIALES:
• Microscopio óptico compuesto • Porta y cubreobjetos

• Papel para lentes • Xilol
• Letra e • Papel milimetrado
• Tijeras • Caja Petri
PROCEDIMIENTO:
A. DISPOSICIÓN DEL MICROSCOPIO:
Al sacar el microscopio del estuche tómelo con ambas manos, de tal manera que con una lo
sostenga por el brazo y con la otra por debajo de la base. Colóquelo suavemente sobre la mesa y con
orientación hacia usted.
Revíselo con las indicaciones del profesor.
B. PARTES DEL MICROSCOPIO:
1. MECÁNICA: La base es la que da soporte al microscopio y es la que se une al brazo, este

sirve como asa para sujetar y transportar el aparato. El brazo se une al tubo que esta
formado por dos partes una de las cuales, su parte superior, lleva los lentes oculares, la
parte inferior lleva el revolver que gira y tiene atornillado los objetivos. La platina es una
superficie plana con un orifico en el centro por donde pasa la luz, en la platina se coloca la
muestra a observar y se sujeta con las pinzas. Cerca de la base se encuentra el tornillo
micrométrico o de movimientos lentos y el macrométrico o de movimientos rápidos.
Algunos microscopios tienen separados estos tornillos.
2. ÓPTICA: Los lentes oculares están en la parte superior del tubo y es por donde se observa
la muestra. Los lentes objetivos están atornillados en el revolver y son los que están cerca
de la muestra. Tanto los oculares y los objetivos llevan escrito el número de aumentos que
proporcionan. En la mayoría de los microscopios para conocer el aumento total con que se
observa, se multiplica el aumento de los oculares por el del objetivo.
3. LUMÍNICA: Está ubicada por debajo de la platina y consta de un espejo (con una cara
cóncava y una plana) que recibe los rayos luminosos y los refleja hacia la preparación a
través del condensador, la cantidad de luz que llega a la preparación se regula abriendo o
cerrando el diafragma.
3
A
LAB OR TO
RI O
E
ÍA
D
2024
BI OLO G
C. MANEJO DEL MICROSCOPIO:
Para un buen manejo del microscopio se debe tener en cuenta lo siguiente:
1. ILUMINACIÓN: Está colocada por debajo de la platina y consta de un espejo (con una
cara cóncava y una plana) que recibe los rayos luminosos y los refleja hacia la preparación
a través del condensador, la cantidad de luz que llega a la preparación se regula abriendo o
cerrando el diafragma.
Figura 1. Trayecto de la luz en un Microscopio óptico compuesto, de abajo hacia arriba hasta el ojo
humano
Principios ópticos
Una lente sencilla (biconvexa) posee dos focos, uno a cada lado de la lente (F y F´). Cuando los
4
A
LAB OR TO
RI O
E
ÍA
D
2024
BI OLO G
rayos luminosos pasan a través de la lente se concentran en el foco. La distancia focal es la distancia
entre el centro de la lente y el punto en donde convergen los rayos.
La distancia focal de una lente depende del índice de refracción del material del cual está hecha, y
del medio que envuelve la lente. Por eso, es diferente la distancia focal de una lente en el agua, que
esta misma en el aire. Como también es diferente la distancia focal de una lente de vidrio en
comparación con una construida en plástico.
Cuanto más pequeña es la distancia focal de una lente tanto mayor es su aumento. Si el objeto se
coloca a distancia mayor del foco, se obtiene una imagen real invertida, mientras que si el objeto se
localiza a una distancia menor del foco la imagen será virtual. A medida que se aleja el objeto del
foco, la imagen se percibe más pequeña.
Figura 2. Representación distancia focal
La distancia de trabajo focal de un objetivo, es el espacio que existe entre la superficie de la lente
del objetivo y la laminilla, una vez se encuentre enfocada la preparación. A mayor aumento del
objetivo la distancia de trabajo disminuye.
Como determinar la posición de los objetos observados
Los objetos que se observan en el campo microscópico se pueden localizar en relación con las
manecillas del reloj. Los objetos que aparecen en la parte inferior del fondo del campo
microscópico se encuentran realmente en la parte superior. Los objetos en el lado izquierdo del
campo microscópico se encuentran realmente al lado derecho.
5
A
LAB OR TO
RI O
E
ÍA
D
2024
BI OLO G
Desplazamiento del objeto
Si se mueve el portaobjetos hacia la derecha, el objeto examinado se desplazará hacia la izquierda.

Si se mueve el portaobjetos hacia usted, el objeto examinado se alejará.
Formación de la imagen real invertida
Las imágenes se observan invertidas por las lentes.
Figura 3. Representación del trayecto de luz para la formación de la imagen virtual invertida
La distancia focal de una lente depende del índice de refracción del material del cual está hecha y
del medio que envuelve la lente.
Cuando los rayos de luz se mueven en un medio homogéneo como el aire, se propagan en línea
recta, pero cuando caen sobre la superficie de un medio de diferente densidad, a la del medio en el
6
A
LAB OR TO
RI O
E
ÍA
D
2024
BI OLO G
cual se venía propagando, cambian de dirección y de velocidad a estos cambios se les conoce
como refracción de la luz.
Los rayos de luz procedentes de los objetos sumergidos en el agua se desvían al atravesar dos
medios de diferente densidad (agua-aire), originando este efecto de refracción. Por ejemplo si
introducimos un lápiz en un vaso con agua, el lápiz se verá cortado al pasar del agua al aire.
En la práctica de microscopía encontramos diferentes medios: aire, agua aceite de inmersión y

vidrio, cuyos índices de refracción son 1.0, 1.33, 1.51, .1.54 respectivamente. Al observar una
muestra a través del microscopio, los rayos de luz tienen que atravesar estos medios y son
refractados cambiando su dirección.
El aceite de inmersión, tiene un índice de refracción igual al de la lente, por tanto, evita la
refracción de los rayos luminosos.
2. COLOCACIÓN DE LA MUESTRA: La muestra se debe colocar en una lámina

portaobjetos y sobre esta colocar el cubreobjetos. La muestra a observar debe ser delgada
con el fin de que la luz la pueda atravesar. La preparación se debe colocar sobre la platina
de modo que la muestra quede en el centro de la abertura, lo cual se logra moviendo la
lámina portaobjetos por medio de los tornillos que hacen funcionar el carro del
microscopio.
Figura 4. Colocación de la lámina con el micropreparado en la platina del microscopio
El porta objetos, es una lámina de vidrio rectangular de color transparente utilizada para almacenar
muestras y objetos con el fin de observarlas bajo el microscopio. Las dimensiones típicas de un
portaobjeto son de 75mm x 25mm, sin embargo pueden variar dependiendo del tipo de objeto o
muestra (en geología suelen utilizarse portaobjetos de 75 x 50 mm).
7
A
LAB OR TO
RI O
E
ÍA
D
2024
BI OLO G
Para mantener la muestra segura, se utiliza un cubreobjeto que es colocado sobre la muestra bajo el
portaobjeto. El cubreobjeto es una lámina cuadrada o rectangular similar al portaobjeto pero de
menores dimensiones. Los portaobjetos pueden estar hechos de vidrio, vidrio borosilicatado, y
plástico.
3. ENFOQUE: Empleando el tornillo macrométrico se debe hacer descender la platina hasta

la posición más baja. Luego observando a través del ocular, debe comenzar a subir
lentamente la platina hasta que la muestra se haga visible, después virando el tronillo
micrométrico aclare la imagen al máximo.
A continuación se debe hacer girar el revolver para colocar el objetivo que sigue en
magnitud de aumento. Cuando la observación ha terminado se debe regresar al objetivo de
menor aumento, se lleva la platina hasta la parte inferior y se retira la muestra.
Siguiendo todos los pasos indicados anteriormente, tome como muestra la letra “e” o
cualquier otra letra, teniendo en cuenta de agregar una gota de agua al momento de colocar
la letra sobre el portaobjetos, antes de cubrirla con la laminilla o lámina cubreobjetos.
Figura 5. Esquema del micropreparado
D. MEDIDAS MICROSCÓPICAS:
La unida de medida más frecuente en microscopia es la micra o micrón, cuyo símbolo es µ y

equivale a una milésima de milímetro.
En los laboratorios de investigación se utiliza un instrumento, el micrómetro o retículo

micrométrico para realizar mediciones microscópicas. Si no se dispone de un micrómetro, es
posible estimar el tamaño de las muestras microscópicas en las observaciones si se conoce el
diámetro de campo. Para ello realice el siguiente procedimiento:
a. Coloque un fragmento de papel milimetrado sobre la platina, de tal manera que al enfocar
el microscopio pueda observarlo, mida entonces el diámetro del campo correspondiente al
8
A
LAB OR TO
RI O
E
ÍA
D
2024
BI OLO G
objetivo de menor aumento, en milímetros y micras, para esto cuantifique el número de

cuadros visibles del papel milimétrico. Realice lo anterior con los objetivos 4; 10; 40 y 100
x. Recuerde que para observar en 100x, se debe aplicar aceite de inmersión.
Figura 6. Campo visual de papel milimetrado
El campo de visión de un microscopio es la zona circular que se observa al mirar la

preparación bajo un determinado aumento. Para medir el campo de visión de un microscopio,
se debe usar una unidad llamada micra. Una micra equivale a 0,0001 mm; en otras palabras,
hay 1000 micras en un milímetro. El diámetro de este campo es su medida.
b. Con el dato anterior es posible determinar el diámetro del campo correspondiente al

objetivo de mayor aumento siguiente, entonces se debe dividir el diámetro encontrado por
la razón entre las magnificaciones del objetivo de mayor aumento y de menor aumento.
Por ejemplo: si el aumento del objetivo de mayor magnificación es de 45X y el otro es de
15X, la razón mencionada será 45/15 = 3; ahora, si el campo correspondiente al objetivo de
menor aumento tiene un diámetro de 1500 µ, el diámetro del campo para el mayor
aumento es de 1500/3 = 500 µ.
c. Retire el papel milimetrado y remplácelo por la muestra que tiene la letra e. ¿cuál es el
tamaño de la letra?
E. CUIDADOS DEL MICROSCOPIO:
El microscopio es un equipo costoso y por lo tanto exige un cuidado esmerado. Para

transportarlo se debe tomar por el brazo (o aditamento indicado) y con la otra mano se sujeta
9
A
LAB OR TO
RI O
E
ÍA
D
2024
BI OLO G
por debajo de la base. Cuando se acomoda en la mesa de trabajo, éste debe quedar por lo
menos a 10 cm. del borde de la mesa, para evitar cualquier caída.
Figura 7. Representación de la forma correcta de trasladar el microscopio
El microscopio debe manejarse con las manos limpias y se debe disponer de una tela suave
para limpiar el espejo, la platina, los portaobjetos y los cubreobjetos. Es muy importante
mantener los lentes fuera de contacto de la mano y de cualquier sustancia de laboratorio. Antes
de usar el aparato, limpie siempre los lentes, utilizando para ello papel lente, en ningún caso
utilice otro tipo de material, pues podría rayar los lentes. Emplee láminas completamente secas,
en su parte inferior al momento de realizar la observación. Las humedades en la platina y
objetivos generan hongos que deterioran la calidad de la imagen y el equipo como tal.
Figura 8. Representación de lavado de manos y manipulacióin de portaobjetos.
10
A
LAB OR TO
RI O
E
ÍA
D
2024
BI OLO G
Asegúrese que la lámina con el micropreparado quede firme al fijarla con las pinzas de la
platina.
Figura 9. Representación de la ubicación y aseguramiento delo micropreparado sobre la

platina.
Tenga en cuenta la secuencia para dar buen uso al microscopio y cumplir con los objetivos de la
práctica en la cual emplee este equipo:
- Encienda el microscopio y regule la luz

- Ajuste los oculares; gire los oculares para encontrar el espacio correcto entre los ojos, o la
distancia interpupilar.
- Si usa anteojos, los puede retirar y luego ajuste el microscopio para enfocar el objeto acorde
a su visión.
Figura 10. Representación del ajuste de oculares
11
A
LAB OR TO
RI O
E
ÍA
D
2024
BI OLO G
- Enfoque el micropreparado, iniciando con el menor aumento (esto permite tener una
imagen macro de lo que se observa).
- Emplee el tornillo macrométrico para precisar la imagen y luego ajústela a su visión con el
tornillo macrométrico. Cada vez que cambie de aumento solo debe ajustar la imagen
haciendo uso del tornillo micrométrico
Figura 11. Representación esquemática de la forma correcta de realizar la observación de un

micropreparado y del uso del tornillo macrométrico.
- Ajuste la luz moviendo el diafragma; notará que la imagen cambia dando mayor o menor
nitidez.
Figura 12. Representación de la ubicación y forma de mover el diafragma
- Cuando requiera precisar algunos detalles del micropreparado, emplee aceite de inmersión
con el objetivo 100x, Recuerde limpiarlo con xilol o alcohol isopropílico
12
A
LAB OR TO
RI O
E
ÍA
D
2024
BI OLO G
Figura 13. Representación del objetivo 100x y la forma de limpiarlo (también puede hacerse
empleando un hisopo)
- Al final de cada práctica limpie las láminas cubre y portaobjetos que haya usado, nunca las
deje en el microscopio, luego coloque el protector del microscopio y ubíquelo en el lugar
correspondiente.
CUESTIONARIO
1. Realice una breve reseña histórica acerca de la invención y desarrollo del microscopio
2. Construya un cuadro comparativo en el cual se relacionen los diferentes tipos de

microscopios, resaltando en cada uno de ellos las principales características, capacidad de
aumento, ventajas, y desventajas.
3. Realice un manual ilustrado con las normas de manejo y cuidado del microscopio.
4. Explique qué es poder de resolución
5. ¿Por qué el cambio de un objetivo a otro provoca una modificación en la imagen

observada?
6. A través de un diagrama o dibujo, explique por qué las imágenes se ven invertidas en el
microscopio.
7. ¿Qué es un estereomicroscopio? ¿Cuál es su función? Dibuje sus partes.
13
A
LAB OR TO
RI O
E
ÍA
D
2024
BI OLO G
Bibliografía y webgrafía
Manual de Prácticas de Biología I. Colegio de Estudios Científicos y Tecnológicos del Estado de

Chiapas. 2012. 68p. Disponible en:
El microscopio
https://www.youtube.com/watch?v=zBWi_I3fGBI
Lección 10. Microscopía óptica y electrónica. Universidad Abierta y a Distancia. UNAD.

http://datateca.unad.edu.co/contenidos/358010/exe/leccin_10_microscopa_ptica_y_electrnica.html
Historia del Microscopio

https://www.youtube.com/watch?v=HzHAECxLjs0
https://www.youtube.com/watch?v=USmCf8BRZJY
https://www.youtube.com/watch?v=sFJFMbRVefE
Partes del microscopio

https://www.youtube.com/watch?v=AC_X87DexiY
http://hnncbiol.blogspot.com.co/2008/01/microscopia_22.html
Cómo usar un microscopio

http://es.wikihow.com/usar-un-microscopio
14

LABORATORIO 1 Uso y Manejo Del Microscopio 2024

Cargado por

Información del documento

Título original

Derechos de autor

Formatos disponibles

Compartir este documento

Compartir o incrustar documentos

Opciones para compartir

¿Le pareció útil este documento?

¿Este contenido es inapropiado?

Copyright:

Formatos disponibles

LABORATORIO 1 Uso y Manejo Del Microscopio 2024

Cargado por

Copyright:

Formatos disponibles

A

Tabla 1. Medidas empleadas en microscopía y sus equivalencias

MAGNITUD SÍMBOLO EQUIVALENCIA (en mm)

La lupa es el microscopio más simple. El tipo de microscopio más utilizado es el microscopio

El microscopio óptico compuesto consiste en dos sistemas de lentes, el objetivo y el ocular,

Para su estudio, se pueden distinguir tres partes: mecánica, óptica y de iluminación.

Poderes del Microscopio

A= Tamaño del objetivo x tamaño del ocular

Poder de resolución se refiere a la capacidad de un sistema óptico de distinguir dos puntos

El poder de resolución (PR) está dado por:

• Microscopio óptico compuesto • Porta y cubreobjetos

A. DISPOSICIÓN DEL MICROSCOPIO:

Revíselo con las indicaciones del profesor.

B. PARTES DEL MICROSCOPIO:

1. MECÁNICA: La base es la que da soporte al microscopio y es la que se une al brazo, este

C. MANEJO DEL MICROSCOPIO:

Para un buen manejo del microscopio se debe tener en cuenta lo siguiente:

Figura 2. Representación distancia focal

Como determinar la posición de los objetos observados

Desplazamiento del objeto

Si se mueve el portaobjetos hacia la derecha, el objeto examinado se desplazará hacia la izquierda.

Formación de la imagen real invertida

Las imágenes se observan invertidas por las lentes.

En la práctica de microscopía encontramos diferentes medios: aire, agua aceite de inmersión y

2. COLOCACIÓN DE LA MUESTRA: La muestra se debe colocar en una lámina

Figura 4. Colocación de la lámina con el micropreparado en la platina del microscopio

3. ENFOQUE: Empleando el tornillo macrométrico se debe hacer descender la platina hasta

Figura 5. Esquema del micropreparado

La unida de medida más frecuente en microscopia es la micra o micrón, cuyo símbolo es µ y

En los laboratorios de investigación se utiliza un instrumento, el micrómetro o retículo

objetivo de menor aumento, en milímetros y micras, para esto cuantifique el número de

Figura 6. Campo visual de papel milimetrado

El campo de visión de un microscopio es la zona circular que se observa al mirar la

b. Con el dato anterior es posible determinar el diámetro del campo correspondiente al

E. CUIDADOS DEL MICROSCOPIO:

El microscopio es un equipo costoso y por lo tanto exige un cuidado esmerado. Para

Figura 7. Representación de la forma correcta de trasladar el microscopio

Figura 8. Representación de lavado de manos y manipulacióin de portaobjetos.

Figura 9. Representación de la ubicación y aseguramiento delo micropreparado sobre la

- Encienda el microscopio y regule la luz

Figura 10. Representación del ajuste de oculares

Figura 11. Representación esquemática de la forma correcta de realizar la observación de un

Figura 12. Representación de la ubicación y forma de mover el diafragma

2. Construya un cuadro comparativo en el cual se relacionen los diferentes tipos de

4. Explique qué es poder de resolución

5. ¿Por qué el cambio de un objetivo a otro provoca una modificación en la imagen

7. ¿Qué es un estereomicroscopio? ¿Cuál es su función? Dibuje sus partes.

Manual de Prácticas de Biología I. Colegio de Estudios Científicos y Tecnológicos del Estado de

Lección 10. Microscopía óptica y electrónica. Universidad Abierta y a Distancia. UNAD.

Historia del Microscopio

Partes del microscopio

Cómo usar un microscopio

También podría gustarte