Frotis de sangre periférica (FSP) 3. 1.

Fundamento El examen morfológico de las células sanguíneas con el microscopio óptico requiere la preparación de un frotis de sangre bien extendido y teñido, ya que la precisión de la evaluación depende, en parte, de su calidad. El examen minucioso de un frotis de sangre periférica se puede usar: 1) Como instrumento de detección para identificar una enfermedad. 2) Para diagnóstico definitivo de ciertos trastornos hemáticos y no hemáticos. 3) Para vigilar la respuesta del paciente al tratamiento. Este examen incluye: una estimación de la cantidad de plaquetas y leucocitos; apreciación morfológica de eritrocitos, leucocitos y plaquetas, así como su distribución; observación de la presencia de células anormales, y un conteo diferencial de 100 leucocitos, el cual se debe reportar en valores relativos  y absolutos. El FSP se debe realizar de forma obligatoria a todos los pacientes del servicio de pediatría, neonatología, hematología, terapia intensiva y recién nacidos de ginecología; al resto de los pacientes, de acuerdo a su diagnóstico, al resultado de su Biometría Hematica o si el médico así lo requiere. 3. 2. Muestra. Criterios de Inclusión  Obtenida por punción venosa o arterial. Ver manual de toma de muestras sanguíneas.  Recolectada en tubo vacuntainer o microtainer lila, con K 2EDTA como anticoagulante.  No debe estar coagulada, ni contener fibrinas. 3. 3. Muestra. Criterios de Exclusión  Aquellas que no cumplan los criterios de inclusión.            3. 4. Material y reactivos Microscopio óptico Contador de células Portaobjetos nuevos y limpios Tubos capilares azules Extensores limpios Gasas Lápiz Etanol al 20 Aceite de inmersión Guantes desechables Contenedor rígido rojo de RPBI

         3. acercarlo suavemente y permitir que ésta se propague en toda su anchura. Colocar un extensor por delante de la gota de sangre. Procedimiento Con ayuda de un tubo capilar. En esta región existe un exceso de granulocitos y monocitos. colocar una gota aprox. a una distancia de 1 cm del borde de un portaobjetos y en el centro. da lugar a artificios de contracción de las células. mezclar 3 veces levantando y bajando el extensor (sin despegarlo del portaobjetos). Cuando se observe una zona apta. marcar con un lápiz el número de ID de la muestraaño. los eritrocitos se tocan entre sí pero no están sobrepuestos. Zona excesivamente fina: Corresponde al final de la extensión y termina en un área donde las células adoptan una posición acartonada (barbas). inciso 4. Observar al microscopio. durante media hora como mínimo no soplar ni agitar. . 2. Zona de lectura: Corresponde a la región intermedia del frotis y en ella existe un reparto equilibrado de células. Teñir por tinción de Wright. 5-7 µL de sangre. de este manual de procedimientos. colocar una gota de aceite de inmersión directamente sobre el frotis. especialmente por el aumento de humedad. formando un ángulo de 45° modificar según necesidades. están bien teñidos y no se han producido precipitados de colorante. o La falla en el secado en un tiempo oportuno. primeramente a bajos aumentos (10x o 40x) para un estudio global del frotis. pasar a aumento de 100x. Permitir que el frotis seque por si solo a temperatura ambiente. Ver fracción IV. 5. En un movimiento lento pero firme. extender la sangre a lo largo del portaobjetos. 3. apreciar su calidad y así localizar la zona de lectura: o Aquella donde la extensión de las células se ha conseguido en una sola capa. Desechar el tubo capilar en el contenedor rígido rojo de RPBI. Zona excesivamente gruesa: Se halla en la región inmediata al punto de partida de la extensión (cabeza). En ella se aprecia siempre un aumento de linfocitos. En un extremo del frotis.

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