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PREFACIO
0 INTRODUCCIÓN
Es esta la prueba confirmatoria. Para obtener los valores buscados, se consultan las
tablas llamadas de Número más Probable, en las que se expresa la concentración de
gérmenes que corresponde a cada combinación de tubos positivos.
Por su mismo carácter probabilístico, las cifras consignadas en las tablas, constituyen la
mejor estimación que puede hacerse del número de microorganismos en la muestra
original.
Se indican, sin embargo, los límites que con una probabilidad de 0.95 pueden esperarse
en cada caso.
1 OBJETIVO Y CAMPO DE APLICACIÓN
2 REFERENCIAS
3 REACTIVOS Y MATERIALES
Los reactivos empleados en esta prueba deben ser grado analítico a menos que se
indique otra cosa.
4 APARATOS E INSTRUMENTOS
Todo material de vidrio empleado en esta prueba debe estar estéril y cumplir con los
requisitos establecidos en la Norma NMX-BB-014 en vigor.
6. PROCEDIMIENTO
6.2 Marcar e identificar los tubos por inocular de acuerdo con las claves que les
correspondan a las muestras.
7.1.2 Incubar los tubos a 35°. Examinarlos a las 24 ± 2 horas y observar si hay
formación de gas, desarrollo bacteriano y/o vire del indicador según el grupo
microbiano que se está investigando.
7.1.3 Después de la primera lectura continuar la incubación de los tubos 24 horas más,
la presencia de gas, desarrollo bacteriano y/o vire del indicador, según el caso(después
de 48 horas de incubación) hace positiva la prueba y remite los tubos a la prueba
confirmatoria.
7.2.1 Agitar suavemente los tubos que resultaron positivos; resembrar 2 ó 3 asadas del
contenido de cada uno a un tubo que contenga el medio de cultivo de la prueba
confirmatoria. Al efectuar esta resiembra sostener el tubo primario (prueba presuntiva)
en un ángulo tal que se pueda tomar la asada evitando la película que exista en el medio.
Sacar el asa del líquido en sentido perpendicular a su superficie de manera que se forme
un menisco bien definido.
7.2.2 Incubar los tubos por 48 ± 2 horas a 35°C . Considerar la prueba positiva, si hay
formación de gas en cualquier cantidad, él vire del indicador o desarrollo bacteriano,
según la base técnica utilizada.
7.2.4 Si la serie utilizada o seleccionada incluye las diluciones 10-3, 10-4 y 10-5,
multiplicar la cifra correspondiente a la combinación de tubos positivos en la tabla por
100.
TABLA 1
NÚMERO MÁS PROBABLE DE ORGANISMOS
TABLA 2
Indice del NMP y 95% de límites de confianza para varias combinaciones de resultados
positivos, cuando se emplean varios números de tubos.
Dilución (10 ml, 1.0 ml, 0.1 ml)
TABLA 3
NÚMERO MÁS PROBABLE DE ORGANISMOS
Tubos inoculados:
7.2.5 Informar el Número Más probable (NMP) de microorganismos por gramo, por
100 ml o por litro del alimento.
8 APÉNDICE
8.1 Los medios de cultivo deberán ser específicos según el microorganismo de que
se trate.
8.2 Las Normas NMX que se mencionan en esta Norma, corresponden a las
Normas DGN vigentes de la misma letra y número.
9 BIBLIOGRAFÍA