Código: FR-GME-025

GUÍA PROTOCOLO DE PRÁCTICA Versión: 04

Proceso: Gestión de los Fecha de emisión: Fecha de versión:

Medios Educativos 26-Mar-2010 17-Ene-2022

Sección 1. DATOS DE LA ASIGNATURA

Nombre de la asignatura Nombre del docente

MICROBIOLOGÍA Y LABORATORIO
Nombre de la práctica
10. DETERMINACIÓN DE MICROORGANISMOS INDICADORES DE CONTAMINACIÓN FECAL EN AGUAS

Fecha de práctica Hora No. de grupos

Objetivo general
Evaluar la calidad del agua mediante indicadores microbiológicos.
Sección 2. LISTADO DE MATERIALES REACTIVOS Y EQUIPO

Cant. Materiales Cant. Equipos Cant. Reactivos Concentración

Equipo de Filtración por Agua destilada
2 Filtros de membrana de 0,45 μm 1 2L
membrana estéril

1 Erlenmeyer de 100 mL estéril 1 Incubadora 2 Agar Chromocult

Pinzas estériles (preferiblemente Lámpara de fluorescencia 366 Tubo de agua

1 1 2 0,1% p/v
planas) nm peptonada (9 mL)
Tubos con caldo
1 Probeta de 100 mL estéril 1 Brila y campana de
Durham

1 Pipeta de 10 o 5 mL estéril

1 Pipeteador

1 Gradilla

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Sección 3. PROCEDIMIENTO (preferiblemente en diagrama de flujo)

1. Evaluación de aguas potables por AquaCHROM®

• Agite la muestra.
• Mida 100 mL de la muestra con la probeta y transfiéralos al Erlenmeyer de 100 mL.
• Adicione la cápsula de AquaCHROM®. Homogenizar.
• Incubar 24 h-35°C

2. Filtración por membrana

• Realice el montaje del equipo de filtración (ver figura).

• Ubique el filtro de membrana con la cuadricula hacía arriba.

• Adiciones 30 mL de agua destilada estéril y encienda el equipo (bomba de
vacío).
• Adicione 100 mL de la muestra (tenga en cuenta dilución indicada por el
docente si es necesario)
• Encienda el equipo de filtración nuevamente.
• Transfiera la membrana filtrada con la ayuda de una pinza al agar
Chromocult.
• Incube a 35°C por 24 horas.

Coliformes totales: colonias rojas y colonias azules

Coliformes fecales: colonias azules
Salmonella: colonias azul turquesa

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3. Técnica del número más probable

• De la muestra tome 1 mL e inocule sobre el caldo Brilla.
• Agite con cuidado de no formar burbujas en la campana Durham.
• Incube a 37°C por 24 a 48h.

Negativo: ausencia de turbidez y/o gas.

Positivo: turbidez y presencia de gas
El crecimiento se evidencia por la presencia de turbidez en el medio
de cultivo. Puede existir viraje del color del medio de cultivo al color
amarronado o amarillo.

Sección 4. DISPOSICIÓN DE RESIDUOS

Los elementos de protección personal serán depositados en la cuenca roja de guantes, gorros y tapabocas respectivamente.
Los agares serán esterilizados y depositados en la bolsa roja de medios de cultivo.

Sección 5. POLÍTICAS DE LA PRÁCTICA

• La hora de entrada será hasta quince minutos después de iniciada la práctica.

• Conocer y aplicar el reglamento del laboratorio.
• Es obligatorio para cualquier usuario del laboratorio portar y utilizar los elementos de protección personal (bata,
guantes, gafas, cofia, tapabocas y una toalla de manos).
• El estudiante debe consultar con anterioridad las fichas de seguridad de los reactivos que se van a utilizar durante la
práctica.
• La práctica del laboratorio inicia una vez llegue el docente.
• El profesor debe radicar en la jefatura de laboratorio esta guía con ocho (8) días de anterioridad, ya sea en medio
físico o por correo electrónico.
• La entrega de materiales, equipos y reactivos se realizará hasta quince (15) minutos después de empezada la clase,
igualmente la entrega de estos debe realizarse diez (10) minutos antes de finalizar la práctica experimental.
• El laboratorio no realizará entrega de ningún tipo de material a los estudiantes después del tiempo estimado.
• Cualquier daño o pérdida de equipos o materiales será responsabilidad del estudiante que haya causado el daño. Sin
embargo, se recomienda al docente la supervisión constante de los estudiantes. En caso de ausencia del docente en el
laboratorio informar a la Jefatura del Laboratorio o a los Laboratoristas para mantener controlada la práctica experimental.
• En el caso de cancelación por parte del docente de la práctica experimental informar a la Jefatura del Laboratorio con
suficiente anterioridad para poder disponer del laboratorio.

PROFESOR LABORATORIO
Fecha de diligenciamiento: Fecha de radicación:
Firma Firma

Pasos para el diligenciamiento de este formato

1. Esta solicitud debe ser diligenciada a mano, en letra imprenta clara, con tita negra, evitando enmendaduras y/o
tachones.
2. Debe ser diligenciado por el docente responsable de la práctica especificando en cada sección los datos de esta.
3. El docente debe dar a conocer a sus estudiantes con antelación en qué consiste la práctica y los elementos que se
utilizarán en ella.

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