CULTIVO

DE MICROALGAS
LABORATORIO DE PROCESOS II

Integrantes: Mario Cortez

Profesor: Susana pereira

11 de diciembre del 2017

Índice
RESUMEN ............................................................................................................................................ 2
INTRODUCCIÓN ................................................................................................................................... 3
OBJETIVOS ........................................................................................................................................... 4
MATERIALES Y PROCEDIMIENTO......................................................................................................... 5
CÁLCULOS Y RESULTADOS ................................................................................................................... 6
CONCLUSIÓN ....................................................................................................................................... 9
BIBLIOGRAFÍA .................................................................................................................................... 10

11 de diciembre del 2017

 RESUMEN

En el presente laboratorio se realizo un cultivo de microalgas para determinar las distintas etapas
de crecimiento de ellas. Para ello se cuenta con 5 matraces el cual cada uno de ellos contiene 50 ml
de medio de cultivo 790, posteriormente y manteniendo el cuidado que requiere la utilización de
materiales estériles, se vertió el inoculo dentro de cada matraz para luego llevarlas al shaker
calefaccionado. Para seguir el crecimiento del cultivo las muestras son puestas en tubos centrifuga,
previamente secados y pesados, en donde cada una será centrifugada a 4000 RPM por 10 minutos
en una centrifuga LABNET Z 150A. El centrifugado que queda en los tubos contiene las células de
microalgas, las que posteriormente serán secadas en una estufa WTC Binder a 105°C por 24 horas.
Una vez secada cada muestra estas son llevadas a una balanza analítica para pesarlas y finalmente
determinar la biomasa.

11 de diciembre del 2017

 INTRODUCCIÓN

El término microalga engloba un grupo muy diversificado de microorganismos fotosintéticos,

procariotas y eucariotas, catalizadores del proceso de fijación del CO2, convirtiéndolo en materia
orgánica. Pese a las grandes diferencias estructurales, fisiológicamente ambos tipos de microalgas,
procariotas y eucariotas, son similares y poseen un metabolismo fotosintético similar al de las
plantas superiores.

Las microalgas, seres unicelulares muy variados en tamaño y forma, existen en casi todos los
hábitats conocidos. La mayor parte pertenecen a hábitats acuáticos, tanto marinos como
dulceacuícolas, aunque algunas viven en tierra. Los mares y océanos contienen enormes cantidades
de algas planctónicas, estimándose que el 90% de la fotosíntesis total de la Tierra es realizada por
estos vegetales acuáticos. El número de taxones es elevado, se cuentan hasta ahora más de 30.000
especies de microalgas sobrepasando las 10.000 especies de cianofíceas y clorofíceas,
representando en la actualidad un recurso prácticamente inexplorado, ya que solamente unas 50
especies han sido estudiadas con detalle desde el punto de vista fisiológico y bioquímico.

Uno de los sistemas más importante para el estudio y la identificación de estos microorganismos es
observar su crecimiento en sustancias alimenticias artificiales preparadas en el laboratorio. El
material alimenticio en el que crecen es el medio de cultivo. Para que las bacterias, levaduras y
microalgas crezcan adecuadamente en un medio de cultivo artificial debe reunir una serie de
condiciones como la temperatura, humedad y presión de oxigeno adecuado, así como un grado
correcto de acidez o alcalinidad. Un medio de cultivo debe contener los nutrientes y factores de
crecimiento necesario y debe estar exento de todo microorganismo contaminante.

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 OBJETIVOS
OBJETIVO GENERAL

 Realizar un cultivo de microalgas en reactor batch con la finalidad de identificar las distintas
etapas de crecimiento.

OBJETIVOS ESPECÍFICOS

 Determinar las fases de crecimiento

 Determinar la máxima concentración de biomasa.
 Realizar la curva de crecimiento de un cultivo de microalgas.

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 MATERIALES Y PROCEDIMIENTO
MATERIALES

 Matraz Erlenmeyer
 Mechero
 Algodón
 Alcohol (solución 70%)
 Tubos centrifuga
 Estufa WTC Binder
 Centrifuga LABNET Z 15A.
 Balanza analítica.
 Shaker

PROCEDIMIENTO

 APLICACIÓN DEL INÓCULO

Manteniendo el cuidado de los materiales estériles para no contaminarlos, cada grupo debe
verter el inóculo dentro del matraz, previamente rotulado con el nombre o numero del
grupo. Posteriormente coloque el matraz en el shaker calefaccionado anotando la hora de
inicio de la incubación.

 TOMA DE MUESTRA
Para seguir el crecimiento del cultivo se deben tomar muestras de 100 ml en tubos
centrifuga, a determinados intervalos de tiempo (24 horas), por un periodo total de 5 días.

 ESTIMACIÓN DE BIOMASA
La biomasa será determinada por peso seco, agregando muestras de cultivo a cada matraz
con una pipeta aforada estéril. Las muestras serán puestas en tubos centrifuga,
previamente secado y pesados, y serán secados a intervalos de 24 horas durante un periodo
de 5 días, cada muestra será centrifugada a 4000 RPM por 10 minutos. El centrifugado que
queda en el tubo contiene las células de microalgas, las que posteriormente serán secadas
en una estufa a 105 °C por 24 horas, luego los tubos son llevados a un desecador, para
posteriormente ser pesados en una balanza analítica.

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 CÁLCULOS Y RESULTADOS
FORMULA

 Para determinar la biomasa se ocupará la siguiente ecuación:

( 𝑩−𝑨 )∗𝟏𝟎𝟎𝟎
S=
𝑽
A: masa del tubo seco (g)
B: masa del tubo mas muestra seca a 105 °C (g)
V: volumen de muestra (ml)
S: biomasa (g/L)

DATOS OBTENIDOS

muestras Peso sin muestra (g) Peso con muestra (g)

Tubo N° 1 10,2140 10,4166
Tubo N° 2 10,2024 10,4199
Tubo N° 3 10,2526 10,5029
Tubo N° 4 10,1921 10,3928
Tubo N° 5 10,1028 10,3007

CÁLCULOS DE LA BIOMASA

muestras Biomasa (g/L) días

Tubo N° 1 4502,22 0
Tubo N° 2 4833,33 1
Tubo N° 3 5562,22 2
Tubo N° 4 4460,00 3
Tubo N° 5 4397,78 4

Curva de crecimiento determinada por la biomasa mediante el método del peso seco.

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  Fase de latencia: Periodo de adaptación del microorganismo a un nuevo medio de cultivo.
 Fase exponencial: aumento regular de la población que se duplica a intervalos regulares de
tiempo.
 Fase estacionaria: el crecimiento se detiene por agotamiento de nutrientes, por
acumulación de productos tóxicos, etc.
 Fase de declinación: en esta fase se observa el número de células que mueren es mayor
que el número de células que se dividen.

DESARROLLO

1.- realizar un diagrama de la metodología aplicada

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2.- determinar ventajas y desventajas de la metodología empleada.

Ventajas:

 Permite un mejor control y registro de los parámetros fisicoquímicos.

 Disminuyen los problemas presentes en los sistemas de cultivos abiertos.
 Permite realizar cultivos hiperconcentrados.
 Es una metodología rápida y eficaz si se toman las precauciones adecuadas.
 Es un método fácil de hacer y analizar.

Desventajas:

 No es factible a grandes escalas.

 Exposición a contaminación por parte de organismos heterótrofos de rápido crecimiento.
 Puede ser afectado por cualquier parámetro a la hora de hacer los cambios de la muestra.

3.- aplicaciones de las metodologías empleadas.

 En pequeña escala, han probado ser altamente efectivo en tratamientos de aguas

residuales.
 Alta utilización en biofertilizantes y biocombustibles.
 Para alimentación animal y humana.
 Para la obtención de productos biotecnológicos con uso en medicina, Farmacia y/o
cosmética.

4.- ¿Cuáles fueron las principales dificultades en el trabajo del laboratorio?

 Las dificultades en este practico fue mantener todas las zonas de contacto que tenia la sala
del laboratorio debidamente estériles, ya que se podía realizar una contaminación cruzada,
al igual de pasar las boquillas de los matraces por el mechero, todo bajo campana para
realizar el procedimiento así poder acotar el mayor porcentaje posible de algún tipo de
contaminación cruzada que se pudo haber realizado.

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 CONCLUSIÓN

Podemos concluir de acuerdo con la toma de muestra que el cultivo de microalgas realizado en el
practico tuvo éxito ya que se pudo visualizar las curvas de crecimiento sin ningún problema y poder
diferenciar las etapas del cultivo de microalgas, por ende, no fue entorpecido por algún tipo de
contaminación que pudo haber afectado a la biomasa, igual poder observar el procedimiento y ver
todos los cuidados a tener al momento de manipular las muestras. Igual los objetivos generales y
específicos se pudieron ver en el presente informe.

11 de diciembre del 2017

 BIBLIOGRAFÍA

 Brock, Thomas D. (2004), Microbiología

 fao.org/docrep/field/003/AB473S/AB473S02.htm

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