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Microbiología “C”
Practica #3
Tinción de Gram
Basantes Vergara Joel Alejandro.
Este informe de laboratorio es para que reflejes lo que llevaste a cabo y aprendiste en esta simulación, y para
practicar tus habilidades de comunicación científica escrita.
Método de la tinción de gram: es una técnica de tinción diferencial que separa casi todas las especies de bacterias
en dos grandes grupos según las diferencias estructurales en su pared celular. La pared celular es esencal, puesto
que protege y da forma a la bacteria y juega un papel importante en la introducción de enfermedades en el
huésped afectado, también puede servir da diana para ciertos antibióticos.
Las bacterias que tienen una capa gruesa de peptidoglicano retienen la tinción primaria, el cristal violeta, y se
dice que son gram positivas.
Aquellas que tienen una capa fina de peptidoglicano y una membrana externa, no retienen la tinción primaria y
se dice que son gram negativas.
La tinción de gram no identifica especies individuales dentro de un grupo, para ello, necesariamente realizar
pruebas microbiológicas adicionales.
Recoger la muestra de bacterias a estudio mediante un frotis. Extender dicha muestra sobre un portaobjetos y
ponerla a secar en una placa calefactora a 60 °C. Fijar la muestra mediante un alcohol etilico (metanol). Aplicar
el cristal violeta sobre el portaobjetos y esperar un minuto. Enjuagar la muestra con agua y aplicar un fijador del
violeta como el yodo, formando un complejo insoluble en agua capaz de Integrantes Paralelo Carrera
Joel Alejandro Basantes Vergara C Ing. Química penetrar en la pared de las células bacterianas. Lavar de nuevo
el portaobjetos con una mezcla de alcohol y acetona durante unos segundos. Opcionalmente se puede añadir una
tinción de safranina para distinguir las gram negativas que aparecerán bajo el microscopio (en lugar de incoloras)
con un tono rosado, lavar con agua. Ya se puede observar la muestra al microscopio donde se visualizarán de
color violeta las gram positivas y de color rosado las gram negativas.
Pista: Puedes utilizar la pestaña «MEDIOS» en el LabPad para encontrar imágenes relevantes de la
simulación. También puedes tomar capturas de pantalla mientras realizas la simulación.
En este caso tenemos como resultado en que las bacterias gram positivas los complejos insolubles se quedan
atrapados entre las capas de este, sin disolver y dando la coloración morada. En cambio, en las bacterias gram
negativas estos compuestos si se disuelven y pierden tinción. En el microscopio se verían y se diferenciarían el
tipo de gram.
Es una técnica sencilla ya que se basa en el uso de un cristal violeta que funciona como tinción, el cual sirve para
identificar una bacteria, y esto nos permite observar e identificar de mejor manera el tipo gram positivo o
negativo.