EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL LOCAL DE Código:AD-SP1-PR-10

CUBARRAL – META Versión: 02

NIT 900048040-7
APOYO DIAGNÓSTICO - LABORATORIO Fecha: 15/12/2021
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HEMATOLOGÍA – HEMOPARÁSITOS

1. GENERALIDADES

La malaria o paludismo es una enfermedad reconocida desde hace mas de 4.000años y

considerada como una verdadera plaga para la humanidad. Los parásitos causantes de la
malaria son esporozoarios de orden Eucoccidia, familia Plasmodidae, género
Plasmodium. Diferentes especies parasitan al hombre y a los animales. Las 2 especies
principales de Plasmodium que afectan al hombre son, P. vivax y P. falciparum. Existen
otras 2 especies de importancia regional, que son P. malariae y P. ovale.
Morfológicamente pueden diferenciarse las 4 especies de Plasmodium cuando se
observan preparaciones coloreadas (gota gruesa).

2. OBJETIVO

 Confirmar el hallazgo de Plasmodium vivax y Plasmodium falciparum, especies

que predominan en la población.

3. RESPONSABILIDAD

Bacterióloga coordinadora y/o Bacterióloga rural. Solo puede ser ejecutado por
profesionales en el área de bacteriología.

4. CONTENIDO

4.1 Fundamento

La gota gruesa o hemoparásito permite detectar parásitos circulantes aun cuando la

parasitemia sea baja ya que concentra varias capas de sangre para ser examinadas
simultáneamente, el hemoparásito se debe realizar a todo paciente febril sospechoso en
zona endémica, con recaída o recrudescencia, a toda mujer embarazada de zona
endémica, a todo menor de 5 años con EDA, IRA o anemia grave, a recién nacido con
madre con malaria, y a todo donante de sangre de zona endémica.

4.2 Definiciones

 GOTA GRUESA: Extendido de sangre empleado para la búsqueda de

hemoparasitos.

5. PROCEDIMIENTO
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5.1 Fase preanalitica

5.1.1 Preparacion del paciente

No es necesaria una preparacion especial.

5.1.2 Muestra

La muestra para realizar la gota gruesa es tomada directamente por punción en el dedo.

5.1.3 Toma de muestra

Tomar muestra en un área física ordenada.
 Marcar la lámina en el borde esmerilado; o rotular con cinta de enmascarar, lápiz
de cera.
 Con manos enguantadas realizar la limpieza del dedo corazón o índice del
paciente, con algodón mojado en alcohol; dejar secar y puncionar con lanceta
estéril desechable el borde lateral del dedo a la altura del nacimiento de la uña.
 Limpiar la primera gota de sangre con algodón seco; presionar el dedo y colocar la
siguiente gota a 1 cm de la marca de la lámina portaobjetos; poner en contacto la
lámina con la gota de sangre, de manera delicada, evitando que la lámina toque el
dedo del paciente.
 Realizar dos láminas de gota gruesa por paciente.
 Extender la gota de sangre para formar un cuadrado de aproximadamente 1cm x
1cm y un grosor y homogeneidad adecuados y así obtener un mayor número de
campos microscópicos ideales.
 Dejar secar la gota de sangre a la temperatura ambiente en una superficie plana y
Libre de polvo.
 Colorear con la coloración field.
 Observar al microscopio con objetivo de 10x y 40x para la selección de los
campos donde se encuentre mayor número de glóbulos blancos. Posteriormente
mirar con objetivo de 100x y buscar las formas parasitarias propias del
Plasmodium. De no visualizar el parásito, se deben observar por lo menos 200
campos microscópicos antes de calificar la muestra como negativa.
 Debe tenerse presente que un buen campo microscópico es aquel en el cual
seobservan de 10 a 20 leucocitos por campo.

5.2 Fase analítica

5.2.1 Coloración de Field

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La coloración para gota gruesa consta de dos pasos: precoloración y coloración.

Precoloración:

Este proceso ayuda a preservar las células sanguíneas e iniciar el proceso de

deshemoglobinización sin alterar la morfología del parásito.

• Verificar que la muestra esté completamente seca para que no se desprenda.

• Sumergir la lámina en una solución de azul de metileno por dos segundos.

• Escurrir la lámina sobre una gasa o papel absorbente para eliminar el exceso de
azul de metileno.

• Introducir la lámina en un recipiente que contenga una solución amortiguadora pH 7.2,

por dos segundos. Esta solución se cambia cada vez que tenga mucho tinte azul
proveniente del azul de metileno.

• Cuando las muestras precoloreadas han tomado un exceso de azul de metileno

fosfatado, se pueden volver a enjuagar para evitar muestras muy oscuras.

• Deje escurrir las láminas para continuar la coloración.

Después de la deshemoglobinización, la coloración permite la diferenciación de las

estructuras parasitarias. El color esperado para la cromatina es el rojo; para el citoplasma
es azul y el pigmento malárico varía entre el amarillo y el café oscuro.

• Por cada lámina que se necesita colorear, se adicionan 3 ml de solución

amortiguadora, una gota de solución A y una gota de solución B en un tubo, y se
mezcla suavemente por inversión.

• Las muestras se colocan hacia la concavidad de la lámina de coloración; se

Adiciona la solución colorante evitando la formación de burbujas y se deja actuar por 9
minutos.

• Pasado el tiempo de coloración, coloque las láminas en posición vertical en el soporte.

El tiempo de secado es de 20 minutos a temperatura ambiente.

5.2.2. Lectura y Cuantificación e Interpretación de la Gota Gruesa

El tratamiento adecuado para un paciente con malaria depende de la lectura cuidadosa de

la gota gruesa. Dicha lectura tiene como objetivos específicos establecer la especie del
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Plasmodium y cuantificar el número de parásitos por microlitro (ul) de sangre, criterios

básicos para el tratamiento y control del paciente.

• Determinar el número de parásitos en los campos microscópicos necesarios para

contar 100 leucocitos.

• Asumiendo una constante nacional de 8.000 leucocitos/ml de sangre en pacientes con

malaria, se establece la proporción de parásitos por 100 leucocitos encontrados así:
# de parásitos x 8.000 leucocitos/μl
# de parásitos/ μl de sangre = ------------------------------------------------
100 leucocitos

Se considera Positivo para Plasmodium cuando se observan las formas parasitarias

características. Para el informe de resultados es necesario informar la especie de
Plasmodium y en el caso específico de P. falciparum es indispensable anexar el recuento
del parásito por microlitro de sangre discriminando por formas encontradas.
Nota: es importante resaltar que una muestra que presente sólo gametocitos de P.
falciparum debe ser diagnosticada como positiva aunque al paciente no sea necesario
suministrarle tratamiento.

En casos de P. vivax se recomienda realizar el recuento en todos los casos,

especialmente si el paciente se encuentra complicado. En el caso de una malaria mixta
(asociación parasitaria), es necesario realizar recuento parasitario informando primero la
especie que tenga mayor número y posteriormente la
que se encuentra subordinada, para el diagnóstico de infección mixta es indispensable
tener en cuenta los siguientes criterios:

1. Presencia de formas parasitarias de P. vivax y gametocitos de P. falciparum.

2. Predominio de trofozoítos de P. falciparum y escasas formas de P. vivax.
3. Presencia de trofozoítos de P. falciparum y formas de P. vivax en proporciones
similares. El diagnóstico se realiza estableciendo la cantidad de formas
parasitarias compatibles con P. falciparum y con P. vivax, en 100 formas
parasitarias observadas. Si al realizar el recuento se encuentran 40 formas ó más, es
decir, equivalente al 40% de los trofozoítos compatibles con P. falciparum se puede
informar positivo para infección mixta.

Si después de realizar el recuento las proporciones se mantienen equivalentes es

necesario llevar el recuento a 200 formas parasitarias, para tal caso debería existir
compatibilidad con los trofozoitos de P. falciparum en por lo menos 80 formas para
obtener el 40%.
Se considera Negativo cuando no se observan las formas del parásito en por lo menos
200 campos microscópicos observados.

Nota: En parasitemias muy altas cuando no sea posible realizar el hematocrito del
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paciente, puede contar el número de leucocitos contra 500 parásitos, como se presenta
en la siguiente fórmula:
≥500 parásitos x 8000 leucocitos/ μl
Recuento o densidad parasitaria/μl = ______________________________
# leucocitos contados

5.3 Fase postanalítica

5.3.1 Informe de resultados

Se informa:

 Hemoparasitos: Negativo para hemoparasitos en la muestra analizada

 Hemoparasitos: Positivo para P. vivax

 Hemoparásito. Positivo para P. falciparum (# de parásitos asexuados/µl)

 Hemoparásito Positivo para P. falciparum (# parasitos asexuados/µl y #

gametocitos/ µl).

 Hemoparasitos: Infección mixta: Positivo para (p. vivax y p. falciparum # de

gametocitos/µl)

 Hemoparasitos: Infección mixta: Positivo para (p. vivax y p. falciparum # de

parásitos asexuados/µl).

 Para FSP, el informe del resultado se especifica la especie y el recuento. Para P.

falciparum se debe hacer el recuento tanto de las formas sexuadas como de las formas
asexuadas e informarlo por separado.

Para P. vivax no es necesario hacer el recuento si no lo solicitan, cuando la

infección es mixta debe haber recuento de ambos.

5.3.2 Interferencias
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 Coloración excesivamente azulada: coloración muy gruesa, tiempo prolongado

de tinción y alcalinidad del agua amortigua.

 Coloración excesivamente rosada: tinción insuficiente, tiempo de lavado

prolongado y acidez del agua amortiguada.

 Precipitación: portaobjetos sucios, secado del colorante durante el momento de la

tinción y filtración inadecuada.

6. REFERENCIA BIBLIOGRAFICA

 DIAGNOSTICO DE MALARIA: Técnicas y procedimientos. Laboratorio de Salud

Pública.
 BOTERO, DAVID, Parasitosis humanas, 4ta edición. CIB. Medellín Colombia.
 Guía de atención malaria 2008. Ministerio de Protección Social

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2 Restructuración Bacterióloga Asesor de calidad 15/12/2021

del documento y
adaptación a los
procedimientos
implementados
en la institución.