Universidad

Autónoma de

Baja California

Sur
M I C R O B I O L O G Í A

Rojas Contreras Maurilia

Reporte de práctica III

Grupo A

Departamento de

Agronomía

Turno Vespertino

Yahir Sanchéz Sologuren

 Introducción
Los microorganismos están presentes, en el aire, en el agua,

en el suelo, en las plantas, en los animales, en los alimentos,

en las cavidades internas del cuerpo que tienen conexión con

el exterior (tracto respiratorio y tracto digestivo) y en todas las

superficies exteriores de organismos vivos y de los utensilios.

En condiciones normales, los órganos y cavidades internas

carecen de microorganismos, son estériles. De la misma

manera, el interior de los músculos o de cualquier tejido

sólido está estéril. Los microorganismos no se encuentran

aislados, sino que su número suele ser muy elevado por

unidad de volumen o por unidad de superficie. Por

consiguiente, allí donde se encuentran son muy abundantes.

Además suelen formar agrupaciones de varios

microorganismos que interaccionan entre sí: unos pueden

usar como alimento los productos residuales de otros, o
pueden ser atacados por los vecinos que compiten por el

mismo alimento. Estas interacciones dan lugar a

sucesiones de microorganismos por lo que la microbiota

puede variar con el tiempo. Los métodos de siembra de

microrganismos en los diferentes medios de cultivo son

muy variables y la selección del método depende de la

pregunta que vas a contestar y del tipo de medio de cultivo:

sólido, líquido, semisólido y si está en caja o en tubo.

Los métodos de siembra en medio sólido y semi-sólido más

comunes son:

 1. Estría simple. Se hace sobre el medio sólido en la caja

de Petri o en tubo con agar inclinado.

2. Estría cruzada. Se hace sobre el medio sólido en la caja

de Petri
3. Vaciado en placa. El medio de cultivo estéril, malteado

se vacía sobre la muestra agregada a la caja de Petri

estéril, se homogeneiza y se deja solidificar.

4. Extensión en superficie. Con una aza de vidrio se

dispersa la muestra sobre el medio sólido de la caa de

Petri.
5. Siembra por picadura. Con un asa sin aro se toma la

muestra y se introduce en el centro de un tubo preparado

con medio de cultivo sólido o semi-sólido en forma

vertical.
6. Siembra en el centro de la placa. Se toma con unas

pinzas estériles un disco de papel filtro de 5mm estéril, se

humedece en PBS también estéril, se pone en contacto

con las esporas de un hongo y se coloca en el centro de

placa de Petri que contiene el medio de cultivo adecuado.

Los tipos de cultivo en medio líquido son dos:

a) Cultivo por lotes o intermitente en tubo de ensaye

b) cultivo en fermentador o reactor que puede ser

por lotes o intermitente, cultivo semi-continuo, y
cultivo continuo

 Metodología
A partir de los tubos y cajas de Petri que proporcione la

maestra con los siguientes

microorganismos realiza las siembras que se te indica.
a. bacteria mesófila aerobia,
b. bacteria termófila micro-aerofílica
c. bacteria del grupo coliforme,
d. levadura
e. hongo.
1. Siembra por extensión en superficie la bacteria mesófila

aerobia. Se sembrará en una caja de Petri con agar para

métodos estándar 100 μl de la dilución 10-4 de este cultivo y

se dispersará usando un asa de vidrio estéril. Posteriormente

se incubará a 37ºC por 24 h.

2. Siembra por vaciado (vertido) en placa la bacteria del

grupo coliforme. Se sembrará en una caja de Petri estéril, 1

ml de la dilución 10-3, de este cultivo, se adicionará

aproximadamente 15 ml del agar rojo violeta bilis malteado y

se homogenizará moviendo la caja lentamente en forma de

ocho. Se deja la
caja en reposo hasta solidificar y se incuba a 37ºC por 24 h.
3. Siembra por estría cruzada de una bacteria mesófila

aerobia. La siembra se hará en una caja con Agar para

métodos estándar usando un asa bacteriológica.

Posteriormente se incubará a 37ºC por 48-72 h.

4. Siembra por estría simple de la Levadura. Se sembrará con
un asa bacteriológica, por estría en una caja con agar papa

dextrosa inclinado y se incubará a 30ºC por 48-72 h.

5. Siembra de esporas de un hongo en el centro de la caja de

Petri. El disco que se pone en contacto con las esporas de

una colonia del hongo aislado

se colocará sobre el centro de

una caja de Petri con Agar papa dextrosa adicionado con

ácido tartárico y se incubará a 30ºC por 48-72 h.

6. Siembra por estría en agar inclinado de una levadura. Con

el asa bacteriológica estéril se tomará una muestra del cultivo

y se sembrará por estría en un tubo inclinado con agar papa

dextrosa adicionado con ácido tartárico y se incubará a 30ºC

por 72 h.
7. Siembra por picadura en agar bilis, rojo violeta. En un tubo

de ensayo con agar bilis, rojo violeta estéril y con un asa

vertical (sin aro), estéril se tomará una muestra del cultivo de

la bacteria coliforme y se sembrará en el centro del agar,

introduciendo y sacando el asa por el mismo punto. Se

incubará a 37ºC por 24 h.

8. Siembra en medio líquido la bacteria micro-aerofílica. Se

sembrará con un asa bacteriológica (una asada) en un tubo

con caldo MRS (Man Rogosa and Sharp).

Objetivo
Esta práctica tiene como objetivo fundamental conocer y

practicar los diferentes métodos de siembra de

microorganismos y demostrar la gran variedad y número de

microorganismos que se encuentran en el suelo, el aire, en

las plantas, animales, etc., así como mostrar que es factible

aislar en forma selectiva a los microorganismos favoreciendo

el desarrollo del microorganismo deseado.

 Resultados
1. Reporta las unidades formadoras de colonias (UFC) de las

diluciones de tu muestra de
mesófilos aerobios que sembraste 71

por extensión en superficies. colonias

201

UFC= 71+201= 272/ 2
colonias
UFC= 136
UFC=

= 136x10mLx10-4
UFC= 136x10-3

UFC= 136 x10-4 = 136x10-3 (Valor estimado)

2. Reporta las unidades formadoras de colonias (UFC) de las

diluciones de tu muestra de coliformes

que sembraste por vaciado en placa. 50

colonias
48

colonias UFC= 50+48=

98/ 2 = 49 UFC
UFC= 49x1mLx10-3

UFC= 0.4900 49x10-2 (Valor estimado)

4. Elabora una tabla con la siguiente información de tus cajas

sembradas por extensión en

de Petri que tienen las bacterias

superficie, por vaciado en placa
y por estría cruzada y realiza

las siguientes anotaciones en forma de tabla

a. Medio de cultivo usaste
b. Método de siembra
c. Observa las colonias formadas en tus cajas de Petri y anota

la morfología de las colonias obtenidas de acuerdo a los

siguientes diagramas
 4. Observa el crecimiento en el tubo de agar inclinado y realiza las

siguientes
anotaciones.
a. Que microorganismos sembraste
b. Que medio de cultivo usaste
c. Que método se siembra
d. Qué tipo de crecimiento encontraste (en base al diagrama

siguiente)

Nombre del

Medio de cultivo Método de siembra Tipo de crecimiento

microorganismo
Agar papa dextrosa
En tubos con agar

Levadura adicionado con ácido inclinado Perlado

tartárico

5.- Observa el crecimiento en el tubo con medio líquido y realiza las

siguientes anotaciones:
a. Que microorganismo cultivaste
b. Que medio de cultivo usaste
c. Que método de siembra usaste
d. Que características tiene el cultivo en el medio líquido (caldo), en

base al siguiente diagrama.

Nombre del

Método de cultivo Método de siembra Tipo de crecimiento

microorganismo
Man Rogosa Tubo con medio

En un tubo con caldo

and Sharp líquido Película
Conclusión:
Se vió que hay distintos métodos de cultivo,

como algunos que utilizamos, agar papa

dextrosa, tubo con caldo, también distintos

métodos de siembra, como lo fueron por

extesión simple, en tubos con agar inclinado,

por picadura, por vaciado y estría cruzada.

Conocimos los tipos de crecimientos que

pueden tener los microorganismos y sus

colonias.