Frotis de sangre periférica (FSP) 3. 1.

Fundamento El examen morfológico de las células sanguíneas con el microscopio óptico requiere la preparación de un frotis de sangre bien extendido y teñido, ya que la precisión de la evaluación depende, en parte, de su calidad. El examen minucioso de un frotis de sangre periférica se puede usar: 1) Como instrumento de detección para identificar una enfermedad. 2) Para diagnóstico definitivo de ciertos trastornos hemáticos y no hemáticos. 3) Para vigilar la respuesta del paciente al tratamiento. Este examen incluye: una estimación de la cantidad de plaquetas y leucocitos; apreciación morfológica de eritrocitos, leucocitos y plaquetas, así como su distribución; observación de la presencia de células anormales, y un conteo diferencial de 100 leucocitos, el cual se debe reportar en valores relativos  y absolutos. El FSP se debe realizar de forma obligatoria a todos los pacientes del servicio de pediatría, neonatología, hematología, terapia intensiva y recién nacidos de ginecología; al resto de los pacientes, de acuerdo a su diagnóstico, al resultado de su Biometría Hematica o si el médico así lo requiere. 3. 2. Muestra. Criterios de Inclusión  Obtenida por punción venosa o arterial. Ver manual de toma de muestras sanguíneas.  Recolectada en tubo vacuntainer o microtainer lila, con K 2EDTA como anticoagulante.  No debe estar coagulada, ni contener fibrinas. 3. 3. Muestra. Criterios de Exclusión  Aquellas que no cumplan los criterios de inclusión.            3. 4. Material y reactivos Microscopio óptico Contador de células Portaobjetos nuevos y limpios Tubos capilares azules Extensores limpios Gasas Lápiz Etanol al 20 Aceite de inmersión Guantes desechables Contenedor rígido rojo de RPBI

. En un movimiento lento pero firme. apreciar su calidad y así localizar la zona de lectura: o Aquella donde la extensión de las células se ha conseguido en una sola capa. Zona excesivamente fina: Corresponde al final de la extensión y termina en un área donde las células adoptan una posición acartonada (barbas). 5-7 µL de sangre. formando un ángulo de 45° modificar según necesidades. En esta región existe un exceso de granulocitos y monocitos. o La falla en el secado en un tiempo oportuno. marcar con un lápiz el número de ID de la muestraaño. Zona excesivamente gruesa: Se halla en la región inmediata al punto de partida de la extensión (cabeza). los eritrocitos se tocan entre sí pero no están sobrepuestos. Zona de lectura: Corresponde a la región intermedia del frotis y en ella existe un reparto equilibrado de células. acercarlo suavemente y permitir que ésta se propague en toda su anchura. durante media hora como mínimo no soplar ni agitar. están bien teñidos y no se han producido precipitados de colorante. colocar una gota de aceite de inmersión directamente sobre el frotis. Desechar el tubo capilar en el contenedor rígido rojo de RPBI. 5. da lugar a artificios de contracción de las células. Ver fracción IV. Teñir por tinción de Wright. En un extremo del frotis. primeramente a bajos aumentos (10x o 40x) para un estudio global del frotis. extender la sangre a lo largo del portaobjetos.         3. Procedimiento Con ayuda de un tubo capilar. 2. pasar a aumento de 100x. de este manual de procedimientos. colocar una gota aprox. 3. Observar al microscopio. especialmente por el aumento de humedad. Permitir que el frotis seque por si solo a temperatura ambiente. En ella se aprecia siempre un aumento de linfocitos. inciso 4. mezclar 3 veces levantando y bajando el extensor (sin despegarlo del portaobjetos). Cuando se observe una zona apta. Colocar un extensor por delante de la gota de sangre. a una distancia de 1 cm del borde de un portaobjetos y en el centro.