David Mateos Jaén

Práctica 8: determinación de triglicéridos.

Introducción.
Los triglicéridos son ésteres de glicerol y ácidos grasos que provienen de la dieta o son
sintetizados principalmente en el hígado. Los triglicéridos se transportan en el plasma en
las lipoproteínas y son utilizados por el tejido adiposo, músculo y otros. Su principal
función es suministrar energía a la célula.

Fundamento.
lipasa
Triglicéridos + H2O → Glicerol + ácidos grasos

glicerol quinasa
Glicerol + ATP → Glicerol-3-P+ADP.

G – 3 – P - oxidasa
Glicerol-3-P + O2 → Dihidroxiacetona – P+ H2O2

peroxidasa
2H2O2+4 – Aminoempirina + 4 – clorofenol → Quinonaimina + 4H2O.

Los triglicéridos presentes en la muestra originan, según las reacciones acopladas

descritas a continuación, un complejo coloreado que se cuantifica por espectrofotometría.

Objetivo.
El objetivo principal de esta prueba es determinar de forma cuantitativa la cantidad de
triglicéridos que hay en sangre.

Equipo, materiales y reactivos.

➢ Papel de filtro.
➢ Rotulador.
➢ Toallitas limpiadoras.
➢ Cubetas.
➢ Gradillas de corcho.
➢ Micropipetas de 1000ul y de 10ul.
➢ Gradilla de tubos eppendorf.
➢ Tubos eppendorf.
➢ Puntas de pipetas
➢ agua destilada
➢ parafilm.
➢ Espectrofotómetro.
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Procedimiento.
➢ Limpiamos la mesa de trabajo.
➢ Colocamos el papel de filtro.
➢ Nos colocamos los guantes y la bata.
➢ Ponemos los materiales en la zona de trabajo.
➢ Colocamos las cubetas en la zona de trabajo y rotulamos cada una de ellas.
➢ Verter 200ul de muestra y 500ul de reactivo A en un eppendorf.
➢ Esperar 10 minutos para que se disuelvan todas las lipoproteínas y precipiten todas
ellas menos el HDL.
➢ Colocamos el eppendorf en una centrifuga siempre los tubos deben estar
enfrentados para no dañar la centrífuga, a una velocidad de 40x1000 revoluciones.
➢ Preparamos el patrón en un eppendorf, vertemos 1000ul de reactivo A y 100ul de
patrón standard.
➢ Preparar la muestra en un eppendorf, añadimos 1000ul de reactivo B y 100ul de
sobrenadante.
➢ Esperamos 30 minutos
➢ Encendemos y calibramos el analizador
➢ Preparar el analizador a 500 nm, colocamos el agua destilada y el reactivo B para
realizar el análisis.
➢ Apuntamos el resultado.
➢ Recogemos la zona de trabajo y apagamos el analizador.

Resultados.
Cm = 0,093/0,164 = 113,41 mg/dl

INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS:

Los valores normales de triglicéridos son aquellos que se encuentran por debajo de 150
mg/dl en este caso ya que nuestro paciente tiene 14 años por lo que un valor de 113,41
encuentra dentro de los valores normales.

Conclusión.
Los triglicéridos son grasas presentes en algunos alimentos, y también fabricados por el
hígado. Los triglicéridos absorbidos en la digestión, son transportados a los tejidos, donde
se almacenan en forma de grasa, constituyendo la principal reserva de energía del
organismo. Esta energía es liberada cuando los músculos y cerebro la necesitan.
Los triglicéridos son transportados a todo el organismo para dar energía o bien para ser
almacenados como grasa.
La prueba de triglicéridos es un análisis que se utiliza para determinar el nivel de estos en
la sangre, así como también para evaluar la función hepática y un posible riesgo
cardiovascular.
Su aumento es relativamente inespecífico. Diversas dolencias, como ciertas disfunciones
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hepáticas (cirrosis, hepatitis, obstrucción biliar) o diabetes mellitus, pueden esta asociada
con su elevación.

Incidencias y precauciones para la optima realización

de la prueba.
No se han encontrado incidencias al realizar la práctica.