UNIVERSIDAD TÉCNICA DEL NORTE

Ibarra – Ecuador

Nombre: Jessica Tabango Fecha: 26/10/2022

Carrera: Ingeniería Forestal

Materia: Microbiología Tipo de Actividad: Trabajo Individual

Tema: Observación de microorganismos

Nombre del licenciado:

FUNDAMENTOS TEÓRICOS
EL Microscopio óptico
a. Partes
1. Ocular: lente situada cerca del ojo del observador. Capta y amplía la imagen formada en los objetivos.

2. Objetivo: lente situada en el revólver. Amplía la imagen, es un elemento vital que permite ver a través
de los oculares.
3. Cabezal: es la cabeza del microscopio que te permite obtener mejores tomas del objetivo.
4. Condensador: lente que concentra los rayos luminosos sobre la preparación.
5. Diafragma: regula la cantidad de luz que llega al condensador.
6. Foco: dirige los rayos luminosos hacia el condensador.
7. Tubo: es la cámara oscura que porta el ocular y los objetivos. Puede estar unida al brazo mediante una
cremallera para permitir el enfoque.
8. Revólver: Es el sistema que porta los objetivos de diferentes aumentos, y que rota para poder utilizar
uno u otro, alineándolos con el ocular.
9. Tornillos macro y micrométrico: Son tornillos de enfoque, mueven la platina o el tubo hacia arriba y
hacia abajo.
10. Platina: Es una plataforma horizontal con un orificio central, sobre el que se coloca la preparación, que
permite el paso de los rayos procedentes de la fuente de iluminación situada por debajo.
11. Pinzas sujetadoras: Dos pinzas, sirven para retener el portaobjetos sobre la platina y un sistema de
cremallera que permite mover la preparación. Puede estar fija o unida al brazo por una cremallera para
permitir el enfoque.
12. Brazo: Es la estructura que sujeta el tubo, la platina y los tornillos de enfoque asociados al tubo o a la
platina. La unión con la base puede ser articulada o fija.
13. Base o pie: Es la parte inferior del microscopio que permite que este se mantenga de pie.
b.Como funciona
El principio de funcionamiento de un microscopio óptico se basa en la propiedad de algunos materiales que
permiten cambiar la dirección de los rayos de luz. Con este fin, se fabrican lentes capaces de hacer converger o
divergir los rayos de luz, generando así la imagen aumentada a partir de distintas lentes. Algunas de ellas
montadas en el objetivo del microscopio y otras en el ocular.

tipos de microscopios ópticos

Existen distintas variaciones del concepto básico de microscopio óptico que resultan en diferentes tipos de
microscopio:
1. Microscopio compuesto: El microscopio compuesto es el tipo elemental de microscopio óptico. El
término compuesto indica que se utilizan dos o más lentes para obtener la imagen aumentada.
2. Microscopio compuesto: El microscopio compuesto es el tipo elemental de microscopio óptico. El
término compuesto indica que se utilizan dos o más lentes para obtener la imagen aumentada.
3. Microscopio binocular: El microscopio binocular incluye dos oculares de modo que es posible utilizar
los dos ojos para examinar una muestra.
4. Microscopio digital: El microscopio digital incluye una cámara en lugar del ocular, esto permite
capturar digitalmente la imagen de la muestra. La imagen digital se puede visualizar en tiempo real en
una pantalla o transmitirla a un ordenador mediante conexión USB.
5. Microscopio trinocular: Este tipo de microscopio tiene los dos oculares necesarios para observar la
muestra con los dos ojos e incluye también un ocular adicional donde se puede conectar una cámara para
capturar imágenes de las observaciones.
6. Microcopio USB: El microscopio USB es un tipo de microscopio digital muy sencillo que se ha
popularizado en los últimos años debido a su bajo coste.
7. Microscopio invertido: En el microscopio invertido la posición de la fuente de luz y el objetivo es la
opuesta al microscopio convencional. De este modo la muestra es iluminada desde arriba y el objetivo se
encuentra debajo la platina.
8. Microscopio estereoscópico: Un microscopio estereoscópico es un tipo de microscopio binocular
porque está equipado con dos oculares.
d. Procedimiento (enfoque de muestras)
1. Poner la muestra en la pletina.
2. Ajustar la distancia Inter pupilar (separación entre ambos oculares); ver fotografía 1.
3. Seleccionar el objetivo de mínimo aumento,
4. Con el tornillo macrométrico (fotografía 2) ajustamos la altura de la pletina hasta que la muestra esté
enfocada.
5. Usamos el tornillo micrométrico para un ajuste fino. A partir de ahora, cuando cambiemos de objetivo,
casi siempre con un ajuste micrométrico será suficiente.
e. Cuidados del microscopio
1. Procure dejar su microscopio en un mismo sitio. En general, debe evitarse en lo más posible el
transporte diario o constante de cualquier aparato.
2. Cuando no esté en uso, mantenga el microscopio cubierto y protegido del polvo.
3. No toque el instrumento con manos sucias o grasosas.
4. Economice la vida de la lámpara, asegurándose de ejecutar la iluminación correcta tal como se le ha
enseñado. Si el diafragma del condensador está cerrado, ya podrá darle toda la intensidad a la lámpara,
gastándola innecesariamente, que no logrará mejor iluminación. Si no hace contraste, tampoco verá
nada.
5. No permita que líquidos, ácidos o aceites ensucien el microscopio.
6. Nunca utilice lentes de mayor aumento sin cubrir la preparación con un cubreobjetos.
7. Nunca deje el objetivo de inmersión lleno de aceite. Use papel de lente, con movimientos suaves y
circulares para limpiarlo luego de usarlo.
8. Si falta uno o varios objetivos, tape inmediatamente el agujero con un tapón de rosca especial para ello
o con esparadrapo si no hay otra cosa.
9. Muchos recomiendan xilol para limpiar las lentes mal cuidadas, con aceite o sucio resecado sobre ellas.
Es preferible, sin embargo, usar un poco de éter en vez de xilol para evitar despegar las lentes ya que el
xilol es disolvente de pegamento. Utilice un aplicador con algodón en la punta humedecido en éter.
Páselo por las lentes grasosas y limpie inmediatamente con papel de lentes limpio.
Referencia
El inciso sobre calibración fue traducido literalmente de: Ash L and Orihel T. Parasites: a guide laboratory
procedures and identification. ASCP Press, American Society of Clinical Pathologists, Chicago, 1987.
Técnicas de microscopía
Las técnicas de microscopía son el conjunto de procedimientos de investigación que utilizan un microscopio
para obtener imágenes de determinadas estructuras, las cuales, por ser demasiado pequeñas, resultan
inapreciables a simple vista para el ojo humano. Debido a su gran potencial para identificar propiedades de los
materiales, se usan con fines variados, que van desde la microbiología molecular hasta el análisis de metales y
otros compuestos industriales.
Preparación de muestras para observación en microscopio
Existen dos formas básicas de preparar una muestra para el microscopio: la preparación en fresco o húmeda y la
preparación en seco.
Preparación en fresco
La preparación en fresco es ideal para la observación de microorganismos o de tejidos biológicos que
requieren ser hidratados.
10. Si la muestra es líquida colocamos unas gotas de la muestra en el centro del portaobjetos con la ayuda
de una pipeta.
11. Si la muestra es sólida colocamos primero unas gotas de agua destilada o de solución salina sobre el
portaobjetos y a continuación un fragmento de la muestra con la ayuda de unas pinzas.
12. Sujetando el cubreobjetos por dos de sus lados, apoyamos otro de sus lados sobre el portaobjetos de
modo que forme un ángulo de aproximadamente 45 grados.
13. A continuación, podemos soltar con cuidado el cubreobjetos de modo que quede colocado sobre el
líquido que hemos depositado anteriormente. (Mediante este procedimiento se evita la formación de
burbujas dentro de la muestra. En caso de que hayan aparecido burbujas entre el portaobjetos y el
cubreobjetos será necesario repetir el procedimiento anterior.)
14. En caso de que haya un exceso de líquido alrededor del cubreobjetos podemos eliminarlo mediante
papel absorbente.
Las preparaciones en fresco mantienen la hidratación durante un periodo de aproximadamente 30 minutos.
Preparación en seco
La preparación en seco es ideal para muestras que no necesitan hidratación. Esto incluye, por ejemplo, un
cabello, granos de polen, esporas, muestras de plantas, insectos, etc.
15. Si la muestra es totalmente opaca el primer paso consistirá en cortar primero una sección muy fina de la
muestra. Esto permitirá observarla en el microscopio mediante luz transmitida.
16. Colocamos la sección que hemos cortado en el centro del portaobjetos con la ayuda de unas pinzas. Si
la muestra tiene un cierto volumen es recomendable utilizar un portaobjetos con una cavidad cóncava.
17. Para mantener la muestra fija en su sitio la cubrimos con un cubreobjetos. Esto evita también que el
objetivo llegue a tocar la muestra en caso de cometer algún error durante la manipulación del
microscopio.
18. Preparación con tinción
19. Existen distintas técnicas para aplicar una tinción que se adecuan a los distintos tipos de muestras.
20. Si hemos preparado una muestra en fresco, podemos aplicar un tinte siguiendo los siguientes pasos:
21. Depositamos unas gotas del tinte sobre uno de los bordes del cubreobjetos.
22. Colocamos papel absorbente al lado opuesto del cubreobjetos para forzar el movimiento del tinte a
través de la muestra.
23. Una vez la muestra ha absorbido el tinte retiramos el papel absorbente.
24. Los tintes permiten aumentar el contraste y facilitar la observación de algunos detalles concretos de la
muestra. Existen tintes de distintos colores y características adecuados para distintos tipos de muestras.
Tinciones: tipos y aplicaciones
TIPOS
Tinción Simple.
Utiliza un solo colorante.
Tinción Ácido Resistente.
Esta tinción sirve principalmente para clasificar microbacterias y actinomicetos, que tienen un alto contenido en
lipídico y en ácidos micólicos y que no pueden ser clasificadas por la tinción de gram.
Tinción de Giensa.
La tinción de Giensa es un método habitual para el examen de frotis sanguíneos, cortes histológicos y otro tipo
de muestras biológicas.
Tinción de Esporas.
Se usa verde de malaquita en contraste con safranina. La envuelta de la endospora es más compleja e
impermeable que la envuelta de las células vegetativas en las que se forma. Sólo se puede teñir el contenido de
la espora alterando su envuelta.
Tinción de Cápsula.
La cápsula bacteriana es una capa de material viscoso o mucoide. El tamaño de estas cápsulas está influenciado
por el medio en el que crece la bacteria. En algunos casos el grosor de la cápsula es sólo una fracción del
diámetro de la célula, en otros casos la cápsula es mucho mayor que la célula

Tinción de Flagelos o leifson.

Es una tinción para lograr observar flagelos de bacterias. Es usada en laboratorios, pero no de rutina. Los pasos
que sigue son el de usar pararos anilina sirve como tinción principal, y ácido tánico es agregado a la solución
como mordiente.
Aplicaciones
El primero, permite magnificar el tamaño y estructuras de los microorganismos para que sean visibles al ojo
humano y la segunda, permiten hacer visibles a los objetos microscópicos y transparentes, revelar su forma y
tamaño, así como hacer evidente la presencia de estructuras internas y externas.
3. Bacterias, hongos, levaduras, microalgas
Características
Las bacterias son los organismos más exitosos sobre el planeta. Han vivido en este planeta por dos mil millones
de años antes que las primeras células eucariotas y, durante ese tiempo, evolucionaron en millones de especies
distintas.
Son tan pequeñas que solo se pueden observar en un microscopio. Se pueden observar tres formas distintas.
Estas se pueden identificar y clasificar por su forma, como se ve en la siguiente:

25. Bacilos tienen forma de barra.

26. Cocos tienen forma de esfera.

27. Espirilos tienen forma de espiral.

28. Las bacterias, al igual que las células eucariotas, poseen citoplasma, ribosomas y una membrana
plasmática.
29. Los rasgos que distinguen a las bacterias de las células eucariotas incluyen el ADN circular del
nucleoide, la falta de orgánulos unidos a la membrana, la pared celular de peptidoglucano y los flagelos.

https://flexbooks.ck12.org/cbook/ck-12-conceptos-de-ciencias-de-la-vida-grados-6-8-en-espanol/section/5.1/
primary/lesson/caracter%C3%ADsticas-de-las-bacterias/

Morfología
Las bacterias pueden presentar ciertas variaciones morfológicas, entre estas se encuentran las que tienen forma
de estrella, las planas y rectangulares, las alargadas en forma de pera y por último aquellas que forman
pedúnculos no celulares.

http://www.revistasbolivianas.ciencia.bo/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S2304-
37682014001000002&lng=es&nrm=iso#:~:text=Las%20bacterias%20p

HONGOS

CARACTERISTICAS

La mayor parte son saprofitos (descomponen la materia muerta).Hay varios miles de especies que parasitan a
las plantas; de hecho, los hongos son los fitopatógenos por excelencia. En comparación, sólo unas cincuenta
especies provocan enfermedades (micosis) en humanos. Otros hongos viven en simbiosis mutualistas, como los
líquenes (con algas), micoparásitos Biotróficos, Necrotróficos. Trichoderma harzianum, Gliocladium virens.
Las micorrizas (con las raíces vegetales, casi siempre imprescindibles para la supervivencia de las plantas en
ecosistemas naturales).

1. Características generales de los hongos

Son organismos eucarióticos (núcleo bien definido)

2. No tienen clorofila.

3. La mayor parte tiene pared celular definida (quitina y/o celulosa)

4. Generalmente producen esporas para la reproducción

5. Presentan reproducción sexual y/o asexual.

6. La mayoría son microscópicos

https://slideplayer.es/slide/159769/

MORFOLOGIA

La morfología de los hongos es conocida por ser compuesta por un micelio que son largos filamentos
denominados hifas unidas entre ellas. Estas hifas se pueden observar a través del microscopio y los hongos y las
utilizan para poder aferrarse y propagarse a lo largo y ancho de los lugares donde se desarrollan.
https://www.renovablesverdes.com/morfologia-de-los-hongos/#:~:text=La%20morfolog%C3%ADa
%20de%20los%20hongos%20es%20conocida%20por%20ser%20compuesta,los%20lugares
%20donde%20se%20desarrollan.

LEVADURAS
Características generales

1. La mayoría de las levaduras son hongos unicelulares sencillos y microscópicos, la mayoría se

reproducen asexualmente por geminación y otras especies lo que hacen por fisión múltiple.
2. Las levaduras que pueden reproducirse sexualmente como verdaderas
3. Aspectos negativos:
4. Microorganismos que echan a perder los alimentos.
5. Aspectos positivos:
6. Utilizan en bioprocesos de los alimentos.
7. Utilizan producción de aditivos para alimentos y enzimas.
https://slideplayer.es/slide/1129196/
Morfología
Las levaduras son hongos unicelulares, también denominados hongos imperfectos porque no desarrollan
micelio.
8. Morfología. Tienen forma esférica, cilíndrica o elíptica. El tamaño de las células de levaduras varía
considerablemente.
https://www.ceupe.com/blog/clasificacion-de-levaduras-en-alimentos.html#:~:text=Las%20levaduras%20son
%20hongos%20unicelulares,c%C3%A9lulas%20de%20levaduras%20v
MICRIOALGAS
Si quieres conocer más sobre estos intrigantes microorganismos te invito a que veamos algunas de sus
características:
1. Son organismos microscópicos: pueden medir entre 2 y 200 µm, son unicelulares y en su mayoría
fotosintéticos, es decir, que tienen la capacidad de utilizar la luz solar como fuente de energía.
2. Suelen ser microorganismos autótrofos: ya que tienen la capacidad de fijar el CO2 de la atmósfera
para producir su propia biomasa a través de la fotosíntesis.
3. Su ciclo vital se completa en horas: el ciclo vital de la mayoría de las especies de microalgas se
completa tan solo en horas. Pueden reproducirse sexual y asexualmente, principalmente por fisión
binaria o mitosis.
4. Pueden contener sustancias de reserva: dependiendo de las condiciones de cultivo y de la especie de
la que se trate, las microalgas pueden contener numerosas sustancias de reserva en su interior como
lípidos, carbohidratos y proteínas.
5. Son el primer escalón de la muchas cadenas tróficas: gracias a su capacidad fotosintética son el
primer eslabón de cadenas tróficas, es decir, los productores primarios de materia orgánica, sirviendo de
alimento para las demás especies del ecosistema.
6. Son especies cosmopolitas: su adaptabilidad les permite encontrarse ampliamente distribuidas por la
biosfera, tolerando un amplio rango de condiciones. Pueden crecer en todos los cuerpos de agua como
lagos, mares y ríos, pero también en zonas terrestres y extremas como hielos y desiertos.
https://www.ecologiaverde.com/que-son-las-microalgas-caracteristicas-ejemplos-e-importancia-4013.html
Morfología
Las observaciones de las características morfológicas a nivel celular permitieron identificar el género de las
microalgas; se sabe que las microalgas pertenecientes al género Chlorella se caracterizan por ser células
esféricas o esferoides de 2-10 μm.
https://www.researchgate.net/figure/Figura-1-Morfologia-celular-de-microalgas-aisladas-del-rio-Lerma-Salamanca-
A_fig1_341998300#:~:text=Las%20observaciones%20d
Nombre del microorganismo Tipo de célula Muestra fresca Tinción

Actinomicetos Procariota, bacteria Forma: coco bacilo Tinción diferencial: Tincion

de gram.
Tamaño: 1 μm
Reacción o la tinción: violeta
Movimiento: negativo gram (

+)
.
E-coli Procariota: bacteria Forma: bacilos Tinción diferencial: Tinción
de gram.
Tamaño: 1 μm
Reacción o la tinción: rojo
Movimiento: positivo
gram (-)

Saccharomyces cerevisiae Eucariota: levadura Forma: redondas y ovaladas Tinción diferencial: Tinción
de levadura-azul metileno.
Tamaño:10 μm
Reacción de tinción: color
Movimiento: negativo
morado, simple

Asperguillus niger: Eucariota: hongo Forma: redonda Sin tinción

Tamaño: 10 μm
Movimiento: negativo
Asperguillus niger: Eucariota: hongo Forma: redonda Tinción con azul de metileno

Tamaño: 10 μm
Movimiento: negativo

Ettlia Eucariota:algas Forma: redonda Sin tincion

Tamaño: 10 μm
Movimiento:negativo

BIBLIOGRAFIA
(Yordan, 2006)qué son las microalgas, sus características, ejemplos e importancia,
(valder, 2014)Hacia el reemplazo de pesticidas quimicos: Explorando las microalgas para su uso en
control biológico.
(GyB)NUNCA se debe utilizar el tornillo macrométrico con los objetivos de mayor aumento, pues al estar
éste muy cerca del preparado, secorre el riesgo de partirlo.

PREGUNTAS
Responder:
¿Por qué se recomienda iniciar a visualizar la muestra con el lente de menor aumento?
-Colocar en primera instancia el objetivo de menor aumento para lograr un enfoque correcto. Este paso en muy
importante y se debe realizar siempre, ya que permitirá la observación de una panorámica del preparado y la
ubicación de áreas de interés para su análisis posterior.
http://users.df.uba.ar/dcs/f2bg/labo/MicrAvan/TP_MICROSCOPIA.pdf
¿Para qué se utiliza el aceite de inmersión?
El aceite de inmersión es un líquido viscoso y transparente que tiene un alto índice refractivo. Por este motivo
es muy utilizado en las observaciones microscópicas ya que brinda la propiedad de concentrar la luz cuando
esta pasa a través del objetivo de 100X del microscopio, aumentando su poder de resolución.
¿Cómo podría diferenciar una célula eucariota de una procariota con una simple observación al microscopio?
La célula eucariota tiene una membrana que encierra el núcleo separándolo del citoplasma. La célula
procariota no posee estructuras con membranas en su interior, es decir, su contenido intracelular está
esparcido en el citoplasma.
https://www.diferenciador.com/celula-eucariota-y-celula-procariota/#:~:text=La%20c%C3%A9lula
%20eucariota%20tiene%20una,est%C3%A1%20esparcido%20en%20el%20citoplasma.
Cuál es la diferencia estructural entre bacterias Gram (+) y bacterias Gram (-)
Las bacterias Gram positivas tienen una capa gruesa de peptidoglicano y no tienen una membrana lipídica
externa, mientras que las bacterias Gram negativas tienen una capa delgada de peptidoglicano y tienen una
membrana lipídica externa.
Como las bacterias Gram positivas carecen de una membrana lipídica externa, cuando se refieren correctamente
a su estructura en lugar de las propiedades de tinción, se denominan monodermos. La membrana lipídica
externa que poseen las bacterias Gram negativas significa que, cuando se hace referencia a su estructura física,
se denominan didermas.
https://www.news-courier.com/immunology/articles/gram-positive-vs-gram-negative-323007#:~:text=Las
%20bacterias%20Gram%20positivas%20tienen,tienen%20una%20membrana%20lip%C3%ADdica
%20externa.
¿Por qué es importante el proceso de fijación de la muestra al portaobjetos?
La fijación química se utiliza para proteger las subestructuras celulares finas y la morfología de los
microrganismos más grandes.
La fijación de una extensión bacteriana hace que las bacterias queden inactivadas y adheridas al vidrio
alterando lo menos posible la morfología bacteriana y las posibles agrupaciones de células que pudiera
haber. Colocar una pequeña gota de agua en el centro de un portaobjetos limpio. Fijación de las bacterias al
portaobjetos Por calor: Pasar tres veces el portaobjetos por la llama durante unos segundos. Dejar enfriar la
porta entre los pases. Con metanol (para bacterias procedentes de medio líquido). Añadir unas gotas de metanol
sobre la extensión completamente seca. Golpear el portaobjetos por su canto con cuidado contra la mesa de
trabajo para retirar de inmediato el exceso de metanol. Esperar a que el metanol se evapore completamente. Una
vez realizado el frotis y fijadas las bacterias, las preparaciones pueden ser observadas al microscopio, aunque
carecen de contraste. Lo normal es continuar con el proceso de tinción.
https://www2.ulpgc.es/hege/almacen/download/35/35695/preparacion_de_un_frotis_bacteriano.pdf