FLUJOGRAMA PRÁCTICA No.

“Determinación de Proteínas por

el Método de Lowry”
*Retirar el filtro y ajustar a
100%T cada que se cambie la λ
✓ CURVA DE CALIBRACIÓN
3. Agregar:
1. Preparar reactivos conforme a la 2. Dejar reposar x 10 minutos a
sig. tabla: temperatura ambiente ✓ Reactivo D

Solución
Tubo Reactivo D
de
No. (mL)
Tubo proteína Reactivo A Reactivo C
1 y 1´ 0.5
No. (0.25 (mL) (mL)
mg/mL) 2 y 2´ 0.5
(mL) 3 y 3´ 0.5
1 y 1´ 0.1 0.4 5.0 4 y 4´ 0.5
2 y 2´ 0.2 0.3 5.0 5 y 5´ 0.5
3 y 3´ 0.3 0.2 5.0 6 y 6´ 0.5
4 y 4´ 0.4 0.1 5.0
5 y 5´ 0.5 0.0 5.0
6 y 6´ 0.6 0.5 5.0

6.Ajustar el 5.Leer en el 4. Dejar desarrollar color

espectrofotómetro al espectrofotómetro a durante 30 minutos a
100% con el tubo 6 una absorbancia de temperatura ambiente
590 nm.

✓ ANÁLISIS ESTADÍSTICO

1. Preparar 10 tubos en las 2. Leer a 590 nm 3. Ajustar el espectrofotómetro

con el tubo 6
mismas condiciones que el
tubo 3 de la curva de
calibración
✓ EFECTO DE SUSTANCIAS NO PROTEÍNICAS EN EL MÉTODO DE LOWRY

1. Preparar 10 tubos que contengan: 2. Leer a 590 nm 3. Ajustar el espectrofotómetro

con el tubo 6 a 100% T.
✓ 0.3 mL de solución tipo
protéina
✓ 0.1 mL de sustancia
interferente
✓ 0.1 mL de reactivo A