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Universidad Nacional de San Agustín de Arequipa

Escuela Profesional de Agronomía


Biología Celular Vegetal
Mg. Giovanna Rodrigo Machicao

PRÁCTICA 7
EL MICROSCOPIO ÓPTICO
INTRODUCCIÓN
Dada la diversidad de seres vivos en la naturaleza, observamos que ellos pueden
ser unicelulares y pluricelulares, por lo cual para realizar un adecuado estudio es
necesario poder tener equipos que permitan dicho objetivo, es así que el empleo del
microscopio es fundamental para realizar el estudio y reconocimiento de ellos.
El microscopio óptico es el instrumento básico y fundamental para el estudio en
los laboratorios, hospitales, centros de educación e investigación ya que mediante
su uso nos permite el estudio de células y de los microorganismos.

Objetivos:
* Reconocimiento de las partes del microscopio óptico.
* Desarrollar cualidades para la manipulación de muestras visualizadas en microscopia.

Fuente:http://www.citethisforme.com/topic-ideas/biology/Microscop%C3%ADa-
15203050

4.3. Revisión Bibliográfica:


Componentes del microscopio óptico compuesto:
a) Sistema de movimiento:
- Pie: es el soporte del microscopio.
- Columna: es un mango de metal, une el pie con la parte superior del tubo, sirve
para coger y trasladar el microscopio.
- Platina: soporta el portaobjetos (muestra); puede ser móvil.

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- Tubo: lleva el ocular y el revólver; varía su ubicación de acuerdo al modelo
de microscopio.
- Revólver: lleva los objetivos.
- Tornillos macrométricos y micrométricos: movimiento del tubo o de la platina,
sirve para enfocar la muestra. Varía su ubicación.
- Carro: desplaza el portaobjetos; puede faltar y llevar un vernier.

b) Sistema de iluminación:
- Espejo o lámpara eléctrica: ilumina el campo microscópico.
- Diafragma-iris: regula la cantidad de luz del campo microscópico.
- Condensador: concentra la luz hacia el campo del microscopio.
c) Sistema de magnificación:
- Ocular: 5X, 10X, 16X y 25X.
- Objetivos: 4X, 10X, 40X, 100X (ó inmersión).
4.- Materiales y Metodología:
4.1 Materiales:
- Microscopio óptico.
- Láminas portaobjetos y cubreobjetos.
- Muestras biológicas
- Muestras con la letra “e”.

4.5.- Metodología:
4.5.1.- Reconocer y nombrar las partes del microscopio óptico.

Fuente: http://www.ictsl.net/productos/01d63694a80f7db0d/0000009d830d5746d.html

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4.5.2.- Manejo del microscopio.
Se inicia con la iluminación del campo microscópico, se continúa con el enfoque de las
preparaciones (muestra) y termina con la observación de éstas.

a) Iluminación del campo del microscopio.


- Si el microscopio tiene una lámpara eléctrica (fuente de luz): sólo se realiza la
conexión de esta a la fuente de corriente eléctrica y se mueve el interruptor.
- Si el microscopio posee un espejo, la iluminación del campo microscópico es de la
siguiente manera:
1. El objetivo de menor aumento se ubica en su posición correcta.
2. El diafragma totalmente abierto y junto con el condensador se acercan a la platina.
3. Mirando a través del ocular a la vez se mueve el espejo para reflejar la luz del
ambiente hacia el campo del microscopio. Se obtienen una iluminación intensa y
uniforme del campo. Después no se cambia la posición del microscopio.
La luz natural de toma preferentemente de una ventana y la artificial de una lámpara
eléctrica.

b) Enfoque: para enfocar una preparación (muestra) se debe:


1. Colocar el portaobjeto sobre la platina, la preparación y la etiqueta hacia arriba en
el centro del orificio de la platina (centrar la preparación), sujetarla con las
pinzas. Con el carro podemos movilizar la preparación sobre la platina.
2. Enfocar la preparación.
3. Las imágenes pueden verse borrosas, en tal caso se aclara la visualización mediante
los tornillos micrométricos, pero siempre mirando a través del ocular.
Durante del enfoque y la observación de las muestras se debe tener cuidado de
no romper o dañar la preparación o el portaobjetos.

c) Observación de una preparación.


Luego del enfoque de la preparación se continúa con la observación de la superficie
de la muestra. Se puede desplazar el portaobjetos, se observa y mejora el enfoque
mediante el uso de los respectivos tornillos y variando la iluminación del campo
microscopio.
Es preferible iniciar la observación de las muestras usando el objetivo de menor
aumento.

d) Cambio de objetivo: se realiza con la finalidad de conseguir el mayor tamaño de


las imágenes de la estructura de la muestra. Para el cambio de objetivos se debe
recordar:
1. Centrar la parte de muestra que será observada con el nuevo objetivo.
2. Alejar la muestra de la lente frontal y el objetivo deseado se desplaza a su ubicación
correcta. Para el enfoque con los diferentes objetivos se considera por ejemplo la
distancia entre la superficie de la laminilla y la lente frontal, que disminuye cuando
aumenta la magnificación del objetivo.
3. Finalmente se realiza el enfoque. Continuar con la observación

Para el uso del objetivo de inmersión, se procede básicamente como en el caso


anterior, pero en este caso se usa el aceite de inmersión. Se debe recordar que después
de centrada la zona de interés de la preparaciones coloca una gota pequeña de aceite
de inmersión sobre la laminilla de la preparación y efectúa un nuevo enfoque (no

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romper la preparación, la lente de inmersión se hallará sumergida en el aceite).
Continuar con la observación y para observar con el objetivo de inmersión los
movimientos de los tornillos deben realizarse más lentos.
Se debe recordar que en el momento de acercar la lente frontal del objetivo a la
muestra (o está a la lente), se debe mirar por un lado del tubo para no dañar la
preparación.

E. Cálculo del tamaño de la imagen de una estructura.


El tamaño aproximado de la imagen de la muestra que se observa se calcula
multiplicando el valor del ocular por el valor del objetivo que utiliza.
- Para un ocular 10x y si se usa un objetivo 10, el tamaño final de la imagen es 100
aumentos (diámetros).
- Para un ocular 10x y un objetivo 50X, será 500 aumentos.
- Con un de 10x y un objetivo 100X, será 1000 aumentos.

F.- Uso del vernier (carro).


Las reglas del carro están graduadas (vernier) y funcionan como un sistema de
coordenadas que permite ubicar la superficie de una zona de la muestra que fue
observada. Antes de retirar el portaobjetos (con la preparación) de la platina, se anotan
los valores que indican ambas escalas. Si en otro momento se desea observar la misma
superficie de la preparación, se coloca ésta en la platina, se sujeta con las pinzas, y se
mueven las reglas del carro hasta los valores anotados y luego se enfoca la
preparación.

G.- Cuidado del microscopio


Se debe recordar:
1. El microscopio se transporta usando las manos y ligeramente inclinado hacia la
persona.
2. La limpieza del aparato se realiza con una franela o lienzo limpio.
3. No ensuciar las lentes ni tocarlas con los dedos. Las lentes se limpian con un
lienzo suave o con papel lente e impregnado en xilol o alcohol.
4. No forzar los movimientos de las partes del microscopio. Cuando se presenta
algún problema durante el manejo del microscopio, consultar al profesor.
5. Colocar el portaobjeto sobre la platina (con la laminilla hacia arriba).
6. Al finalizar las observaciones se apaga el sistema de iluminación, se limpia el
microscopio (incluyendo las lentes). El objetivo de menor aumento se ubica en el
eje del microscopio, y éste se guarda en el estante o se protege con una funda.

Teniendo en cuenta las recomendaciones anteriores se procederá a realizar la


observación de la muestra correspondiente.

1. Se recortará una letra “e” pequeña de un texto y con una gota de agua adherirla en
un portaobjeto.
2. Colocar el portaobjeto en la platina, previamente iluminar el microscopio.
3. Realizar el procedimiento para un buen enfoque, mirar a través del ocular hasta
v isualizar la imagen de la muestra en el campo microscópico.
Uso de microscopio (Experiencia de la letra e)
https://www.youtube.com/watch?v=H75_-bgcavY

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5. Resultados y discusiones.
Dibuje la letra observada, desplazar la muestra a la derecha e izquierda, arriba,
abajo y responda:
A. ¿Qué posición tiene la letra de acuerdo con la posición inicial que se colocó en la
platina? ¿Porque?

B. ¿Qué sucede al desplazar la muestra a la derecha e izquierda, arriba y abajo?


¿Porqué?

Conclusiones.

Videos de apoyo
Video: Mira atentamente los videos y al final se realizará un reconocimiento del
microscopio.

Lentes y objetivos
https://www.youtube.com/watch?v=zWlz7SJFQz8
Microscopio óptico:
https://www.youtube.com/watch?v=9o5Nbn1VYK4
Sistema óptico
https://www.youtube.com/watch?v=HB3BnhhN2hM
Uso de microscopio (Experiencia de la letra e)
https://www.youtube.com/watch?v=H75_-bgcavY
Visualización de muestras
https://www.youtube.com/watch?v=thA_mcyYlo4

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CUESTIONARIO
1.- ¿Qué es un microscopio óptico y cuál es su utilidad?

2. Detalle que comprende y cuál es la utilidad de los sistemas de: Movimiento,


Iluminación y Magnificación.
3.-¿Qué es la resolución y magnificación? Y ¿Qué aplicaciones tiene en la
investigación científica?
4.- Señale y describa el significado de cada uno de los rótulos que se halla en los
objetivos del revolver del microscopio.
5.- Realice un cuadro comparativo de los diferentes tipos de microscopia y de
por lo menos un ejemplo de su aplicación.

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PRÁCTICA N° 8
RECONOCIMIENTO DE CELULA ANIMAL Y VEGETAL

1. Introducción.
En la diversidad de seres vivos podemos diferenciar dos grandes grupos las plantas y
los animales en los cuales hallamos diversidad de formas, los cuales habitan en
diferentes hábitats y se interrelacionan de diferentes maneras, por ejemplo si miramos
nuestro jardín podremos observar diversidad de plantas, desde el pasto hasta quizá
árboles de mayor tamaño, y al revisar debajo de las piedras posiblemente
observemos escarabajos, o si observamos en las flores es posible hallar abejas que son
atraídas por los colores de estás, en dicha observación es posible preguntarnos ¿Las
flores y las abejas tendrán la misma conformación celular?
Para aclarar nuestras dudas es necesario observar las células que conforman a ambos
seres vivos y al analizar sus elementos celulares nos daremos cuenta que no son las
mismas estructuras celulares y lograremos reconocer características y componentes
propias de cada tipo de célula.

Objetivos:
*Estudiar la morfología celular de una muestra animal y vegetal.
*Reconocer los componentes celulares de la célula animal y vegetal.
Revisión Bibliográfica: (A completar por el estudiante)
Célula Animal: estructura celular.
Célula Vegetal: estructura celular
Diferencias entre la célula animal y vegetal.

2. Materiales:
1. De laboratorio: Láminas porta y cubreobjeto, lanceta, hisopo estéril o palillo
estéril, mechero, bisturí o cúter microscopio óptico.
2. Soluciones y reactivos: Colorantes básicos, azul de metileno, pizeta con agua destilada,
3. Biológico: muestra de tejido animal (Tejido epitelial, sanguíneo, etc.) y tejido
vegetal (catáfila de cebolla, tubérculo de papa, etc.).

3. Procedimiento:
Observación de célula animal, tejido epitelial de la cavidad bucal. Tinción simple.
1. Con el debido orden y limpieza raspar suavemente con un palillo limpio la cara interna
de la mejilla, en la cavidad bucal.
2. En un portaobjeto coloque unas dos o tres gotas de agua destilada y enjuague el palillo,
homogenizando y extendiendo las gotas sobre el portaobjetos, este procedimiento debe
ser de la forma más extendida posible.
3. Con la ayuda de un mechero fije la muestra del tejido epitelial, para ello debe flamear
la muestra con el mechero sin que llegue a quemar el dorso de la mano con el
portaobjetos, una vez que haya secado la muestra del portaobjeto.
4. Agregar unas gotas de azul de metileno, dejando actuar el colorante 2 o 3 minutos.
5. Elimine el colorante sobrante y lavando con agua hasta que no suelte color.
6. Utilizar un cubreobjetos colocándolo suavemente.
7. Proceda a observar en el microscopio y dibuje sus resultados.

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Observación de célula vegetal, catáfila del bulbo de una cebolla Tinción simple.
1. Con el debido orden y limpieza, corte con un bisturí o cúter la catáfila de una cebolla
un tamaño aproximado de 1 cm cuadrado, de está desprende el tejido epidérmico
2. En un portaobjeto coloque unas dos gotas de agua destilada, para tener un mejor
contraste en otro cubreobjeto reemplace el agua destilada por una o dos gotas de azul
de metileno
3. Coloque delicadamente una lámina cubreobjeto en una posición de un ángulo de 45°,
presione suavemente para evitar la formación de burbujas
4. Proceda a observar en el microscopio y dibuje sus resultados.

Resultados y discusiones. (Dibuje sus observaciones)

Conclusiones.

Videos de apoyo
La célula y su funcionamiento (15 min)
youtube.com/watch?v=Gz8d0ITAGpk
Célula epitelial de cavidad bucal
https://www.youtube.com/watch?v=lbaPF5GGAQ4
Célula sanguínea https://www.youtube.com/watch?v=7-IUOuuJ3hU
Célula vegetal catáfila de cebolla
https://www.youtube.com/watch?v=RaS34Tbxj0c
Células vegetales https://www.youtube.com/watch?v=3XeSczVVUYo
Célula vegetal https://www.youtube.com/watch?v=m4WOyJX9M-8
Célula vegetal y animal (10 min)
https://www.youtube.com/watch?v=AsBwcGa7XZQ

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CUESTIONARIO
1. Elabore un cuadro comparativo de los componentes celulares de la célula animal
y vegetal, además detalle las similitudes y las diferencias de ambas.
2. ¿Qué forma de células se pueden encontrar en el reino plantae? Precise y
ejemplifique.
3. ¿Qué forma de células se pueden encontrar en el reino animalia? Precise y
ejemplifique.
4. ¿Todas las células eucarióticas tienen núcleo? Sustente su respuesta y
ejemplifique.

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PRÁCTICA N° 9
RECONOCIMIENTO DE ORGANULOS CELULARES
1. Introducción.
La célula es la unidad estructural y funcional de todo ser vivo, teniendo esta
consideración quizá te hayas preguntado ¿Cómo lo hace?, bien, al interior de la célula
existen orgánulos cumpliendo cada una de ellas funciones específicas, como por ejemplo
los ribosomas sintetizan proteínas, el núcleo almacena la información genética y
coordinación de la actividad celular, etc.
Entonces en conjunto todos los orgánulos colaboran de forma integral con el
funcionamiento de la célula y gracias a ello pueden elaborar las distintas sustancias que
permiten el normal funcionamiento de la célula conllevando que todo el organismo vivo
este en homeostasis.
Objetivos:
*Identificar los orgánulos que están presentes en una célula animal y vegetal.
*Analizar el rol que desempeñan los orgánulos celulares y detallar su importancia en el
ser vivo.

Revisión Bibliográfica: (A completar por el estudiante)


Orgánulos celulares de la célula animal.
Orgánulos celulares de la célula vegetal.

3. Materiales:
*Bibliografía oficial y videos de la web

3. Procedimiento:
Realice un listado de todos los orgánulos presentes en la célula vegetal y animal.
Luego de ello por cada orgánulo detalle:
*Descubridor
*Método o técnica que sirvió para su estudio
*Ubicación
*Estructura
*Composición
*Funciones

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*Peculiaridades
*Acompañe con esquemas para cada caso

Resultados y discusiones:
Dibuje o adjunte esquemas de sus observaciones, recuerde que si no es inédito debe
colocar la fuente.

Conclusiones.

Videos de apoyo:
Estructura celular (Célula y orgánulos) Introducción
https://www.youtube.com/watch?v=15iDep-ZINY
Célula eucariótica (14 min, 2021)
https://www.youtube.com/watch?v=pH1GM4wCLDA
Célula eucariótica y sus organelos
https://www.youtube.com/watch?v=pn4YoQqKhGs&t=18s
Estructura celular (Célula y orgánulos)
https://www.youtube.com/watch?v=15iDep-ZINY

CUESTIONARIO
1.- Realice un cuadro comparativo de los orgánulos presentes en la célula vegetal y
animal.
2. Detalle las características de los orgánulos y sus funciones que desempeñan en los
seres vivos.

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PRÁCTICA N° 10
TRANSPORTE A TRAVES DE LA MEMBRANA CELULAR

Introducción
La membrana celular es la estructura que se halla presente en todas las células, en ella se
destaca su composición de proteínas, lípidos y glucoproteínas, ya que estos elementos le
confieren características especiales, que le permiten el gran dinamismo que se halla en
dicha estructura, de tal forma que hay una comunicación fluida entre el medio interno y
externo de la célula. En la membrana celular están presentes los fosfolípidos que le
confieren características anfipáticas (anfi=ambos), es decir características hidrofóbicas
(repelen al agua) e hidrofílicas (afinidad por el agua); las proteínas pueden ser periféricas,
integrales y transportadora, siendo estás las que determinan que moléculas entran o salen
de la célula.
La membrana es elástica, ultra delgada, con permeabilidad selectiva, entre otras
cualidades, debido a dichas cualidades a través de la membrana se tiene dos tipos de
transporte: pasivo y activo, así el trasporte pasivo no gasta energía y pueden ser mediante
el proceso de osmosis y difusión; en el transporte activo hay gasto de energía debido que
mediante este tipo de trasporte vencen barreras de concentración, es decir el movimiento es
de un lugar de menor concentración a otro de mayor concentración.
El comportamiento del transporte de sustancias dependerá del medio circundante y del tipo
de célula, es así que, si sometemos a una célula animal o vegetal en un medio hipotónico,
isotónico e hipertónico, se observará diferentes comportamientos, cambiando el aspecto,
tamaño y comportamiento celular.

Objetivos
a. Identificar los cambios celulares de una célula animal y vegetal sometido a un medio
hipotónico, isotónico e hipertónico.
b. Describa las similitudes o diferencias que ocurren en la célula animal y vegetal sometido
a un medio hipotónico, isotónico e hipertónico.

3. Materiales y métodos
Material biológico: catáfila de cebolla (célula vegetal) y tejido sanguíneo (eritrocito) tejido
epitelial (célula animal).
Material de laboratorio: Microscopio óptico, bisturí, lanceta estéril, palillo o hisopo estéril,
soluciones salinas al 0.5%, solución hipotónica, al 0.9%, solución isotónica o agua
destilada y solución al 5%, medio hipertónico, lámina portaobjetos, laminillas cubreobjeto,

En la siguiente tabla se puede apreciar las concentraciones que se tienen para cada
concentración salina.

Solución HIPOTÓNICO ISOTÓNICO HIPERTÓNICO


cc. de soluto 0.5% 0.9% 5%
Célula animal
Célula vegetal

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Resultados y discusiones:

Conclusiones.

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Vídeos de apoyo
Osmósis
https://www.youtube.com/watch?v=xcDNAxwIMkY&t=306s
Osmosis en Elodea y glóbulos rojos
https://www.youtube.com/watch?v=NktJagueeLc
Identificación de cloroplastos y ciclosis en Elodea sp (planta acuática), Vídeo
ilustrativo para reconocer la morfología celular de la Elodea.
https://www.youtube.com/watch?v=znwgLb5yBL0
Transporte a través de la membrana en solución hipotónica, isotónica e hipertónica
en célula vegetal (Soluto: sacarosa. Concentraciones de 1%, 20% y 80%) Universidad
Latina de Costa Rica (5.20 min)
https://www.youtube.com/watch?v=wLIQxcU_KXw
Transporte a través de la membrana en solución hipotónica, isotónica e hipertónica
en célula animal (Soluto: sacarosa. Concentraciones de 1%, 20% y 80%) Universidad
Latina de Costa Rica (8.05 min)
https://www.youtube.com/watch?v=0G5jquuWxAI
Experiencia macroscópica utilizando huevo de gallina (COMPLEMENTO, 5 min.)
https://www.youtube.com/watch?v=Vv--9WIxYtA

CUESTIONARIO

1. ¿Qué es una membrana biológica?


2. Detalle los componentes que están presentes en una membrana celular.
3. De acuerdo con los componentes de la membrana analice y explique las
peculiaridades que le confieren.
4. ¿Qué es la presión osmótica y cuál es su importancia en el transporte a través de
la membrana?

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