VALORACIÓN DE PROTEÍNAS

TOTALES EN SUERO
Bioquímica clínica 4-E
Grupo #2
Garcia Cantillo Terith Paulina
Gomez Rivera Alejandra
Guarin Pineda Aracelys Carolina
Hernandez Cervantes Andrea
Herrera Romero  Marianella
Johnson Acevedo Brian

Presentado a: Dr. Libardo Banderas Narvaez

 ÍNDICE
1. Introducción
2. Objetivos
2.1 Generales
2.2 Específicos
3. Fundamento del método
4. Materiales
5. Equipos
6. Reactivos
7. Muestra
8. Toma de muestra
9. Epicrisis
10. Procedimiento
11. Cálculos
12. Resultados
13. Valores de referencia.
14. Análisis
15. Conclusión
16. Video
INTRODUCCIÓN
Las proteínas son moléculas
formadas por aminoácidos que están
unidos por un tipo de enlaces
conocidos como enlaces peptídicos.
Todas las proteínas están compuestas
por:
● Carbono
● Hidrógeno
● Oxígeno
● Nitrógeno
Y la mayoría contiene además azufre
y fósforo.

(1)
OBJETIVOS
 GENERALES
Aprender sobre las proteínas, sus
tipos. Además de, los materiales,
equipos y reactivos que son
requeridos en cada paso al momento
de la toma de muestra para obtener
los resultados, así como también el
debido proceso, y las patologías
referentes a ésta.
 ESPECÍFICOS
● Determinar el proceso de
toma de muestras.
● Conocer los valores de
referencia.
● Determinar los niveles de
proteínas en el organismo.
● Estudiar la incidencia del
colesterol en la fisiología del
organismo.
● Mencionar las diferentes
enfermedades relacionados
con las proteínas.
FUNDAMENTO
DEL MÉTODO
FUNDAMENTO DEL MÉTODO
La proteína presente en la muestra reacciona con los iones cobre (II)
en medio alcalino originando un complejo coloreado que se cuantifica
por espectrofotometría.

(2)
MATERIALES
 MATERIALES (2)

Guantes Gradilla Tubos de ensayo Algodón

● Palillo
● Jeringa

Torniquete Auxiliar de pipeteo Pipeta

EQUIPOS
 EQUIPOS

Espectrofotómetro o Centrifugadora
Baño serológico a 37°C
fotómetro para lecturas a
545 ± 20 nm.

(2)
 1. 2.

Uso de la
centrifugadora
1. Verificar que el equipo esté limpio y libre
de objetos en su interior.
2. Cargue el cabezal, tener en cuenta las
instrucciones de equilibrio y balanceo.
3. Cerrar la etapa del equipo. 2. 3.
4. La velocidad debe estar en cero.
5. Lleve la perilla del reloj hasta el tiempo
deseado.
6. Gire lentamente el selector de velocidad
hasta el punto que se alcanza las r.p.m
requeridas.
7. Pasado el tiempo, el equipo disminuirá su 4.
marcha hasta 0 r.p.m
8. Levante la tapa y retire el material.

(1)
REACTIVOS
 REACTIVOS
Reactivo: Acetato de cobre (II) 6
mmol/L, ioduro de potasio 12 mmol/L,
hidróxido sódico 1,15 mol/L,
detergente
Corrosivo (C): R34: Provoca
quemaduras
S. Patrón de Proteína : Albúmina
bovina.
. La concentración viene indicada en la
etiqueta del vial
(2)
MUESTRA
 MUESTRA

• Suero y plasma heparinizado

recogido mediante
procedimientos estándar.

• Estable 8 días a 2-8ºC.

• Los anticoagulantes quelantes

interfieren.

(2)
TOMA DE
MUESTRA
 (4)
PROCEDIMIENTO PARA LA TOMA DE UNA MUESTRA
1. Elegir la vena adecuada. 1 2
2. Limpiar la zona con alcohol.
3. Colocar el torniquete.
4. En un ángulo aproximadamente de 15°
realizar la punción.
5. Una vez extraída la muestra se retira el
torniquete. 3 4
6. Se aplica presión en la zona de la
punción con una gasa esteril.
7. Se envasa la sangre en un tubo de
ensayo.

5 6 7
VIDEO PROCEDIMIENTO PARA LA TOMA DE UNA MUESTRA

https://www.youtube.com/watch?v=pMYGzqZAl9Y
EPICRISIS
 EPICRISIS
Al finalizar la toma de muestra, el profesional encargado, deberá realizar la
epicrisis correspondiente al paciente, donde necesitará los siguientes datos:

Nombre: Karla Rodríguez

Edad: 45 años
Peso: 40 Kg (bajo)
Altura: 170cm
IMC: 13.84 (bajo)
Antecedentes Personales: No fuma, No utiliza drogas, presenta malnutrición
Antecedentes Familiares: Padre hipertenso
Síntomas: diarrea y deshidratación, con posible intolerancia a la lactosa.
Hora de su última comida o ingesta: 7:00 p.m.
¿Tomó alcohol la noche anterior?: No
PROCEDIMIENTO
 (2)

1.Se rotula la muestra de

sangre
2.Se rotulan los tubos de
ensayo
3.Se hace la retracción del
coagulo
PIPETEAR EN TUBOS DE ENSAYO (2)

PIPETEAR EN
TUBO PATRÓN

PIPETEAR EN TUBO PATRÓN REACTIVO

BLANCO PROTEÍNA (A) (1,0 mL)
(20μl)

AGUA
REACTIVO
DESTILADA
(A) (1,0 mL)
(20 μl)

PIPETEAR EN TUBO
MUESTRA

MUESTRA REACTIVO
(20 μl) (A) (1,0 mL)
 (2)
● Agitar bien y dejar los
tubos durante 10 minutos
a temperatura ambiente.

● Leer la absorbancia del

Patrón y de la Muestra
frente al Blanco a 545 nm

● El color es estable durante

al menos 2 horas

Blanco: Es una muestra que

no contiene soluto, con la que
está diluida la sustancia.
Se usa para ajustar el
instrumento para leer la A en
0.
Absorbancia: Intensidad
Patrón: es una sustancia
utilizada como referencia
de luz que absorbe la
muestra
al momento de hacer una
valoración o
estandarización.
 (2)

Parte trasera

2
 (2)

MONOCROMÁTICA
Seleccione 545 nm
Absorbancia 1,0 mL
5 minutos
37°C

Remueva el
“BLANCO” y coloque
otra celda con la
solución a ser
examinada.
Inserte el “blanco” en el Ajuste la A en 0.
portaceldas y ciérrelo.
 (2)

m
0,410
n m 0,523 n

muestra patrón
CÁLCULOS
 (2)

La concentración de proteína en la muestra se calcula a partir de la

siguiente fórmula general:

Para calcular la Para calibrar el patrón de

concentración de proteína se proteína se debe utilizar:
utiliza:

x 7 = g/dl albúmina
x 1.060= mmol/dl albúmina
 DATOS (2)

Los valores de absorbancia son los resultados contenidos en el

espectrofotómetro y la concentración es la contenida en la etiqueta del vial.

A .PATRÓN: 0.523 nm

A. MUESTRA: 0.410 nm

CONCENTRACIÓN PATRÓN
PRIMARIO DE ALBÚMINA BOVINA:
(7 g/dL)- (1.060= mmol/dl)
 (2)

Cálculos

g/dl = __ 0,410 nm_____ X 7 g/dl proteína = 5,48 g/dl proteína

0.523 nm

mmol/L = __ 0,410 nm_____ X 1,060 mmol/l proteína = 0,819 mmol/L proteína

0,523 nm
5,48 g/dL
C. MUESTRA
0,819 mmol/L
RESULTADOS
 (2)

En los resultados obtenidos podemos

apreciar que la cantidad de proteínas en
plasma de esta paciente es 5,48 g/dl,
esto nos puede confirmar que el
paciente presenta una proteína más
baja del rango normal.

Los niveles bajos de

proteínas también pueden
indicar presencia de
enfermedades hepáticas,
malabsorción, enteropatías
y deficiencias en la síntesis
proteica.
VALORES DE REFERENCIA
 (2)
.Adultos: Ambulatorio = 64-83 g/L
Rango normal
Recostado = 60-78 g/L

Varía levemente según el

laboratorio Proteínas totales: 6-8 Gm%

Albúminas: 3,5-5,5 Gm%

Globulinas: 1,5-3,0 Gm%

Cociente proteínico: A/G=1.5-2.0

ANÁLISIS
 (2)
Los valores normales se pueden presentar entre
6,0-7,8 g/dl y el paciente presentó una valor,de
5,48 g/dl.

Gracias a estos resultados y a los datos obtenidos

en la epicrisis, podemos relacionar la malnutrición
evidenciada por el bajo IMC del paciente como
uno de los factores principales.

Esta baja concentración de proteínas totales en el

análisis puede deberse a defectos en la síntesis de
proteínas como consecuencia de una malnutrición
severa como la que el paciente presenta.
CONCLUSIÓN
 (3)

Se puede concluir que los resultados obtenidos

de la muestra del paciente no son favorables ya
que no se encuentra dentro los rangos normales.

Esta prueba es muy importante ya que gracias a

su obtención y cuantificación en sangre
podemos diagnosticar y evitar ciertas
enfermedades o trastornos que a largo plazo
podrían comprometer la vida del paciente.

La hiperproteinemia es el aumento de proteínas

en sangre, en donde sus causas principales son,
la deshidratación y la hiperglobulinemia.
VIDEO
 BIBLIOGRAFÍA
(1) Vásquez, M., García, P. Proteínas en nutrición artificial. Patología renal y crónica
[Internet]. 2005 [citado 28 Febrero 2021]. Disponible en:
https://senpe.com/documentacion/monografias/senpe_monografias_proteinas_pat_re
nal_cronica5.pdf
(2) BioSystems S.A. Costa Brava 30, Barcelona (Spain) ISO 13485 Rheinland.
Disponible en: http//
www.biosimex.com.mx/pdf/insertos/QUIMICA%20CLINICA/11500c.pdf
(3) Morley J. Desnutrición calórico-proteica (DCP) - Trastornos nutricionales - Manual
MSD versión para profesionales [Internet]. Manual MSD versión para profesionales.
2018 [citado 28 Febrero 2021]. Disponible en:
https://www.msdmanuals.com/es-es/professional/trastornos-nutricionales/desnutrici
%C3%B3n/desnutrici%C3%B3n-cal%C3%B3rico-proteica-dcp
(4) Dean AJ, Lee DC. Bedside laboratory and microbiologic procedures. In: Roberts JR,
Custalow CB, Thomsen TW, eds. Roberts and Hedges' Clinical Procedures in
Emergency Medicine and Acute Care. 7th ed. Philadelphia, PA: Elsevier; 2019:chap
67.