Pérez López Diego 2IM2

Morales Arizmendi Saul 2IV2

PRACTICA 5. CROMATOGRAFIA
Colocar de manera vertical la
columna cromatográfica

1)con ayuda de una pinza universal

Introducir un pequeño trozo de algodón

hasta la base con ayuda de un agitador

1) 1 cm de diámetro

Por la parte superior adicionar una

suspensión de silica gel 4g en una
mezcla C6H14 y C4H8O2 (1:1) 30mL

Llenar en su
totalidad la Introducir una capa de 1 cm de Na2SO4
columna sobre la superficie de la silica gel
cromatográfica
con el disolvente. Dejar gotear el
disolvente y esperar
Colocar sobre la capa de Na2SO4 un hasta que el disolvente
disco de papel filtro quede ligeramente
arriba de la fase
estacionaria
Mantener el goteo
hasta que los 10 gotas de concentrado de espinaca
pigmentos sobre el papel filtro
penetren en la
silica.
1) No derramar sobre las paredes de la
columna
Abrir la llave para
Llenar lentamente la columna con el permitir el
primer eluyente C6H14 y C4H8O2 (7:3) desarrollo del
30ml cromatograma.

Recoger la primera fracción colorida

en tubos de ensayo y cubiertos con
papel aluminio.

Finalizar cambiando el eluyente

Cambiar el eluyente a la mezcla de por C4H8O2 y CH3OH (1:1) 30ml
C6H14 y C4H8O2 (1:1) 30ml recoger la recoger la fracción en tubos de
fracción ensaye con papel aluminio
Pérez López Diego 2IM2
Morales Arizmendi Saul 2IV2
PRACTICA 5. CROMATOGRAFIA

PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL 2. SEPARACION DE PIGMENTOS DEL EXTRACTO DE

CHILE GUAJILLO

Montar un sistema de
cromatografía en columna

Repetir el procedimiento hasta colocar el

extracto de chile guajillo en la columna
sobre el papel filtro(10 gotas)

Continuar de la misma
Llenar la columna con el eluyente de forma que con el
C6H14 y C4O8H2 (8:2) 30mL extracto de espinaca
(del menos polar al
más polar)

PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL 3: SEPARACION POR

CROMATOGRAFIA EN PLACA
Dibujar con un lápiz una línea 1.0cm
de distancia del borde inferior y 0.5
en el borde superior
1) En una cromatoplaca de 5 y 2cm

Sobre la línea inferior en 3 puntos equidistantes

colocar 2 de las fracciones más coloridas de la
separación de pigmentos y 1 de la mezcla
original(espinaca o chile)
2) Colocar con una micropipeta elaborada
con un capilar

Dejar secar y desarrollar el cromatograma en una Revisar que no rebase

mezcla C6H14 y C4H8O2 7:3 para espinaca y 8:2 los puntos de
para los pigmentos de chile guajillo. aplicación y que eluya
hasta 0.5cm antes del
borde superior de la
placa.
Sacar , secar , observar y
Calcular los valores de Rf
medir la distancia recorrida
para cada componente
de cada componente