Universidad Tecnológica de Panamá

Facultad de Ingeniería Civil

Lic. en Ingeniería Ambiental

Experiencia de laboratorio # 2
Uso del microscopio

Microbiología Ambiental

EXPERIENCIA DE LABORATORIO #2A PRESENCIAL USO DEL

MICROSCOPIO
Objetivo
Reconocer las partes del microscopio y su manejo para obtener la máxima utilidad de su
microscopio.
Resumen
El microscopio, el instrumento más peculiar del laboratorio de microbiología, proporciona
la amplificación gracias a la cual el hombre es capaz de ver organismos estructuras que a
simple vista serían indivisibles. Se dispone de microscopios que permiten amplías escalas
de aumento, desde de centenares hasta centenares de miles de diámetros. Se cuenta también
con varios tipos de microscopios y se han Ideado muchas técnicas por las cuales las
muestras de microorganismos se preparan para el examen con el máximo detalle. Cada tipo
de microscopio y cada método de preparar (las muestras ofrece alguna ventaja precisa para
demostrar algunos aspectos morfológicos.

Figura 1. Tamaño de los microorganismos.

Los microscopios pertenecen a dos ciases, el de luz (óptico) y e! electrónico, según el
principio en que se basa la amplificación. Existen varios tipos de microscopios de luz, los
estudiantes hacen casi la totalidad de sus exámenes, acaso todos, con el microscopio de luz
tipo campo luminoso. Los otros tipos de microscopía se usan para propósitos especiales o
trabajos de investigaciones.
 Figura 2. El microscopio compuesto.
(a) Componentes del microscopio óptico compuesto.
(b) Trayectoria de la luz a través del microscopio compuesto.
Microscopía de Campo Luminoso: En la microscopía de campo luminoso, el campo
microscópico, a área observada está Intensamente iluminado y los objetivos que se estudien
allí aparecen más oscuros. Por lo general, los microscopios de este tipo dan aumentos útiles
de unos mil diámetros.
Anatomía del Microscopio: Base, brazo y cuerpo del tubo: La base y brazo sirven para
mantener en posición las partes ópticas esenciales. La base y el brazo son gruesos y fuertes,
para disminuir la vibración. En los instrumentos modernos todo el cuerpo del tubo, al cual
están unidas las principales lentes, se inclina hacia el observador. Oculares: Son tubos
cortos, cada una con dos lentes, colocados en el extremo superior del cuerpo del tubo
binocular. La función de los oculares es amplificar la imagen de! objeto formada por el
objetivo. Los oculares están marcadas "5X", "10X". etc., indicando que amplían la imagen
del objetivo cinco veces, diez veces etc. El ocular más generalmente empleado es el 10X.
Tubo, revólver o porta objetivos: En el tubo están colocados los oculares. La mayoría de
los microscopios modernos tienen una longitud de tubo fija y oculares doble, que permiten
utilizarlos con los dos ojos. En el revólver se colocan los objetivos y permite cambiarlos
con rapidez.
 Objetivos: Constituyen la parte óptica más importante y son el sistema de lentes más
cercano al objetivo observado. Limitan el tamaño de la imagen y responden de la calidad de
esta imagen. La mayoría de los microscopios están equipados con tres objetivos de
diferente aumento-pequeño aumento, gran aumento y objetivo de inmersión de aceite.
Objetivo de pequeño aumento: Este objetivo es muy útil para examinar protozoarios y
otros grandes microorganismos y se puede usar para estudiar colonias de organismos en
desarrollo. Pero con esta lente difícilmente se pueden diferenciar las bacterias individuales.
Este objetivo generalmente es más corto que los otros dos. Viene marcado con la potencia
amplificadora, 10X. Este objetivo posee una distancia focal equivalente a 16 mm, la cual
proporciona una idea de la distancia que habrá entre los extremos del objetivo y la muestra
cuando se enfoque.
Objetivo de gran aumento: Este objetivo se usa en microbiología para el examen de
microorganismos vivos suspendidos en gotas de agua u otros líquidos. En la mayoría, de los
microscopios el objetivo de gran aumento es más largo y delgado que el anterior. Viene
marcado con 45X, que es la potencia amplificadora. Su distancia focal equivalente
corresponde a 4 mm.
Objetivo de inmersión de aceite: Este objetivo se utiliza para el examen de frotis teñidos
de bacterias. El objetivo puede ser largo o corto. Viene marcado con "oil immer" y estará
enfocado a menos de 2 mm por encima de la muestra colocada en el portaobjetos.
Platina: Es la parte del microscopio donde se coloca la muestra que va a ser examinada. En
la mayoría de los trabajos microbiológicos la muestra es un frotis transparente u otra
preparación sobre una placa de cristal o portaobjetos. Sobre la platina se encuentran unas
pinzas que se utilizan para sujetar el portaobjeto.
Espejo, Condensador y Diafragma: El espejo recoge y refleja la luz hacia el microscopio.
Antes de que la luz alcance la muestra en la platina, se condensa y enfoca a través de una
gran lente condensadora que se halla bajo la platina. Con esto se consigue dirigir el máximo
de luz hacia la muestra, lo que es necesario cuando se emplean las lentes de mayor
aumento. A veces, sin embargo, si toda la luz del espejo pasa a través del condensador, la
muestra se ilumina demasiado. Por esta razón se coloca bajo el condensador un diafragma.
El tamaño de la abertura del diafragma se puede reducir hasta el de una cabeza de alfiler o
cualquier tamaño Intermedio, moviendo una palanquita; así se puede controlar exactamente
la cantidad de luz admitida en el condensador. Si se requiere la luz difusa, como en el
estudio de microbios vivos sin tinción, se puede hacer descender el condensador y el
diafragma.
En muchos de los microscopios modernos el condensador y el espejo están combinados en
una sola unidad con luz eléctrica ajustable.
Ajuste macro métrico y micrométrico para enfocar: La platina y el condensador se
mueven hacia arriba y hacia abajo, mediante tomillos de ajuste micrométrico. La platina
puede subir o bajar muy ligeramente, mediante el ajuste micrométrico.
La finalidad de estos es poner la muestra en el foco, de manera que sus bordes sean nítidos
y claros. Ambos ajuste deben manejarse cuidadosamente especialmente el micrométrico,
debido a que su mecanismo es muy delicado. El recorrido del tornillo de ajuste micro es
muy limitado. En uno de los extremos de su recorrido se encuentra un tope y en el otro
sobrepasa el límite de movimiento y no tiene efecto. Se debe conservar siempre en un
punto-intermedio.
Empleo y Cuidado del Microscopio
Siguiendo las recomendaciones dadas a continuación usted podrá manejar su microscopio a
satisfacción aunque no sea un especialista en la materia.
Procedimiento
1. Limpie el espejo, la parte superior del condensador, ocular y objetiva, frotando
suavemente con papel especial para lentes.
2. Haga girar el revólver hasta colocar en posición el objetivo de menor aumento (10X).
3. Coloque la muestra en su portaobjeto, con su respectivo cubre objeto, en la platina
aproximadamente en el centro de la línea de observación. Encienda la lámpara.
4. Ajuste la separación de los binoculares a su medida.
5. Controle intensidad de luz cerrando el diafragma hasta su posición intermedia.
6. Lleve el objetivo lo más cerca posible a la muestra haciendo esta observación desde el
exterior. Utilice para ello el tornillo micrométrico. Ajuste la altura del condensador
haciendo girar el tomillo micrométrico de tal suerte que la platina y el condensador
descendieran hasta que apareciera la imagen de la muestra en observación.
7. Con el tornillo micrométrico realice el ajuste fino hasta obtener una imagen ciara.
8. Para observar diferentes puntos de la muestra mueva la platina hacia adelante o hacia
atrás, hacia la derecha o izquierda con los tornillos que se encontraban bajo la misma, del
lado izquierdo.
 EXPERIENCIA DE LABORATORIO #2B VIRTUAL USO DEL MICROSCOPIO
En la enseñanza a distancia no podemos realizar prácticas conjuntamente el alumnado y los
profesores. Sin embargo, es posible facilitarles que las realicen ellos, gracias a los
magníficos microscopios virtuales de los que disponemos. Vamos a realizar una práctica
virtual.
A. Cómo usar el Microscopio
Ver el siguiente video para aprender a usar un microscopio
https://www.youtube.com/watch?v=0Tunrrm3OlM
B. Usar Microscopio Virtual 1
En el siguiente link esta el microscopio virtual que usaremos.
https://www1.udel.edu/biology/ketcham/microscope/scope.html
Como usar el Microscopio Virtual o En la plataforma https://teams.microsoft.com hay un
archivo en la carpeta Laboratorio de Microbiología Ambiental que se llama Video Ejemplo
de como usar el Microscopio Virtual 2020-04-13
a) Familiarízate con él y sigue el tutorial. Ajusta los oculares (swicht views) hasta que
veas una sola imagen. Toca los botones dirigiéndolos hacia adelante o detrás.
b) Enciende los interruptores. Mueve la platina (la bandeja en la que se colocan las
muestras) b) Busca la muestra (arriba a la derecha) con la etiqueta “letra e”. Sigue el
tutorial y utiliza los ajustes del microscopio para enfocar la “e” en cada uno de los
objetivos. Para ello, recuerda:
1. Ajusta los oculares.
2. Mueve el tornillo macrométrico y posteriormente el micrométrico para enfocar.
3. Posteriormente, una vez bien enfocado, puedes pasar al siguiente objetivo. Dibuje la
“e” tal y como aparece.
c) Selecciona las otras muestras (haz clic en una diapositiva).
 Desarrollo
Parte A.
El microscopio tiene una gran importancia en la microbiología ya que gran parte de los
conocimientos sobre los microorganismos han sido descubiertos a través del microscopio.
Microscopio óptico: este se basa en lentes ópticas, también se le conoce como microscopio
de campo claro.
Componentes de un microscopio:
 Base: se sitúa la fuente de luz.
 Brazo: es donde se fija el resto de las partes.
 Ocular: es la lente que se encarga de ampliar la imagen del objetivo.
 Objetivo: lente situada cerca de la preparación que amplia la imagen.
 Platina: se depositan las preparaciones.
 Pinza: se utiliza para fijar la platina.
 Condensador: lente que se encarga de concentrar los rayos de luz sobre la
preparación.
 Diafragma: lente que regula la cantidad de luz sobre el condensador.
 Macrométrico: se encarga de aproximar el enfoque.
 Micrométrico: consigue nitidez.
Parte B.
Muestra Información sobre la Muestra en el Muestra investigada
muestra Microscopio virtual
Letra e Es una letra minúscula
del abecedario.

Punta de raíz La raíz de la

de cebolla cebolla es un buen
material para observar
el proceso de mitosis,
puesto que en el
meristemo apical las
células se dividen a
gran velocidad.
Cápsula Es la capa con borde
bacteriana definido formada por
una serie de polímeros
orgánicos que en las
bacterias se deposita
en el exterior de
su pared celular.

Frotis de La superficie bucal

mejilla está tapizada por la
mucosa bucal, un tapiz
de células
superpuestas
formando varias capas
y unidas entre sí
formando el epitelio
plano estratificado o
no queratinizado.

Referencias
Parte A.
https://www.youtube.com/watch?v=0Tunrrm3OlM

Parte B.
https://www1.udel.edu/biology/ketcham/microscope/scope.html