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La Gota Gruesa Es Una Forma de Extendido Usado en Las Coloraciones Para Determinar Malaria

La Gota Gruesa Es Una Forma de Extendido Usado en Las Coloraciones Para Determinar Malaria

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La Gota Gruesa es una forma de extendido usado en las coloraciones para determinar malaria.

Lo ideal es tomar una gota de sangre directamente del dedo del paciente ojalá en estado febril y colocarla directamente sobre uno de los extremos del portaobjeto (nuevo y desengrasado) hacia el centro. Después con el borde de otro porta objeto se extiende (angulo 45º)desde el centro de la gota hacia arriba,luego al centro pasa hacia abajo y nuevamente al centro sin levanter y de forma rápida; quedando un frotis grueso en forma de franja. Después se deja secar y se realiza coloración para hemoparásitos(p.e.j: Coloración de Field, )

DIAGNÓSTICO DE MALARIA Gota gruesa y extensión de sangre teñido por Giemsa: es el más conocido y el más utilizado y no ha podido ser igualado. En estos métodos se utilizan 100 µl de sangre lisada y se hace una preparación que se tiñe con Giemsa. Tinción fluorescente DNA-RNA en estos casos se utiliza la naranja de Acridina y uno de estos métodos es el QBC. De los métodos moleculares el PCR es muy sensible. La detección de pigmento malárico se realiza a través de la microscopia de campo oscuro. La detección de antígeno que se usan métodos de Parasight y el método de pLDH OptiMAL. DIAGNÓSTICO PARASITOLOGICO Se realiza a través de la gota gruesa y extendido Se toma una muestra por punción capilar y eso se tiñe por Giemsa. Esto es lo que se hace tanto en la capital como en las zonas rurales y en las zonas endémicas. El extendido: se hace un extendido de la muestra de sangre y es una sola capa de células rojas. Vamos a ver una sola capa de glóbulos rojos y se pueden ver tanto los eritrocitos parasitados como los no parasitados de tal forma que si la persona no es experta se puede hacer una diferencia. La gota gruesa consiste en hacer una preparación con varias gotas de sangre del tamaño de una moneda de 10 centavos se hacen varias capas y después que se seca se procede a que gotas de agua le caigan despacio para que se deshemoglobinice el glóbulo rojo con el objetivo de que los glóbulos rojos desaparezcan y solamente queden los parásitos, una vez que se ha realizado eso se deja secar y se tiñe con Giemsa. Como hay varias capas de eritrocitos y se rompen vamos a tener un mayor número de parásitos, si los hay, solamente se van a ver los parásitos, los glóbulos blancos y las plaquetas. En el caso de falciparum podemos ver la infección múltiple que consiste en varios parásitos por eritrocito. Vamos a ver gametocitos, ya les explique porque no vamos a ver trofozoitos maduros ni esquizontes jóvenes ni esquizontes maduros en un extendido de sangre. Por lo tanto cuando el laboratorio hace reporte de malaria por P. falciparum solo esta reportando los trofozoitos inmaduros en sangre periférica, no hay reporte de los parásitos que están secuestrados en eritrocitos en los

capilares de los órganos internos. En el caso del P. vivax el esquizonte maduro es el estadio diagnóstico, en él pueden observarse de 12 a 24 merozoitos, Trofozoitos jóvenes, gametocitos y trofozoitos maduros ameboides. Todos estos estadios se ven en sangre periférica. En el caso de Malariae los estadios en sangre periférica son trofozoito maduro que adquiere la forma de banda el citoplasma del parásito y el esquizonte maduro que tiene de 6 a 12 merozoitos. El otro reporte (además del de Genero y especie por gota gruesa y extendido) que debe ir obligatoriamente con un reporte de infección por malaria es la determinación de la parasitemia. Esto es sumamente importante porque es la guía para el médico de cómo empezó o como está la infección al momento que se hizo el diagnóstico. Porque cuando se va a administrar el tratamiento es necesario conocer la parasitemia para saber si el tratamiento está siendo efectivo o hay que cambiarlo antes de las 24 horas. La determinación de parasitemia en gota gruesa se hace contando 200 glóbulos blancos y cuantos parásitos hay por campo donde se contaron los gb. Entonces uno asume que hay 8000 glóbulos blancos en cada microlitro de sangre y se multiplica el número total de parásitos por 40 y eso nos va a dar el número de parásitos por microlitro.Si se hace el diagnostico a través de un extendido sí tenemos eritrocitos, en ese caso se van a contar cuantos eritrocitos hay parasitados por campo hasta que se cuentan 100 eritrocitos. Entonces ahí el reporte se da en porcentaje. Esto tiene una razón de ser: * En primer lugar que el médico tiene que conocer la parasitemia cuando va a administrar el tratamiento para saber si el tratamiento que está dando le esta funcionando al paciente Segundo porque el médico puede evaluar la situación del paciente: Parasitemia de 0.0001 a 0.0004% ó 5-20 p/ul es la mínima cantidad de parásitos para que la gota gruesa sea positiva, por debajo de este número de parásitos no se va a detectar en sangre periférica. Parasitemia de 0.002% o de 100 p/ul es el nivel en que los pacientes pueden ser sintomáticos, aunq pueden estar sintomáticos por debajo de este nivel. Parasitemia esta en 0.2% o 10000 p/ ul en este nivel los pacientes que ya han tenido una exposición previa a malaria van a presentar síntomas. Parasitemia de 2% ó 100000 p/ul es la parasitemia máxima que vamos a ver con vivax por lo tanto si tenemos más de este numero hay una fuerte sospecha de que sea P. falciparum. Parasitemia de 2-5% o de 100000 a 250000 p/ul es considerado una hiperparasitemia, hay malaria severa y la mortalidad es aumentada. Parasitemia de 10% o de 500000 p/ul hay que considerar una exanguinotransfusion o la aplicación de una bolsa con glóbulos rojos empacados con el objeto de disminuir la parasitemia y en esos casos hay alta mortalidad. O sea que el médico podría tener unas mejores opciones si la parasitemia llega hasta un 2% porque eso indica que es P. vivax. Pero cuando la parasitemia es mucho mas elevada hay que tener mucho cuidado. Y en el momento en que se empieza la administración de la terapia el medico tiene

fiebre recurrente. Con la microcentrifuga se hacen varias capas: de glóbulos blancos. falciparum porque utiliza un anticuerpo monoclonal hacia Ag esta especie. brucelosis. La detección de especies por PCR es muy específica ya que cada plasmodium tiene una banda específica y se utiliza más que nada para fines de investigación. De incubacion mas prolongado. acceso hepatico.malariae Fiebre cuartana Sintomatologia mas benigna. tifoide. Se requieren 50 ul de sangre. Las personas en panamá que son infectadas por P. recuerden que los eritrocitos humanos no tienen núcleo y x eso no tienen ADN y por ende en la tinción con naranja de acridina el ADN que se va a teñir es el ADN del parásito. paratifoidea. No puede permanecer sin evaluación porque puede presentar resistencia a la droga y los parásitos se siguen multiplicando lo que a veces termina con la muerte del paciente. 3. Es una técnica un poco elaborada y no se utiliza para diagnostico rutinario xq saldría muy caro y tomaría mucho tiempo.  . dengue. La proteína que se utiliza es la proteína de los knobs la Proteína de falciparum rica en histidina II (PfHRII) y los resultados son visibles en 11 minutos en una tirita que no necesita refrigeración. El resultado de la prueba negativa es una raya fraccionada. se puede llevar al campo y su sensibilidad estimada es que deben haber por lo menos 10 p/ul. A todo paciente remitido para confirmación del DX. hepatitis. de plaquetas y en la capa de glóbulos rojos se ve. P. DIAGNOSTICO Se basa en la observación e identificación de parásitos plasmodium en muestras de sangre. Lo que hace es que tiene unos tubos capilares que tienen naranja de acridina que es un colorante de ADN. Puede confundirse con otras enfermedades febriles: fiebre amarilla. PALUDISMO POR P. A todo paciente con recaida.  24. leishmaniasis visceral y procesos septicos. Recrudescencias despues de muchos años. si uno va al campo a evaluar pacientes esta centrifuga puede ser portátil y todo puede funcionar con una batería. Y eso es lo que vamos a ver con la fluorescencia. También se usa QBC para Tripanosoma cuzi. Confirmacion: hallazgo de los parásitos . pielonefritis. METODOS UTILIZADOS Gota gruesa Extendido de sangre periférica Pruebas de DX rapido PCR RX inmunologicas Examenes complementarios 26. Malaria cronica.  25. INDICACIONES DE LA TOMA DE MUESTRA A todo paciente febril sospechoso por demanda de atención.que especificar que este paciente tiene que ser evaluado por lo menos 8 a 10 horas o 12 horas después de haberse iniciado el tratamiento. La prueba de QBC en una prueba muy buena que hace una medición del ADN nuclear. Sin embargo sale muy costosa xq requiere un microscopio de fluorescencia. El ParaSightF es una prueba especifica y exclusiva para P. mas cronica. falciparum proveniente de Colombia tienen gran posibilidad de que este sea resistente a Cloroquina. tuberculosis. un adaptador de fluorescencia y una microcentrifuga.

Dejar secar a temp ambiente .  30. Valoracion de la coloración de gota gruesa Macroscópica Se observa como un cuadrado continuo de color azul claro. Forma: Trofozoitos Forma: Schizonte Forma: Gametocito Plasmodium falciparum 37. Marcar 3 laminas. Dejar secar a temp ambiente.  35. se realiza control de parasitemia cada 8 a 12 horas. granulaciones rosado o rojo. naranja (eosinofilos). GOTA GRUESA Con el borde de un cubreobjetos se extiende la gota de sangre con movimientos en N.   32. A todo paciente que se ha automedicado. COLORACIÓN precoloración coloración Preservar células sanguíneas. Recuento parásitario en extendido de sangre periferica. Forma: Trofozoitos Forma: Schizonte Forma: Gametocito Plasmodium malariae 40. EXTENDIDO DE SANGRE PERIFERICA Con el borde de un cubreobjetos se extiende la gota de sangre con movimientos en N. Citoplasma: azul claro (linfocitos). 33. Coloración. Forma: Trofozoitos Forma: Gametocito Forma: Schizonte Plasmodium ovale 39. Disminucion progresiva y tenue Microscópica Eritrocitos: neutra o violeta. Plaquetas: rosadas a violeta. 27. Luego se coloca otra gota de sangre a una distancia de 0. Forma: Trofozoitos Forma: Schizonte Forma: Gametocito Plasmodium vivax 38. sangre # de parasitos x # de eritrocitos/uL de = 10000 eritrocitos # de parásitos x hematocrito x 100000 = 10000 eritrocitos # de parasitos/ul de sangre # de parasitos/ul de sangre .  29. inicio de deshemoglobinización Diferenciar estructuras parasitarias completación de la deshemoglobinización  31.      36.5-1 cm de la otra. Granulaciones: azul o rosado (neutrofilos). Parasitos: citoplasma azul. Se repite el procedimiento en otra lamina.  28. Importante : Se realiza gota gruesa seriada a todo paciente con fuerte evidencia epidemiologica de padecer malaria y con gota gruesa negativa inicial. para formar un cuadrado de 1 x 1 cm. gris (monocitos). dos para gota gruesa y una para el extendido para sangre periférica. RECUENTO PARASITARIO Recuento parasitario en gota gruesa: # de parásitos x 8000 leucocitos / ul = 100 leucocitos Parasitemias altas: 500 parásitos x 8000 leucocitos / ul = # de leucocitos contados # de parasitos/ul de sangre # de parasitos/ul de sangre  34. En casos complicados o con parasitemias altas (<50000 parasitos/uL). rosado tenue (neutrofilos). cromatina roja intensa o violeta. No debe llegar a los bordes. Leucocitos: núcleo azul oscuro o violeta. Valoracion de la coloración de un extendido de sangre periférica Macroscópica pelicula fina y uniforme. TOMA DE MUESTRA Toma de datos completos del paciente Tomar muestra. para formar un cuadrado de 1 x 1 cm. Microscópica deshemoglobinización completa Plaquetas: rosadas Leucocitos: intensamente coloreados Granulaciones de schuffner y maurer Citoplasma y cromatina del parasito: intensamente coloreados.

... Tomar la muestra de un área limpia .......... Coger la hora de la toma de la muestra........ Nombre del paciente... Cálculo de la parasitemia en porcentaje 10000 glóbulos rojos 20 trofozoitos 100 glóbulos rojos X Recuento semicuantitativo Informar especie de plasmodium que ocasiona la infección...... Control biológico... Recuento parasitario.....+ 11 – 100 en 100 campos microscópicos.....  46..... asexuadas P.... Se limpia el dedo índice o el del medio del paciente. Construcción....... INFORME DE RESULTADO Especie presente.. Control quimico..... TRATAMIENTO 1..... de formas parasitarias encontrados en la gota gruesa. Periodo epidemiológico......+++ > 10 por campo microscópico.. ESQUIZONTICIDAS ERITROCITICOS: 4-aminoquinoleinas Hidroximetilquinoleinas Diaminopirimidinas Sulfonamidas 2.......++++   42... se presiona el dedo y se coloca la siguiente gota a 1 cm de la  1.... PREVENCION Y CONTROL Tratamiento y aislamiento del enfermo......... Uso de mosquitero..... Extendido: solo termino hemopárasito..... Cambio en el comportamiento humano ...... Se limpia la 1° gota de sangre.. EXAMENES COMPLEMENTARIOS HB ANEMIA HTO  44.. falciparum recuento sexuadas En infecciones mixtas: Recuento de cada especie de manera independiente.. Ordenamiento del medio ambiente...............  51.  47..... En casos complicados o con parasitemias altas (<50000 parásitos/uL)...... ESQUIZONTICIDAS TISULARES: 8-aminoquinoleinas   48.. Informar el numero aprox.... Fecha...... COMPARACIÓN DE LOS MÉTODOS DE DIAGNÓSTICO MÉTO-DOS TIPOS DE TÉCNICA VENTAJAS INCONVENIEN-TES Extensión Fina Tinción de Giemsa Fácil realización Bajo coste Diferencia especies Cuantitativa No detecta parasitemias bajas Gota Gruesa Tinción de Giemsa Fácil realización Bajo costo Solo indica (+) Detecta parasitemias bajas No puede detectar la especie Kit Reacción antigenoanticuerpo Fácil realización Rápida Alto costo No detecta la especie  45..... modificación y protección de las viviendas.... PRUEBAS DE DX RAPIDO Inmunocromatografia 43. Rango de parásitos encontrados Equivalencia en cruces 1 – 10 en 100 campos microscópicos .++ 1 – 10 por campo microscópico. en el borde lateral del dedo entre la yema y la uña..........  50...... Identificación. EXAMEN DE EXTENDIDOS DE SANGRE PERIFÉRICA ... 41...... RX INMUNOLÓGICAS IFD ELISA FAST-ELISA HEMAGLUTINACIÓN INDIRECTA. ¡¡¡ GRACIAS!!! 49. En niños se puede tomar del talón ó del lóbulo de la oreja Secar la zona Se punciona con una lanceta estéril desechable. Reportar especie predominante en 1° lugar y subordinada en 2° lugar Gota gruesa: termino hemopárasito o gota gruesa... Numero consecutivo..

8% Los leucocitos y plaquetas se multiplican por 1.extendido muy largo o muy grueso. el portaobjetos se desplaza a un sitio de secado. se lleva hacia atrás hasta tocar la gota de sangre.  4. Deben secarse tan rápido como sea posible. TINCIÓN AUTOMÁTICA DE EXTENDIDOS El nombre. ligeramente redondeado en el borde más fino Los bordes laterales deben ser visibles. 2. luego a una zona de almacenamiento. Obtención de la muestra y preparación del extendido de sangre periférica Casi todas las muestras para hematología se recolectan en tubos de tapa lila que contienen EDTA ( que anticoagula la sangre por quelación de calcio) Los extendidos deben realizarse dentro de 2 a 3 horas de la toma de muestra El EDTA impide la aglutinación de las plaquetas en el portaobjetos. TÉCNICA DE EXTENDIDOS Se coloca una gota de sangre de 2 a 3 mm de diámetro en el extremo del portaobjeto. PREPARACIÓN DEL EXTENDIDO DE SANGRE PERIFÉRICA La sangre de ciertos pacientes sufre satelitosis plaquetaria cuando se aglutina con EDTA ( las plaquetas rodean al neutrófilo). bordes biselados y esquinas romas También puede hacerse con un cubreobjetos de hemocitómetro  5. para ser leido. PREPARACIÓN Y TINCIÓN AUTOMATIZADA DE EXTENDIDOS Después que el equipo analizó una muestra. Toda la gota debe ser incluída y extendida Al colocar contra la luz la porción delgada debe tener aspecto en arco iris  9.  6. . número y fecha de la muestra se imprime en el portaobjetos Luego se seca . Extendido parejo. TÉCNICAS DE EXTENDIDO El portaobjeto extensor se sostiene con firmeza con la mano dominante a un ángulo de 30 a 45 grados . TIPOS DE EXTENDIDOS Manual con dos portaobjetos en ángulo 2 portaobjetos de vidrio de 75 x 25 mm limpios. Debe tomarse la muestra en tubos con citrato de sodio al 3. El tamaño de la gota es importante. En Hto bajos aumentar el ángulo  8. se carga un cassette y se va al sitio de tinción. sin agujeros ni estrías.1 para obtener resultados exactos. dejando que se esparza en todo lo ancho del portaobjetos.  3. dedo – extendidos inmediatos. Entonces se empuja con rapidez y suavidad hacia delante. Movimiento lento produce mala distribución de los leucocitos. Punción talón. hasta el final del portaobjetos  7. cuando la tinción está terminada. el portaobjetos extensor se limpia en forma automática  10. Tiene forma de dedo. CARACTERÍSTICAS DE UN EXTENDIDO BIEN PEPARADO Debe cubrir de dos tercios a tres cuartas partes de la longitud del extendido. De acuerdo con el Hto el sistema ajusta el tamaño de la gota a usar. Demasiado pequeña extendido corto o delgado. TÉCNICAS DE EXTENDIDO Toda la gota debe incluirse en el extendido . En Hto altos ángulo de 25 grados. el portador desplaza el tubo y lee el código de barras. porque desplza las cél más grandes hacia el final y los lados del extendido. Demasiado grueso . y el ángulo y la velocidad del portaobjetos extensor Luego de preparar el extendido .

los gránulos eosinófilos Los neutrofilos se denominan así porque tienen gránulos citoplasmáticos con pH neutro y toman algunas características de tinción de ambas coloraciones.  18. MÉTODOS DE COLORACIÓN DE WRIGHT Se realiza sobre un soporte para coloraciones Puede filtrarse antes de usarlo en forma directa desde la botella Es importante cubrir el portaobjetos por completo. Los portaobjetos se sumergen automáticamente en el colorante . El metanol fija las células al portaobjetos El azul de metileno oxidado y la eosina. 11. pero suave. Para teñir un lote de portaobjetos. Para 500 ml: 1. La eosina libre es ácida y tiñe y tiñe los componentes básicos ( eosinófilos) la Hb. se diluye y lava con el metileno. Las soluciones de tinción son estables de 3 a 6 horas. Los mejores resultados se obtienen de una extensión bien realizada  19. El portaobjetos se deja secar al aire en posición vertical. DISPOSITIVOS DE TINCIÓN AUTOMÁTIZADOS Una vez que el proceso de tinción inicio no pueden agregarse portaobjetos al lote.  17. TINCIÓN DE WRIGHT Se realiza con balanza de precisión bien calibrada y en gramos.6 gr Wright 16 ml glicerina 485 milímetros de metanol En el mortero se coloca el glicerol más el Wright.luego en el buffer y en una serie de lavados. TINCIÓN DE LOS EXTENDIDOS DE SANGRE PERIFÉRICA Wright o Wright – Giemsa (Romanowsky) Estas coloraciones son policromáticas pues tienen eosina y azul de metileno . El buffer que se agrega a la tinción debe ser fosfato de sodio 0.  15.05 o agua destilada  12. Cuando termina la coloración .  16. Los portaobjetos deben secarse antes de teñirlos.aumento de los lípidos Aspecto grumoso . Si la mezcla es correcta debe aparecer en el portaobjetos un brillo metálico. CARACTERÍSTICAS DE UN EXTENDIDO BIEN TEÑIDO Debe ser de color rosa o púrpura. DISPOSITIVOS DE TINCIÓN AUTOMATIZADOS Utiles en laboratorios con alto volumen de muestras. Se necesita 5 a 10 min. EXAMEN DE LOS EXTENDIDOS DE SANGRE PERIFÉRICA EXAMEN MACROSCÓPICO Coloración más azul . con gránulos de color anaranjado brillante. La parte de atrás se limpia para eliminar residuo del colorante. se lava el portaobjetos con un chorro de agua continuo. tiñe los componentes neutros. se filtra por 24 horas.proteinas sanguíneas Vacuolas dispersas .  13. Los eritrocitos deben tener un color anaranjado a rosa salmón. TINCIÓN DE LOS EXTENDIDOS DE SANGRE PERIFÉRICA El azul de metileno tiñe los componentes célulares ácidos ( Basófilos) como el RNA. MÉTODO DE COLORACIÓN DE WRIGHT Luego se pone una cantidad igual de buffer al portaobjetos. El citoplasma de los neutrófilos de color rosa a bronceado. Los núcleos de los leucocitos color púrpura a azules. El colorante debe permanecer sobre el portaobjetos de 1 a 3 minutos  14.aglutinaciones de eritrocitos .

 24. el extendido de sangre periférica en casos en los cuales existan dudas sobre la especie del plasmodium.  23. linfocitos inmaduros y células reactivas  25. Debe quitarse el aceite. Cantidad desproporcionada de monocitos en el borde indica mala extensión. EXTENDIDOS DE SANGRE PERIFÉRICA EXAMEN MICROSCOPICO El microscopio debe calibrase La luz debe centrarse de manera adecuada El condensador debe estar elevado casi por completo Calibrar correctamente el aumento Diafragma abrir una cantidad de luz cómoda para el ojo.  26. El # aproximado de plaquetas X C.1 Procedimiento • Marcar la lamina de la misma manera descrita para gota gruesa . como tambien en los casos de parasitemias altas. EXAMEN CON EL OBJETIVO DE 10x Puede evaluarse la calidad del extendido. confiable y economico. # promedio de plaquetas x recuento de eritrocitos 200 (En el contexto nacional no se acepta la utilizacion del recuento semicuantitativo).eritrocitos se altera. EXAMEN CON EL OBJETIVO DE 40x Luego usar el objetivo seco fuerte 40x El número de leucocitos por campo se multiplica por 2000 para obtener una aproximación adecuada del recuento de leucocitos. Presencia de filamentos de fibrina. donde los eritrocitos apenas se topen entre sí se cuenta el # de plaquetas en 10 CIA.  22. para disminuir los errores de distribución. cuando la cuantificacion exacta en gota gruesa se hace dificil. Al igual que la gota gruesa.  21. puede usarse la siguiente fòrmula. 2. RECUENTO DE PLAQUETAS Una estimación grosera es si hay de 3 a 25 plaquetas por C. EXAMEN CON LENTE DE 100x Se utiliza aceite de inmersión Se cuenta 100 leucocitos y se informa con porcentaje de leucocitos.8. RECUENTO DE PLAQUETAS Se hace con el objetivo de aceite de 100x En una zona del extendido. Uso de filtro. 20. Portaobjetos al revés. distribución de los eritrocitos. X 20. REALIZACIÓN DE FÓRMULA LEUCOCITARIA Debe leerse en serpentina hacia delante y hacia atrás. está anémico o tiene eritrocitosis las proporciones plaqueta. rapido. no es aceptable. Cuando el pcte. ademas de la gota gruesa. Se cuenta 100 leucocitos y se clasifican con contadores o pianos ( 200) Los resultados se informan como porcentajes – 100% Es importante incluir los bordes laterales por los monocitos. el recuento es adecuado siempre y cuando haya unos 200 leucocitos por C. el color y la distribución de las células. Un área demasiado espesa distorsiona los eritrocitos al amontonarlos uno encima de otro. 2. formación de rodillos o aglutinación. Un área demasiado delgada.000 es aproximadamente el recuento de plaquetas.8 Extendido de sangre periférica Para un correcto diagnostico de especie de plasmodium de malaria es necesario realizar. el examen del frotis es sencillo.

• Despues de tomar la gota gruesa. sobre una superficie plana y libre de polvo • Limpiar bien la lamina que utilizo para realizar el extendido. de manera delicada. En los casos de confirmacion de especie no es necesario • Limpiar el dedo del paciente • Dejar secar la muestra de sangre a la temperatura ambiente. buscar los campos donde los globulos rojos se encuentren separados. evitando que la lamina toque el dedo del paciente. presionar el dedo del paciente y colocar una nueva gota de sangre en el extremo de una lamina portaobjetos. solo que el tiempo de coloracion es aproximadamente el doble (segun estandarización de cada laboratorio o puesto de microscopia) • Observar al microscopio con objetivo de 10X y 40X. teniendo en cuenta que el procedimiento para la coloracion es igual que para la gota gruesa. • Fijar con metanol • Colorear con Field. Giemsa o Wright. para evitar la transferencia de parasitos de una muestra a otra. y con una inclinacion de 30 a 40 grados realizar el frotis a lo largo de la lamina • Presionar nuevamente y tomar un microhematocrito. . Proceder a observar con objetivo de 100 x las formas parasitarias caracteristicas de plasmodium. Poner en contacto la lámina con la gota. guardando el espacio designado para la marca de la lamina • Para realizar el extendido se debe ayudar de otro portaobjetos: colocar en contacto uno de los extremos de este segundo portaobjetos con la gota de sangre que se acaba de tomar. dejar extender por capilaridad la sangre a lo largo del borde del portaobjetos.

PRIN CIPIO S .

GEN ERAL ES .

´ GOTA GRUESA : es la extensión .

de una gota de sangreen forma cuadrang .

ular de un diámetro aproxima do de1 a .

1.5 cm. Con la gota gruesa se puede .

.detectar lapresen cia de plasmodi um.

´ EL PROT IS SANG UINEO: Es .

la extensi ón de una gota de sangre d .

e tal maner a que se puede observar .

almicrosc opio tanto los eritrocitos como0 .

Y .los parásitos en un solo plano.

con el protissan guineose puededif erenciar .

.claramen te la especie de plasm odium.

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